百草枯所致小鼠肺纤维化时肺组织酸性鞘磷脂酶表达上调

目的: 观察百草枯所致C57BL/6小鼠肺纤维化时肺组织酸性鞘磷脂酶（acid sphingomyelinase, ASM）的表达变化,初步探讨ASM在百草枯所致肺纤维化发生发展中的潜在病理意义。方法: 将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和百草枯组,百草枯组动物腹腔注射20 mg/kg百草枯,对照组动物注射等体积生理盐水,单次注射百草枯21 d后麻醉动物进行支气管肺泡灌洗,取支气管肺泡灌洗液（bronchial alveolar lavage fluid, BALF）检测灌洗液中细胞总数、总蛋白浓度,ELISA法检测BALF中IL-6和TNF-α水平;取肺组织,HE染色和Masson染色观察组织形态学变化和胶原沉积,TUNEL染色和Caspase-3活性检测细胞凋亡情况,DHE染色检测活性氧（reactive oxtgen species, ROS）水平, Real time PCR、免疫组织化学、Western Blot检测肺组织中ASM mRNA和蛋白表达。结果: 用百草枯处理后,C57BL/6小鼠肺组织肺泡排列紊乱、部分肺泡出现塌陷、肺泡间隔增厚、炎性细胞浸润,肺组织中出现大量胶原沉积。与对照组相比,百草枯组小鼠BALF中细胞总数增多（P<0.01）,总蛋白浓度增加（P<0.01）,IL-6和TNF-α水平升高（P<0.05）;肺组织中TUNEL染色阳性细胞数增多（P<0.01）,Caspase-3活性增加（P<0.05）,ROS水平升高,ASM mRNA和蛋白表达上调（P<0.05）。结论: ASM可能参与百草枯所致肺纤维化的病理生理过程,其具体作用机制有待进一步研究证实。     

姜黄素对Lewis肺癌小鼠血管内皮成长因子和endostatin表达的影响

目的:探讨姜黄素对Lewis肺癌组织中血管内皮成长因子（VEGF）和血管生成抑制因子抑制素（endostatin）表达的影响。方法: 本实验分为3组：空白对照组、模型组、姜黄素组（100 mg/kg）。空白对照组设10只C57BL/6纯系小鼠,另20只小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞,随机分为2组：模型组、姜黄素组（100 mg/kg）,每组10只。接种成功后,空白对照组与模型组灌胃0.5%羟甲基纤维素钠溶液,姜黄素组灌胃100 mg/kg,灌胃容积为0.2 mL/10 g,连续灌胃14 d,每天1次。末次给药后处死小鼠,称其体重,剥离肿瘤组织称重后采用Western Blot法和Q-PCR法检测VEGF、endostatin蛋白及基因的表达。结果:给予Lewis肺癌小鼠姜黄素治疗后肿瘤体积与质量明显减少,VEGF的表达显著减少和endostatin的表达明显增加。 结论:姜黄素抑制肺癌肿瘤的生长,其作用可能是通过下调VEGF与上调endostatin的表达,从而抑制肿瘤血管的生长。     

益气活血通络解毒方经CHOP通路对肺缺血/再灌注损伤的干预

目的: 研究益气活血通络解毒方（yiqi huoxue tongluo jiedu fang, YHTJF）减轻小鼠肺缺血/再灌注性损伤药效及其机制。方法: 取雄性C57BL/6J小鼠70只,随机分为7组：正常对照组（control,C）,羧甲基纤维素钠对照组（CMC-Na+control,CC),羧甲基纤维素钠假手术组（CMC-Na+sham,CS）,羧甲基纤维素钠缺血/再灌注模型组（CMC-Na+I/R,CIR）,YHTJF低、中、高浓度干预组（CMC-Na+YHTJF-low、CMC-Na+YHTJF-middle、CMC-Na+YHTJF-high,CYL、CYM、CYH）。CC、CS、CIR组术前连续7 d腹腔注射CMC溶液,中药干预组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺,测定肺组织干湿比（W/D）及总肺含水量（TLW）,行肺组织损伤评估（IQA）,光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变,原位末端标记法（TUNEL）测细胞凋亡指数（AI）,Western blot和逆转录PCR（RT-PCR）分别检测CHOP、GRP78的蛋白和mRNA表达量。结果: 较之C组,CIR组W/D、TLW、IQA、AI明显升高（P<0.01）,肺组织形态学破坏显著,CHOP、GRP78蛋白和mRNA 表达量增加（P<0.01）,而CC、CS组各项指标与C组无明显差异;较CIR组,CYL、CYM、CYH中药保护剂组各项指标数值下降（P<0.01）,组织损伤明显减轻,CYM组各项指标数值下降最明显,组织损伤最轻。结论: YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,中剂量效果较好,该机制可能与其抑制CHOP通路所致凋亡有关。     

益气除痰方调控内质网应激蛋白ATF4、CHOP治疗肺癌机理研究

目的: 从内质网应激角度探讨益气除痰方治疗脾虚型肺癌的作用机制。方法: 建立脾虚Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组（生理盐水）,化疗组（生理盐水+顺铂注射液 1 mg/kg）,益气除痰方低、中、高剂量组（2、4、8 g/kg）,联合用药组（益气除痰方 4 g/kg+顺铂注射液 1 mg/kg）,每组8只。每 3 d 测量小鼠体重和瘤体大小,14 d 后处死小鼠,称量瘤重、计算肺表面转移结节数,免疫组织化学法、RT-qPCR法检测肿瘤组织中ATF4、CHOP表达。结果: 与模型组比较,益气除痰方中、高剂量组均能明显抑制移植瘤生长,减少肺转移结节数,提高肺转移抑制率（P<0.01或P<0.05）;并能明显上调内质网应激蛋白ATF4、CHOP表达,其中联合用药组效果最好（P<0.01）。与化疗组比较,联合用药组ATF4、CHOP表达明显升高（P<0.05）。结论: 益气除痰方可能通过上调内质网应激蛋白ATF4、CHOP的表达介导细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。     

胡桃醌对人卵巢癌SKOV3和IOSE80细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制研究

目的: 研究胡桃醌对人卵巢癌SKOV3和IOSE80细胞增殖和侵袭的抑制作用,并从信号通路深入探讨其作用机制。方法: 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和IOSE80细胞,给予不同浓度的胡桃醌溶液干预,MTT比色法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell检测细胞转移,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测AKT、ERK、NF-κB信号通路蛋白表达,RT-PCR检测波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA表达。 结果: 不同浓度胡桃醌可抑制SKOV3细胞和IOSE80细胞增殖活力,降低细胞侵袭能力,加速细胞凋亡,且随浓度的增加对细胞增殖、侵袭和凋亡的作用越明显,差异均有统计学意义（P<0.05）。不同浓度胡桃醌均可抑制SKOV3细胞和IOSE80细胞AKT、ERK、NF-κB信号通路蛋白的表达,且随浓度的增加信号通路蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。不同浓度胡桃醌均可减少SKOV3细胞和IOSE80细胞Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,且随浓度的增加mRNA表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论: 胡桃醌可抑制SKOV3和IOSE80细胞体外增殖、转移,促进凋亡,其机制与抑制AKT、ERK、NF-κB信号通路表达和下调Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA表达有关。     

甘草次酸对小鼠急性放射性肺损伤的防治作用

摘要 : 目的 建立C57BL/6小鼠急性放射性肺损伤模型,观察甘草次酸对急性放射性肺损伤的干预作用。方法 成年C57BL/6雌性小鼠90只,随机分为三组,每组30只：(1)空白对照组：不照射+生理盐水10ml/（kg.d）灌胃;(2)单纯照射组：照射+生理盐水10ml/（kg.d）灌胃;(3)甘草次酸组（GA组）：照射+甘草次酸40mg /（kg.d）灌胃。IR组和GA组小鼠予6MV-X线12Gy全肺单次照射。照射后第2天、17天、30天随机从各组分别选取10只小鼠处死。取双侧肺组织行HE染色、Masson染色观察肺组织形态变化。结果 CG组小鼠肺组织结构正常。IR组小鼠肺组织在照射后第2天、17天以渗出为主,肺泡腔及间隔可见渗出、充血,伴有炎症细胞的浸润。照射后第30天,肺泡壁间隔增宽、肺泡结构变形、炎性细胞浸润,并可见胶原纤维沉积。GA组在不同时间点,肺泡炎及胶原沉积的情况均较IR组改善,任一时间点两组之间有显著性差异(P<0.05)。结论 C57BL/6小鼠全肺单次照射12Gy X射线可建立急性放射性肺损伤动物模型,甘草次酸可以减轻急性放射性肺损伤的炎症反应及改善胶原沉积。     

miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂诱导的心肌细胞纤维化中的作用

目的：探究miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂（hyperglycemia and hyperlipidemia, HGHL）诱导的H9C2细胞纤维化过程中的作用。方法：使用含葡萄糖（33 mmol/L）和棕榈酸酯（500 μmol/L）的DMEM培养基干预H9C2细胞24 h用于后续实验。共有8个实验分组,分别为NC组、HGHL组、miR-NC组、mimics组、inhibitor组、pc-HMGB1组、si-HMGB1组和miR-29a mimics+pc-HMGB1组。流式细胞术检测各组H9C2细胞的凋亡率。Western blot实验检测各组H9C2细胞内转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达量。RT-qPCR检测各组细胞中miR-29a以及TGF-β1、CTGF、MMP-9、PPARγ、HMGB1 mRNA的表达水平。划痕实验检测各组H9C2细胞的迁移能力。结果：HGHL干预后,H9C2细胞的凋亡率显著增加（P<0.05）,细胞迁移能力显著增强（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA表达水平显著增加（P<0.05）,PPARγ mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）,相应蛋白的表达量也随mRNA的变化发生改变（P<0.05）,此外H9C2细胞内miR-29a的表达水平也显著降低（P<0.05）。转染miR-29a mimics后,H9C2细胞因HGHL干预引起的凋亡率增加受到显著抑制（P<0.05）,细胞的迁移能力也受到显著抑制（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9蛋白表达量和mRNA表达水平相较于HGHL组显著降低（P<0.05）,PPARγ蛋白表达量和mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。转染miR-29a inhibitor后促进了HGHL诱导的H9C2细胞纤维化过程。miR-29a负调控HMGB1蛋白及其mRNA在H9C2细胞内的表达,双荧光素酶报告基因实验结果显示HMGB1是miR-29a的下游靶基因。转染si-HMGB1与转染miR-29a mimics对HGHL诱导的H9C2细胞纤维化作用类似。同时转染miR-29a mimics与pc-HMGB1对HGHL诱导的H9C2心肌细胞纤维化无显著影响。 结论：HGHL干预后显著增加H9C2细胞的凋亡率,增强其迁移能力和纤维化的过程。同时HGHL干预显著下调miR-29a在细胞内的表达水平,miR-29a通过负调控HMGB1在细胞内的表达进而影响HGHL诱导的H9C2细胞纤维化。     

季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法: 将30只清洁级SD雄性大鼠分为季德胜蛇药组(D组)、对照组(C组)和缺血再灌注组(I/R组),每组10只。建立大鼠肺缺血再灌注模型,检测大鼠肺组织湿干重比;光学显微镜及透射电镜下观察肺组织损伤程度;通过明胶酶谱法测定肺组织匀浆液中明胶酶即金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)的活力;逆转录酶PCR方法检测MMP-2、MMP-9 mRNA在大鼠肺组织中的表达变化。结果: 与缺血再灌注组比较,蛇药组肺湿干重比降低(P<0.01),肺组织损伤程度减轻,肺组织匀浆液MMP-9酶活力显著下降,MMP-2酶活力略有降低,肺组织中MMP-9、MMP-2的mRNA表达均降低。 结论: 季德胜蛇药片通过抑制MMP-9、MMP-2的活性及表达,使基底膜的降解降低,从而对大鼠肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

Delicaflavone通过PI3K/AKT/mTOR通路调控上皮-间质转化抑制吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移和侵袭

目的：研究Delicaflavone对人吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移与侵袭作用及机制。方法：采用MTT法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞存活率的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验测定Delicaflavone对PC-9/GR细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blotting法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases 9, MMP-9）、基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinases 2, MMP-2）、钙黏连蛋白（E-cadherin, N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果：与对照组比较,20 mg/L Delicaflavone作用24 h能显著抑制PC-9/GR细胞的细胞活性（P<0.05）,而浓度在10 mg/L以下时则对细胞活性无明显影响。Delicaflavone能够浓度依赖性地抑制PC-9/GR细胞的迁移率、侵袭细胞数量（P<0.05和P<0.01）,并能浓度依赖性地减少PC-9/GR细胞迁移标记蛋白（MMP-9和MMP-2）的表达（P<0.01）,上调E-cadherin、下调N-cadherin和Vimentin的表达（P<0.01）。此外,Delicaflavone还浓度依赖性地减少p-PI3K、p-Akt和p-mTOR表达（P<0.01）。 结论：Delicaflavone具有抑制PC-9/GR细胞迁移及侵袭能力的作用,该作用与Delicaflavone通过PI3K/Akt/mTOR通路调控上皮-间质转化有关。     

氟尿嘧啶调控VHL/HIF信号通路抑制肾癌细胞增殖、侵袭与转移的研究

目的:探讨氟尿嘧啶通过调控VHL/HIF信号通路影响肾癌细胞增殖、侵袭与转移。方法:体外培养人肾癌786-0细胞,分别用终浓度为6、60、600 μg/mL的氟尿嘧啶处理肾癌细胞,噻唑蓝（MTT）检测氟尿嘧啶对肾癌细胞增殖的影响,划痕实验检测细胞转移能力的影响,Transwell实验检测细胞体外侵袭能力的影响。Western blot检测细胞中VHL/HIF信号通路相关蛋白HIF-1α、VEGF及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达。通过细胞转染法转染pcDNA-HIF-1α后Western blot检测转染效率,同样的方法检测对肾癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。结果:氟尿嘧啶处理后的肾癌细胞增殖明显受到抑制,侵袭和转移能力明显降低,且呈现出时间和浓度依赖性（P<0.05）,相关蛋白HIF-1α、VEGF、MMP-9表达下调,Cleaved Caspase-3表达上调,转染pcDNA-HIF-1α后,HIF-1α的表达上调,肾癌细胞增殖活性降低,侵袭和转移能力减弱,与对照组相比,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:氟尿嘧啶能抑制肾癌细胞增殖、侵袭与转移,其作用机制与通过阻断VHL/HIF信号通路,调节Cleaved Caspase-3和MMP-9的表达有关。     

柠檬苦素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用

目的: 探讨柠檬苦素（LM）对脂多糖（LPS）致小鼠急性肺损伤的影响。方法: 40只ICR雄性小鼠,按体质量随机分为4组：正常组、模型组、地塞米松（Dex）给药组和LM给药组,每组10只。Dex和LM均在滴注LPS前2 h分别小鼠腹腔注射10 mg/kg给药,之后除正常组小鼠只给予腹腔注射等体积的生理盐水外,其余小鼠气管滴注致死量的5 mg/kg LPS。LPS注射6 h后,处死小鼠,解剖小鼠取肺脏,计算小鼠肺指数、湿干比值。采用苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织形态。采用ELISA法检测小鼠血清中TNF α、IL 1β和IL 6含量;比色法检测血清髓过氧化物酶（MPO）含量。实时定量PCR检测TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达情况。Western blot检测TLR4和NF-κB p65蛋白表达。结果: 与正常组比较,模型组小鼠肺指数和湿干比值明显升高,肺组织间质炎性细胞浸润,伴明显的肺泡充血、水肿,血清MPO、TNF-α、IL-1β和IL-6含量及其肺组织mRNA表达量均明显升高（P<0.01）;与模型组比较,LM给药组小鼠肺指数和湿干比值明显降低,肺组织病理状态明显改善,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及肺组织TNF α mRNA、IL-1β mRNA、IL-6 mRNA、TLR4和NF-κB p65蛋白表达量均明显降低（P<0.01）。结论: LM可通过调控TLR4/NF-κB通路抑制炎症因子的表达从而改善LPS诱导的小鼠肺组织损伤。     

携带Kringle 5 基因重组腺病毒的构建及其对荷肺癌小鼠生存期的作用

目的 构建携带人纤溶酶原Kringle 5(K5)基因重组腺病毒并观察其在小鼠肺癌细胞中的表达和对荷TC-1 瘤小鼠的生存期的影响。 方法 构建携带人纤溶酶原K5 基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1α-K5, 用RT-PCR 法检测腺病毒感染TC-1细胞后K5 mRNA 的表达, 用免疫沉淀和Westernbloting 法检测腺病毒感染TC-1 细胞后K5 蛋白的表达。建立荷TC-1 小鼠肺癌C57BL/6 小鼠模型,观察重组腺病毒对荷瘤小鼠生存期的影响。取肿瘤组织做免疫组织化学染色并计数微血管密度。 结果 携带K5 基因的人V 型腺病毒能有效感染小鼠肺癌TC-1 细胞, 在转录和翻译水平进行表达, 能有效延长荷瘤鼠的生存期并降低肿瘤微血管密度。 结论 腺病毒可作为便捷的载体携带K5基因感染肿瘤细胞, 分泌表达K5 蛋白, 延长荷瘤小鼠生存期, 可能与其通过抑制肿瘤区血管生成、遏制肿瘤区血供有关。     

MiR-200a抑制Wnt/β-catenin信号通路缓解肾间质纤维化

目的: 探讨miR-200a对单侧输尿管梗阻小鼠肾Wnt/β-catenin信号通路的影响,进一步探讨miR-200a对肾间质纤维化的作用。方法: 应用单侧输尿管结扎(UUO)建立肾间质纤维化模型,24只6周C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组,UUO组,UUO+miR-200a组,UUO+NC组,每组6只。从模型建立第一天开始,给予UUO+miR-200a组每只小鼠尾静脉注射40 mg/kg的miR-200a,给予UUO+NC组每只小鼠尾静脉注射40 mg/kg的Negative Control,连续3 d。第7天取肾组织行HE及Masson染色,RT-PCR及Western Blot检测Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA mRNA和蛋白在肾组织中的表达。结果: 与假手术组比较,UUO组中肾小管损伤,间质胶原沉积明显,Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与UUO组比较,UUO+miR-200a组肾小管损伤和间质胶原沉积亦明显减轻,Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA基因及蛋白表达降低（P<0.05）。结论: miR-200a能够抑制Wnt/β-catenin通路缓解肾间质纤维化。     

跨膜蛋白106A在肺癌中的表达分析及其作用研究

目的:探讨跨膜蛋白106A（transmembrane protein 106A,TMEM106A）在肺癌肿瘤中的表达及其与临床病理特征的关系,并进一步研究了该分子对肺癌细胞增殖的影响。方法:收集肺癌病人手术切除标本31例,提取组织RNA,采用荧光实时定量PCR实验,检测肺癌组织以及肺癌旁组织中TMEM106A mRNA的相对表达量。构建TMEM106A慢病毒表达载体Plenti-UBI/TMEM106A,转染至H1299细胞中,实现TMEM106A高表达,采用CCK-8细胞增殖实验和克隆形成实验观察TMEM106A过表达对肺癌细胞H1299 增殖能力的抑制作用。结果:荧光实时定量PCR实验结果显示肺癌组织中,TMEM106A基因的mRNA相对表达量低于肺癌旁对照组。成功构建肺癌H1299-TMEM106A过表达细胞系,与H1299-control比较,细胞系H1299-TMEM106A中TMEM106A表达显著升高;增殖实验结果显示TMEM106A高表达显著抑制了肺癌细胞的增殖能力;克隆形成实验结果显示细胞系H1299-TMEM106A中高表达TMEM106A的肺癌细胞克隆形成能力明显低于H1299-control肺癌细胞（P<0.01）。结论:TMEM106A能抑制肺癌细胞的增殖。     

阿司匹林抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞MMP-9表达及机制研究

目的: 探讨阿司匹林对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达及其机制研究。方法: MTT法检测LPS诱导RAW264.7细胞作用下,阿司匹林对细胞毒性的影响。Q-RT- PCR检测MMP-9 mRNA表达,免疫蛋白印迹法(western blot)检测MMP-9、p38MAPK及磷酸化p38(Phospho-p38,P-p38)蛋白表达。特异性抑制剂SB203580(SB)阻断p38MAPK通路后,分别应用Q-RT-PCR和Western blot检测MMP-9的基因和蛋白表达。结果: 阿司匹林呈剂量依赖性抑制MMP-9基因和蛋白表达。与LPS组相比,阿司匹林可明显抑制P-p38MAPK蛋白的表达,而p38MAPK总蛋白无明显变化。抑制p38MAPK通路后,MMP-9 mRNA和蛋白水平均明显下调。结论: 阿司匹林抑制LPS诱导RAW264.7细胞中MMP-9表达可能与抑制p38MAPK信号转导通路有关,进而发挥其抗AS药理作用。     

氧化苦参碱通过调控上皮间质转化抑制三阴性乳腺癌细胞侵袭转移

目的: 探讨氧化苦参碱对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长增殖及其对迁移能力的影响和机制。方法: CCK-8活细胞计数法分析氧化苦参碱不同浓度（0、1、2、4、6、8、10、20 mg/mL）在不同时间（24、48、72 h）对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长增殖的影响，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，Transwell法观察氧化苦参碱对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响，Q-PCR法检测EMT相关因子Snail-2和E-cadherin表达水平。结果: 与对照组比较，浓度为2、4、6、8、10、20 mg/mL的氧化苦参碱处理MDA-MB-231细胞24、48和72 h后，对细胞的生长呈时间和剂量依赖性的抑制作用。流式细胞实验提示2 mg/mL氧化苦参碱可使G0/G1期细胞数明显增加（P<0.05），S期和G2/M期的细胞数明显减少（P<0.05），细胞生长阻滞于G0/G1期。中、高浓度氧化苦参碱（4 mg/mL、6 mg/mL）处理12 h能明显抑制MDA-MB-231的侵袭能力，抑制Snail 2 mRNA的表达（P<0.01），上调E-cadherin mRNA和蛋白水平的表达（P<0.01）。结论: 氧化苦参碱对三阴性乳腺癌细胞生长和迁移侵袭有抑制作用，具有潜在的抗肿瘤生长和转移作用。     

小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的:探讨小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法:将120只C57BL/6小鼠按随机数字表法分成假手术组、模型组、人参皂苷Rb1组、人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组、人参皂苷Rb1+siNC组，每组24只。采用大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组在造模后即刻给予人参皂苷Rb1（40 mg/kg，i.p.），假手术组和模型组给予等量生理盐水。人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组和人参皂苷Rb1+siNC组在造模前24 h分别侧脑室注射Cav-1 siRNA和siNC，其他操作同人参皂苷Rb1组。再灌注24 h时测各组小鼠神经行为学评分，然后每组各取6只小鼠分别检测脑组织含水量、脑梗死体积，大脑皮质半暗带区Cav-1 mRNA和Cav-1、Bcl2、Bax蛋白表达量。结果:与假手术组相比，模型组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加（P<0.05），Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少（P<0.05）。与模型组相比，人参皂苷Rb1组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显减少，Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显增加（P<0.05）；与人参皂苷Rb1组相比，人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加,且Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少（P<0.05）。结论:人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠具有脑保护作用。而Cav-1 siRNA使小鼠脑组织中Cav-1蛋白表达下降后，可以明显逆转人参皂苷Rb1的脑保护作用，说明Cav-1蛋白介导了人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠的脑保护作用。     

右美托咪定对小鼠肺血-再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨右美托咪定对小鼠肺缺血/再灌注损伤的保护作用。方法: 实验用雄性8~10周龄C57BL/6J小鼠50只,随机分为5组：假手术组（sham operation, sham组）,缺血 再灌注组（I/R组）,I/R+生理盐水组（NS组）,I/R+右美托咪定组（DEX组）,I/R+阿替美唑（Atipamezole,ATI）+DEX组（ATI+DEX组）。复制在体小鼠左肺I/R损伤模型,I/R组小鼠开胸夹闭左肺门缺血30 min,再灌注180 min;sham组仅开胸游离肺门而不夹闭,肺门游离后机械通气210 min;DEX组在左肺缺血前30 min腹腔注射DEX 25 μg/kg,NS组则腹腔注射同体积生理盐水;ATI+DEX组在缺血前30 min腹腔注射ATI 250 μg/kg后,随即腹腔注射DEX 25 μg/kg。实验结束时取左肺组织测肺组织湿/干重比（W/D）、总肺含水量（TLW）,评估肺组织损伤指数（IQA）,光镜和电镜下观察肺组织的形态学变化。结果: 与sham组比,其余4组肺组织W/D、TLW、IQA值明显上升（P<0.05）,光镜、电镜示肺组织呈明显损伤性变化;I/R组与NS组间上述指标差异无统计学意义（P>0.05）;DEX干预后,肺组织W/D、TLW、IQA值较I/R组明显降低（P<0.01）,肺组织损伤明显改善;应用阿替美唑以后,肺组织损伤加重,W/D、TLW、IQA值明显升高,与DEX组相比差异具有统计学意义（P<0.01）。结论: 右美托咪定可能通过抑制交感活性,改善缺血区域的血流,对缺血再灌注肺发挥保护作用。     

CO2气腹压力对胃癌细胞侵袭黏附分子表达的影响

目的: 探讨不同压强CO₂气腹对胃癌细胞侵袭黏附能力的影响。方法: 建立体外CO₂气腹模型,选胃中分化腺癌株SGC-7901,分别暴露在6、9、12、15 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和常规细胞培养环境下各3 h。Real-time PCR法检测胃癌细胞中黏附侵袭分子E-cadherin、细胞黏附侵袭分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和细胞黏附分子CD44v6的表达水平;Western-blot检测胃癌细胞中E-cadherin、ICAM-1、MMP-2和CD44v6蛋白的表达水平。结果: 随着CO₂压强升高,在 15 mm Hg 时,E-cadherin的mRNA相对表达水平较对照组明显下降(P<0.05);MMP-2和CD44v6的mRNA相对表达水平较对照组明显上升(P<0.05);而ICAM-1 mRNA的相对表达水平也有上调趋势,但各组与对照组比较均无统计学差异。Western-blot检测结果显示蛋白的表达水平与基因检测结果一致。压强为 15 mm Hg时,CD44v6和MMP-2的表达上调,E-cadherin 的表达下调,具有统计学差异。结论: 在压强不高于 12 mm Hg 时,不同压强的CO₂气腹对胃癌细胞株的黏附侵袭能力无明显影响,并不增加肿瘤的转移几率。     

蛋白酶激活受体-2对动脉粥样硬化斑块发展和稳定性作用的实验研究

目的: 探讨蛋白酶激活受体-2（PAR-2）对动脉粥样硬化斑块发展和稳定性的影响。方法: 将32只6周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组、实验组,每组16只。两组均给予高脂饮食建立动脉粥样硬化模型,连续喂养14周。实验组给予腹腔注射SLIGRL-NH2（5 μmol·kg-1·d-1）,对照组给予腹腔注射0.9%生理盐水,持续喂养至24周,处死小鼠并收集相关检测标本进行检测,采用酶法检测血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）,采用免疫组化检测巨噬细胞表面分子抗-2（Mac-2）、α平滑肌激动蛋白（α-SMA）、血小板-内皮细胞粘附分子(CD-31)、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、血管细胞间粘附分子-1（VCAM-1）,采用RT-PCR检测TNF-α、γ干扰素（IFN-γ）、IL-6、Egr-1、MCP-1等炎症因子mRNA表达。对比分析两组小鼠各项检测结果差异。结果: 32只小鼠动脉粥样硬化模型建模成功率为93.75%（30/32）,实验组小鼠PAR-2 mRNA表达明显高于对照组（P<0.05）,两组小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C浓度及体质量（BW）差异无统计学意义（P>0.05）,实验组小鼠动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度小于对照组,斑块核心坏死率、Mac-2、α-SMA、CD-31、MMP-9、MMP-13、VCAM-1等检测结果明显高于对照组（P<0.05）,实验组TNF-α、IFN-γ、IL-6、Egr-1、MCP-1等炎症因子mRNA表达相对水平明显高于对照组（P<0.05）。结论: PAR-2激动剂能通过激活PAR-2促进小鼠动脉粥样硬化斑块发生发展,加快斑块内的炎症反应。