LC-MS/MS法测定人血浆中西格列汀浓度及其药物动力学研究

目的: 建立LC-MS /MS法测定人血浆中西格列汀的浓度并进行药动学研究。方法: 人血浆样品用乙酸乙酯提取后,选用ZORBAX Eclipse XDB C18(2.1 mm×100 mm, 3.5 μm)色谱柱,以乙腈-10 mmol/L醋酸铵溶液（80∶20,含0.1%甲酸）为流动相,流速为0.30 mL/min,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 408.1→m/z 235.1（西格列汀）和m/z 303.2→m/z 152.9（内标橙皮素）。结果: 血浆中西格列汀的线性范围为0.20~1 000 ng/mL ( r=0.998 0),定量下限为0.20 ng/mL;方法回收率在93.2%~105.5%;日内、日间RSD均小于15%;提取回收率81.6%~86.5%,无明显基质效应。结论: 该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于人血浆中西格列汀浓度的测定,可应用于西格列汀的血药浓度检测和药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定肿瘤患者血浆中阿帕替尼浓度及其临床应用

目的: 建立一种快速、灵敏地测定人血浆中阿帕替尼的LC-MS/MS方法,并应用于肿瘤患者的药物浓度测定。方法: 选用索拉菲尼作为内标,血浆样品用乙腈直接沉淀蛋白后,色谱柱采用 Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm, 3.5 μm),流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵溶液（均含0.1%甲酸） 85∶15(V/V),流速为0.25 mL/min,采用电喷雾离子化源,正离子方式,扫描方式为多反应监测(MRM),用于监测的离子反应分别为m/z 398.1→m/z 212.0（阿帕替尼）和m/z 465.3→m/z 270.1（内标索拉菲尼）。方法学验证后用于肿瘤患者的血药浓度检测。结果: 血浆中内源性物质对测定无干扰,阿帕替尼2.0～2 000.0 μg/L范围内线性关系良好(r=0.996 8);4个不同质控浓度水平(定量下限,低、中、高浓度)的准确度96.1%~105.3%范围内;批内(n=5)和批间(n=3)精密度良好,相对标准误差（RSD）均小于15%;阿帕替尼和内标的提取回收78.0%~87.8%,内标归一化阿帕替尼基质效应因子为92.4 %~107.3%。结论: 本方法特异性强,灵敏度高,符合临床生物样本分析要求,适用于人血浆中阿帕替尼浓度的测定。     

正负离子切换同时测定布洛芬、伪麻黄碱、氯苯那敏血浆浓度的HPLC-MS/MS法

目的: 建立正负离子切换同时测定人血浆中布洛芬、伪麻黄碱和氯苯那敏血药浓度的HPLC-MS/MS方法。方法: HPLC-MS/MS由SHIMADZU公司SIL-HTc型全自动HPLC仪、PHENOMENEX公司Luna C₁₈色谱柱(50 mm×2.0 mm, 3 μm)和AB公司API 3000型三重四极杆串联质谱仪组成。流动相：CH₃OH-5 mmol/L NH₄AC=65∶35（用10%甲酸调至pH 6.0）;流速：0.2 mL/min。样本经两步萃取后进样,分析用时 6.1 min,前 1.7 min 作正离子扫描,测定伪麻黄碱、氯苯那敏、苯海拉明（内标）;1.7~6.1 min 作负离子扫描,测定布洛芬、酮洛芬（内标）。数据的采集和处理由Analyst 1.4工作站完成。结果: 布洛芬、伪麻黄碱和氯苯那敏的血浆标准曲线分别在50～0.097 μg/mL, 500～0.98 ng/mL和400～0.78 ng/mL 范围内有良好线性,且精密度、方法回收率、稳定性等考察均符合要求。结论:本测定方法灵敏度高、特异性好,可用于布洛芬、伪麻黄碱和氯苯那敏的血药浓度测定和药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中4种CYP450探针药物浓度

目的:建立高效液相-串联质谱（LC-MS/MS）法同时测定大鼠血浆中非那西丁(1A2),甲苯磺丁脲(2C9),右美沙芬(2D6),咪达唑仑(3A4) 4 种探针底物浓度。方法:采用symmetry C18柱(2.1 mm×50 mm,3.5 μm),流动相为甲醇：0.1％甲酸水溶液(67∶33,V/V),流速为 0.2 mL/min,柱温35 ℃。电喷雾离子化,检测方式为多反应离子监测。以卡马西平为内标,同时检测大鼠血浆中非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑的药物浓度,并进行其专属性、精密度、准确度、稳定性的验证。结果:非那西丁( 10～5 000 ng/mL )、甲苯磺丁脲( 20～10 000 ng/mL )、右美沙芬( 4～1 000 ng/mL )、咪达唑仑( 4～1 000 ng/mL )线性关系良好,R²>0.99,准确度为95.6%～105.2%,日内和日间精密度RSD(%)<10%,提取回收率>77%,RSD(%)<7%、基质效应在90.7%～100.3%之间,RSD(%)<5.9%,稳定性好。结论:建立了同时快速测定大鼠血浆中4种探针药物（非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑）浓度的高效液相-串联质谱分析方法,准确度和灵敏度高,专属性强。血浆样品的稳定性好,适用于CYP450酶活性的研究。     

UPLC-MS/MS同时测定血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用

目的: 建立UPLC-MS/MS法测定人体血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用。 方法: 采用Waters AcQuity型超高效液相色谱联用API4000型三重四级杆质谱仪,样品处理采用固相萃取的方法,采用Thermo hypurity C₁₈(150 mm×2.1 mm,5 μm)色谱分析柱, 流动相为 10 mmol/L 甲酸胺-乙腈(40∶60,V/V),流速为 0.3 mL/min,进样体积为 10 μL,柱温为 30 ℃, 样品室温度为 5 ℃,质谱应用ESI源、正离子模式、多反应监测(MRM)方式检测他莫昔芬及各代谢产物的浓度。 结果: 他莫昔芬、ND-Tam和TamNox线性范围为1~400 ng/mL,4-OH-Tam线性范围为 0.4~160 ng/mL,4-OHND-Tam线性范围为2~800 ng/mL,可以满足样本浓度定量检测的需要,方法稳定、特异性高,并成功地应用到用药后他莫昔芬及各代谢产物血浆浓度的检测。 结论: 该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆他莫昔芬和代谢产物的浓度,除了为临床血药浓度监测及他莫昔芬药效学研究提供服务外,也可为遗传药理学科研提供技术方法。     

快速灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中阿莫西林并应用于两种制剂的一致性评价

目的: 建立快速灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中阿莫西林浓度,并用于两种阿莫西林胶囊的一致性评价。方法: 采用岛津公司LCMS-8060型LC-MS/MS仪,以MRM模式测定阿莫西林（m/z 366.00/114.00）的浓度,d4-阿莫西林作内标（m/z 370.10/114.05）,离子源为ESI源。色谱柱选用Waters ACQUITY BEH C18（2.1×50 mm,1.7 μm）,梯度洗脱。血浆样本加入内标,经甲醇沉淀蛋白后取上清液进样检测。结果: 所建方法经验证,其线性、准确度、精密度、最低定量限、提取回收率、特异性、基质效应、稳定性等各项指标均符合CFDA的指导原则及最新核查标准要求,并较文献报道中的方法有处理简单、灵敏度高、色谱峰形好的优点。结论: 所建方法快速、灵敏,适用于人血浆中阿莫西林浓度的检测。用于一致性评价的样本实测,两种制剂生物等效。     

LC-MS/MS法同时测定比格犬血浆中氯维地平及其主要代谢物的浓度

目的: 建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）同时测定比格犬血浆中的氯维地平及其主要代谢产物去乙基非洛地平（H152/81）的方法,并将其应用于氯维地平脂肪乳注射液在比格犬的生物等效性研究中。方法: 本实验采用尼莫地平作为内标,血浆样品采用蛋白沉淀处理,分析柱为Synergi Polar-RP C₁₈色谱柱(80 A, 4 μm, 50 mm×2.0 mm),流动相为 0.1%甲酸乙腈和 10 mmol/L 醋酸铵水溶液,采用梯度洗脱,使用电喷雾电离源（ESI）,采用MRM扫描方式进行分析。结果: 氯维地平在1~200 ng/mL、去乙基非洛地平在 5~1 000 ng/mL 范围内线性良好（r＞0.995）。待测物的日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的相关要求。血浆样品经历3次冷冻-解冻循环和-80 ℃ 放置 27 d都是稳定的。结论: 本方法适合用于氯维地平脂肪乳注射液的生物等效性研究。