蛋白质组研究中的分离方法

蛋白质组包括一个细胞或生命体中所有的蛋白质，对蛋白质组的研究是一种非常复杂、并具冒险性的行为。其中心除了基因表达的研究外，首先是对特定蛋白质的结构进行鳃析和辩认。通过联用技术，如液相色谱-质谱（LCMS／MS）联用或高效液相色谱-电喷雾离子源双质谱（HPLC／ESI／MS／MS）联用，可以将蛋白质从混合物中分离出来，并进行表征。[编者按]     

毛细管电泳-质谱联用技术及其在药物和生物分析中的应用

毛细管电泳-质谱（CE-MS）联用技术是在液相色谱-质谱联用技术基础上发展起来的一项新型分析技术,它结合了毛细管电泳具有的分离效率高、分离速度快、样品消耗量少以及质谱检测具有的高灵敏度和强结构解析能力等优点,现已成为倍受分析化学工作者关注的新型微量分析技术。目前,CE-MS联用技术是中药有效成分分析,体内药物分析以及生物样品,如氨基酸、多肽、蛋白质和多糖等分析的重要手段。本文对CE-MS联用技术中同轴鞘流及无鞘流纳流电喷雾等几种接口装置的研究进展,CE-MS技术在中药活性成分分析及多级质谱结构解析以及氨基酸、多肽及蛋白质等生物样品分析中的应用研究进行了综述,并对该技术的发展进行了展望。     

非变性质谱相关技术的研究进展

蛋白质与其他分子的相互作用几乎在所有的生命活动中起着核心调控作用,这些相互作用力和形成的蛋白质复合物是现代生命科学的研究重点。由于传统的生物物理技术对蛋白质复合物和相互作用的研究存在样品纯度要求高的限制,因此迫切需要新技术的出现,为结构生物学和相互作用组学的研究提供补充。质谱技术可以从原理上对混合样品进行检测,降低对样品纯度的要求,其中非变性质谱展现出强大的连接与互补作用。本文从样品制备、离子源、质量分析器、质谱联用技术等4方面介绍非变性质谱相关技术及近年来的研究进展,并总结分析未来面临的挑战以及发展方向。     

基于质谱的蛋白质组学方法新进展

蛋白质组学是后基因组时代的科研热点,其研究方向主要涵盖蛋白质表达谱、蛋白质翻译后修饰谱、蛋白质相互作用谱和单细胞蛋白质组等定性分析以及相对和绝对定量分析,现已广泛应用于生物、医药及病理研究中.由于质谱具有灵敏、准确、高通量等特点,是蛋白质组学研究必不可少的工具.本文综述了近年来基于质谱技术的蛋白质组鉴定及定量方法,并展...     

蛋白质组学的发展与科学仪器现代化

蛋白质组研究是当今生命科学发展的一个新的增长点。本文对蛋白组的历史及其重要性能做了简要论述,介绍了目前蛋白质组研究的两大主要技术,双向凝胶电泳和质谱技术,并对蛋白质组研究的应用领域和一些技术进展做了介绍。     

蛋白质组

蛋白质组研究是近来兴起的生命科学的前沿领域,是生命科学进入后基因组时代的标志之一。蛋白质组是指基因组表达的全部蛋白质,蛋白质组研究在细胞或组织水平上对蛋白质进行大规模的分离和分析。目前蛋白质组研究采用的主要技术是双向凝胶电泳和质谱方法。本文就蛋白质组研究和蛋白质组学的发展过程,研究意义,所涉及的研究范围及主要的研究策略,及最新的进展作一综述。     

RPLC—SDS—PAGE整体蛋白质分离与纳升毛细管液相色谱-串联质谱联用技术的研究及应用

采用RPLC-SDS-PAGE与纳升毛细管液相色谱-串联质谱联用技术对国际人类蛋白质组织(HUPO)提供的法国人肝脏蛋白质组表达谱的构建及其理化性质的统计分析,鉴定了2552条肽段,归结于402种蛋白质和240个蛋白质簇.蛋白质的pI分布范围为4.29～11.57,分子量范围为8,593～3,816,218Da,其中大于100kDa的蛋白质占到所鉴定蛋白质的10%,二者皆高于两维凝胶电泳的等电点和分子量范围(一般等电点3～10;分子量10～100kDa).另外,蛋白质组中不同蛋白质的疏水性分布显示大部分蛋白质为可溶性蛋白质,其中疏水性蛋白质占15%(GRAVY＞0的蛋白质).实验结果表明该技术路线兼顾了反相色谱分离度高和SAS-PAGE兼容性好的优点,可用于复杂组织或细胞中蛋白质组表达谱的构建或比较蛋白质组的研究,为蛋白质组学的方法学研究奠定了基础.     

质谱与蛋白质（肽）的序列结构测定

文章归纳了历史上蛋白质（肽）序列分析方法的发展过程，介绍了质谱在蛋白质序列分析中的应用以及近年来运用化学和酶解方法同质谱联用，使蛋白质序列分析方法更通用、快速、灵敏和廉价。     

色谱质谱联用技术

在色谱质谱联用技术中，气相色谱与质谱的联用和液相色谱与质谱的联用是应用最广泛的在线联用技术。本书分为两部分。第一部分主要介绍了气相色谱质谱联用技术的基本原理，气相色谱与质谱联用仪器以及操作要点，数据采集与处理，谱库检索和典型应用示例。第二部分主要介绍了液相色谱质谱联用技术的原理、方法、技术及最新的发展，并结合具体实例进行讨论，同时介绍了ESI、APCI的原理及相关的接口技术。     

离子迁移谱-质谱技术及其在蛋白质糖基化研究中的应用

糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰（PTM）。基于质谱的检测技术,特别是液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术是糖基化研究的常规手段。然而,由于糖基化存在复杂的异构现象,大多数基于质谱的分析技术在区分其异构体时存在困难。离子迁移谱（IM）是一种基于离子在气相中的形状和电荷进行分离的技术,能够为质谱分析提供新的分离维度。离子迁移谱-质谱（IM-MS）技术具有较强的区分异构体的能力,在蛋白质糖基化研究中的潜力越来越受到重视。本文总结了IM-MS技术的类型和基本原理,及其在蛋白质糖基化研究中的进展,如对完整糖蛋白、完整糖肽和聚糖的研究,并展望了其应用前景。