桦褐孔菌多糖磷酸化修饰工艺研究

桦褐孔菌多糖是桦褐孔菌中主要的生物活性成分,在抗氧化、提高免疫力等方面具有重要作用和广泛的药用价值。该文以桦褐孔菌为研究对象,以桦褐孔菌多糖溶液中磷酸根含量为指标,通过单因素试验及响应面法对桦褐孔菌多糖磷酸化修饰工艺条件进行优化,以提高其多糖的生物活性。结果表明,桦褐孔菌多糖磷酸化修饰最佳工艺条件：三聚磷酸钠与三偏磷酸钠质量比为6∶1、反应温度为75℃,反应时间为4 h,pH值为8.6,修饰后的桦褐孔菌多糖溶液中磷酸根含量为9.58%。该结果为桦褐孔菌多糖磷酸化衍生物的开发提供参考依据。     

桦褐孔菌发酵豆乳的工艺探究及品质分析

为开发出一种新型桦褐孔菌发酵豆乳饮料,采用液体发酵技术,以东北黄豆为原料,以桦褐孔菌为发酵剂研制发酵型功能性豆乳饮料。以桦褐孔菌发酵豆乳多糖含量作为指标,采用单因素试验及响应面法对桦褐孔菌豆乳发酵工艺进行优化。结果表明：桦褐孔菌豆乳的最佳发酵工艺条件为接种量6.3%、豆浆添加量119 mL、发酵温度28 ℃、发酵时间4 d,测得多糖含量4.55 μg/mL。发酵后饮料添加5%蔗糖、0.10%乳酸和2.00%的蜂蜜可明显提高产品适口性和品质。     

桦褐孔菌多糖的乙酰化修饰及其抗氧化活性

采用乙酰化修饰方法对桦褐孔菌多糖进行结构修饰,并评价其抗氧化活性,为桦褐孔菌多糖结构修饰提供新的思路和方向。以桦褐孔菌为原料,采用水提醇沉法提取桦褐孔菌多糖,过AB-8大孔吸附树脂,得纯化后的桦褐孔菌多糖。在氢氧化钠水溶液中以不同体积的乙酸酐制备乙酰化桦褐孔菌多糖,盐酸羟胺比色法测定其取代度。在此基础上,对3种不同取代度的乙酰化桦褐孔菌多糖进行抗氧化活性研究。结果表明,桦褐孔菌多糖经纯化后,通过乙酰化修饰得到三个取代度分别为0.2810、0.3136、0.4072的乙酰化产物,随着乙酰化试剂的体积增加,多糖取代度逐渐增大;三个不同取代度的乙酰化产物对DPPH自由基最大清除率分别为71.8%、74.9%、78.5%;对超氧阴离子的最大清除率分别为71.8%、74.9%、78.5%;对羟基自由基的最大清除率分别为74.5%、79.9%、81.1%。随着取代度的增加,乙酰化桦褐孔菌多糖抗氧化活性逐渐增强。桦褐孔菌多糖经乙酰化修饰后,可显著提高体外抗氧化活性,且抗氧化活性的强弱与乙酰基取代度有关。     

挤压预处理对桦褐孔菌多糖溶出率的影响

以桦褐孔菌粉为原料,采用挤压喷爆法进行预处理,研究桦褐孔菌多糖溶出率。利用单因素、正交试验优化挤压条件,分析物料含水量、螺杆转速、挤压温度对桦褐孔菌多糖溶出率的影响,用扫描电镜观察挤压前、后细胞结构变化,结果表明:挤压温度对多糖溶出率的影响最大,最佳的挤压条件为五区挤压温度160℃,物料含水量9%,螺杆转速100 r/min。在此条件下多糖溶出率为43.98%,比未经挤压的桦褐孔菌多糖溶出率提高6倍。挤压后细胞结构破坏明显。挤压喷爆前处理是提高桦褐孔菌多糖溶出率的有效方法。     

基于响应面法的闪式提取桦褐孔菌多糖工艺优化

利用响应面法优化桦褐孔菌多糖的闪式提取工艺。在单因素实验的基础上,以桦褐孔菌多糖的提取率为响应值,以料液比、提取时间、提取电压为主要考察因素,采用响应面法优化闪式提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺参数。结果表明,经响应面优化得到料液比为1∶23,提取时间为86 s,提取电压为150 V时,桦褐孔菌多糖的提取率最高,可达到8.52%。结论:闪式提取法适用于桦褐孔菌多糖的提取,该工艺具有方便、快速和高效的优点。且经响应面法优化所得的最佳提取条件准确可靠,具有一定的实用价值。      

基于响应面法的闪式提取桦褐孔菌多糖工艺优化

利用响应面法优化桦褐孔菌多糖的闪式提取工艺。在单因素实验的基础上,以桦褐孔菌多糖的提取率为响应值,以料液比、提取时间、提取电压为主要考察因素,采用响应面法优化闪式提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺参数。结果表明,经响应面优化得到料液比为1∶23,提取时间为86 s,提取电压为150 V时,桦褐孔菌多糖的提取率最高,可达到8.52%。结论:闪式提取法适用于桦褐孔菌多糖的提取,该工艺具有方便、快速和高效的优点。且经响应面法优化所得的最佳提取条件准确可靠,具有一定的实用价值。     

基于网络药理学探讨桦褐孔菌降血糖功效成分及作用机制

目的:本研究基于网络药理学和分子对接技术探究桦褐孔菌降血糖功效成分及作用机制研究。方法:通过文献大数据挖掘获取桦褐孔菌主要成分，利用OMIM、DisGeNET和GAD数据库收集降血糖相关基因，Cytoscpe软件构建桦褐孔菌成分-靶点相互关系网络。主要靶点通过DAVID数据库进行GO和KEGG富集，并对KEGG信号通路进行可视化。最后，采用PyRx软件对成分与核心靶点进行分子对接。结果:筛选得到25, 26-二羟维生素D、桦褐孔菌酸，栓菌酸和桦褐孔菌醇烷D等19种成分为桦褐孔菌降血糖的功效成分，作用于AKT1、AGTR1、ADRA2B和HSP90AA1等21个关键靶点，参与调控89条信号通路。分子对接结果发现疏水作用和氢键连接是其主要的作用形式。结论:本研究通过桦褐孔菌主要成分降血糖的功效研究筛选出19个核心活性成分，为桦褐孔菌相关产品开发及其质量控制提供科学的依据。     

桦褐孔菌乙醇粗提物对朊病毒复制的抑制作用

优化桦褐孔菌乙醇粗提物提取工艺并初步探究其对朊病毒复制的影响。采用醇提方法,利用正交试验方法,确定最佳提取工艺。使用CCK-8试剂盒对桦褐孔菌乙醇粗提物处理细胞的安全性进行评价,确定其安全质量浓度;根据安全性评价结果,使用蛋白免疫印记（Western blot）方法检测桦褐孔菌乙醇粗提物对朊病毒复制的影响;通过测定过氧化氢及抗氧化因子等对桦褐孔菌乙醇粗提物的抗氧化活性进行研究。桦褐孔菌乙醇粗提物的最佳提取工艺为：料液比（桦褐孔菌生粉:乙醇）1:10（g/mL）,乙醇体积分数75%,提取时间2 h,提取温度80 ℃,在此条件下,得率为6.32%。桦褐孔菌乙醇粗提物的最大安全质量浓度为6.25×10-4 mg/mL;在此浓度下,处理细胞24 h后,桦褐孔菌乙醇粗提物对朊病毒的复制有抑制作用（p<0.01）,可减少H2O2的含量,增加SOD和抗氧化因子GCLM、GCLC的含量,且具有统计学意义。本试验表明桦褐孔菌乙醇粗提物对朊病毒的复制具有抑制作用,且这种作用可能与其抗氧化活性有关。     

桦褐孔菌黄酮类化合物的提取工艺优化及抗氧化活性

以桦褐孔菌为试材,采用乙醇热回流进行黄酮类化合物的提取,研究了单因素(料液比、提取温度、乙醇浓度以及提取时间)对桦褐孔菌中黄酮类化合物提取率的影响,通过正交实验对其提取工艺进行优化,利用FRAP、DPPH·、ABTS⁺·三种方法测定其抗氧化活性。结果表明:桦褐孔菌黄酮类化合物提取率影响因素为提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,最佳工艺为提取温度75℃,乙醇浓度60%,提取时间2.0 h,料液比1:25 g/mL,在此工艺下提取桦褐孔菌黄酮类化合物含量为53.25 mg/mL,提取率为10.66%。桦褐孔菌黄酮类化合物浓度为200 μg/mL时,其总抗氧化能力相当于464.53 μmol/L FeSO₄。对DPPH自由基清除率的EC₅₀为36.44 μg/mL;对ABTS⁺自由基清除率的EC₅₀为299.89 μg/mL。研究表明桦褐孔菌中黄酮类化合物对DPPH·和ABTS⁺·的清除率接近V_C,具有较强的抗氧化活性,有潜力作为天然抗氧化剂推广应用。     

桦褐孔菌菌粉多糖提取工艺的优化

根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析法,以多糖提取率为响应值作响应面,并进行回归分析。结果表明,桦褐孔菌菌粉多糖提取的理想工艺条件为:温度为83℃,提取时间为2.2 h,液料比为33.3∶1时,桦褐孔菌菌粉多糖的提取率达到24.578%。气相色谱分析该工艺条件下提取的桦褐孔菌菌粉多糖,各主要单糖组成及质量分数分别为:阿拉伯单糖0.53%,甘露糖0.48%,葡萄糖10.75%,半乳糖2.44%。红外光谱分析结果显示,多糖产品中含有酸性多糖,糖苷键主要是α型。     

桑黄液体培养工艺的优化试验

试验研究了桑黄在液体培养条件下碳源、氮源及无机盐对菌丝生物量的影响,并利用正交试验优化了桑黄液体培养的培养基。结果显示:最佳的碳源是玉米粉,最佳的氮源是黄豆粉,优化培养基配方为:玉米粉4%、黄豆粉1.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%。最适合桑黄菌丝体生长的液体发酵条件是:培养温度26℃,pH值6.5,摇瓶装液量为250ml三角瓶装100ml,摇瓶转速130r/min,接种量15%,发酵时间7天。     

马勃液体培养条件的研究

试验以马勃发酵液中菌丝生物量为指标研究了碳源、氮源及无机盐对马勃在液体培养条件下生长的影响,并采用正交试验优化了马勃液体培养的培养基。结果表明：玉米粉为最佳碳源,黄豆粉为最佳氮源,优化培养基配方为：玉米粉3.0%、黄豆粉1.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%。最适合马勃菌丝体生长的液体发酵条件是：培养温度26℃,pH值6.5,摇瓶装液量为250ml装80ml,摇床转速130r/min,接种量15%。     

植物乳杆菌YSQ 规模化生产的低成本培养基配方优化

通过单因素试验、Plackett-Burman试验设计及响应面法筛选适于植物乳杆菌YSQ株大规模发酵的低成本培养基。结果表明：单因素试验确定培养基成分：碳源为玉米粉、次粉+蔗糖;氮源为豆粕;番茄汁作为生长因子供体。利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响植物乳杆菌生长的4个主要因子：次粉、豆粕、K2HPO4和MnSO4。最陡爬坡、中心优化组合及响应面分析确定培养基各组分的最适添加量为：玉米粉10g/L、豆粕15.5g/L、次粉1.2g/L、蔗糖5g/L、番茄汁150mL/L、K2HPO4 1.1g/L、MnSO4 0.28g/L、MgSO4 0.3g/L。优化后,植物乳杆菌发酵18h的菌落总数从优化前的8.73×108CFU/mL(玉米粉、豆粕、次粉的混合料)提高到2.68×1010CFU/mL。     

紫红曲霉液态发酵红曲红色素培养基的优化

以高产诱变株紫红曲霉M144为出发菌株,以红色价和色调为指标,对液态发酵生产红曲红色素的培养基进行响应面法优化。首先采用析因实验设计确定液态发酵生产红曲红色素的红色价和色调的主要影响因子,然后通过Box．Behnken实验设计和响应面法进行优化。实验结果表明：玉米粉和豆粕粉是红色价的主要影响因子,玉米粉和MgSO4·7H2O是色调的主要影响因子,最优培养基配方为：玉米粉4．52％,豆粕粉2．32％,MESO4·7H201．55％,K2HPO4·3H2O0．10％。在此条件下,红曲红色素的红色价为280．27U／mL,色调为1．09,比优化前分别提高了64．86％和10．10％。     

影响灵芝深层发酵因素的探讨

本文研究了灵芝在深层发酵过程中培养基及发酵液粘度对灵芝菌丝体生长状况的影响。试验结果表明,麦芽粉作为培养基主要营养成分时,增稠剂浓度为0.15％（发酵液粘度为3.4mPa.s）时,菌丝体数量较多、重量较大且菌丝体大小均匀,菌丝呈球形绒毛状,品质较好。玉米粉为培养基主要原料时,增稠剂浓度为0.05％（发酵液粘度为1.65mPa.s）时,菌丝生长状态最好,菌丝呈球形刺状。在一定粘度范围内,低粘度有利于形成数量较多的小菌丝球,高粘度时有利于形成大菌丝球。结果分析还表明,麦芽粉作为培养原料用于灵芝深层发酵明显优于玉米粉。     

发夫酵母工业化生产虾青素的培养基研究

为进一步降低培养基成本,促进工业化生产,在前期优化的培养基基础上,本研究尝试直接以价廉易得的玉米粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉水解液代替葡萄糖作碳源,进行摇瓶发酵实验和10L罐分批发酵实验,探讨了发夫酵母产虾青素工业化培养基的制备。研究发现玉米淀粉水解液可代替葡萄糖作碳源进行工业化生产,并确定了淀粉双酶水解的最佳工艺条件为淀粉糊浓度为30％、液化酶添加量为25U／g淀粉、糖化酶添加量为200U／g淀粉、糖化时间为4h。这样可大大降低培养基成本。     

绿色木霉液体发酵产纤维素酶的培养基优化

研究液体摇瓶发酵产纤维素酶的最佳培养基组成。通过单因素实验确定了培养基中氮源、碳源和诱导碳源的种类,采用正交试验确定了培养基中4种主要营养成分的组成。结果表明,摇瓶液体发酵产纤维素酶的最佳产酶培养基的种类和组成为：有机氮源蛋白胨和无机氮源硫酸铵的含量分别为11g／L和13g／L,葡萄糖6g/L,磷酸二氢钾10．5g/L,爆破的稻草为13．4g/L;纤维素酶的滤纸酶活为19．22U／mL。     

松茸T_2菌株培养基碳氮源的选择及优化

研究了碳氮源对松茸T2菌株生长的影响,结果表明:25种碳源中,淀粉、玉米粉和葡萄糖的利用效果较好;26种氮源中,酵母浸膏和牛肉浸膏的利用效果较好。选取不同水平的玉米粉、葡萄糖和酵母浸膏作为碳源和氮源,采用三因素二次回归正交旋转设计试验建立了回归模型,确定了最佳培养基成分配比为:玉米粉2·00%、葡萄糖2·00%、酵母浸膏0·55%。用该培养基,在选定培养条件下菌落直径达到了3·18cm,比对照的2·50cm提高了30·0%。     

三七渣混菌发酵生产蛋白饲料的初步研究

本次研究考察了培养基制备条件对黑曲霉/产朊假丝酵母固态发酵三七渣生产蛋白饲料的影响,并采用正交试验对培养基制备条件进行了优化.研究结果表明,在培养基制备过程中,氮源添加量、水含量和粒径3个因素对发酵培养物中真蛋白含量影响较大;磷源添加量、pH值和Tween-80添加量3个因素对其影响不显著.三七渣需要进行粉碎过筛、适量的补充氮源和调整含水量等预处理后才适合作为固态发酵培养基使用,优化的三七渣培养基制备条件为采用经粉碎后过60目筛的三七渣,添加5％的硫酸铵,基质含水量70％,pH值自然.     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的特性及补料研究

采用分离纯化的枯草芽孢杆菌进行产中性蛋白酶的研究,结果表明:适宜的碳源和氮源分别为玉米粉和豆粕粉;磷酸盐能提高酶产量;未添加Na2HPO4和KH2PO4的情况下,Ca2+和Mg2+对产酶都有抑制作用;Na2HPO4和KH2PO4存在时,1 mmol/L的Ca2+和Mg2+能使酶产量分别提高12%和8%,随着离子浓度的增加,产酶受到抑制;采用在11 h、18 h和24 h分别补加10 g/L玉米粉和7.5 g/L豆粕粉的补加策略,产量提高了96%,生产强度提高了112%。