不同真菌纤维素酶固体发酵条件的比较研究

在稻草和麸皮固体培养基上对木霉、康宁木霉、绿色木霉、黑曲霉、宇佐美曲霉纤维素酶产酶条件进行了研究,分析了培养基组成、含水量、 氮源、培养时间对酶活性的影响,并对酶的pH稳定性及酶促温度进行了初步研究。     

绿色木霉固态发酵工艺及诱导条件研究

探讨绿色木霉固态发酵产生纤维素酶的诱导促进条件。通过初始培养基、表面活性剂、诱导物、缓冲pH体系等对绿色木霉固态发酵产酶的诱导情况进行分析,获得产酶时间曲线和最大产酶量。不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P0.05),麸皮∶秸秆粉=1.5∶1(质量比),培养基固液比1∶2.5(g/m L),硫酸铵按培养基干基的2%加入,初始pH=6为最佳条件,采用缓冲pH体系对产酶有促进作用,添加表面活性剂和适当种类的诱导物可以提高产酶量,而过高浓度的诱导物则降低产酶量。该研究为绿色木霉对秸秆的转化应用提供了理论依据。     

里氏木霉产纤维素酶的条件优化及酶学性质研究

本文对里氏木霉产纤维素酶发酵培养条件及对其所产纤维素酶的酶学性质进行初步研究。结果表明,里氏木霉发酵产酶的最佳培养基为:麦麸1.8%、硝酸钠1.3%、碳酸钙0.3%、氯化钠0.2%、磷酸二氢钾0.3%;里氏木霉所产纤维素酶的最适反应条件为:pH 4.0、50℃,金属离子Fe2+、Co2+、Mn2+、Ca2+对酶活有促进作用,而Fe3+、Ag+对酶有抑制作用。经培养基优化后,发酵液上清中的最终酶活为116.64U/mL,是优化前的3.5倍。     

多菌混合发酵产纤维素酶及生物法预处理秸秆的研究

对实验室分离筛选的3株绿色木霉和6株枯草芽孢杆菌的生长及产酶情况进行了研究,综合确定绿色木霉绿2与芽孢杆菌S3为混合菌中产纤维素酶酶活最高的组合。在此基础上,采用解脂假丝酵母处理高粱秸秆。先将解脂假丝酵母的种子培养液按照3%的接种量接种到发酵产酶培养基中,隔24 h将绿色木霉绿2的孢子悬浮液按照2.67%的接种量接种到发酵产酶培养基中,再隔12 h将芽孢杆菌S3的种子培养液按照5.33%的接种量接种到发酵产酶培养基中,测定出的滤纸酶活（FPA）最高,为389.89 U/mL,比优化前提高了14.30%。     

响应面优化木霉TP-24固态发酵生产β-1,3-葡聚糖酶产酶条件

研究采用响应面法(RSM)对木霉TP-24固态发酵生产β-1,3-葡聚糖酶的培养基组成(碳源酵母粉、氮源NH4NO3和料水比)进行了优化。结果表明,采用以麸皮为基质、添加1.91%酵母粉、1.99%NH4NO3和15.79mL水的培养基中,接种木霉TP-24菌株于30℃发酵4d,β-1,3-葡聚糖酶活力可达到594.37U/g·ssc,比对照产酶水平提高了273.55%。     

康氏木霉降解麸皮的研究

对实验室分离筛选的康氏木霉进行研究.研究和分析了滤纸酶活（FPA）测定法的最优酶解条件为：在60℃、pH4.5下酶解40min,酶与底物之比为1：2.康氏木霉的最优产酶条件为28℃下,培养4d,培养基pH为6.5,含水量为150%,接种量为5%.用同时去蛋白和淀粉的麸皮作为作用底物,麸皮的转化率可高达28.5%.     

响应面法优化康氏木霉产β-葡聚糖酶的液体发酵条件

确定康氏木霉(Trichoderma koningii)产β-葡聚糖酶的发酵培养条件。利用响应面优化法,通过两步实验设计,即部分因子实验和中心组合实验设计,对康氏木霉液体发酵产β-葡聚糖酶的最佳培养条件进行了优化研究。得到最优培养条件:发酵培养温度29·8℃,摇床转速为200r/min,发酵培养基起始pH为3·43;250mL三角瓶中装液量30mL;接种量5%(1·5mL/瓶),培养时间为156h。在最优培养条件下康氏木霉产β-葡聚糖酶活力达到36·9U/mL。实验结果表明,康氏木霉在液体发酵条件下产β-葡聚糖酶,发酵液起始pH和培养温度对康氏木霉产β-葡聚糖酶活力影响最显著。     

聚乙二醇介导木霉的原生质体转化

在研究绿色木霉菌(Tdchoderma viride)原生质体形成和再生基础上,初步研究了木霉的转化条件.实验表明,木霉原生质体形成的合适条件为:pH6.98磷酸盐缓冲液中加入8mg/mL溶壁酶,培养24 h的菌丝,在40 r/min荡条件下30℃酶解4 h,原生质体产量为4.70×107个/mg.原生质体在0.3mol/L,肌醇和0.3mol/L氯化钾的CM培养基上再生率为14.5%.利用聚乙二醇(PEG)介导将带有潮霉素抗性标记的激发子基因转化到绿色木霉中,使其成为价值更大的生防菌.对获得的转化子进行了初步的鉴定,结果表明,外源基因已转入受体菌绿色木霉中.     

木霉10号应用于食醋生产培养条件的试验

已有报导,木霉应用于食醋生产可提高淀粉利用率和出品率。我们在陕西省微生物所刘涛工程师的协助下,以该所新菌株2559—10<简称10号>与木霉9023进行了优选试验,同时根据食品卫生的要求对木霉10号一、二代培养基的组成、三代木霉、黑曲霉共生种曲培养中接种量的比值等培养条件进行了选优试验,应用于大生产效果显著,现就部分试验简报如下: 一、种曲培养方法1.菌株来源黑曲霉3324:西安大庆酿造厂;木霉2539—10:陕西微生物研究所;木霉9023;陕西微生物研究所. 2.试管斜面培养黑曲霉用米曲汁培养基,木霉均用土豆琼脂培养基(土豆20%,葡葡糖1%琼脂2.5%)做保藏菌株培养基,以碱麦草粉、麸皮培养基做一代生产     

康氏木霉ZJ4摇瓶发酵产纤维素酶的研究

本文以稻草为主要碳源，对几种真菌产纤维素酶的能力进行了比较研究，发现康氏木霉ZJ4产酶能力最强。研究了康氏木霉ZJ4发酵产纤维素酶的发酵条件，结果表明：康氏木霉ZJ4发酵产纤维素酶的培养基组成为（g／L）：稻草40，麦麸20，大麦粉16．5，（NH4）2SO410，装液量30mL，起始pH5．0。产酶条件为：培养温度28℃，转速200r／min，当培养时间为144h，纤维素酶活达到最高值。