低温冷冻对申克氏孢子丝菌的影响

申克氏孢子细菌生物学的研究,目前只有对高温的测试,认为该菌耐热性弱,然而对低温冷冻有何影响?生物学性状如何?尚未见报导,能否用现代的治疗手段——冷冻疗法治疗孢子丝菌病等是本文研究的中心。一、实验材料与方法1.使用菌株:我院真菌室保存的标准申克氏孢子丝菌,最易转换双相性的菌株。2.培养法:微量培养(钢圈法),4％葡萄糖沙氏琼脂,接种上述试验菌株,25℃培养一周,观查形成典型菌丝相,称试验标本。3.冷冻及复温条件:将上述标本若干个,每两个为一组,放入-85℃冰箱内,按原定     

低温保存,低温生物学和低温免疫的近况

第七届国际低温外科大会于1989年10月11—14日在北京召开。来自15个国家的200余名专家出席了会议,我国23个省市自治区的专家121人(台湾9人,香港2人)。共发表论文115篇,内容涉及临床各科疾病的冷冻治疗,低温器械以及低温保存,低温生物学和低温免疫。这些报告较全面介绍了国内外低温医学、生物学的最新进展情况,现仅就后三方面的内容简述如下。     

牙鲆与大菱鲆病原迟钝爱德华氏菌生物学特性及系统发育学分析

对从7起牙鲆（Bastard halibut,Paralichthys olivaeeus L．）、3起大菱鲆（Turbot,Scophdudmus maximus L．）病害的病（死）鱼中分离到的相应病原菌较系统地进行了形态特征、理化特性等表观分类学指征的鉴定及代表菌株DNA中G＋Cmol％的测定。同时,择代表菌株进行了16SrRNA基因的分子鉴定,测定了16SrRNA基因序列,分析了相关细菌相应序列的同源性,构建了系统发生树。结果表明,分离鉴定的148株菌均为爱德华氏菌属（Edwardsiella Ewing and McWhorter 1965）的迟钝爱德华氏菌（E．tarda）,其中128株为迟钝爱德华氏菌野生型（E．tarda wild type）菌株,20株暂定为迟钝爱德华氏菌吲哚阴性变异株。代表菌株（HC010907—1及HC010830-1）的16SrRNA基因序列,与GenBank数据库中的迟钝爱德华氏菌的同源性均在99％。     

铟丝密封件低温密封性能实验研究

针对铟丝密封件,采用法兰-密封件-螺栓密封结构对其进行密封性能的实验研究,测试系统的设计压力范围为0-10 MPa,设计温度为-196℃.基于实验测试结果,探讨了该密封结构的螺栓预紧力、工作压力及温度等与泄漏率之间的关系.     

低温技术在生物学和医学中的应用

食物的低温保鲜贮存技术早已在生产及日常生活中广泛应用。利用低温贮存动物的精液、血液、人体皮肤等生物组织的技术也已进行了大量的研究，并已获得了成功的应用。在低温外科方面，低温冷冻技术已在治疗帕金森氏病(Parkinson′s disease)、眼外科、某些肿瘤及癌症手术中应用。     

菰黑粉菌孢子萌发过程形态学观察及系统发育研究

通过显微观察法研究菰黑粉菌厚垣孢子在28℃、PDA液体培养基中静止萌发各时期的菌体形态,克隆了菰黑粉菌18S rDNA序列并测序,结合已有ITS-5.8S rDNA序列和18S rDNA序列分析其系统发育地位.结果表明,从厚垣孢子到形成稳定的担孢子需要62~72 h,经历厚垣孢子萌发、芽管形成、先菌丝形成、担孢子和小孢子等几个阶段,在体外培养时多以棒状担孢子形态存在,培养30 d后,在培养基表面或边缘形成白色丝状菌丝;系统发育分析结果显示菰黑粉菌与Ustilago属和Sporisorium属亲缘关系较近,与黑粉菌属中的Ustilago triodiae亲缘关系最近.     

一起雏鹅并发鸭里默氏菌和大肠杆菌混合感染的诊治

无菌采集病死鸭的脑,心血、肝分别接种普通琼脂、鲜虹琼脂和麦康凯琼脂平板,分别置37℃培养箱和烛缸培养14小时,结果鲜血琼脂平板上长出两种菌落形态的细菌。将两种菌的纯培养物分别接种微量生化反应管内（购自杭州天和微生物试剂有限公司）培养观察,结果第一种菌不发酵碳水化合物,静基质实验、甲基红试验、硝酸盐还原试验均为阴性,不产生硫化氢,氧化酶和过氧化酶阳性。     

基于刚度模型分析低温流体对科氏质量流量计的影响

以单直管科氏质量流量计(CMF,Coriolis Mass Flowmeter)作为研究对象,在欧拉伯努利梁简化为简支梁建立数学模型,即刚度模型的基础上,导出了包含无量纲函数形式的质量流量表达式;通过建立刚度参数与材料温度的关系,导出了由材料线膨胀系数和温差表示的流量计相对误差理论计算表达式;计算了在温度为-197℃～+7℃范围内的流量计的相对误差。     

低温脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及其部分酶学性质

从南极乔治王岛冻土来源的76株低温细菌中筛选到13株低温脂肪酶产生菌，对其中的BTsl0022菌株进行鉴定。通过生理生化特征、16s rDNA基因序列的同源性和系统发育分析发现，菌株RTsl0022属于假单胞菌属(Pseudomonas)，但与已定名的假单胞菌有一定的差异，与未定名的Pseudomonas sp．PsB的亲缘关系最接近，故将其暂定名为Pseudomonas sp．BTsl0022。对该菌脂肪酶的酶学性质初步研究表明，酶的最适作用温度为24℃，对热敏感，60℃处理30min仅残留25％酶活性，酶的适宜作用pH范围在7．0～9．0，最适pH为8．0。     

鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌标准物质的研制

将一定浓度的菌种添加至经过辐照灭菌的鸡肉基质中,经冻干脱水制成鸡肉基质中单核细胞增生李斯特氏菌准标准物质,研究其均匀性与稳定性.实验结果表明:该准标准物质的均匀性试验的相对重复性标准差为3.596%,相对再现性标准差为3.514%;批次内与各批次间验证试验表明:批次内与各批次之间测试结果无显著差异,半年内稳定性良好.     

转dct结构基因固氮斯氏假单胞菌工程菌株构建及其特性研究

固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501是一种定殖于水稻根部的联合固氮菌。将含有A1501四碳Z-羧酸转运系统(Dct-transport system)结构基因dctPQM的亚克隆大片段克隆到具有广泛宿主范围转移特性的质粒载体pSZ21上。通过三亲接合试验，重组质粒pSZY6中所携带的dctPQM基因随机转座插入到菌株A1501的染色体基因组中，构建了含有额外拷贝dct结构基因的遗传212程菌株。在A15卡那霉素(50μg／mol)平板上，共筛选到约60株转接合子。其中工程菌株A-136、A-115和A-142在以不同的四碳二羧酸如琥珀酸、延胡索酸和苹果酸，以及乳酸为唯一碳源生长时，表现了较高的固氮活性，其固氮水平明显高于野生型菌株A1501。     

原位合成纳米SiOx/LZM/TP-CS涂膜对腐败希瓦氏菌的抑菌机理

目的 为拓展壳聚糖(CS)保鲜涂膜在水产品中的应用,并为水产品保鲜机制的研究提供理论支持.方法 以原位合成纳米SiOx改性的CS为成膜基质,以溶菌酶(LZM)和茶多酚(TP)为添加剂,采用流延法制备复合保鲜涂膜.以水产品中优势腐败菌——腐败希瓦氏菌为抑菌对象,研究涂膜的抑菌性能,用扫描电子显微镜(SEM)观测复合保鲜涂膜处理前后菌体的微观形貌变化,测定复合保鲜涂膜处理一定时间后菌悬液的电导率、OD260值、Na+/K+-ATP酶和AKP酶活性的变化.结果 各涂膜均表现出了抑菌性能,涂膜处理后菌体变形,且其菌悬液的电导率、OD260值、Na+/K+-ATP酶和AKP酶活性明显高于同期未处理样品.CS经纳米SiOx改性后,涂膜的抑菌性能略有提高,菌体多处塌陷,菌悬液电导率、OD260值、Na+/K+-ATP酶和AKP酶活性显著增加;继续加入LZM或TP后,涂膜的抑菌性能继续提高,且原位合成纳米SiOx/TP-CS涂膜抑菌性能更优.LZM和TP同时加入经纳米SiOx改性的CS涂膜中后,复合涂膜处理的菌体细胞壁溶解,损伤严重,同期处理的菌悬液电导率、OD260值最高,并对Na+/K+-ATP酶、AKP酶活性有抑制作用.结论 结合前期的研究结果,SiOx/LZM/TP-CS复合保鲜涂膜具有良好的保鲜、抑菌性能,可为可食性保鲜涂膜的应用提供理论指导和技术支持.     

esaC基因对迟缓爱德华氏菌的毒力及T3SS蛋白分泌的影响

为了确定编码迟缓爱德华氏菌(E.tarda)Ⅲ型分泌系统(T3SS)装置蛋白的esaC基因的功能,采用基因敲除的方法构建了E.tarda野生型致病菌株LSFAO的esaC基因无极性缺失突变株LSE40ΔesaC,该突变株缺失了esaC的46-1452bp。Western blotting分析表明,由于esaC的缺失,E.tarda T3SS的输送器蛋白(EseB,EseC,EseD)不能分泌到细胞外,同时细菌的自凝聚现象消失;毒力检测发现,突变株LSE40ΔesaC对蓝曼龙鱼的半数致死量比野生型菌株提高了11.5倍。结果表明,esaC基因影响T3SS输送器蛋白的分泌和E.tarda的毒力。此研究确定了esaC基因作为E.tarda T3SS装置蛋白的功能,加深了对E.tarda致病机理的了解。     

定伸长条件下PAN基预氧丝低温碳化的力学性能及其群子统计参数的考察

研究了低温碳化条件下不同的预牵引力和升温速率对纤维的力学性能的影响。通过扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)方法对低温碳化丝进行了表征。发现当升温速率为5℃/min,1%的定牵引率时,得到的纤维的抗拉强度和抗拉模量都比较高,且直径比较小。同时应用第四统计力学对定牵伸条件下不同升温速率对纤维性能的群子参数进行了讨论,发现其可以很好模拟升温速率对纤维低温碳化过程的影响。     

碳酸盐矿化菌调控碳酸钙结晶动力学、形态学的研究

选用实验室自培育碳酸盐矿化菌,研究了体系、细菌体体系、细菌分泌物液体系对碳酸钙结晶动力学,晶体形貌影响.研究发现细菌液浓度增加,抑制碳酸钙成核动力学"平台区"由0增加到7.8min;细菌体作为异相成核点加速结晶过程;分泌物抑制晶体成核,并随着与Ca2 混合时间的不同,"平台期"延长.球形碳酸钙的产生是由细菌分泌物调控;Ca2 同有机质表面-COO-和CO结合,并且随着相互间作用程度的增加,球状碳酸钙不规整表面逐步转变为光滑表面.本研究对于微生物诱导碳酸钙的工程性应用如混凝土微裂缝修复、古建筑表面防护处理、微纳米碳酸钙颗粒制备等具有一定指导意义.     

食品中志贺氏菌快速检测免疫磁分离样品前处理技术研究

采用Protein A磁珠与志贺氏菌混合血清制备抗志贺氏菌多靶标免疫磁珠,建立了25 mL志贺氏菌免疫磁分离体系,并通过测定代表性食品(牛奶、水果、面包)中志贺氏菌生长曲线,设计食品样品前处理可行性技术方案,与环介导等温扩增(LAMP)检测技术整合进行了食品中痕量志贺氏菌快速检测验证。结果显示：多靶标免疫磁珠能同时捕获福氏、宋内氏、鲍氏、痢疾氏等4种志贺氏菌,捕获效率为35%～94%,非特异性小于1%(金黄色葡萄球菌10%除外),1～2×10¹ CFU志贺氏菌在25 mL纯牛奶、25 g梨/面包+25 mL志贺氏菌增菌肉汤基础中,通过6 h培养+免疫磁分离的策略可获得10² CFU/mL以上的志贺氏菌,将志贺氏菌检测样品前处理时间由48 h缩短至8 h内,并能够满足后续检测技术检出限的需求,实现了食品中志贺氏菌的快速检测。     

深低温冻存血对细胞形态学及六项细胞化学影响的观察

血细胞经液氮-196℃冻存,使细胞新陈代谢停止,可以长期保存。我们在工作中见到准备冷冻作骨髓移植的骨髓血中的有核细胞,大多数是外周血的白细胞。本文旨在了解在深低温冻存后白细胞的生化及形态学的变化,拟为临床提供一点参考。     

低温换热器的特点及研究方向

本文论述对低温换热器的要求、传热的特点及低温换热器的研究方向。     

TiNi超弹丝的传感及驱动功能研究

测试了TiNi超弹丝在恒温拉伸、卸载过程中的电阻－应力－应变关系曲线，分析了力学及电阻特性的变化机理。结果表明，在恒温拉伸过程中TiNi超弹丝的电阻变化率与温度呈近似线性关系，在卸载过程中TiNi超弹丝表现出较大的屈服应力。可得出TiNi超弹丝具有力传感与驱动功能的结论，为构建以TiNi超弹丝为组元的智能材料结构提供了理论依据。     

低温纤维素酶产生菌的筛选、鉴定、生长特性及酶学性质

从北极楚科奇海分离出一株产纤维素酶的耐冷假交替单胞菌BSw20308。研究表明：该菌最适生长温度10℃,35℃不生长;在pH7．0～8．0、含2．0％～3．0％NaCl的培养基条件下最适宜菌株生长与产酶;可溶性淀粉、酵母浸出液是有利于菌株生长及产酶的碳源、氮源物质;蔗糖、可溶性淀粉、麦芽糖及麸皮对CMCase的合成具有明显诱导作用;CMC、麸皮、可溶性淀粉及麦芽糖对滤纸酶的合成有一定诱导作用,单糖与部分双糖(蔗糖、纤维二糖及乳糖)则起阻遏作用;在指数生长后期至稳定早期,大量产CMCase;发酵液含CMCase、滤纸酶及葡萄糖苷酶活性,以CMCase活力最高;胞外CMCase活力占总CMCase活力的74．1％左右;酶最适作用温度35℃,5℃时酶活保留50％左右;酶对热敏感,35℃半衰期为3h,25℃下酶活稳定;酶最适pH8．0。