白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2.63%～5.28%和2.40%～4.26%;回收率为95.0%～106.4%;高浓度Alb样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.997 4。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

肿瘤标志物CA125免疫放射分析试剂盒的研制

采用两株CA125单克隆抗体,一株用于125I标记,另一株包被于试管作为固相抗体,稀释卵巢癌患者腹水制备标准品,建立了双位点夹心法人血清肿瘤标志物CA125免疫放射分析法.标准曲线的最大标准点免疫结合与零标准非特异结合之比大于100;最小检测限为1.0 U/mL;批内、批间变异系数分别为 4.4%～5.8 %和8.4%～9.9 %;样品中加入已知量CA125测定,回收率为96.8%～112.5%;对含高浓度CA125的血清样品稀释测定,结果表明方法的健全性良好.38例健康女性血清样品测定值范围为2.9～24.1 U/mL;±2s为9.6±9.6 U/mL.     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

β2-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

以β₂-微球蛋白（β₂-MG）抗体包被微孔板，四甲基联苯胺（TMB）为底物，用辣根过氧化物酶标记β₂-MG，建立了β₂-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒，并对该方法进行了方法学分析。结果显示：本方法分析灵敏度为0.15 mg/L，批内、批间变异系数分别为4.1％～11.2%和14.1％～16.0％，回收率为93.3%～115.9%，高浓度β₂-MG样品系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数为r=0.997 4。特异性结果显示：本试剂盒与铁蛋白基本无交叉反应，与白蛋白及甲胎蛋白在浓度分别低于10 mg/L及5 mg/L时有交叉反应，但反应很小。与放射免疫分析法（RIA）同时测定人血清样品，方法间有良好的相关性，相关方程为y_ELIA=1.006x_RIA+0.406，r=0.900(n=59)。以上参数均符合临床免疫分析的要求。本试剂盒操作简便、快速，适用于临床检测和科研应用。     

胰岛素免疫放射分析方法的建立

摘要：采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯试管作为固相抗体、另一株标记125I，建立了胰岛素测定的双抗体夹心免疫放射分析方法。其方法学灵敏度为2.8mIU/L；曲线范围5～160mIU/L；批内、批间变异系数分别小于5%、10%；回收率92.3％～112.6％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.996；39例健康人血清样品测定值为4.7～14.3mIU/L，该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性良好（r=0.981）。     

人血清CA15-3免疫放射分析法的建立

一株CA15-3单克隆抗体用于^125I标记，另一株CA15-3单克隆抗体包被试管作为固相抗体，建立了双位点夹心肿瘤标志物CA15-3免疫放射分析法。CA15-3标准品以CIS公司免疫放射分析药盒标准品校正。最小检测限为0.4U／mL；批内、批间变异系数分别为6．0％～6．2％和4．1％～5．9％；样品中加入已知量CA15-3测定，回收率为86．8％～118．6％；高浓度CA15-3的血清样品系列倍比稀释后测定，实测值和计算值呈线性相关，相关系数大于0.99；38例健康女性血清样品测定值为5．7～23．7U／mL。     

氯霉素酶联免疫分析方法的建立

以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素（CAP）辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺（TMB）为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析（CAP-EIA）方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.     

磺胺甲恶唑酶联免疫分析方法的建立

本方法建立了磺胺甲恶唑酶联免疫分析方法用以检测动物源性食品中磺胺甲恶唑的残留。利用辣根过氧化物酶（HRP）标记SMX（Sulfamethoxazole ），兔抗SMX抗体制备固相抗体，通过标本中的SMX和一定酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗，标本中SMX的量和显色后的OD450值呈负相关的原理来检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定，本方法的灵敏度为0.067μg/L，批内变异<10%，批间变异<20%。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94.9%~116.0%、 82.0%~107.6%、 81.6%~94.9%、89.0%~93.0%，符合免疫分析方法的要求，     

氯霉素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用化学发光免疫分析(CLIA)技术检测动物性食品中的氯霉素(CAP)残留量。将兔抗氯霉素多抗吸附在聚苯乙烯微孔板上制成固相抗体,在氯霉素上连接辣根过氧化物酶(HRP)制成标记物,鲁米诺体系作为发光底物,建立了氯霉素酶促化学发光免疫分析方法。方法学分析灵敏度为0.05 ng/ml,批内变异系数小于8%,批间变异系数小于20%,以牛奶为样品的分析回收率为87%～100%,稀释实验相关系数为0.999,检测线性范围为0.1～10 ng/ml。     

游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法。其灵敏度为0.90pmol/L,标准曲线范围0.9～45.0pmol/L,批内变异系数3.1%～8.1%,批间变异系数4.9%～10.6%。测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5～11.1pmol/L,均值为5.1±2.0pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7～37.3pmol/L,均值为20.5±7.1pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9～3.8pmol/L,均值为2.0±0.9pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4～8.5pmol/L,均值为6.0±2.5pmol/L。通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(RIA)的测定结果有良好的相关性。应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。     

高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒

以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用     

丙型肝炎病毒抗体时间分辨免疫荧光分析及应用评价

为建立抗-HCV的时间分辨免疫荧光分析法（IFMA）、以HCV抗原包被微孔板，样品中的抗-HCV、Eu^3 标记羊抗人IgG形成夹心，以β-二酮体为增强液，数据采用Log-Logit函数和四参数Logistc函数数据处理程序处理。结果表明，方法的批内和批间CV分别为3.64%和4.39%，平均回收率105.58%，可测范围为1.01-17.34NCV/mL，灵敏度为0.03NCU/mL。本法与HBsAg有0.23%的交叉，与HBeAg有0.04%的交叉。278例正常对照组血清抗-HCV浓度均小于1NCU/mL。结果提示，高度灵敏、稳定的抗-HCV IFMA方法的建立为临床和科研工作提供了一种非放射性标记定量检测分析的方法。     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T₃抗体包被微孔,T₃生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T₃）生物素-亲合素酶联免疫分析(T₃-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1％～8.3％和6.5％～10.5％,回收率为98.1％～107.2％;高浓度T₃血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

北京城区大气中有机溴污染物的分析

利用仪器中子活化（INAA）法分析了2004年4月至12月间北京城区大气中气态与总悬浮颗粒物（TSP）样品中可萃取有机溴污染物（EOBr）和持久性可萃取有机溴污染物（EPOBr）的浓度。结果表明，采样期间城区大气中气态EOBr平均浓度为6．2ng／m^3（1．0～18．5ng／m^3），EPOBr平均浓度为0．95ng／m^3（0．02～2．2ng／m^3）；TSP中EOBr和EPOBr的平均浓度分别为18．3ng／m^3（2．3～73．4ng／m^3）和1．0ng／m^3（0．09～3．0ng／m^3）；气态和TSP中EPOBr分别占EOBr的15．3％（1．9％～62．8％）和5．5％（0．8％～55．6％）。可见大气中的有机溴污染物绝大多数为酸溶或酸不稳定的化合物。     

自动固相萃取仪在尿中钚分析方法中的应用

为了对钚操作者内照射剂量进行有效监测和估算,国际辐射防护委员会(ICRP)推荐测量工作人员的排泄物,比如对尿液中钚进行分析。本研究采用自行研制的自动固相萃取仪分离纯化尿中的钚,并优化实验方案,实现自动化操作。分离纯化的优化实验条件为:料液硝酸浓度为7~8mol/L、吸附速度为0.5mL/min、解吸速度为0.3mL/min和解吸液为10mL 0.36mol/L HCl-0.01mol/L HF溶液。采用优化条件处理后,全程平均回收率为75.70%,相对标准偏差为7.98%。结果表明,在尿中钚分析的前处理中,采用自动固相萃取仪进行分离纯化,能够显著提高分离效率,提高样品前处理的稳定性。     

HPLC-MS/MS检测[18F]FDG中Kryptofix2.2.2的残留量

应用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-MS/MS)测定[18F]FDG示踪剂中残留的Kryptofix 2.2.2浓度,并进行方法学确证。以乙腈40 mmol/L NH4Ac水溶液(50:50,V/V)为流动相,采用ultimate XB-C18(4.6×150 mm,3μm)色谱柱进行分离,流速为0.85 mL.min–1,通过电喷雾离子化串联质谱,以多反应监测(MRM)方式对[18F]FDG中的K-222残留量进行检测。结果表明,用HPLC-MS/MS法可以在4 min内完成K-222的检测,其线性范围为0.5–120 ng.mL–1,平均回收率在101.3%–106.6%,批内和批间变异均小于9.4%。HPLC-MS/MS方法简单、快速、灵敏,适合于短半衰期[18F]FDG中K-222残留浓度的检测。     

磺胺喹噁啉酶联免疫分析方法的建立

利用抗磺胺喹噁啉(SQ)多抗建立酶联免疫分析方法，以测定SQ在动物源食品中的残留。方法学鉴定结果表明，灵敏度为0.2ng/mL，批内、批间变异分别为7.8%～10.0%、10.5%～12.0%；牛奶、蜂蜜、鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别在93.1%～107.0%、69.0%～104.0%、40.0%～73.6%、50.0%～84.0%之间。牛奶稀释实验表明，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数R=0.997。     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立

采用抗恩诺沙星单克隆抗体建立酶联免疫吸附法（ELISA）用以检测恩诺沙星在动物源性食品中的残留。经方法学鉴定,本方法的检测范围为0．5～50μg／L,灵敏度为0．2μg／L,批内变异系数〈10％,批间变异系数〈20％。鸡肉、鱼肉、虾和蜂蜜样品的回收率分别为95．5％～107．5％、80．0％～101．3％、105．7％～122．7％和93．3％～111．3％。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。