DNA分子标记技术在红曲菌分类中的研究进展

介绍了限制性长度片段多态性(RFLP),rDNA基因中的IGS、ITS、LSU区域的标记技术以及随机扩增DNA多态性分析(RAPD),以及DNA分子标记技术的方法和原理,及近年来在应用国内外红曲菌分类鉴定中的研究进展,指出了各种技术的优缺点.     

分子标记技术在红曲霉分类鉴定中的研究进展

红曲菌属内的分种鉴定体系存在的局限性,对其开发利用不利。在红曲菌的分类鉴定上,当今趋向于综合多项技术,如传统的生物分类法(形态和生化指标),现代分子标记技术和辅助方法同时应用。文章综述介绍了DNA分子遗传诊断技术的原理和方法,主要包括DNA序列测定分析(在IGS、ITS、LSU区)和基于PCR技术的RFLP、RAPD、SCAR、ISSR等,阐述了国内外近年来结合不同方法在红曲菌株中分类鉴定的研究进展。针对红曲发源地和主产地的福建省,需要逐步形成一套完整的红曲霉分类鉴定体系,并运用于福建省特有的野生红曲种资源的开发利用上。     

DNA分子标记技术及其在啤酒大麦品种鉴定中的应用

简单对比了常用的大麦品种鉴定方法以及归纳DNA分子标记技术的分类,进一步通过综述几种常用DNA分子标记技术的原理、优缺点及其在大麦品种及纯度鉴定上的应用情况,以期为DNA分子标记在啤酒大麦品种及纯度鉴定研究提供参考。     

分子标记技术用于乳酸菌分类鉴定研究进展

介绍了几种分子标记技术的基本原理和方法及其在乳酸菌分类鉴定中的研究进展.     

大曲中主要酵母菌的分子鉴定

采用添加去氧胆酸钠的选择性培养基,从大曲中分离获得了7株酵母菌纯培养。以NL1和NL4为引物,对分离得到的酵母菌进行了26srDNAD1／D2区域序列扩增、同源性比较和系统发育分析。研究结果表明：6株分离酵母菌与GenBank数据库中已知酵母有较高的相似性和相近的亲源关系,如DQY-1与Saccharomyces cerevisiae;DQY-2与Pichiadeserticola DQY-3与Zygosaccharomyces bailii;DQY-4与Debaryomyceshansenii;DQY-5与Candida pseudolambica;DQY-6与Endomycesfibuliger。另外1株酵母菌DQY-7与Uncultured fungusclone FS10有较高的相似性,而与已知酵母菌相似性较低,说明大曲中还存在一种以前尚未被认识的酵母菌。     

DNA分子标记及其在啤酒大麦种质鉴定中的应用

随着分子生物学的快速发展,各种新型分子标记技术也不断涌现,为啤酒大麦的种质鉴定和选育提供了有力依据并取得优良成绩.文中针对常用DNA分子标记技术及其在啤酒大麦图谱构建、种质鉴定和分子标记辅助选择等方面进行了综述,为本领域研究及应用提供一定参考.     

DNA标记技术在乳酸菌分类鉴定中的应用

通过DNA标记技术研究乳酸菌的基因型特征，阐明它们与类似属种在系统发育上的亲缘关系成为乳酸菌分类和鉴定的研究热点。综述了DNA标记技术在乳酸菌分类鉴定中的研究进展。     

一株鸭梨酒酵母菌的鉴定

从市售鸭梨果皮中分离出1株酵母菌，经形态与培养特征、酵母假菌丝的观察、酵母菌子囊孢子的观察和生理生化试验，初步鉴定将酵母菌株GY定为酵母属的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive)。(孙悟)     

分子标记技术及其在益生菌分类中的应用

益生菌的准确分类鉴定是益生菌应用于功能食品、药品开发的前提。由于益生菌菌群结构的多样性和复杂性,传统方法如形态结构、培养特征试验和生理生化试验等对其组成的研究准确性低且耗时长。随着分子生物学技术的发展,现代分子标记技术的应用为益生菌分类研究提供了一个新的方向。该文对常用的分子标记技术进行了概括包括分子杂交标记、PCR分子扩增标记和新型分子标记。以益生菌菌群分类鉴定为例,分析分子标记技术的基本原理、特点和现状,为其进一步开发提供基础。     

橙汁腐败酵母菌的分子鉴定及其形态特征分析

目的：结合多种酵母菌鉴定方法,分析腐败橙汁中酵母菌的种类,为快速检测和控制商品橙汁中酵母菌污染奠定基础,也为酵母菌种类的快速鉴定提供参考。方法：以分离自腐败橙汁的8株酵母菌株为材料,观察菌落和细胞形态。用引物ITS1/ITS4扩增菌株5.8S rDNA 及其ITS间隔区(5.8S-ITS),对扩增产物用HhaⅠ、Hae Ⅲ 和 HinfⅠ进行限制性酶切片段多态性(RFLP)分析和测序;用引物NL1/NL4扩增26S rDNA D1/D2区并测序。结果：菌落特征观察将菌株初分为6组,细胞学观察粗分为3组,分子方法都分成4组。用限制性内切酶HhaⅠ、Hae Ⅲ和HinfⅠ对5.8S-ITS区产物进行 RFLP分析,观察到4种不同的图谱类型。5.8S-ITS 区和26S rDNA D1/D2区的序列分析结果相似,8株分离菌与GenBank中的4种酵母菌参考菌株序列一致性达99%以上。分离株与参考菌株以两区序列构建的NJ系统树都分成4枝：Y1与克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri),Y12-3、Y18-1与发酵毕赤酵母(Pichia fermentans),Y22、Y23、Y26和Y56与Meyerozyma guilliermondii,Y47与Wickerhamomyces anomalus分别聚为一枝。结论：结合形态分析和核酸分析,将8株腐败橙汁分离菌鉴定为P. kluyveri var. kluyveri、P. fermentans、M. guilliermondii和W. anomalus 4个种,其中M. guilliermondii在腐败橙汁中首见报道;ITS- RFLP分析、26S rDNA D1/D2区测序与菌株形态特征结合能有效鉴定酵母菌,核糖体DNA分析可鉴定酵母到生物学种,菌落形态特征可反映种以下的遗传差异,因此,采用分子方法鉴定时不能忽视形态特征分析的重要性。     

酵母分离株分子鉴定及其挥发性香气成分检测分析

测定了8类不同食品来源的12株酵母分离株26S rDNA D1/D2序列,与Genbank登陆序列比较分析,12株分离酵母鉴定为:3株酿酒酵母,2株戴尔有孢圆酵母、1株马克斯克鲁维氏酵母、1株喜仙人掌毕赤酵母、1株鲁西坦念珠菌、1株膜噗毕赤酵母、2株Kudriavzevii毕赤酵母,1株疑似新种。选用固相微萃取-气质联用(SPME-GC/MS)方法,完成了各分离株挥发性成分的检测。结果表明,酵母发酵后的香气组分主要为酯类,包括乙酸乙酯、辛酸乙酯、乙酸苯乙酯、癸酸乙酯等,其中菌株A1发酵后产生多种含量较高的挥发性组分及独有组分己酸乙酯。结果表明,酵母产生的香气组分、含量与酵母分离来源、种类有关,这可能与不同酵母代谢途径的差异相关。     

一种酵母快速批量分子鉴定方法

26S rDNA D1/D2区域序列同源性分析是一种常用的酵母分子鉴定方法。D1/D2区域序列的扩增需要酵母染色体DNA作为模板,目前常用的酵母染色体DNA提取方法繁琐耗时且难以进行批量操作,限制了酵母分子鉴定的规模化。研究中建立了一种快速高效的批量酵母染色体DNA提取方法,整个提取过程仅耗时20min,从而使得酵母大规模快速分子鉴定成为可能。用该方法制备的染色体DNA不需要任何后续处理即可作为模板用于扩增酵母的26S rDNA D1/D2区域序列,获得了良好的扩增结果以及扩增产物的测序结果。     

橙汁中两株条件致病酵母的形态及分子鉴定

目的：为建立更加完善的橙汁酵母菌检测体系,进一步精确监控市售橙汁质量,对市售橙汁中分离的两株酵母菌Y25、Y32进行菌落动态发育和细胞特征的观察。方法：以NL1和NL4为引物,对分离到的两株酵母菌基因组进行26S rDNA D1/D2区域序列扩增。结果：酵母菌的菌落形态随培养时间延长发生变化,菌落发育形态和菌体细胞特征对菌株鉴定具有直观、简洁的优点;PCR扩增后的基因碱基序列经GeneBank公布的同源基因碱基序列比对后,相似度在99%以上。结论：把分离到的Y25、Y32鉴定为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)和近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)。形态学与分子技术的结合使鉴定结果更为准确可靠,将为橙汁中其他腐败微生物的鉴定与监控提供有价值的借鉴。     

26S rDNA序列分析法鉴定开菲尔发酵液中的酵母菌

利用26S r DNA D1/D2区序列分析法鉴定了内蒙古牧区传统开菲尔发酵液中的酵母菌,为筛选可发酵特色乳酒的酵母菌奠定基础。对所分离纯化得的酵母菌进行菌落特征和细胞显微形态区分,在形态鉴定基础上,选择代表菌进行26S r DNA D1/D2区序列分子鉴定。结果表明,共分离到36株酵母菌,形态聚类为5类,经DNA提取、26S r DNA D1/D2区PCR扩增、酶切、基因序列分析和同源性比对,鉴定为5种分子类型的酵母菌,分别为胶红酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)、诞沫假丝酵母菌(Candida zeylanoides)、发酵毕赤酵母菌(Pichia fermentans)、酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、有孢圆酵母菌(Torulaspora delbrueckii)。传统开菲尔发酵液中分离到的酿酒酵母,具有可发酵特色乳酒的潜质。     

利用Biolog微生物自动分析系统对两株啤酒酵母的鉴定和比较

利用Biolog微生物自动分析系统对两家大型啤酒厂生产用酵母进行鉴定,并比较了它们在碳源利用方面的差异性.     

发酵刺梨干红酵母菌的鉴定及优良菌株的筛选

本试验对8株从法国引进发酵刺梨干红的酵母菌进行形态学、生理生化学及分子生物学分类鉴定;并结合刺梨干红生产特点,检测其发酵性能、抗逆性能等指标。经比较筛选出RC212号葡萄汁酵母（Saccharomyces uvarum）与DV10号汉氏德巴利氏酵母（Debaryomyces hansenii）两菌株,其均表现出较强的发酵性能及生产适应性能,为“刺梨干红工业化生产技术研究”提供了试验菌株。     

葡萄酒中葡萄的DNA提取和分子鉴定研究进展

分子生物学技术能够对葡萄酒真伪和品质鉴别提供直接的判别依据。解决葡萄酒中葡萄DNA提取的技术难题,并以此为基础利用分子标记技术进行葡萄酒中葡萄品种的鉴定,具有重大的研究和应用价值。因此,本文综述了近10余年来分子生物学技术在葡萄酒分子鉴定方面的研究进展,从葡萄酒中葡萄DNA提取、DNA质量评价和品种鉴定三方面进行了阐述,尤其是将文献中的DNA提取和下游检测技术方案进行了系统比较,就DNA提取部分按照葡萄DNA的富集、DNA粗提和多糖多酚的去除以及DNA纯化回收3 个步骤进行了深入的分析,并详细介绍了以微卫星标记为代表的品种鉴定技术现状。在此基础上,本文还探讨了基因检测技术在葡萄酒真伪和品质鉴定方面的应用前景。     

分子标记技术及其在植物育种中的应用

概述各种常用分子标记技术RFLP，RAPD，AFLP，SSR，ISSR，SCAR，STS，CAPs的原理，并从种质资源的鉴别、基因定位、基因累加、异源目的基因的筛选、遗传图谱的构建等方面综述了分子标记技术在植物育种中的应用。     

大曲中酵母菌的分离及其鉴定

本试验对大曲中酵母菌进行分离纯化,共得到8株酵母菌。从形态学和生化鉴定两方面对其进行属的鉴定。将其归入4个属,分别是汉逊酵母属、假丝酵母属、酒香酵母属和德克酵母属。