干酪乳杆菌IMAU10041抗甜瓜枯萎病菌的作用及理化性质

从60株乳酸菌中筛选出22株具有抗甜瓜枯萎病菌活性的乳酸菌菌株,其中9株具有较强抗甜瓜枯萎病菌活性.对这9株乳酸菌的抗植物致病真菌谱进行研究发现,9株菌对番茄早疫病菌（Alternaria solani）、甜瓜疫霉菌（Phytophthora drechsleri Tucker）、苹果炭疽病菌（Glomerella cingulate）、灰葡萄孢霉菌（Botrytis cinerea）的生长均有抑制作用.其中干酪乳杆菌IMAU10041对甜瓜枯萎病菌具有较强的抑制作用,并且对甜瓜疫霉和番茄早疫病菌有较高的抑菌活性.分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理干酪乳杆菌IMAU10041的发酵滤液后,发现干酪乳杆菌IMAU10041发酵液具有一定的热稳定性;在pH 4.0时具有最大抑菌活性,在碱性条件下抑菌活性迅速失活;发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,这表明干酪乳杆菌IMAU10041发酵液中可能含有一定的蛋白类抑菌物质.     

凝结芽孢杆菌TQ33产抗疫霉物质特性研究

凝结芽孢杆菌TQ33是从脱脂奶粉中分离出来的,发现其发酵液中活性代谢产物对甜瓜疫霉菌（Phytophthora drechsleri Tucker）、灰葡萄孢霉菌（Botrytis cinerea）、番茄早疫病菌（Alternaria solani）、甜瓜枯萎病菌（Fusarium ox-ysporum）、苹果炭疽病菌（Glomerella cingulate）植物致病真菌有很好的抑制作用,其中对甜瓜疫霉菌具有较强的抑制作用,同时对抗甜瓜疫霉物质特性进行了研究,将具有抑菌活性的发酵液分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理后发现,凝结芽孢杆菌TQ33发酵液具有一定的热稳定性;在pH,5～6时具有最大抑菌活性,发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,初步分离纯化实验表明其中一种抗菌物质可能是苯乳酸,这表明凝结芽孢杆菌TQ33发酵液中可能含有苯乳酸,以及其他蛋白类抑菌物质.     

烟草赤星病菌的拮抗放线茵筛选

为有效防治烟草赤星病,从烟草赤星病菌感染区和秦岭山区的土壤样品中,采用平板对峙、抑菌率测定及发酵液扩散法,筛选对烟草赤星病菌有拮抗作用菌株．结果表明：有31株初筛放线菌与烟草赤星病菌平板对峙培养后抑制作用较稳定,抑菌率检测有19株菌株抑菌率达到了20％以上,12株菌株抑菌率大于309／6;进一步通过发酵液扩散试验,有9株放线茵能够产生拮抗烟草赤星病菌的活性物质,其中Y26—2和Y82—2抑菌效果最好,且所产抑菌物质较稳定．而且,这2株放线茵对辣椒疫霉菌、黄瓜枯萎菌、苹果轮纹菌三种植物病原真菌也有拮抗作用．     

黄瓜灰霉病拮抗放线菌的筛选

从辽宁、北京等不同地区采集土壤样品25份,采用平板稀释分离法得到放线菌,通过抑菌圈法筛选获得对黄瓜灰霉病病原菌(Botrytis cinereaPers.)有抑制作用的拮抗放线菌.采用牛津杯法对28株拮抗菌发酵液进行复筛,抑菌圈直径≥15 mm的拮抗菌有16株,其中4株抑制作用明显,抑菌直径分别为:60.2 mm、59.6 mm、58.7 mm和57.9 mm.     

22种中草药提取物的抑菌活性研究

以水稻稻瘟病菌、辣椒疫霉病菌、黄瓜灰霉病菌、黄瓜炭疽病菌4种病原菌为靶标菌，对22种中草药乙醇提取物进行孢子萌发抑菌试验．结果表明：补骨脂、虎杖、黄柏提取物在100mg／L质量浓度下对水稻稻瘟病原菌的抑菌率均为100％．然后以水稻稻瘟病原菌为靶标菌，进行菌丝生长抑制试验，结果表明：补骨脂、虎杖、黄柏粗提物对水稻稻瘟病菌菌丝生长抑制率均随着质量浓度的增大而逐渐提高，在相同质量浓度下，补骨脂对水稻稻瘟病菌菌丝生长抑制率明显高于虎杖和黄柏．     

迷迭香抗植物病原菌活性研究

用滤纸片扩散法和菌丝生长速率法实验研究了迷迭香乙醇提取物对6种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用。结果表明迷迭香乙醇提取物对水稻稻瘟病菌、番茄霜霉病菌、黄瓜枯萎病菌有较好的抑制活性,浓度在5mg／mL以上时,抑菌率达到100％。     

一株引起番茄果腐病病原菌的分离鉴定

番茄果实上的病害能引发叶片及果实腐败等多种症状,对番茄生产构成极大的威胁。实验从番茄病果上分离纯化得到病原菌株,命名为BC1402,其形态学特征与灰葡萄孢霉菌极其相似。根据柯赫式法则,用BC1402菌株对健康番茄进行侵染,测试致病力。结果表明,被侵染的番茄叶片和茎部发黄褐色、干软枯萎,证明菌株有致病力,与预期结果一致。CTAB法提取BC1402菌株的总DNA,并对rDNA-ITS序列进行PCR克隆,DNA电泳表明克隆结果为阳性。对BC1402进行系统发育树分析,结果表明该菌为灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea)。     

链霉菌S1-5菌株鉴定及抗菌性能研究

对一株自行筛选的生防链霉菌S1-5进行了种的鉴定、拮抗活性测定以及抗菌性能的研究.通过对菌株的形态特征、培养性状和生理生化特征进行综合试验分析,鉴定该菌株为灰色链霉菌(Streptomyces griseus).采用平板对峙培养法测定S1-5抑菌活性、抑菌谱,结果表明S1-5具有广谱的抗菌活性,对蕃茄叶霉病菌(Fulria fulva)、烟草疫霉菌(Phyto phthora nicotianae)、烟草赤星病菌(Alternaria alternata)以及水稻纹枯病菌(Rhizotonia solani)四种植物病原菌菌丝生长、孢子萌发均具有一定的抑制作用;杀螨试验结果显示S1-5产生物活性物质还对棉花红蜘蛛有一定的杀伤力,是一株值得开发的抗菌杀螨放线菌菌株.     

解淀粉芽孢杆菌IMAUB1034抗真菌活性物质的初步研究

对解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliuefaciens）IMAUB1034活性物质的理化性质和盆栽实验中对甜瓜疫霉菌引起的病害的防治效果进行研究．结果显示,解淀粉芽孢杆菌发酵液对由甜瓜疫霉菌引起的病害具有一定防病效果,病情指数为40．22,生防效果达到35．9％．另外,其发酵液还能抑制甜瓜枯萎病菌（Fusariumoxysporum）、灰葡萄孢霉菌（Botrytiscinerea）、番茄早疫病菌ternariasolani）、甜瓜疫霉菌（PhytophthoradrechsleriTucker）、苹果炭疽病菌（Glomerellacingulate）的生长．无菌上清液中的活性物质能碱高温、耐酸碱,在pH2～10仍然能检测到很高的抑菌活性．但经过酶处理后抑菌活性降低程度不同．     

解淀粉芽孢杆菌BI_2的鉴定及其对黄曲霉的抑制作用

菌株BI2是从青贮玉米秸秆饲料中分离得到的一株革兰氏阳性芽孢杆菌.经16S rDNA序列分析,发现该菌株与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens（NC_009725）的相似性达到99.6%;进一步结合Biolog及生理生化分析,将该菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌.以番茄叶霉病菌、黄瓜枯萎病菌等12种植物病原菌及部分霉菌、酵母、食品乳酸菌和人类致病细菌为指示菌进行抑菌实验.结果表明：BI2主要抑制丝状真菌,而对细菌无拮抗作用;BI2菌株生长36 h的上清液能明显抑制黄曲霉孢子萌发及其菌丝生长,抑制率分别达到67.4%和74.8%;而且该上清液经120℃高温处理20 min后对黄曲霉的抑制效果基本没有影响.     

棉花枯萎病菌的拮抗细菌筛选

以棉花枯萎病致病菌尖孢镰刀菌为靶标菌，从土壤中分离了184株细菌进行拮抗筛选，获得抗性菌株48株，其中4株拮抗性能强且抗性稳定的菌株具有较好的生防潜力。本试验对其中一株进行测试，初步判断属枯草芽孢杆菌。     

3株生防芽孢杆菌的筛选及对棉花枯萎病的防治研究

从植物根际土壤中筛选到3株对大豆根腐病、棉花枯萎病、小麦赤霉病等多种作物真菌病害有较强拮抗性的芽孢杆菌菌株Bacillus sp．920,Bacillus sp．930和Bacillus sp．932。用琼脂块法分别测定了它们对11种植物病原真菌的抗菌谱、发酵液的抑菌活性大小及其热稳定性,并对发酵液中的抑菌活性物质进行了初步提取。结果表明,920和932菌株为广谱性抗真菌菌株;930菌株仅表现出对稻瘟病菌具有较强的桔抗性。Bacillus sp．920发酵液中的抑菌活性物质可被酸沉淀,并具有较好的热稳定性。棉花盆栽试验结果表明,接种芽孢杆菌920菌剂可使棉花枯萎病引起的棉苗死亡率由15％降至3．7％,发芽率比对照提高了10％。     

地衣芽孢杆菌XY—2的筛选及其培养基的优化

从土壤中筛选出3株具有较强抑菌活性的菌株,其中XY-2菌株对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、灰霉葡萄孢菌、变形链球菌和大肠杆菌的抑制作用最强。根据对XY-2菌株形态特征、培养特征、生理生化特征的分析,初步鉴定为地衣芽孢杆菌。最后通过正交实验对地衣芽孢杆菌XY-2的发酵培养基成分配比进行了选择和优化,为以后工业化生产提供依据。结果表明当培养基质量浓度配比为:ρ(玉米淀粉)20 g/L、ρ(豆饼粉)90 g/L、ρ(玉米浆)7 g/L时菌体的培养效果最好。在最佳配比下培养基中活菌浓度可以达到9.67×10~8 cfu/mL。     

解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质特性研究与初步分离纯化

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique aciens)BW-13发酵滤液对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和植物病原真菌灰霉(Botrytis cinerea)均具有显著的抑制活性,并具有热稳定性好、对紫外线照射和蛋白酶处理不敏感、在pH 3～9范围内稳定,尤其在酸性条件下基本不丧失活性的特点.通过发酵液预处理,活性炭吸附,D293强碱性季铵型阴离子交换树脂柱层析,对解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质进行了初步分离纯化.高效液相色谱(HPLC)分析显示分离得到的抗真菌物质在220 nm处有单一的活性峰.     

红毛七中三萜皂苷类化学成分生物活性研究

采用96孔板微量稀释法,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乳链球菌、枯草芽孢杆菌、小麦赤霉病菌、白菜黑斑病菌、西瓜枯萎病菌、葡萄炭疽病菌等为指示菌,对红毛七中分离纯化得到的化合物进行抑菌活性评价．结果表明：三萜皂苷化合物对测试的8种菌均有抑制作用,其中16α-羟基-齐墩果-12-烯-28-酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷、葳严仙皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷显示出很强的抑细菌活性,MIC值为3．9μg／mL;采用二甲苯致小鼠耳肿胀方法和热板法对分离得到的三萜皂苷化合物常春藤皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷,常春藤皂苷元-3-O-β-D-葡萄吡喃糖-（1→2）-α-L-阿拉伯吡喃糖苷等进行了抗炎和镇痛作用研究．结果表明：2种三萜皂苷化合物对小鼠的抗炎、镇痛效果与剂量成依赖关系．在注射化合物30min后,镇痛效果达到最大．     

自生固氮菌的分离鉴定

从非豆科作物根际土壤中分离筛选得到２１３个在元氮培养基本能良好生长的菌标,通过酶测定,从中筛选得到１８株固氮能力较强的菌株,并对其中酸疼活最高的４株菌株进行了鉴定,结果表明它们属于固氮菌料的不同属。利用它们可望制成适合于不同农作物复合物。