姬松茸液态发酵的研究

通过2次L27(3^13)正交实验对姬松茸液态发酵的碳源、氮源、生长因子的种类和浓度、培养基的酸碱度、接种量、通气量、培养温度和培养时间等影响因子进行全面实验研究、经极差分析和方差分析，得到姬松茸液态发酵的培养基配方(g／dL)：玉米淀粉3，豆粕0．8，麸皮0．15；发酵条件：pH5，接种量10％，摇瓶装量50mL培养基／250mL三角瓶，培养温度30℃，培养时间7d，在此培养条件下，姬松茸液体培养的生物量可达15．6g／L。     

红曲霉发酵产胞多糖工艺的优化

研究了碳源、氮源和无机盐对红曲霉Y－7产多糖的影响，优化并确定了产胞外多糖的培养基组成：麦芽糖60g/L，蛋白胨2．5g/L，磷酸二氢钾4g/L，硫酸镁0．5g/L，氯化钙0．6g/L。研究了油脂对胞外多糖的影响，并确定棕榈油的添加量为0．2g/dL。在500mL的三角瓶装培养基75mL，接种量15％，种子液种龄24h，培养温度33℃，摇床转速220r/min，培养96h。在上述条件下生物量干重为1．42g/dL，发酵液胞外多糖产量可达3．24g/L，比初始条件高出2．5倍。     

红曲霉液态发酵产洛伐他汀条件的研究

对红曲霉GM026产洛伐他汀的液态发酵培养基成分和发酵条件进行了研究．结果表明。最佳培养基组成：甘油9％,大豆粉0．75％,NANO30．2％,MgSO4·7H2O0．05％。KH2PO40．15％;最佳发酵条件：培养温度26℃,初始pH=5．0,接种量7％,250mL三角瓶装液量为50mL,摇床转速170rad／min。在上述条件下。发酵培养14d,洛伐他汀产量达到375．853mg／L．     

产生物表面活性剂细菌的筛选及发酵条件优化

利用变色圈法、排油圈法从土壤和污泥等样品中分离筛选出1株产生物表面活性剂的细菌菌株WB,并通过单因素实验及L9（3^4）正交实验对该菌株的培养基配方及培养条件进行优化．结果表明：在葡萄糖10g／L,麸皮25g／L,酵母粉0．9g／L,培养基初始pH值为7．2,250mL摇瓶装液量为50mL,发酵时间为72h的条件下,菌株WB的表面活性剂的产量可达3．6g／L．     

重组大肠杆菌生产hEGF发酵条件的研究

在摇瓶条件下,研究了发酵条件对重组大肠杆菌JLU菌株hEGF表达的影响．研究表明,最适的发酵条件是温度在32℃、pH6．6～7．3、初始葡萄浓度5g／L、装液量30mL／250mL三角瓶,并发现在发酵培养基中用0．5g／L甘油代替5g／L葡萄糖作为发酵碳源会进一步提高hEGF的表达水平,提高幅度可达15．5％．     

复合酶法提取姬松茸胞内多糖

以液体深层发酵培养的姬松茸菌丝体为原料,利用酶法提取姬松茸胞内多糖。通过单因素试验、正交试验及方差分析确定了复合酶法提取胞内多糖的最佳条件:pH 4.5、温度45℃、时间1.5 h、木瓜蛋白酶1.0%、纤维素酶0.5%、果胶酶1.0%。在此条件下,胞内多糖的提取率为3.70%。胞内多糖经Sephadex G-200柱层析后得到两种多糖组分,经测定此两种多糖组分的相对分子质量分别为91 000和40 500。     

复合酶法提取姬松茸胞内多糖

以液体深层发酵培养的姬松茸菌丝体为原料,利用酶法提取姬松茸胞内多糖.通过单因素试验、正交试验及方差分析确定了复合酶法提取胞内多糖的最佳条件：pH 4.5、温度45 ℃、时间1.5 h、木瓜蛋白酶1.0%、纤维素酶0.5%、果胶酶1.0%.在此条件下,胞内多糖的提取率为3.70%.胞内多糖经Sephadex G-200柱层析后得到两种多糖组分,经测定此两种多糖组分的相对分子质量分别为91 000和40 500.     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行亚硝基胍和^60Co诱变，获得一株)γ-PGA的高产菌株C9．γ-PGA质量浓度由9．44g／L提高到19．76g／L，提高了109％．突变株传代10次，质量浓度保持基本稳定．通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化．当发酵培养基中含柠檬酸12g／L、甘油80g／L、L-谷氨酸23g／L、氯化铵7g／L，pH7．0，装液量为50mL／250mL三角瓶。接种体积分数为5％时。37℃摇瓶发酵72h。γ-PGA达到23．32g／L。     

富锌培养对姬松茸生长代谢的影响

研究了锌对食药用菌姬松节茸生长代谢的影响，考察了姬松茸耐锌能力和富集能力以及锌对姬松茸多糖和氨基酸代谢的影响。结果表明：液体培养姬松茸对锌的最适富集质量浓度为300mg/L，在锌质量浓度为300mg/L以内，锌对姬松茸菌丝量、多糖、氨基酸均为促进作用。锌的有机化分析表明82．2％的ZnSO4在姬松茸菌丝内以有机锌的形式存在，氨基酸分析结果显示，富锌后菌丝体的发酵液必需氨基酸含量与对照相比分别提高了12．3％和3．6％。     

重组人生长激素在毕赤酵母中的表达研究

通过单因素分析和正交实验法优化高密度发酵培养基和诱导条件,根据优化结果指导发酵罐发酵．得到改良BSM培养基的最佳配比为甘油30g／L、酵母粉14g／L、K2SO4 13g／L、MgSO4·7H2O11g／L、CaSO4 0．3g／L、PTM14．4mL、0．1mol／L磷酸盐缓冲液（pH=6．5）;得到摇瓶培养最佳诱导条件为种龄24h,诱导时间30h,甲醇浓度2％,pH6．3～6．9．瑞士Bioengineering公司L1523型发酵罐发酵结果显示,细胞光密度（OD600）达到294,rHGH表达量最高达到0．54g／L．     

产海藻糖酵母的培养条件优化研究

对产海藻糖酿酒酵母进行培养条件优化,得到的最适条件为:每升发酵液中葡萄糖10 g,酵母膏7.5 g,尿素7.5 g,KH2PO42.5 g,Na2HPO42.5 g,微量元素液7.5 mL,发酵初始pH为7.0,对数生长期培养温度选择30℃,稳定期培养温度37℃,装液体积分数40%。摇瓶优化后海藻糖质量比为152 mg/g,约为优化前的2.3倍。选用最优条件在5 L发酵罐中进行培养,培养过程中两次补料,确定最佳培养时间为52 h,在该时间海藻糖产量为1 072 mg/L,比摇瓶中培养的最高值831mg/L高出241 mg/L。     

响应面法优化重组枯草芽孢杆菌生产纤维素酶EGA的研究

通过响应面优化法（response surface methodology,RSM）对分泌表达纤维素酶EGA重组枯草芽孢杆菌的发酵条件进行优化。利用Plackett-Burman实验设计对淀粉、酵母粉、蛋白胨等8个因素对枯草芽孢杆菌产纤维素酶EGA的显著影响与否进行评估分析,筛选得到淀粉、酵母粉和MgSO4·7H2O为3个显著影响的因素,再利用Box-Behnken实验设计对这3个因素进行进一步优化,确定最佳培养基的配比为淀粉21g/L,酵母粉11.26g/L,蛋白胨25g/L,MgSO4·7H2O 1.52g/L,KH2PO40.395g/L,NaCl 3.25g/L,CaCl20.1g/L,FeSO4·7H2O 0.005g/L。在最优条件下,利用小型发酵罐对重组菌进行扩大培养,其最高酶活力达到1 264U/L。     

Hydrogen producting characteristics by a novel strain of bacteria-ethanoligenens sp. B49

The objective of this work is to investigate the fermentation capacity and metabolic characteristics of a novel strain of bacteria B49 isolated from anaerobic activated sludge. The examination was conducted in batch culture at 35 ℃. The results showed that the carbon flow gave priority to the production of ethanol, and yield of ethanol is always greater than that of acetic acid. The hydrogen and ethanol occurred simultaneously. The exponential phase of the B49＇ s cell growth was from 12 to 22 h. Evolution of hydrogen appeared to start after the exponential phase of cell growth and reach maximum production at the early stationary phase. The rate of hydrogen production reached a maximum of 16. 8 mL/h, and the percentage of hydrogen gas in the headspace of serum bottle obtained a maximum of 41% at 22 h. The B49 was able to grow using molasses as substrate for cell growth. When the molasses was used as substrate, maximum yield of hydrogen was obtained 2460 mL/L culture at 2 % （V/V） of molasses. The hydrogen yield was increased to 3060 mL/L culture after addition of 0. 5 g/L of yeast extract in the molasses medium and the yield of hydrogen was increased by 24. 4%.     

一株海洋真菌Sw-25产胞外多糖发酵条件研究

通过对海洋真菌Sw-25发酵,研究不同碳源、氮源、培养基初始pH、温度及接种量、装液量对海洋真菌Sw-25产胞外多糖的影响.结果表明,最适培养基组成为:麦芽糖20 mg/L,酵母膏5 mg/L,海水400 mL/L,蒸馏水600 mL/L,培养基初始pH 6.0～6.5.最适发酵条件为:250 mL三角瓶装量80 mL,接种量为6%,24℃培养96 h.在此条件下,海洋真菌Sw-25产胞外多糖1.28 g/L.     

响应面法优化海洋枯草芽孢杆菌HS-A38增殖发酵培养基

在摇瓶培养条件下,优化提高海洋枯草芽孢杆菌菌体浓度的发酵培养基组分。采用Plackett-Burman法确定了影响菌体浓度的显著性因子,即葡萄糖和ZnSO4;通过最陡爬坡实验逼近这两个重要因子的最大响应稳定区域,采用中心组合实验确定显著性因子的最佳水平,并用Design expert 7.13软件进行回归分析。优化后培养基的组成为:葡萄糖8.49g/L,豆粕粉12.0g/L,尿素0.625g/L,酵母膏4.0g/L,K2HPO44.0g/L,ZnSO40.053g/L。优化后的活菌浓度达到1.64×109 cfu/mL,与优化前菌体浓度(7.22×108 cfu/mL)相比,提高了1倍多。通过统计优化培养基组分可有效提高海洋枯草芽孢杆菌HS-A38的发酵液菌体浓度。     

高效表达AIM工程菌的发酵培养基及发酵条件优化

为了进一步提高工程菌的载脂蛋白AI米兰突变体（AIM）的表达量,降低发酵成本,通过碳氮源优化实验并结合正交实验筛选出该工程菌产A1M的最适培养基为（g／L）：蔗糖10,酵母粉10,硫酸铵6和NaCl10;最适发酵条件为：装液量30mL,接种量8％,诱导时机A600 1．0,诱导剂浓度0．8mmol／L,诱导时间6h．在此优化的条件下,A1M的表达量为2．26g/L,是未优化条件下的1．58倍．     

羊肚菌液体发酵培养条件优化

以羊肚菌为材料,采用液体发酵技术,研究了碳源、氮源和培养条件对菌丝体生物量及胞外多糖产量的影响。羊肚菌液体发酵的最佳培养基为:麦芽汁1.5%,玉米粉40mg/L,黄豆粉20mg/L,酵母粉3mg/L。最优培养条件为24℃、140r/min、pH 6.0、接种量10%。在此培养条件下测定羊肚菌的生长曲线,0~48h为延滞期,48~120h为旺盛生长期;在培养144h时菌丝体生物量和胞外多糖质量浓度达到最大,分别为14.11g/L和268.9mg/L。研究结果可为大规模液体发酵生产羊肚菌胞外多糖提供一定的理论依据。