金黄色葡萄球菌在生乳中生长预测模型的建立

目的建立生乳中金黄色葡萄球菌的生长预测模型。方法采用GB/T4789.37—2008第三法,测定不同温度下金黄色葡萄球菌在生乳中的生长曲线,利用麦夸特法和通用全局优化法将曲线数据分别拟合Gompertz方程、Logistic方程、Richards方程、Weibull方程、Baranyi方程和Monod方程,确定最适方程,建立一级模型。同时应用响应面方程建立二级生长预测模型。结果金黄色葡萄球菌在生乳中的最适预测模型为Gompertz模型。结论通过与多模型比较,建立了金黄色葡萄球菌在生乳中的生长预测模型。为该菌在生乳中的风险评估理论体系的建立提供理论基础,也为乳制品的安全生产和流通提供了科学依据。     

生乳中金黄色葡萄球菌产肠毒素特性及耐药性分析

了解生乳中金黄色葡萄球菌污染状况、产肠毒素特性及耐药性，为乳及乳制品的生产及制定HACCP以保证食品安全提供依据。采集省内20个奶牛场共209份生乳样品进行金黄色葡萄球菌的分离、产肠毒素（SEA—SEE）试验及耐药性试验。共检出金黄色葡萄球菌34株，检出率为16．27％，21株产肠毒素试验阳性，阳性率为61．76％，对青霉素、缸霉素、四环素、苯唑西林凝固酶阴性耐药性分别达88．24％、41．48％、35．29％、35．29％，并出现21种耐药谱。生乳中金黄色葡萄球菌的污染率及产肠毒素率较高，耐药性结果对人及畜的安全用药有指导性作用。控制生乳中金黄色葡萄球菌的污染对奶及奶制品食用安全有意义。     

PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌的研究

近年来,金黄色葡萄球菌引起的食品安全事件频发,这就需要建立一种快速准确地检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。传统方法检测食品中金黄色葡萄球菌活菌存在很多缺点。由于细胞死亡后其DNA依然能够存活许久,所以传统方法不能有效区分DNA来自死菌还是活菌。通过荧光染料PMA与快速检测技术LAMP相结合的方法快速、灵敏的检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌,并对死/活菌进行区分。根据金黄色葡萄球菌nuc基因设计引物,并对LAMP反应体系及PMA-LAMP方法进行优化,同时优化了灭菌乳中提取DNA的方法。在纯培养的金黄色葡萄球菌中,PMA-LAMP方法检测灵敏度为3.2CFU/mL,PMA-PCR方法的检测灵敏度为3.2×102CFU/mL;对人工污染灭菌乳中的金黄色葡萄球,PMA-LAMP方法检测灵敏度为5×101CFU/mL,而PMA-PCR方法检测灵敏度为5×103CFU/mL。整个反应需要大约6h,说明PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为快速检测金黄色葡萄球菌活菌的新方法。     

原料乳中金黄色葡萄球菌生长预测模型的建立

研究冬季、春季和夏季原料乳中金黄色葡萄球菌在15、25、37℃条件下的生长情况,并利用Logistic模型和Gompertz模型对生长数据进行建模。3个季节的原料乳中,金黄色葡萄球菌的Gompertz模型方根误差(RMSE)分别为0.0936(冬)、0.1057(春)和0.1032(夏),而Logistic模型相应的参数值为0.1498(冬)、0.1926(春)和0.1857(夏)。通过模型参数比较表明,Gompertz模型比Logistic模型更能准确的描述原料乳中金黄色葡萄球菌的生长情况;同时,建立以温度为自变量的平方根模型,以此来预测原料乳中金黄色葡萄球菌的生长速率。     

生乳中金黄色葡萄球菌污染半定量风险评估研究

目的探索上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染的风险。方法按微生物风险评估的程序,应用半定量风险评估软件(risk ranger)结合流行病学调查和微生物检测等。结果上海市金黄色葡萄球菌肠毒素性食物中毒列报告的细菌性食物中毒暴发事件第3位;金黄色葡萄球菌肠毒素性食物中毒的严重性中等、全人群易感;4—6月上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染率为72.0%,乳及乳制品日均消费量达86.60 g/人;假设生乳在加工前金黄色葡萄球菌超过105 CFU/g的概率为1/1 000,则每人每天因食用污染金黄色葡萄球菌污染乳及乳制品引起食物中毒的概率为2.5×10-7,每年因金黄色葡萄球菌污染乳及乳制品食物中毒病例数862人,风险等级49。结论上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染的风险程度属于中等,需加强监管。     

原料乳中金黄色葡萄球菌生长模型的建立

金黄色葡萄球菌是严重危害人类健康的致病菌之一。本实验研究了原料奶中该菌在不同温度下的生长繁殖规律,建立了金黄色葡萄球菌混合菌株在原料奶中的生长模型,为今后原料奶和乳制品特征性病原菌的风险评估奠定了一定的理论和科学基础。      

原料乳中金黄色葡萄球菌生长模型的建立

金黄色葡萄球菌是严重危害人类健康的致病菌之一.本实验研究了原料奶中该菌在不同温度下的生长繁殖规律,建立了金黄色葡萄球菌混合菌株在原料奶中的生长模型,为今后原料奶和乳制品特征性病原菌的风险评估奠定了一定的理论和科学基础.     

原料乳中金黄色葡萄球菌生长预测模型的研究

通过对实验数据与Gompertz模型、Logistic模型和Rjchards模型拟合结果的比较,确定描述原料奶中金黄色葡萄球茵生长情况的最适合模型Gompertz模型,同时建立二级生长模型.该模型的建立可以为今后原料奶和乳制品特征性病原菌的风险评估奠定了一定的科学基础,也可以为控制原料奶中金黄色葡萄球菌的生长及其毒素的产生提供理论依据.     

乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素的PCR检测

介绍了PCR技术在检测乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素方面的研究进展，并对其今后的发展方向和前景进行了展望。     

食用防腐剂对金黄色葡萄球菌生长参数的影响

为了明确食用防腐剂对金黄色葡萄球菌生长的影响,以乳酸链球菌素、亚硝酸钠、苯甲酸钠、山梨酸钾、焦亚硫酸钠、丙酸钙为实验对象,确定临界生长质量浓度后,分别研究各防腐剂作用下金黄色葡萄球菌的生长规律,并比较部分防腐剂作用于对数期和稳定期菌体时最大比生长速率(μmax)和迟滞期(Lag)的差异。结果表明:乳酸链球菌素具有较强的杀菌作用,培养前6h内菌数持续降低,由6.09(lg(CFU/mL))降至3.68(lg(CFU/mL)),15h左右才恢复到初始值。其余5种防腐剂均表现为抑菌作用,Baranyi方程分析各生长参数,结果显示μmax值均比无防腐剂的对照值低,其中焦亚硫酸钠作用后的μmax值最低为0.45h-1;Lag值则有升有降,其中山梨酸钾作用后的λ值最大为2.87h。将山梨酸钾和焦亚硫酸钠分别作用于对数期和稳定期菌体,发现作用于对数期菌体的μmax值均较稳定期菌体的低,尤其是焦亚硫酸钠作用时,对数期菌体的μmax值(0.45h-1)约为稳定期的(0.88h-1)一半,差异极显著(P<0.01);而两种防腐剂作用于对数期和稳定期菌体时λ值的差异均不显著。     

原料奶中病原菌的调查及代表性病原菌的研究

对榨乳过程进行了采样分析，确定了原料奶中的主要致病菌为金黄色葡萄球菌，并分析了原料奶在不同温度储存时金黄色葡萄球菌的生长情况以及金黄色葡萄球菌在酸奶发酵和冷藏过程中的存活情况。研究发现，酸奶的低酸性环境并不能有效的抑制金黄色葡萄球菌的生长，所以为了确保产品的安全性，要对奶牛的乳房炎和隐性乳房炎进行有效防治，并严格控制榨乳的卫生条件及原料奶的储存温度。     

Occurrence and characterization of Staphylococcus aureus isolated from raw milk for cheesemaking

Fifty-four samples of raw milk for cheesemaking were tested for the presence of Staphylococcus aureus . Multiplex polymerase chain reactions were performed to identify presumptive isolates and the presence of enterotoxin-coding genes sea-see . The strains were tested for antibiotic resistance. Eighty strains were identified as S. aureus and 31 of these carried one or more enterotoxin genes ( sea-see ). Resistance to eritromycin, penicillin and ampicillin was widespread among isolates . Staphylococcus aureus in raw milk for cheesemaking may constitute a risk with respect to staphylococcal food poisoning from raw milk products.     

Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes in Norwegian raw milk cheese production

The aim of this study was to survey the presence of Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes during the cheese making process in small-scale raw milk cheese production in Norway.The prevalence of S. aureus in bovine and caprine raw milk samples was 47.3% and 98.8%, respectively. An increase in contamination during the first 2-3 h resulted in a 73.6% prevalence of contamination in the bovine curd, and 23 out of 38 S. aureus-negative bovine milk samples gave rise to S. aureus-positive curds. The highest contamination levels of S. aureus were reached in both caprine and bovine cheese after 5-6 h (after the first pressing). There was no contamination of L. monocytogenes in caprine cheeses and only one (1.4%) contaminated bovine cheese.This work has increased our knowledge about S. aureus and L. monocytogenes contamination during the process of raw milk cheese production and gives an account of the hygiene status during the manufacture of Norwegian raw milk cheeses.     

云南乳饼中金黄色葡萄球菌污染状况及其耐药性分析

目的了解云南省乳饼中主要致病菌的污染状况及耐药情况。方法采集云南省乳饼主产地区样品62件,用传统方法结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行分离鉴定,采用微量肉汤稀释法对金黄色葡萄球菌进行12种抗生素敏感性分析。结果共检出18株金黄色葡萄球菌,检出率为29.03%,沙门氏菌和单增李斯特氏菌均未检出。农贸市场、加工店和奶牛养殖户检出率分别为44.44%、26.67%和16.67%(P=0.321),超市和网店的样品均未检出;散装和包装样品检出率分别为34.38%、23.33%(P=0.433)。所有菌株的耐药性如下:青霉100%,红霉素44.44%,复方新诺明33.33%,苯唑西林、克林霉素和头孢西丁的耐药率均为27.78%,四环素22.22%,多重耐药率为72.22%。18株菌对环丙沙星、达托霉素、万古霉素、氯霉素和庆大霉素均为敏感。结论金黄色葡萄球菌为乳饼中的主要食源性致病菌,其对抗生素耐药性较普遍,需加强畜禽养殖及乳饼加工卫生条件监管。     

培养条件对金黄色葡萄球菌生物被膜生长的影响

以常见的食源性病原菌金黄色葡萄球菌为研究对象,采用微孔板检测法对其生物被膜形成过程中的不同影响因素进行了研究。结果表明：在37℃下,采用1．6％胰酶大豆肉汤（TSB）培养时,金黄色葡萄球菌易形成大量生物被膜;添加低浓度的单糖及双糖可以大大提高金黄色葡萄球菌形成生物被膜的能力;添加氯化钠对金黄色葡萄球菌形成生物被膜影响显著。     

1874株金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性结果分析

目的了解四川省某医院甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的临床科室分布和耐药性情况。方法回顾性分析2014年12月-2017年12月四川省某医院门诊及住院患者,包括8名因金黄色葡萄球菌引起的食物中毒患者,送检各类标本分离出SA(Staphylococcus aureus)可疑菌落1874株,对其进行鉴定和药敏检测。结果 MSSA和MRSA标本主要来源于痰液(51.31%,74.33%)、伤口分泌物(21.52%,8.96%)和脓液(10.07%,7.92%)。725株MSSA临床分离率依次为门诊(27.17%)、呼吸科(15.45%)、ICU(10.21%)、神经科(8.55%)和口腔科(5.52%),1149株MRSA依次为ICU(33.16%)、神经科(11.66%)、呼吸科(9.75%)、儿科(7.57%)和妇产科(6.27%)。耐药性结果表明,MSSA对苯唑西林、万古霉素、利奈唑胺、替考拉林敏感,对青霉素G、红霉素和阿莫西林/克拉维酸耐药率依次为89.38%、56.69%、21.51%外,对其他抗菌药耐药率均18.00%; MRSA对万古霉素利、奈唑胺、替考拉林敏感,对苯唑西林、莫西沙星、克林霉素、红霉素、青霉素G、四环素、环丙沙星、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦的耐药率均显著高于MSSA。结论四川省某医院2014年12月-2017年12月期间临床分离的SA以MRSA为主, MSSA和MRSA在标本来源、科室分布等方面存在较大差异, MRSA耐药情况更为严重,明显高于MSSA。若要评估金黄色葡萄球菌感染风险以及病人的治疗方案,应分别考虑MRSA和MSSA的感染来源和耐药性。     

生食水产品中金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌的监测

目的为完善生食水产品中金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌的监测方法提供依据。方法在生食水产品的监测中,金黄色葡萄球菌分别采用GB 4789.10-2010第一法,第二法,第三法进行监测,副溶血性弧菌采用GB/T 4789.7-2008进行监测,同时结合仪器进行筛选和鉴定。结果生食水产品中金黄色葡萄球菌采用第二法检出率为3.3%,第三法检出率为6.7%,可见采用第三法检出率较高;生食水产品中副溶血性弧菌的监测,检出率为6.0%,同时发现粪肠球菌、普通变形菌群/彭氏变形菌、海藻希瓦氏菌、雷氏普罗威登斯菌可干扰副溶血性弧菌的筛选,在使用仪器进行筛选或鉴定时,经常会出现一些假阳性和假阴性的情况,因此在采用仪器的同时需进行手动筛选和鉴定,并以手动检测结果为准。结论生食水产品的监测方法需进一步完善,生食水产品的卫生状况需不断加强。     

食品防腐剂对糕点中金黄色葡萄球菌生长的影响

目的研究食品防腐剂对糕点中金黄色葡萄球菌的生长抑制影响。方法确定各防腐剂临界生长质量浓度后,应用修正Gompertz方程和修正Logistic方程拟合添加了不同类别防腐剂的糕点中金黄色葡萄球菌的抑制生长曲线,确定最适初级模型方程及参数。结果糕点中金黄色葡萄球菌对脱氢乙酸钠、纳他霉素、山梨酸钾均敏感,参考GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》最大使用量,所得临界生长浓度为脱氢乙酸钠1 mg/mL,纳他霉素2.4 mg/mL,山梨酸钾4 mg/mL。2种初级预测模型动力学指标分析结果显示r~2均大于0.98,模型拟合所得最大比生长速率(μmax)依次为山梨酸钾脱氢乙酸钠对照纳他霉素; 3种防腐剂组达到相对最大生长速率所需的时间(x_c)相比对照组均延迟;延滞期(λ)时长依次为山梨酸钾脱氢乙酸钠纳他霉素对照。3种防腐剂组在24 h内菌落数均小于对照组,至稳定期后最大菌落数(Nmax)依次为山梨酸钾纳他霉素对照脱氢乙酸钠。结论脱氢乙酸钠、纳他霉素、山梨酸钾等常见食品防腐剂均在延滞期和对数期期间能有效抑制糕点中金黄色葡萄球菌的生长。