精索静脉曲张不育者精子的超薄切片和冷冻蚀刻的电镜观察

精索静脉曲张影响精子发生和精液质量,导致男性不育。为探讨不育的原因,本实验采用超薄切片和冷冻蚀刻复型膜的电镜观察。材料和方法:两例青年男性不育者,年龄为29岁,31岁,婚后三年不育,有双侧中度精索静脉曲张。超薄切片制备:2.5％二醛,1％锇酸双固定,酒精脱水,环氧树脂812包埋,超薄切片厚度500埃左右,铀、铅双染色。冷冻蚀刻复型膜制备:新鲜精液固定于2.5％戊二醛,经30％甘油生理盐水处理12小时,BAF—400D高真空冷冻蚀刻仪制成复型膜,电镜观察。观察结果:超薄切片:精索静脉曲张患者精液内可见头帽期和顶体期精子细胞,且形态异常,如顶体扩张,细胞核染色质松散,核内出现大空腔。发育成熟的精子头畸形,中段线粒体排列紊乱等。冷冻蚀刻复型膜:患者     

适合光镜和电镜诊断肾小球疾病的固定剂选择

目的：为了使已经石蜡包埋的肾穿组织脱蜡后进行电镜观察,关键是选择适当的固定剂。方法：在石蜡包埋前,肾穿组织分别用甲醛、戊二醛及戊二醛、锇酸双固定。根据光镜和电镜观察结果,选择能兼顾光镜和电镜的固定剂。结果：甲醛固定不能有效保存肾穿组织的超微结构,锇酸的固定能有效地保存超微结构,但严重影响了光镜切片的染色;而戊二醛与甲醛相比,较好地保存了肾穿组织的超微结构,同时又不影响光镜切片的染色。结论：在石蜡包     

甲状腺胶性腺瘤及乳头状癌的超微结构

采用电镜观察肿瘤细胞,提高细胞结构的分辨能力是肿瘤形态学研究的重要手段。本研究对比观察了甲状腺胶性腺瘤及乳头状癌的超微结构,并探讨了不同超微结构特征对癌的诊断意义。材料来自北医第一附属医院外科手术室的手术切除标本,共12例胶性腺瘤及5例乳头状癌。组织切成1mm小块固定在3％戊二醛及1％锇酸后固定,环氧树脂618包埋超薄切片经醋酸铀及枸椽酸铅双染色。JEM100CXⅡ电子显微镜观察,剩余标本固定在10％福尔马林液中作常规病理组织切片及检查。讨论:甲状腺胶性腺瘤和乳头状癌的超微结构有明显不同,尤其显著的是核的变化。胶性腺瘤有较大,而且     

照射草虾体内酚氧化酶（phenoloxidase）

利用电子显微镜及免疫细胞化学方法探讨酚氧化酶(phenoloxidase)在草虾(Penaeus mon-odon F.)体内分布的位置,同时观察辐射照射对草虾肌肉、肝胰脏和表皮细胞内酚氧化酶分布的影响。草虾酚氧化酶经抽取纯化后,注入小鸡体内以得到此酵素之抗体,抗体与胶合金(colloidalgold)结合成复合体作为草虾组织切片的免疫金染色之用。草虾在冰浴状态下,经5 KGy加马线照射后,以传统化学法或冷冻取代法固定。切片以抗体胶合金标示,经uranyl acetate和lead cit-rate染色后,再以电子显微镜观察。结果显示酚氧化酶分布在肌肉的肌质网(sarcoplasmic reticu-lum)(Fig.1)、肝胰脏细胞的内质网(endoplasmic reticulum)、脂肪油滴(1ipid droplet)、细胞质(cytoplasm)、毛状突起物缘(microvillar border)(Fig.2)和表皮细胞的内质网、脂肪油滴及色素胞(pigment)(Fig.3)中。5 KGy照射处理的草虾体内酚氧化酶分布情形与未照射者并没有显著差异。     

包涵体肌炎来自同一家族之两病例报告

1976年Chou首先在一慢性多发性肌炎病人的肌肉标本中发现Myxovirus样的构造,Yunis与Samaha在1971年首先以包涵体肌炎(inclusion body myositis)来称呼此一肌肉病变,包涵体肌炎在临床表现如一慢性多发性肌炎,而病理变化上的特色为冷冻的肌肉标本切片以H＆E染色,可发现有镶边的空泡状结构,内含嗜硷性颗粒而电子显微镜下,可在细胞质或细胞核内发现丝状之包涵体。包涵体肌炎一般认为是偶发性的疾病,而病理上与远端肌病变(distal myopathy)和眼因肌失养性病变(Oculopharyngeal muscular dystrophy)相关。     

急速冷冻冷冻置换方法保存的肾小球毛细血管袢的超微结构

目的：用急速冷冻－冷冻置换法与普通的9化学固定技术研究比较肾小球毛细血管袢在相同灌流压条件下的超微结构。方法：用150cmH2O压力灌流活体状态下大白鼠的肾脏,用急速冷冻－冷冻置换法及普通的化学固定法制作电镜超薄切片。结果：在相同的压力下用急速冷冻－冷冻置换法所观察到的肾小球毛细血管袢上皮细胞足突裂孔膜的宽度比普通的固定方法所观察到的窄,另外用急速冷冻－冷冻置换方法观察到的肾小球毛细血管袢的其它超微结构也与普通的化学固定方法所观察到的有所不同。结论：用急速冷冻－冷冻置换法所[观察到的超微结构比用普通的化学固定法观察到的超微结构更接近活体状态。     

电镜超薄切片批量染色的载网固定装置改进与应用

电镜图像对生物组织、细胞形态结构的研究具有重要作用,高质量的超薄切片染色在透射电镜样本制备中起着关键作用.本文介绍了针对目前用于批量染色的载网固定方式存在的超薄切片甚至载网脱落等问题,对载网固定装置和技术进行了改进,从而明显地提高了批量染色的工作质量和效率.     

硬化性胆管炎的细胞超微结构观察

原发性硬化性胆管炎 (ｐｒｉｍａｒｙｓｃｌｅｒｏｓｉｎｇｃｈｏｌａｎｇｉｔｉｓ ,ＰＳＣ)是一种少见的、肝内外胆管均可受到侵犯的慢性炎症。病理表现为进行性胆管系统纤维性变 ,导致胆管不同程度、不同部位的狭窄或闭锁 ,引起慢性胆汁淤积性肝病[1,2 ] ,国内报道病例较少。我院收治了一例ＰＳＣ ,我们进行了光镜及电镜的观察 ,结果报道如下。材料与方法肝穿刺取出肝组织 ,分别固定于 10 %福尔马林固定液内作石蜡切片 ,2 5 %戊二醛固定液内作电镜超薄切片。光镜与电镜进行对照观察。结果在光镜下可见到肝小叶结构仍存在 ,肝细胞弥漫性颗…     

一种观察体内细胞骨架的电镜方法

迄今为止对细胞骨架的形态与分布的研究,几乎全部是在组织培养细胞中进行的。这主要是由于研究活体组织中细胞时要进行切片,而引入的包埋介质限制了去垢剂进行提取等重要而有效的技术手段的应用。然而,有关的研究结果已充分显示出体外人工培养条件,特别是对固体基质表面的附着,造成了骨架系统的一系列显著改变。本文试用新鲜活体组织为材料,在Bright5030型低温切片机上快速冷冻并切成2—8μ厚切片,用盖玻片条或电镜载网取下切片,立即放入37℃的含有非离子型去垢剂TritonX—100(浓度为0.5％)和戊二醛(浓度为2％)的微管稳定性缓冲液中进行处理,或先行提取随之进行固定。用系列提高浓度的乙醇脱水后,临界点干燥,喷镀金膜,用扫描电镜观察,或在固定后用醋酸双氧铀染色。再经脱水和临界点干燥,以透射电镜观察。从而提供了一     

生物样品的冷冻超薄切片术

当生物材料在样品制备过程中需减少化学固定剂对样品中蛋白活性的影响或减少可溶性元素流失时,可采用快速冷冻固定法和冷冻超薄切片。切片在含水状态下或经冷冻干燥后,用电镜观察,这样既能显示生物细胞在体内的形态,又使细胞内各种活性得以保存,是一种值得推广的电镜技术。我们采用新鲜活组织快速冷冻固定和冷冻超薄切片,经冷冻干燥后在透射电镜下对亚细胞结构进行形态观察和微小区域内的元素定性、定量分析,本文总结了初步结果和经验。     

甲状腺显示胸腺样分化的癌超微病理结构观察

利用透射电子显微镜观察2例甲状腺显示胸腺样分化癌(carcinoma showing thymus-like differentiation,CASTLE)的超微病理结构特征,并在光镜下观察其组织学及免疫组织化学特点.电镜下肿瘤组织主要特点为癌细胞细胞核内以常染色质为主,核仁明显,胞质内含较多的线粒体及张力原纤维,细胞...     

栉孔扇贝（Chlamys farreri）外套膜两种肌纤维的电镜观察

有材料指出栉孔扇贝外套膜 (以下简称套膜 )内有两组肌肉 :一是放射肌 ;二是环状肌。有关这两组肌肉的类型、微细结构等可供查阅的资料并不多见。作者在检查标本时 ,注意到栉孔扇贝套膜肌纤维有两种 :平滑肌与横纹肌。现整理如下。材料与方法取成体栉孔扇贝套膜组织 ,按常规电镜术固定、包埋 ,经半薄切片定位作超薄切片 ,经铀和铅双重染色 ,ＪＥＭ 12 0 0ＥＸ透射电镜观察。观察结果1　半薄切片光镜观察套膜厚约 1ｍｍ ,两面覆盖单层上皮。上皮下各有一薄层平滑肌 ,两层平滑肌之间为密集的大块肌组织。有的标本可清楚地看出为横纹肌纤维 ,有…     

不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响

目的:探讨不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响。方法:切取大鼠的坐骨神经及肾脏组织,经戊二醛-锇酸双重固定,乙醇、丙酮梯度脱水后,分别用Epon812和Eponate12包埋聚合,利用超薄切片机制备厚度为1.5μm的半薄切片,切片经甲苯胺蓝染色,在光镜下观察半薄切片的染色效果。结果:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后,颜色更鲜艳,微细结构更清晰,图像反差更好。结论:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后更有利于在光镜下观察组织的微细结构。     

用免疫电镜的方法观察间充质干细胞及再生纤维的超微结构和胶体金标记

本文研究神经再生过程中雪旺氏细胞的功能和作用 ,观察间充质干细胞在体内的存活和功能情况。方法 :以逆转录病毒为载体 ,将EGFP报告基因导入大鼠的骨髓间充质干细胞后 ,注入受损伤的周围神经组织内。三周后取材 ,用FA GA混合固定 ,分为二组 ,A组用K4M低温包埋切片后标记anti EGFP,IgG Au ;B组经冷冻超薄切片后标记anti EGFP ,IgG Au ;观察其超微结构及胶体金标记情况。结果 :电镜下可以观察到A、B二组均呈明显的阳性反应 ,胶体金颗粒均匀地分布在细胞核内及胞浆内。其中K4M低温包埋方法的金颗粒为散在分布 ,超微结构较好 (图 1…     

肾组织的低温快速冷冻固定及冷冻置换研究

超低温快速冷冻固定以极高的冷冻速率对生物样品进行固定,可使生物组织结构、组织内可溶性离子及游离性物质得到保存,使被固定后的生物组织仍旧保持于最接近原自然状态。作者对肾组织的超低温快速冷冻固定及冷冻损伤进行了探讨。取雄性大鼠肾皮质用振动切片机切成150～200/μm厚的薄片,采用Reichert-Jung KF-80弹射式快速冷冻仪将切片快速插入经液氮冷冻至-175℃的冷冻剂F22中,再迅速转移到置换液丙酮中,并保持温度在-80℃(34小时);-60℃(48小时);-20℃(12小时)和-4℃(1小时),缓慢升至室温。常规包埋切片并观察。电镜下,从肾皮质表层到30μm深的范围内,组织超微结构保存良好,细胞核、核仁和微绒毛等结构清晰显     

线状体肌病的超微结构观察(附一例报告)

本文报告1例线状体肌病的临床表现,通过肌肉病理活检,组织化学和超微结构观察,并结合文献复习,探讨了线状体肌病的临床和病理特点。本例临床表现特点为：自婴幼儿期出现肌无力,病情进展非常缓慢,以近端肢体受累为主,血清酶学无明显变化,肌电图显示以近端肌源性损害为主,肌肉病理改变为肌组织纤维组织增生,部分肌纤维轻度萎缩,PTAH示肌纤维横切面蓝色小体,未见肌纤维坏死;超微结构观察可见肌纤维内有大量的线状体异常聚集,伴周围肌原纤维萎缩和断裂,空区还见大量的线粒体堆积,未见类晶体结构。上述病变肌细胞主要超微结构特征再次证实肌肉病理活检的电镜检查是诊断线状体肌病的重要手段。     

含水纳米材料冷冻电镜直接成像研究

对细菌、聚合物胶束、载药脂质体和脂质体立方晶等含水纳米材料进行冷冻电镜直接成像研究.结果表明,与负染色技术相比,文中利用冷冻电镜技术观察到了保存更完整的细菌膜结构和细菌的部分内部结构、精细的多层聚合物胶束结构、包裹在脂质体内的纳米药物以及脂质体立方晶的晶格结构.与负染色技术相比,冷冻电镜技术能避免染色假象、真空变形等缺陷,更真实地反映了有关纳米材料的原有结构特点.     

纵隔神经内分泌癌的肾小球内转移

报告一例十分罕见的肾小球内癌转移病例。肾活检标本进行了光镜、免疫荧光、免疫组化及透射电镜检查。组织学观察,肾小球毛细血管内异常细胞堆积。免疫荧光结果：异常细胞IgG,IgA,IgM,C3,C1q,FRA,ALb,κ链及λ链均阴性。免疫组化染色异常细胞LCA及F8阴性,chrmogranin阳性。电镜观察异常细胞胞质内含特征性的致密核心颗粒。病理诊断神经内分泌癌肾小球内转移。上述结果显示,电镜检查及免疫组织化学方法对本例有诊断意义。     

肺巨噬细胞在某些实验病理情况下超微结构变化的电镜观察

本文以健康家兔为实验对象,分别采用夹闭肠系膜上动脉所造成的动脉闭塞性(SMAO)休克、自耳静脉注入油酸所复制的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)为实验模型,应用“洗肺”技术采取肺巨噬细胞,进行超薄切片和冷冻蚀刻电镜观察;分析比较了肺巨噬细胞在上述实验性疾病时的超微结构变化,探讨了肺巨噬细胞与某些病理过程的关系。一、材料与方法:将健康成年家兔,分为正常对照组,SMAO休克组和ARDS组。各组动物均以适量温生理盐水缓冲液(约50毫升),经气管插管反复灌洗肺组织(六次),再将洗出液三次离心沉淀(500克,8分钟/次),制得5×10~6/毫升肺巨噬细胞混悬液。此后,样品分别经2.5～4.0％戊二醛固定,以618树脂包埋制备超薄切片;经30％甘油生理盐水防冻处理,用日立FHZ—1型冷冻蚀刻装置制得冷冻复型膜。样品送H—500电镜观察,加速电压75KV。     

兔毛髓质的扫描电镜观察

兔毛,因其髓质部分有着比较特殊的格状结构,一般只需在光学显微镜下便可以鉴别、确认。但是据我们实际工作中对多种动物毛纤维的光镜检查时发现,一部分动物的细绒毛,髓质部分有时亦能发现有类似的格状结构,在光镜下难以与兔毛相区别。本文采用纵向剖切法,并运用扫描电子显微镜对动物毛的髓质结构进行观察分析,发现兔毛的方格髓状腔结构具有一定的特异性,在电镜下已完全可以同其它动物毛纤维相区别。观察材料取自普通饲养家兔及动物园饲养动物。将样品置乙醇中用超声波清洗器脱脂清洗十分钟,吸干后用胶水固定于黄铜质样品座,再置光镜下用刀仔细进行纵向剖削,最后蒸金(Au)膜后送入扫描电镜内观察。样品的横截面采用包埋、液氮冷冻断裂制得。