小分子羧甲基壳聚糖的抑菌性能研究

采用体外抑菌法分别测定不同小分子量羧甲基壳聚糖对几类菌种的抑制作用。结果表明3 000 u分子量的羧甲基壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酵母菌的最低抑菌浓度分别为:0.10%、0.15%、0.15%、0.15%;6 000 u分子量的羧甲基壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酵母菌的最低抑菌浓度分别为:0.15%、0.15%、0.20%、0.15%;9 000 u分子量的羧甲基壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酵母菌的最低抑菌浓度分别为:0.20%、0.10%、0.20%、0.20%。较高分子量的羧甲基壳聚糖对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好,低分子量的羧甲基壳聚糖对大肠杆菌、黑曲霉、酵母菌的抑菌效果较好。     

羧甲基硫脲壳聚糖的结构表征及抑菌活性研究

运用红外光谱、紫外光谱和差热-热重分析对合成的羧甲基硫脲壳聚糖进行结构表征,并研究羧甲基硫脲壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明：硫脲壳聚糖中羟基发生了羧甲基化反应,与壳聚糖相比热稳定性降低;羧甲基硫脲壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性较壳聚糖本身增强,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌最小抑菌质量浓度(MIC)均为0.20mg/mL。     

壳聚糖、溶菌酶和牛至油对大豆分离蛋白膜抑菌效果的影响

采用双倍稀释法研究壳聚糖、溶菌酶和牛至油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。采用抑菌圈法研究添加天然抑菌剂壳聚糖、溶菌酶和牛至油的大豆分离蛋白膜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和黑曲霉的抑菌效果。结果表明,添加壳聚糖、溶菌酶和牛至油的大豆分离蛋白膜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和黑曲霉均有抑制作用。对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑制效果为:牛至油>壳聚糖>溶菌酶。对酿酒酵母的抑制效果为:壳聚糖>牛至油>溶菌酶;对黑曲霉的抑制效果为:牛至油>壳聚糖>溶菌酶。因此,添加壳聚糖、溶菌酶和牛至油的大豆分离蛋白膜具有较好的抑菌效果和应用前景。     

荠菜多糖的超声波提取工艺及其抑菌活性的研究

采用超声波技术提取荠菜多糖,以正交实验设计优化提取工艺条件。结果表明:荠菜多糖的最优提取工艺条件为:超声波功率400W、超声波处理时间35min、料液比1∶20、浸提温度70℃,荠菜粗多糖的提取率高达8.26%。为进一步研究荠菜多糖对几种常见肠道致病菌的抑制效果,进行了体外抑菌实验并测定了最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,荠菜多糖对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌都有一定的抑制效果,且随着荠菜多糖浓度的增加其抑菌效果逐渐增强。最小抑菌浓度分别为大肠杆菌8.0mg/mL,枯草杆菌6.0mg/mL,金黄色葡萄球菌10.0mg/mL,沙门氏菌10.0mg/mL。     

荠菜多糖的超声波提取工艺及其抑菌活性的研究

采用超声波技术提取荠菜多糖,以正交实验设计优化提取工艺条件。结果表明:荠菜多糖的最优提取工艺条件为:超声波功率400W、超声波处理时间35min、料液比1∶20、浸提温度70℃,荠菜粗多糖的提取率高达8.26%。为进一步研究荠菜多糖对几种常见肠道致病菌的抑制效果,进行了体外抑菌实验并测定了最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,荠菜多糖对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌都有一定的抑制效果,且随着荠菜多糖浓度的增加其抑菌效果逐渐增强。最小抑菌浓度分别为大肠杆菌8.0mg/mL,枯草杆菌6.0mg/mL,金黄色葡萄球菌10.0mg/mL,沙门氏菌10.0mg/mL。      

菜籽多酚抑菌作用研究

采用滤纸片扩散法测定菜籽多酚溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑制效果。结果表明:0.05%～0.80%的菜籽多酚对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑制作用,并显示浓度-效应关系。最佳抑菌浓度在0.4%左右。菜籽多酚对3种微生物的最低抑菌浓度,大肠杆菌是1.00 mg/100 mL,枯草杆菌是0.50 mg/100 mL,金黄色葡萄球菌是0.25 mg/100 mL。以上结果表明:菜籽多酚有抑菌能力,可望用于食品贮存与加工。     

溶菌酶与壳聚糖复配液抑菌作用的研究

本实验以溶菌酶和壳聚糖联合使用以增强对三种模型菌(大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(St.aureus)及白色念珠菌(C.albicans))的抑菌效果。首先采用抑菌圈法考察不同浓度醋酸溶液对不同浓度壳聚糖溶液抑菌效果的影响,其次通过对倍稀释法测定壳聚糖溶液和溶菌酶溶液的最小抑菌浓度(MIC),并采用定量法确定复配液的配比,最后通过酶标法监测加入复配抑菌剂后三种模型菌的生长曲线。结果表明,1%的醋酸溶液与壳聚糖的协同抑菌效果最好;壳聚糖溶液对三种模型菌的最小抑菌浓度均为0.1562mg/m L,溶菌酶溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度分别为0.625mg/mL、1.25mg/mL和1.25mg/mL,而复合液对三种模型菌的抑制作用优于单独使用溶菌酶或壳聚糖;复配液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用主要表现在对数生长期,而加入材料后白色念珠菌由延迟期直接进入稳定期内。     

壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性的研究

研究了壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性,考察了不同壳聚糖浓度、pH值、金属离子、醋酸浓度对壳聚糖抑制金黄色葡萄球菌活性的影响,并以壳聚糖浓度、pH值、醋酸浓度为因素进行正交试验,确定了壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性的最优条件。实验结果表明,壳聚糖对金黄色葡萄球菌的抑制能力随其浓度的升高而增强;壳聚糖溶于浓度为2%的醋酸溶液时,培养基pH控制在6.0时壳聚糖的抑菌活性最强;金属离子在一定程度上降低了壳聚糖的抑菌活性;这3个因素对壳聚糖的抑菌活性的影响程度为壳聚糖浓度pH值醋酸浓度。     

茶多酚对肉源腐败菌和致病菌的抑制效果

研究了茶多酚对肉源荧光假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果。设计不同浓度茶多酚溶液(0.0%、0.5%、1.0%、2.0%、2.5%),采用滤纸片法评判抑制效果。结果表明,茶多酚溶液(0.5%、1.0%、2.0%、2.5%)对荧光假单胞菌有极显著的抑制效果(P<0.01),常用的防腐剂山梨酸钾(1.0%)对其抑制效果却不显著(P>0.05)。茶多酚溶液(1.0%、2.0%、2.5%)和山梨酸钾溶液(1.0%)对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有极显著的抑制效果(P<0.01),茶多酚溶液(0.5%)对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌无显著的抑制效果(P>0.05)。通过茶多酚溶液的浓度与4种菌抑菌圈直径的直线相关图可以看出,茶多酚溶液的浓度与鼠伤寒沙门氏菌抑菌圈直径的相关系数最大,荧光假单胞菌次之,其次是金黄色葡萄球菌、大肠杆菌。     

甘薯多酚提取液的抑菌试验研究

以最小抑菌浓度、最小杀菌浓度及抑菌率为指标测定甘薯多酚提取液对食品中常见微生物的抑菌活性,并研究温度、pH等对提取液抑菌活性的影响。结果显示:甘薯多酚提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌等几种细菌有较强的抑制作用,尤其对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最为明显,而对枯草杆菌、啤酒酵母、产黄青霉、黑曲霉等仅在高浓度时才表现出一定的抑制作用。甘薯多酚提取液有较好的热稳定性,在pH为4～5时,对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的抑菌作用最强。     

不同消毒剂对细菌的抑制作用

根据抑菌圈的大小,测定不同化学消毒剂对不同细菌的抑菌作用。采用滤纸片法测定消毒剂的抑菌作用,菌种为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌。质量分数0．25％新洁尔灭对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用最强;龙胆紫对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用次之,并随浓度的增加抑制作用增强;质量分数5％苯酚、体积浓度75％乙醇的抑制作用较弱;无水乙醇抑制作用最弱。同一浓度的龙胆紫、新洁尔灭、质量分数5％苯酚和体积浓度75％乙醇对金黄色葡萄球菌的抑制作用比大肠杆菌强;无水乙醇对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用无明显区别。     

联合使用羧甲基壳聚糖与阿霉素抗肿瘤效应

为了研究羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl-chitosan,CM-CTS)与阿霉素(Adriamycin,ADM)的联合抗肿瘤作用。通过细胞平板克隆实验、细胞划痕实验来评价羧甲基壳聚糖和阿霉素对Hela细胞增殖和迁移能力的影响,B16实体瘤模型用于评价体内抗肿瘤活性。结果表明,CM-CTS与ADM联合使用对Hela细胞克隆形成的抑制率为72.65%,极显著高于单独使用CM-CTS(31.47%)或ADM(44.09%)(p<0.01)。CM-CTS与ADM联合使用对Hela细胞迁移的抑制率为84.48%,极显著高于CM-CTS(37.47%)或ADM(56.29%)(p<0.01)单独用药时的抑制作用。体内动物实验结果显示,CM-CTS和ADM单独使用时,在活的有机体内对肿瘤细胞的生长抑制率分别为27.68%、16.96%,当两种药物联合使用时,对肿瘤生长的抑制率为47.32%,具有协同效应。结果说明,联合用药可以显著抑制宫颈癌细胞Hela的增殖和迁移。     

相转移催化法制备羧甲基壳聚糖及其性能表征

采用相转移催化法制备了羧甲基壳聚糖,考察了催化剂种类、催化剂使用量、反应温度、反应时间和溶剂中水醇比对羧甲基壳聚糖取代度(DS)和溶解性的影响。得到最佳反应条件为：以6% 的苄基三乙基氯化铵(TEBA)作催化剂,反应温度55℃,反应时间4h,溶剂中水醇比1:4(V/V),羧甲基壳聚糖的取代度(DS)和溶解率分别达到1.147 和98.87%。并采用傅立叶红外光谱法及X 光电子能谱分析法对产物结构进行了表征,结果表明壳聚糖羧甲基化反应主要是发生在C6 位上的－ OH 基团上。     

灭菌豆干货架期内品质变化及微生物群落多样性分析

取车间生产的灭菌前的预包装香辣味豆干为材料,在实验室进行105 ℃、40 min的热处理,研究其常温保存条件下货架期30 d后的品质变化及微生物状况。结果表明,实验样品在贮藏30 d后生长了大量细菌和真菌,其菌落总数达到了6×105 CFU/g,微生物含量严重超标,且产生的代谢物导致样品酸味突出,口感变糙。高通量测序及分析显示,实验样本中芽孢杆菌属（Bacillus）微生物占比细菌含量为80.69%,为绝对优势细菌,酵母菌（Saccharomycetes）为主要优势真菌,占比真菌含量为32.99%。而进一步的研究发现,热噬淀粉芽孢杆菌（Bacillus thermoamylovorans）和德式乳杆菌（Lactobacillus delbrueckii）是本实验中主要的腐败细菌。     

基于抗生素敏感性构建索罗金小球藻异养无菌体系的研究

为构建索罗金小球藻（Chlorella sorokiniana FZU60）的异养无菌体系,对其共生菌进行分离和鉴定,并考察了8种常见抗生素（头孢噻肟、卡那霉素、新霉素、氨苄青霉素、链霉素、四环素、氯霉素和红霉素）对共生菌和藻株FZU60生长的影响。结果表明：异养体系中主要的共生菌为芽孢杆菌（Bacillus）(78.76%)和甲基杆菌（Methylobacterium）(3.14%),且10 mg/L头孢噻肟、10 mg/L四环素、100 mg/L卡那霉素和100 mg/L红霉素对这两株共生菌均具有较好抑制效果,但对藻株FZU60的生长无明显影响。在此基础上,进一步考察了不同抗生素组合对藻株FZU60异养共生菌的抑制效果,发现采用10 mg/L头孢噻肟、10 mg/L四环素和100 mg/L卡那霉素的抗生素组合可成功构建异养无菌体系,且经3次传代培养后藻株FZU60仍可维持稳定的生长及无菌状态。本实验结果可为索罗金小球藻高密度异养中无菌藻种的制备提供一定的理论参考和实验依据。     

鸡蛋壳表面细菌数量及种群多样性分析

采用GB 4789.2-2010菌落总数计数及Miseq测序分析物种多样性及群落结构的方法,对蛋鸡场鸡蛋壳表面细菌数量及种群结构进行研究。结果检测8组样品的菌落总数为3.79±0.67~5.06±0.75 Log CFU/eggshell±SD;获得的163214条优化序列分属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)及蓝菌门(Cyanobacteria)。8组样品普遍存在假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、泛菌属(Pantoea)、芽孢杆菌属(Bacillus)、肠球菌属(Enterococcus)细菌;而各样品分别以假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)以及肠球菌属(Enterococcus)的相对丰度最大,依次为67.89%、36.15%、68.08%、40.12%、21.59%和26.98%。试验结果表明鸡蛋壳表面细菌数量大、种群多,不同样品间存在相似性差异。鸡蛋腐败变质可能与鸡蛋壳表面细菌种群有关,有待进一步研究。     

酿酒黄水对枯草芽孢杆菌的抑菌机制研究

本论文以枯草芽孢杆菌为例,研究白酒发酵副产物黄水的抑菌机制。通过描绘细菌生长曲线,扫描电镜观察菌体表面形态,电导率实验研究实验菌细胞膜通透性,SDS-PAGE凝胶电泳观察菌内蛋白变化,DAPI荧光染色观察细菌核酸含量变化进行研究。结果证明:酿酒黄水处理的枯草芽孢杆菌生长曲线未出现明显对数生长,扫描电镜观察菌体表面粗糙,电导率实验证明酿酒黄水不能改变细胞膜通透性,SDS-PAGE凝胶电泳分析表明酿酒黄水可抑制菌内蛋白质合成,DAPI荧光染色结果表明酿酒黄水作用9 h后,枯草芽孢杆菌总DNA量减少30.39%,作用3 h后,RNA总量减少39.64%。因此,酿酒黄水抑菌机制主要通过抑制枯草芽孢杆菌菌体内蛋白质和核酸的合成实现的。      

GDL诱导大豆分离蛋白冷凝胶对益生菌的保护

主要研究了葡萄糖酸内酯(GDL)诱导大豆分离蛋白冷凝胶在胃酸pH环境下对乳酸菌的保护情况。利用GDL诱导形成的大豆分离蛋白冷凝胶在胃酸pH环境下作用30min后乳酸菌的存活率为评价指标,用以评价大豆分离蛋白冷凝胶对乳酸菌的保护情况。通过正交实验得出,在pH1.2的胃酸环境下,大豆分离蛋白冷凝胶的成胶条件为变性温度90℃、SPI浓度9%、GDL浓度1.2%,对乳酸菌的保护效果最佳。活菌落菌落计数的数量级由初始的107变为105cfu/mL,仅下降了2个数量级,乳酸菌的存活率达到26.61%,得到显著提高。实验结果表明,在胃酸pH环境下GDL诱导的大豆分离蛋白冷凝胶能很好的保护乳酸菌,为益生菌和大豆分离蛋白在食品中的应用提供了参考。      

基于神经网络平台的牡蛎肉超高压杀菌工艺条件优化

为研究超高压对牡蛎杀菌的影响,利用Box-Behnken实验设计建立数据集,以菌落总数为参考指标,借助JMP7.0软件的神经网络平台建立神经网络模型,优化牡蛎肉超高压杀菌处理工艺条件。实验结果表明,牡蛎肉超高压杀菌的最佳工艺条件为压力350MPa,保压时间20min,处理温度30℃,在此条件下超高压处理后的牡蛎肉菌落总数从3.2718lg cfu/g减少到2.44342lg cfu/g（灭菌率85.13%）,大肠菌群从7MPN/100g减少至0。验证实验结果表明,所建立的神经网络模型具有较好的预测能力,可准确地预测杀菌效果,预测值与实验值的相对误差较小（0.201%）。      

不同浸提条件对植物香辛料抑菌性能的影响

利用滤纸片试验法 ,以假单胞菌、热死环丝菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和乳酸菌为供试菌 ,通过 3因子二次正交旋转设计 ,试验表明 ,丁香用有机溶液浸提、桂皮用水溶液浸提的抑菌效果好 ,它们最佳的浸提条件分别为 :6%的丁香粉溶于 3 1 8%的乙醇溶液中 ,70℃水浴 6h ;5 6%的桂皮粉溶于水溶液中 ,70℃水浴 7h。