仿生石斛多糖对小鼠免疫器官的调节作用

该研究主要通过水提醇沉法提取林下仿生石斛多糖（bionic Dendrobium polysaccharide,BDP）,探讨其对免疫抑制小鼠淋巴器官发育的免疫调节机制。利用环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）建立免疫抑制模型,将6周龄C57BL/6J小鼠随机分为模型组、阳性对照组（左旋咪唑组）、仿生石斛多糖组（剂量为120 mg/kg）,另设健康小鼠作为空白对照组,各组小鼠灌胃相应的药物10 d,检测免疫脏器系数、观察淋巴结的组织病理学变化,酶联免疫吸附试验（enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA）法检测血清中免疫细胞因子白介素2（interleukin-2,IL-2）和白介素6（interleukin-6,IL-6）以及免疫球蛋白 G（immunoglobulin G,IgG）和免疫球蛋白 M（immunoglobulin M,IgM）。结果表明,BDP可以提高免疫抑制小鼠的体重以及免疫脏器系数,改善环磷酰胺造成的肠系膜淋巴结损伤,提高血清中相关免疫球蛋白IgG和IgM的分泌,增加血清中细胞因子IL-2、IL-6的分泌,维持机体的免疫稳态。     

黄芩多糖的免疫调节活性

目的:探讨黄芩多糖的免疫调节活性。方法:通过动物试验,检测小鼠血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量,补体C3、C4的含量和溶菌酶活性,并测定胸腺指数与脾脏指数。结果:黄芩多糖可增加小鼠胸腺质量,显著增加小鼠脾脏质量;增加小鼠血清中IgG含量,显著增加小鼠血清中IgA含量与IgM含量;显著增加小鼠血清中补体的含量,小鼠血清溶菌酶活性。结论:黄芩多糖具有增加机体的免疫功能作用,并在一定程度上对小鼠的体液免疫有所增强,还能激活并提高小鼠非特异性免疫反应。     

槐花多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响研究

研究槐花多糖对免疫低下小鼠的免疫功能的调节作用。采用腹腔注射环磷酰胺制造免疫抑制小鼠模型,考察槐花多糖对免疫抑制小鼠脏器指数、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞增殖活性、血清IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、TNF-γ水平、溶血素水平和溶血空斑形成数量的影响。结果表明槐花多糖能明显提高免疫抑制小鼠的胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬能力、脾淋巴细胞的增殖能力、溶血素含量和溶血空斑形成数量,促进细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、TNF-γ分泌。槐花多糖具有免疫增强活性,具有良好的开发应用潜力。     

黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫相关因子的影响

研究黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫因子的影响。选择健康昆明小鼠,适应性喂养4 d后,分成5 组：空白组、环磷酰胺（cyclophosphamide,CY）模型组、CY＋黄酒多糖（低、中、高剂量）组,每组10 只。黄酒多糖按高、中、低3 个剂量（50、100、200 mg/（kg·d）,均以体质量计）给小鼠灌胃,1 次/d,连续给药14 d,空白组和CY模型组给予生理盐水。第19天除空白组,其余4 组腹腔注射环磷酰胺,连续4 d。处死小鼠,眼眶取血,测定血清中白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）、补体（C3、C4）水平。结果表明,与CY组相比,黄酒多糖能提高IL-6、IFN-γ、TNF-α、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）和补体（C3、C4）水平,并且随着低中高剂量效果依次增加。由此说明,黄酒多糖能提高免疫缺陷小鼠的免疫功能。     

菊糖酸奶对小鼠免疫器官指数和血清免疫球蛋白的影响

以脾脏指数、胸腺指数、体质量及免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）IgG、IgA、IgM含量为评价指标,研究菊糖酸奶对小鼠免疫器官指数和血清免疫球蛋白的影响。结果表明：菊糖能够刺激酸奶中乳酸菌的增加。与普通酸奶相比,菊糖酸奶能够更好地提高小鼠免疫功能,经相关性分析发现IgG、IgA与酸奶中乳酸菌的含量显著相关。由此可见,菊糖刺激了酸奶中乳酸菌的增加,从而增强了酸奶对机体免疫功能的影响。在菊糖添加量为50 g/L时,菊糖酸奶对小鼠的免疫增强效果最好。     

蛹虫草胞外多糖的制备、结构分析及其免疫活性

本实验选择蛹虫草菌株CICC 14014液态发酵培养，提取蛹虫草胞外多糖，测定其理化性质及结构，并对其免疫活性进行研究。采用DEAE-Sephacel阴离子交换柱联合Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱纯化蛹虫草胞外多糖；利用高效液相色谱法测定多糖分子质量，利用傅里叶变换红外光谱鉴定多糖结构；选用BALB/c小鼠构建免疫损伤模型，考察其体质量及免疫器官指数变化情况，观察其脾脏组织切片形态，计算其T、B细胞增殖率，测定其血清细胞因子及免疫球蛋白质量浓度。结果表明，蛹虫草发酵液中多糖质量浓度为3.15 mg/mL，经分离纯化后所得单一多糖分子质量为3.67 kDa，纯度可达86.13%。动物实验结果表明，蛹虫草胞外多糖可明显提高免疫器官指数，能够有效促使T细胞（低剂量时）、B细胞增殖和免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G、IgA、IgM、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-2、干扰素（interferon，IFN）-γ的分泌，免疫调节效果显著。研究结果表明蛹虫草胞外多糖可修复环磷酰胺导致的BALB/c小鼠免疫功能损伤，为开发蛹虫草发酵液资源建立了部分理论支撑。     

牯岭勾儿茶多糖对老龄小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响

目的:观察牯岭勾儿茶多糖对老龄小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响。方法:以老龄小鼠为研究对象,观察牯岭勾儿茶多糖对老龄小鼠碳粒廓清指数、胸腺指数和脾脏指数、血清免疫球蛋白水平,血清及肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果:牯岭勾儿茶多糖能提高老龄小鼠碳粒廓清指数和吞噬指数,增加脾脏指数和胸腺指数,升高血清IgG和IgM水平,提高血清和肝脏SOD、GSH-Px活性,降低血清和肝脏MDA含量。结论:牯岭勾儿茶多糖具有增强老龄小鼠免疫功能和抗过氧化损伤作用。     

野生蝉花多糖抗肿瘤活性及其作用机制

目的：研究野生蝉花多糖（wild Cordyceps sobolifera polysaccharide,CSP）体内外抗肿瘤活性。方法：以3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT）法考察不同剂量蝉花多糖体外对HeLa细胞的抑制作用,并以移植性S180实体荷瘤小鼠为模型检测体内抗肿瘤活性,通过机体免疫系统各项生化指标的测定,初步探讨其抗肿瘤作用机制。结果：当蝉花多糖质量浓度为400～800 μg/mL时,对体外培养的HeLa细胞具有抑制作用,并呈量效关系,当作用质量浓度为800 μg/mL时,抑制率达到61%。体内实验表明,蝉花多糖高剂量组（200 mg/（kg·d））、低剂量组（100 mg/（kg·d））均有一定抗肿瘤活性。当多糖给药剂量为200 mg/（kg·d）（以体质量计）时,对S180荷瘤小鼠抑瘤率达到42.9%;同时,荷瘤小鼠免疫器官指数显著增大（P＜0.01）,并激活淋巴细胞的增殖分化,对抗氧化应激系统具有较好的保护作用。结论：野生蝉花多糖在体内、外均有明显的抗肿瘤活性,其原因可能与增强免疫调节能力及抗氧化活性有关。     

罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白的抗原反应特性分析

目的：确定罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白的抗原性,为进一步研究罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白生物相容性提供依据。方法：采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）对分离提取的罗非鱼皮胶原蛋白进行鉴定,共免疫ICR小鼠3 次。采用酶联免疫吸附反应（enzymelinked immune sorbent assay,ELISA）分别于每次免疫后第7天测定小鼠产生的总胶原蛋白抗体,并在第21天测定小鼠血清中内免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）、免疫球蛋白A（IgA）和免疫球蛋白M（IgM）的含量。结果：罗非鱼皮胶原蛋白样品是Ⅰ型胶原蛋白。所有经罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白免疫的小鼠体内均产生抗体,3 次免疫后罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白抗体质量浓度范围为160.50～164.25 μg/L,小鼠IgG、IgA和IgM的质量浓度范围分别为424.81～437.59 ng/mL、46.86～49.53 μg/mL、1.81～1.89 ng/mL。结论：罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白对ICR小鼠呈现较弱的抗原性。     

黑曲发酵茯苓多糖免疫调节作用研究

研究黑曲发酵茯苓多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,通过构建免疫抑制小鼠模型,将小鼠随机分为4组,即空白对照组(CK)、环磷酰胺模型组(cyclophosphamide,CY)及发酵茯苓多糖(fermented Poria cocos polysaccharides,FPCP)高、低剂量组。小鼠以灌胃方式给予不同剂量发酵茯苓多糖,分别测定脏器指数、血清溶血素水平、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)与免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)含量及单核-巨噬细胞吞噬率。结果表明,与模型组相比,发酵茯苓多糖各剂量组均能显著提高小鼠脏器指数、溶血素水平、IgG与IgM含量、单核-巨噬细胞吞噬率。发酵茯苓多糖能有效增强环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用。     

蝉花虫草中核苷类成分的分离纯化和鉴定

对蝉花虫草子实体中的核苷类成分进行分离纯化,并对获得的组分进行鉴定。结果显示:采用65%乙醇超声波法提取的蝉花虫草子实体提取物于10000r/min离心5min后,经反相HPLC制备液相制备(色谱条件为:流动相为0～100%甲醇,梯度洗脱,洗脱速率为15mL/min,进样量1mL,检测波长260nm),分离得到6种主要化合物,经鉴定,6种化合物均为核苷类产品,分别为胞嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素。对6种化合物进行纯度验证,结果表明,6种化合物的纯度均在95%以上,说明采用反相HPLC分离制备蝉花虫草中的核苷类成分方法是可行的,并且该方法简便、准确。     

响应面法优化金蝉花多糖提取工艺及抗氧化活性分析

通过考察液料比、浸提时间及浸提温度对金蝉花多糖含量的影响,在单因素试验基础上进行响应面优化提取工艺条件,并通过测定金蝉花多糖总还原力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2－·）的能力研究其体外抗氧化活性。结果表明,金蝉花多糖适宜的提取工艺参数为浸提时间130min、浸提温度80℃、液料比50∶1（mL/g）,在此条件下金蝉花多糖含量实际值为26.14mg/g。金蝉花多糖具有较好的抗氧化能力,其清除DPPH自由基、·OH、O2－·的半抑制质量浓度（IC50）分别为28.99μg/mL、0.19mg/mL和0.30mg/mL。     

金蝉花米酒发酵工艺优化

以糯米和金蝉花为主要原料,通过微物发酵制作一种营养保健米酒,并采用单因素试验和正交试验优化金蝉花米酒发酵工艺。结果表明,最佳发酵工艺条件为：发酵时间5 d,发酵温度26 ℃,金蝉花添加量40 g/kg。在此优化条件下,金蝉花米酒的感官评分为94.0分,多糖含量为0.097 mg/mL,虫草酸含量为4.055 mg/mL。     

人工培育蝉花虫草的抗肿瘤活性

以天然蝉花虫草生药为对照,以中国仓鼠卵巢肿瘤（Chinese hamster ovary,CHO）细胞株为模型,采用刃天青染色法检测人工培育蝉花虫草的抗肿瘤活性。结果表明：人工培育蝉花虫草和天然蝉花虫草生药都具有抗肿瘤活性,且活性成分均为中等极性化合物。对人工培育蝉花虫草中的抗肿瘤活性成分进行分离制备,得到两种化合物,命名为化合物1和化合物2。化合物1经鉴定为虫草素,化合物2经纯度验证为纯品,活性验证结果发现当其质量浓度为50 μg/mL时,对CHO细胞抑制率高达（94.55±2.33）%。     

药用真菌蝉拟青霉生物活性物质的研究进展

蝉拟青霉为虫草属真菌,是中药蝉花的无性型时期,具有较高的食用、营养和药用价值,被认为是和冬虫夏草相近的最具开发利用前景的珍贵菌类之一。作者在总结前人研究成果的基础上,综述了蝉拟青霉各种代谢产物、生物活性及发酵生产研究现状,探讨了在该研究领域存在的问题及今后的发展方向。     

蛹虫草的稳定碳同位素和脂肪酸研究

本文旨在对冬虫夏草替代品的脂肪酸组成和稳定碳同位素比值及其变异规律开展研究。采用元素分析-同位素比值质谱仪(EA-IRMS)先对8种冬虫夏草替代品(包括6种蛹虫草和2种虫草菌丝体)和1个冬虫夏草子座样品的稳定碳同位素比值进行测定,再采用化学方法将其中性油脂和极性油脂进行高效分离,并采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对中性油脂和极性油脂的脂肪酸组成进行测定;最后将检测结果与作者之前报道的冬虫夏草数据进行对比分析。对比研究表明,不同冬虫夏草替代品在稳定碳同位素比值、粗脂肪含量和脂肪酸组成上存在明显差异;冬虫夏草替代品的粗脂肪和不饱和脂肪酸含量低于冬虫夏草,显现出冬虫夏草的不可替代性;稳定碳同位素比值和脂肪酸组成是冬虫夏草替代品掺杂判识的两类重要标志。     

液体发酵时间对2种虫草固体栽培的影响

探索蛹虫草和高雄山虫草固体培养时种子液的最佳接种时间,以期为其的工业化生产提供科学依据.采用常规方法接种和计数,以液体发酵的菌丝干重、菌丝段和固体培养基上的菌丝覆盖率为指标,结果表明,2种虫草在液体发酵条件下,第3d～6d为菌株快速生长期,活力旺盛,适合转接,尤其是发酵4d的种子液接种到固体培养基上其生长速度最快,生长状况最好,长满固体培养基的时间最短.     

蝉花菌质主要营养成分和活性成分分析

蝉花是寄生在蝉幼虫上的一种虫草菌,蝉花菌质是指由蝉花的营养菌丝和经发酵的培养基质组成的营养物质。通过对蝉花菌质营养成分和活性成分的研究和分析,结果表明:蝉花菌质蛋白含量为16.17%、总糖含量为38.87%、脂肪酸含量为1.43%,其中不饱和脂肪酸含量达1.18%。通过对蝉花菌质氨基酸的分析,在FAO/WHO的评分模式中,其第一限制氨基酸是赖氨酸。蝉花菌质VE和VC的含量分别达1 833mg/kg和239mg/kg。此外,蝉花菌质中还有腺苷、甘露醇等虫草类真菌的活性成分。该研究结果为蝉花菌质的进一步开放利用奠定了理论基础。     

蛹虫草液态发酵过程中有效成分的动态积累变化

通过对蛹虫草4号菌株进行摇瓶液态发酵培养,考察了蛹虫草发酵过程中发酵液及菌丝体生物量、虫草多糖、虫草酸及虫草素含量的动态积累变化情况。结果表明:70%以上的虫草多糖、虫草酸、虫草素分布在发酵液中。蛹虫草菌在第10天生物转化量达到最大值20.44 mg/mL,虫草酸、虫草多糖、虫草素含量分别在第11、13、14天达到最大值,综合考虑3种产物的最佳发酵周期,将蛹虫草发酵时间定为12 d。10 L发酵罐深层培养试验的结果表明,生物量达24.5 mg/mL,比摇瓶培养提高19.86%,而虫草酸、虫草多糖、虫草素含量分别为7.43、2.82、90.73μg/mL,比摇瓶培养分别提高8.3%、13.7%和15.6%。