基于网络药理学探讨溪黄草治疗酒精性肝损伤的作用机制

目的:考察溪黄草对酒精性肝损伤的保护作用和潜在作用机制.方法:40只雌性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、溪黄草组、阳性对照组.0.1 mL/10 g灌胃52°白酒建立酒精性肝损伤模型,连续给药10 d.末次给药,HE染色观察肝组织病理改变,试剂盒法测定血清指标.网络药理学方法分析溪黄草治疗酒精性肝损伤的潜在有效物质成分...     

罗耳阿太菌多糖经Nrf2通路预防小鼠肝脏铅损伤机制

目的:本研究旨在探究罗耳阿太菌多糖（Athelia rolfsii polysaccharides,AEPS）保护铅暴露小鼠肝脏的作用机制。方法:小鼠随机分为正常组（NC）、模型组（MC）、阳性对照组（PC）、AEPS低剂量组（LD）、AEPS中剂量组（MD）、AEPS高剂量组（HD）、全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid, ATRA）单独组（ATRA+NC）、ATRA干预组（ATRA+MC）和ATRA+AEPS高剂量组（ATRA+HD）。测定铅暴露小鼠肝脏的铅含量、抗氧化指标、功能指标,苏木伊红染色评估小鼠肝脏病理切片。测定小鼠肝脏谷胱甘肽巯基转移酶（glutathione-s-transferase,GST）活性和谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平,肝脏组织中细胞凋亡相关蛋白、多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance-associated protein 2,MRP2）及肝细胞核中核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2）蛋白水平。结果:AEPS低、中、高剂量组均显著提高铅暴露小鼠肝细胞MRP2运输铅离子的能力（P<0.05）,并呈剂量依赖性地减少小鼠肝脏铅积累（P<0.05）。AEPS显著抑制铅暴露小鼠肝细胞凋亡（P<0.05）,呈剂量依赖性地增强小鼠肝脏抗氧化能力（P<0.05）,恢复肝功能（P<0.05）,并减轻肝脏病理损伤。AEPS还促进了Nrf2向肝细胞核转移（P<0.05）。而ATRA干预可降低AEPS对铅暴露小鼠肝脏的保护作用。结论:AEPS依赖于Nrf2信号通路可减少肝脏铅积累,保护肝脏铅损伤。     

虾青素介导Nrf2信号通路减轻大强度运动诱导大鼠心肌细胞的凋亡

目的:观察补充虾青素能否介导核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)通路,减少6周大强度训练致大鼠心肌组织氧化应激,降低细胞凋亡水平。方法:7周龄SD雄性大鼠,适应性饲养及训练后随机分为对照组(C组,10只)、大强度训练组(HT组,15只)、虾青素+大强度训练组(HTA组,15只),大强度训练持续6周。训练期间,HTA组每天灌胃1次虾青素,灌胃剂量为20 mg/kg/d,C组和HT组分别灌胃同体积的大豆油。实验结束24 h后取血清测试血清肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,cTNI),取心肌测定凋亡指数、B细胞淋巴瘤/白血病基因2(B cell lymphoma/leukemia 2,Bcl2)、Bcl2相关x蛋白(Bcl2 associated x protein,Bax)、Nrf2、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达,同时测定心肌总抗氧化能力(Total antioxidative capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(Malonaldehyde,MDA)浓度。结果:经6周大强度训练,与C组比较,HT组大鼠血清cTNI、心肌凋亡水平、Bax表达、MDA浓度极显著增强(p<0.01),Bcl2/Bax、HO-1表达量、SOD、T-AOC活性极显著下降(p<0.01)。而通过6周的虾青素干预,与HT组比较,HTA组血清cTNI、心肌MDA浓度、心肌组织细胞的凋亡水平、Bax表达显著下降(p<0.05),Nrf2和HO-1表达量、Bcl2/Bax、SOD和T-AOC活性显著升高(p<0.05)。除Bcl2和HO-1外,其余指标与C组相比仍有显著性差异(p<0.05)。结论:补充虾青素可以介导Nrf2通路,上调Nrf2、HO-1的蛋白表达,提高SOD和T-AOC抗氧化酶的活性,进而有效降低6周大强度运动训练引发的大鼠心脏组织氧化应激水平和心肌细胞凋亡水平,保护心脏组织结构和功能正常。     

基于Nrf2和NLRP3探讨辣木籽提取物对慢性酒精性肝损伤小鼠肝脏的保护作用

该研究探讨了辣木籽提取物通过调控核转录NF-E2相关因子2（Nuclear Factor Crythroid-related Factor 2,Nrf2）和核苷酸结合寡聚化合物结构域样受体3（NACHT-LRR-PYD-containing Proteins 3 Inflammasome,NLRP3）通路减轻小鼠慢性酒精性肝损伤的作用机制。通过酒精液体饲料建立慢性酒精性肝损伤模型,干预组在酒精液体饲料喂养的同时用不同浓度辣木籽提取物灌胃,检测天冬氨酸氨基转移酶（Aspartate Aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase,ALT）、白细胞介素-18（Interleukin-18,IL-18）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）含量,观察小鼠肝脏病理学改变,检测Nrf2、HO-1、NLRP3和Caspase-1的蛋白表达水平。结果表明,在辣木籽提取物的作用下,慢性酒精性肝损伤小鼠血清的AST和ALT最高分别下降至71.68 U/L、46.84 U/L（P<0.05）,炎症因子IL-18及IL-1β含量下降;肝脏中GSH及SOD含量升高,MDA含量减少,Nrf2及HO-1表达升高,NLRP3及Caspase-1表达降低。提示辣木籽提取物通过Nrf2/HO-1和NLRP3/Caspase-1信号通路起到抗氧化及抑制炎症作用,从而减轻小鼠慢性酒精性肝损伤。     

罗布麻茶黄酮提取物对小鼠CYP2E1的影响

目的 CYP2E1是肝脏中主要的药物代谢酶,在肝脏疾病发生及发展中发挥重要的作用。本实验分别通过体内、体外实验,研究罗布麻茶黄酮提取物对小鼠CYP2E1活性和表达的影响,为评价罗布麻茶对肝脏的保护作用和药物的联合使用提供理论依据。方法将30只昆明小鼠随机分为空白对照组、黄酮提取物低剂量组和高剂量组(50和100 mg/kg),连续灌胃给药10天。采用探针药物法测定小鼠肝脏微粒体中CYP2E1催化对硝基苯酚代谢的活力。采用Western Blot法检测肝脏微粒体中CYP2E1蛋白的表达情况。体外抑制实验中,考察不同浓度的黄酮提取物对CYP2E1的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC_(50))值。结果灌服高剂量黄酮提取物(100 mg/kg)后,小鼠体内CYP2E1酶活性和表达量均显著降低,黄酮提取物对CYP2E1的IC_(50)值为128.4μg/mL。结论罗布麻茶黄酮提取物对小鼠CYP2E1有抑制作用。     

沙棘多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞氧化应激的保护作用与机制

目的：研究沙棘多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞氧化应激的保护作用与机制。方法：采用水提醇沉法对沙棘多糖进行提取,并用苯酚硫酸法测定多糖含量。CCK-8法测定不同浓度沙棘多糖对HepG2细胞活力的影响,用含5×10-8mol/L胰岛素的培养基诱导HepG2细胞24 h,建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型。采用试剂盒测定葡萄糖消耗量以及糖原相对含量,并测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,Western Blot法测定氧化应激相关蛋白的表达。结果：沙棘多糖含量为88.46%,在沙棘多糖质量浓度达到800 μg/mL时,细胞活力出现显著下降(P＜0.05),后续安全剂量选择400 μg/mL。经沙棘多糖处理后的葡萄糖消耗量以及糖原相对含量均显著提高(P＜0.05),SOD水平达到(79.31±2.16) U/mg,MDA水平达到(2.15±0.12) nmol/mg。沙棘多糖处理后显著提高Nrf2和HO-1的表达水平(P＜0.05),显著降低Keap1的表达水平(P＜0.05)。结论：沙棘多糖能够改善胰岛素抵抗细胞模型异常糖代谢情况和氧化应激水平,并通过调控Nrf2/Keap1/HO-1通路起到改善胰岛素抵抗的作用。     

基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路和氧化应激效应研究白肉灵芝多糖对小鼠运动性疲劳的保护作用

目的：研究白肉灵芝多糖对高强度训练小鼠的抗疲劳作用机制。方法：小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和白肉灵芝多糖低、中、高3个处理组,通过跑台训练建立小鼠运动性疲劳模型,处理组按照多糖浓度10、50、100 mg/mL分别连续给予多糖灌胃,其他组灌胃相同剂量的无菌生理盐水,连续训练4周后进行小鼠爬杆实验,记录小鼠爬杆时间,并测定小鼠体内睾酮（TTS）、皮质酮（CTC）、血尿素氮（BUN）、血乳酸（BLA）、肝糖原（HG）、肌糖原（MG）、丙二醛（MDA）含量和过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物歧化酶（GSH-Px）等活力,同时Western blot检测小鼠骨骼肌中Keap-1、Nrf2、HO-1的蛋白表达量。结果：低、中、高多糖处理组小鼠爬杆时间显著提高（P <0.05）,同时小鼠血清中TTS含量逐渐升高,CTC含量则逐渐下降,HG和MG的含量逐渐升高;另外多糖低、中、高剂量组小鼠血清和肝组织中MDA含量均显著降低（P <0.05）,CAT、SOD、GSH-Px酶活性均显著提高（P <0.05）。与空白对照组相比,模型组中Keap1的蛋白...     

沙棘花青素提取物对双氧水诱导的H1299细胞损伤的保护作用及Nrf2/HO-1通路的影响

目的：研究沙棘花青素提取物（The anthocyanidin extract of Hippophae rhamnoides L.,HRAE）对双氧水诱导H1299细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法：利用双氧水诱导H1299细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测HRAE对细胞活力的影响,采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的含量;采用试剂盒分别测定超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathion peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量;采用Western Blot法检测血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶-1(NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch like ECH-associated protein 1,Keap1)和核转录因子E2相关因子（Nu...     

川赤芝多糖对运动疲劳状态下小鼠心肌组织的保护作用

目的：研究川赤芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP）对运动疲劳小鼠心肌组织的保护作用。方法：利用沸水煎煮提取GLP,分别建立小鼠力竭游泳模型和递增负荷游泳疲劳模型,测定小鼠的力竭游泳时间、抗疲劳和抗氧化相关指标,并通过Western blot检测小鼠心肌组织中核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2-Associated X蛋白（Bcl-2-Associated X,Bax）、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartatespecific proteinase-3,Cleaved Caspase-3)表达。结果：与空白对照组（Con-A1）相比,GLP组小鼠游泳时间均极显著增加（P<0.01）,且随着多糖剂量提高游泳时间随之提高;与空白对照组（Con-A2）相比,GLP低（GLPL2）、中（GLP-M2）、高（GLP-H2）剂量组小鼠肝...     

卷丹百合矢车菊素对CCl_4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

研究卷丹百合醇提物矢车菊素对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及相关机制。将50只昆明小鼠随机分为空白对照组(S),CCl_4组(M),CCl_4+卷丹百合矢车菊素低(25mg/kg,LLC)、中(50mg/kg,MLC)、高(100mg/kg,HLC)剂量组。给药组每日灌胃给予相应剂量药物,连续给药7 d,末次给药2 h后,腹腔注射0.3 mL 1%CCl_4花生油溶液造模。24 h后处死小鼠,测定血清ALT、AST、ALP水平,肝脏称重后行HE染色,且匀浆测定SOD、CAT、MDA,Westren-blot检测肝脏组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达。实验结果发现,与M组比较,高剂量卷丹百合花矢车菊素能显著使血清中ALT、AST、ALP水平分别降低至(15.67±5.38)U/L,(35.58±8.68)U/L和(31.38±8.57)U/L,肝组织SOD、CAT酶活力增加至(36.67±5.47 U/mg pro)和(21.58±4.62U/mg pro),MDA生成减少到(4.67±1.42 nmol/mg pro)(p0.05);同时使肝脏组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达明显上调(p0.05)。可见,卷丹百合醇提物矢车菊素具有一定保护肝损伤的作用,其机制可能是通过Nrf2/OH-1/NQO1信号通路介导了氧化应激反应,清除自由基、减轻脂质过氧化、保护肝细胞膜结构和功能起效。     

菊苣醇提物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的研究菊苣醇提物对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的小鼠肝损伤的保护作用。方法将56只昆明小鼠随机分为7组:分别是阴性对照组,APAP模型组,水飞蓟宾阳性对照组,菊苣醇提物单独给药组(200 mg/kg体重),菊苣醇提物低、中和高剂量(50、100和200 mg/kg体重)与APAP联用组。各剂量组小鼠灌胃给予对应药物连续7 d后,一次性腹腔注射APAP(300 mg/kg体重)构建肝损伤模型,24 h后采集肝组织样品和血清。分别测定肝组织和血清的多种氧化指标以及细胞色素P450 2E1酶(CYP2E1)的蛋白表达水平。结果菊苣醇提物能够显著降低血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平。降低肝组织中过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量以及提高抗氧化酶系中过氧化氢酶(catalase,CAT)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活性;同时,体外抗氧化实验亦表明其具有良好的清除自由基的能力。另外,菊苣醇提物还能够显著抑制CYP2E1的蛋白表达。结论菊苣醇提物有助于维持小鼠体内酶防御系统功能,提高机体清除自由基的能力,并通过减少CYP2E1的蛋白表达对APAP所致小鼠肝损伤具有明显保护作用。