黄海海燕体壁酶解物抗氧化活性研究

分别用胃蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶在各自最适条件下酶解黄海海燕体壁制得酶解物,并应用电子自旋共振波谱技术检测酶解物对DPPH和羟基自由基的抗氧化活性。结果表明,黄海海燕体壁酶解物对DPPH和羟基自由基的清除能力随浓度升高而增强;酶解物浓度在20 mg/mL时,胃蛋白酶组、中性蛋白酶组和胰蛋白酶组对DPPH自由基的清除率分别为(52.25±0.14)%,(68.30±0.37)%,(46.27±0.47)%,对羟基自由基的清除率分别为(72.61±0.17)%,(81.82±0.79)%,(56.77±0.28)%;酶解物具有较明显的抗氧化能力。     

海参内脏酶解工艺条件的优化

建立海参内脏酶解工艺条件,为海参内脏活性物质工业化生产提供参考。以蛋白水解度和清除DPPH自由基为指标,分析比较了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对海参内脏的酶解效果及产物的抗氧化活性,筛选出中性蛋白酶为最佳水解酶,以水解度为指标,通过响应面分析法优化海参内脏酶解工艺。结果表明:最优酶解条件为:酶添加量2000 U/g,料液比1∶12 g/m L,酶解温度50℃,酶解液p H7.0。在最优条件下,比较不同酶解时间酶解产物的抗氧化活性,发现第10 h时酶解产物具有较好的抗氧化活性,清除DPPH自由基和羟自由基的IC50值分别为1.26、5.33 mg/m L。中性酶对海参内脏酶解工艺优化合理、可行,酶解产物具有较好的抗氧化活性。     

鲶鱼骨酶解物抗氧化活性及其稳定性研究

探讨鲶鱼骨酶解物体外抗氧化活性及其抗氧化稳定性。测定不同浓度酶解物对羟自由基(.OH)、H2O2和超氧阴离子自由基(O2-)的清除效果,观察其抗氧化活性及其剂量效应关系;将酶解物溶液进行不同pH、温度、微波以及紫外光照射处理,观察其抗氧化活性的变化。结果表明:在试验浓度下,酶解物对.OH、H2O2和O2-均有较强的清除能力,其清除作用随着酶解物浓度的增加而增强,清除作用的IC50分别为6.47、15.96、12.50 mg/mL;在pH2~9范围内、80℃~121℃加热条件下,以及20 min~120 min紫外线照射和0 min~5 min微波处理时,酶解物的总体抗氧化活性变化不大。鲶鱼骨酶解物具有较强的抗氧化作用且抗氧化活性基本稳定。     

连续串联超滤对鳙鱼酶解物抗氧化活性的影响

采用连续串联超滤技术对鳙鱼蛋白酶解物进行分离,比较各组分清除DPPH·自由基的能力.通过扫描电镜观察5 kDa滤过物对受到·OH攻击的红细胞的保护作用.结果表明:鳙鱼酶解物中大多是分子质量小于5 kDa的短肤,采用串联连续超滤技术分级后,56.7%的肽段留在此滤过液中.滤过物的抗氧化活性强于原酶解物,且清除DPPH·的EC50从2.739mg/mL变为1.556mg/mL.通过电镜观察经·OH诱变的红细胞,结果发现经5 kDa滤过物保护后的红细胞畸变率较低,鳙鱼酶解物具有抗氧化功能.对鳙鱼酶解物络合金属离子能力的研究表明,其抗氧化活性与其络合过渡态金属离子的能力呈显著正相关.     

鲨鱼肉酶解物的抗氧化作用及其稳定性研究

以还原能力和金属离子螯合能力、清除DPPH·、O2-·、OH·自由基能力为指标,考察鲨鱼肉酶解物的抗氧化活性,同时以清除自由基DPPH·的活性为指标,分析温度和pH值对其抗氧化作用稳定性的影响。结果表明:鲨鱼肉酶解液产物具有一定的还原能力和金属离子螯合能力,其清除DPPH·、O2-·、OH·自由基的IC50值分别为10.16、23.71、19.82mg/mL。酶解产物耐热性强;在酸性环境中,鲨鱼肉酶解液能较好地保持其抗氧化活性,但在碱性环境中抗氧化活性丧失较快。     

海参体壁自溶的响应面优化及其体外抗氧化活性研究

采用响应面分析法优化海参体壁的自溶条件,并对其自溶水解物进行体外抗氧化活性分析。以TCA-可溶性寡肽含量为指标,利用CCRD中心组合设计研究了温度、pH和底物浓度对海参体壁自溶过程的影响。结果表明,所建立的响应面模型极显著(P 0.0001),可以较好的反映海参体壁自溶过程中各因素与TCA-可溶性寡肽含量之间的关系,且由模型得出海参体壁自溶的最适条件为温度45℃、pH 6.8、底物浓度17.70%、NaCl浓度2.0%和自溶时间4 h。在此条件下,海参体壁自溶水解物中TCA-可溶性寡肽的含量为22.98mg/g。其体外抗氧化活性分析结果表明,海参体壁自溶水解物具有一定的DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力以及Fe2+螯合能力,其清除率和螯合率达到50%时的质量浓度分别为15.95mg/mL、0.15mg/mL、39.38mg/mL以及0.08mg/mL。抗氧化能力强弱次序依次为Fe2+螯合能力羟自由基清除能力DPPH自由基清除能力超氧阴离子自由基清除能力。     

麦芽协同蛋白酶酶解豌豆蛋白产物的功能特性及抗氧化活性

采用麦芽粉分别与风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶协同酶解豌豆蛋白,得到3种酶解物（MFH、MNH和MPH）,研究酶解物的功能特性及抗氧化活性。结果表明：与豌豆蛋白相比,酶解物的溶解性、持油性和体外消化性较高;酶解后豌豆蛋白的抗氧化活性显著提高（P<0.05）,MFH、MNH和MPH的DPPH·清除能力IC50值分别为5.64、7.22、8.95 mg/mL（以蛋白质质量浓度计）,·OH清除能力IC50值分别为1.45、2.19、2.04 mg/mL（以蛋白质质量浓度计）;与仅用蛋白酶酶解得到的酶解物相比,MNH的苦味减轻。     

金华火腿副产品蛋白酶解物的功能特性与抗氧化活性研究

目的:研究以金华火腿副产品为原料制备的蛋白酶解物的功能特性与抗氧化活性.方法:分析金华火腿副产品蛋白酶解物在不同pH值条件下的乳化活性、乳化稳定性、起泡力以及泡沫稳定性;通过体外试验考察不同浓度的酶解物的自由基清除能力、还原力以及抑制脂质过氧化能力.结果:在体系pH9.0时,金华火腿副产品蛋白酶解物显示出较好的乳化与起泡性能.酶解物的抗氧化活性与其浓度有一定的相关性,当酶解物质量浓度为7.5 mg/mL时,超氧阴离子的清除效果最理想;当酶解物质量浓度为10 mg/mL时,DPPH自由基清除率为32%,还原力为0.79.与空白对照组相比,不同浓度的蛋白酶解物均能够抑制亚油酸的自氧化,且随着浓度的增加,抑制效果明显.结论:在碱性条件下,金华火腿副产品蛋白酶解物具有较好的功能特性.金华火腿副产品蛋白酶解物具有一定的体外抗氧化活性.     

糖基化改性对鲣鱼加工副产物活性肽抗氧化能力的影响

目的 本研究利用酶法糖基化修饰鲣鱼加工副产物酶解产物,优化反应条件,制备具有强抗氧化活性和高接枝度的修饰产物,并对产物进行抗氧化活性评价。方法 通过胰酶酶解鲣鱼加工副产物,利用转谷氨酰胺酶（Transglutaminase,TGase）和D-氨基葡萄糖（D-glucosaminase,D-GlcN）酶法糖基化修饰酶解物;采用单因素实验和响应面法优化反应条件;使用羟自由基测定试剂盒等对修饰产物的进行四个指标的抗氧活性评价。结果 酶法糖基化修饰的最优条件为:粗蛋白浓度为40 mg/ml,氨基糖与粗蛋白浓度比为1:1,TGase添加量为108 U/g,反应pH=7.5,反应温度50℃,反应时间5 h。此条件下得到的修饰产物具有很强的抗氧化能力:清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的半抑制质量浓度（median inhibitory concentration, IC50）值为10.02 mg/mL,清除羟自由基的IC50值为2.94 mg/mL;当质量浓度为10 mg/mL时,修饰产物的总抗氧化能力值为0.78 TEAC（Trolox Equivalent Anyioxidant Capacity）,铁离子还原能力值为1.97 OD700（700 nm下测定的吸光度）。结论 鲣鱼胰酶酶解物经过TGase和D-GlcN糖基化修饰后,相比修饰前,具有更强的抗氧化活性,具备作为功能食品原料的潜力。     

干燥方式对四角蛤蜊酶解物功能特性和 抗氧化活性的影响

目的比较不同干燥方式对四角蛤蜊木瓜蛋白酶酶解物功能特性和抗氧化活性的影响。方法采用冷冻干燥和喷雾干燥2种方式对四角蛤蜊木瓜蛋白酶酶解物进行干燥处理,比较其功能特性和抗氧化活性。结果冷冻干燥(freezing drying,FD)组的蛋白含量(49.56%)高于喷雾干燥(spray drying,SD)组(44.31%),2组均含有17种氨基酸,总氨基酸含量之间无显著性差异。两者均具有一定的抗氧化能力,FD组的DPPH?清除能力和还原能力均优于SD组,其IC50和AC0.5值分别为3.02、4.52 mg/mL和3.55、4.03 mg/mL。FD组和SD组颜色差异显著,且FD组的溶解性、起泡性和泡沫稳定性均好于SD组。结论 FD组的功能特性和抗氧化活性均优于SD组,四角蛤蜊酶解物采用真空冷冻干燥效果更好。     

海参内脏的活性成分、保健功能与开发研究进展

海参作为中国的传统补品,具有增强免疫力、抗肿瘤、抗病毒、养颜美容等作用。海参的主要食用部位为海参体壁,因此对海参的研究也多聚焦在海参体壁活性物质上。海参加工中的副产物海参内脏则多被废弃,利用率低,国内外对其研究也较少,已开发的相关产品更是微乎其微。然而海参内脏除含有与体壁相似的化学成分外,还富含牛磺酸、精氨酸、磷脂、不饱和脂肪酸以及各种高活性微量元素、色素、活性酶和功能菌,海参内脏的食用价值和药用价值在一定范围内高于海参体壁。目前对海参内脏活性物质认识的缺乏和忽视,已造成资源严重浪费和流失。基于希望对天然资源的充分合理利用,对海参内脏具有的化学成分、生物活性以及活性物质的提取分离进行介绍,为海参内脏相关食品、保健品和新药的研究与开发提供依据。     

海参多糖制备、化学分析及生物活性研究进展

海参是我国传统保健品,具有极高的保健及营养价值,也是海洋功能食品的重要研究对象。海参多糖作为海参的重要活性成分之一,具有抗高血脂症、抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、提升免疫力等多种生物活性。海参多糖的研究主要集中在海参体壁,体壁多糖包括海参硫酸软骨素和海参盐藻聚糖硫酸脂2种组分。本文主要综述海参多糖的2种常用提取方法(化学水解法和酶解法)、3种分离纯化方法(沉淀法、色谱法和膜分离法)、化学组成分析及其检测方法、结构鉴定方法和4种主要的生物活性(抗高脂血症、抗氧化、抗凝血能力、抗肿瘤活性),为海参功能食品的开发提供参考。     

Bioprocess production of sea cucumber rice wine and characterization of functional components and antioxidant activities

A new production bioprocess for sea cucumber rice wine (SCRW) was established. The traditional production technology of Chinese rice wine was combined with addition of sea cucumber hydrosylates. The optimal enzymatic conditions of sea cucumber and the fermentation process of SCRW were determined. The weight of sea cucumber enzymatic hydrolysates was 2.5% of millet while cooking the millet. SCRW contained abundant free amino acids (30 total at 1,681.216 mg/L), oligosaccharides (4 total at 10,999.380 mg/L), total phenols (658.850 mg/L), and mineral elements (9 total at 1,911.353 mg/kg), and an antioxidant activity, all of which were higher than for control rice wine (CRW). Galactosamine and glucuronic acid, both sea cucumber polysaccharides, were present in SCRW, but not in CRW.     

拟黑多刺蚁乙醇浸提液的理化性质及抗氧化活性研究

采用Alcalase 2.4 L水解拟黑多刺蚁,以抗氧化活性为指标,并结合蛋白质利用率、多肽含量等指标比较拟黑多刺蚁及其酶解物的醇提物的理化性质及抗氧化性的区别。结果表明,在乙醇浓度介于35~75%,酶解拟黑多刺蚁醇提物的氨基酸和多肽含量分别介于4.20~3.19 mg/g和5.19~4.07 mg/mL,是没有经酶解的拟黑多刺蚁醇提物的2倍左右。酶解提高了拟黑多刺蚁醇提物的抗氧化性,在乙醇浓度为55%时,其超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基清除能力和还原力的IC50分别为0.276、0.106、0.279和0.227mg/mL。同时,酶解拟黑多刺蚁醇提物的重要微量元素Zn、Mn和Ca也有显著提高。     

海参皂苷Echinoside A的酶解及其产物结构鉴定与溶血毒性

利用商业酶将海参皂苷Echinoside A(EA)酶解成低溶血毒性的次级苷。为了得到溶血毒性更低的稀有次级海参皂苷,以海参皂苷Echinoside A为底物,选用5种商品糖苷酶,对其进行酶解。利用TLC、高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)和电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)筛选出具有能将海参皂苷EA降解生成新物质的商品糖苷酶,并进行其酶解产物结构鉴定和溶血毒性研究。结果表明,果胶酶、果胶酶Ultra SP-L和纤维素酶有酶解效果,其中果胶酶酶解生成二糖基次级海参皂苷(化合物1)和一糖基次级海参皂苷(化合物2);果胶酶Ultra SP-L和纤维素酶酶解生成化合物1,其他两种酶对海参皂苷EA没有酶解作用。溶血实验证明酶解产物的溶血毒性相对于海参皂苷EA的溶血毒性有明显地降低,其中化合物2的溶血毒性降低到30%以下,效果显著。     

青稞酒糟的高附加值利用及在具保健功能面膜中的应用

青稞酒糟作为青稞白酒的副产物,产量大,营养丰富,然而目前主要作为饲料和农肥,且其易腐败变质,产品利用率和附加值低。本研究提出一种青稞酒糟的高附加值开发应用,利用酸性蛋白酶水解酒糟,全面释放青稞酒糟潜在的活性物质。把经过酶解的酒糟提取液用于制作具有保湿、抗氧化、美白、抗紫外等功能的无纺布面膜。产品经专业机构人体功能测试具有显著效果。     

棘胸蛙肌肉水解物的制备及抗氧化活性评价

以棘胸蛙腿部肌肉为研究材料,利用木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶两种酶,以成品率和水解度为指标,通过单因素结合响应面分析的方法优化棘胸蛙水解物的酶解工艺,同时对棘胸蛙水解物抗氧化能力进行研究。结果表明,棘胸蛙水解物经木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶的最佳酶解条件为：在各酶最适pH和温度的条件下,料液比为1:15(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量为2%(m/m);该工艺条件下,棘胸蛙水解物的水解度分别为19.23%、23.51%,成品率分别为22.66%、15.32%,清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为2.61、2.95mg/mL,清除ABTS⁺自由基的IC₅₀值分别为3.46、3.20 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀值分别为8.20、9.23 mg/mL。综上,通过响应面法优化的棘胸蛙水解物酶解工艺方便可行,制备得到的水解物具有较强抗氧化活性,为棘胸蛙资源的开发提供了理论基础。     

刺参ACE抑制肽制备及降压功效分析

以刺参（Stichopus japonicus）体壁为原料,利用复合蛋白酶对其进行酶解,运用单因素法优化血管紧张素转化酶（angiotensin I-converting enzyme,ACE）抑制肽的酶解制备工艺。获得最佳工艺参数为：料液比1∶6（g/mL）、加酶量0.8%（质量分数）、反应时间6?h、pH?7.0。将酶解产物用3?kDa膜超滤,其中小于3?kDa组分具有较高的ACE抑制活性,IC50为0.8?mg/mL,对ACE表现为非竞争性抑制作用。刺参ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下均具有较好的稳定性,同时具有较强的抵抗胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化的能力。动物实验结果表明,刺参ACE抑制肽对雄性自发性高血压大鼠具有良好的降压功效。因此,利用复合蛋白酶酶解刺参体壁制备的ACE抑制肽在降血压功能性食品的开发利用方面具有研究价值。     

南方刺参性腺多肽酶解工艺优化及抗氧化活性分析

研究南方养殖刺参性腺多肽的酶解提取条件,并分析南北刺参性腺多肽抗氧化活性。选用复合蛋白酶对刺参性腺进行水解,以酶解多肽得率为指标,选取酶解温度、底物浓度、pH、酶解时间、酶用量等为主要影响因素,在单因素实验基础上应用响应面分析法对以上5个因子进行优化,确定刺参性腺多肽酶解工艺。试验结果表明,刺参性腺多肽酶解最佳条件:温度为56 ℃,底物浓度11.5%,酶添加量0.5 mKat/g,pH7.1,酶解时间4.5 h,此时刺参性腺多肽得率可达到67.97%±0.96%,与预测值相差0.26%。抗氧化试验结果表明,刺参性腺多肽浓度在40 mg/mL时,羟自由基抑制率与超氧自由基抑制率均大于0.1 mg/mL的维生素C溶液,60 mg/mL刺参性腺多肽的FRAP值大于0.1 mg/mL的维生素C溶液,南、北方养殖刺参性腺酶解多肽的抗氧化能力无显著差异。     

东北刺人参的抗氧化作用研究

对东北刺人参(ChiRenShen,CRS)体内外抗氧化及延缓衰老作用进行研究。优化微板法测定DPPH自由基清除率的条件,考察东北刺人参的体外抗氧化作用,同时以果蝇生物模型和小鼠为考察对象,测定不同浓度的刺人参对果蝇寿命相关行为学指标和力竭游泳实验小鼠丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活力的影响。体外实验结果显示,微板法测定DPPH自由基清除率的最佳反应时间为30 min,反应体积为1∶1,刺人参水煎液DPPH自由基清除率的IC50值为0.829 mg/mL,阳性对照药VC的IC50值为0.0401 mg/mL;动物实验结果显示,东北刺人参可延长果蝇寿命,增加果蝇的子代数量,提高老年蝇的攀爬能力,提高老龄果蝇抗亚急性氧化损伤能力,并且可以降低MDA含量,提高SOD活力。东北刺人参具有体内外抗氧化及延缓衰老作用。