斑鰶鱼蛋白控制酶解及其酶解物抗氧化活性研究

以斑鰶鱼(Clupanodom punchtatus)为原料,采用食品级的风味蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶和木瓜蛋白酶酶解斑鰶鱼蛋白,制备具有DPPH自由基清除活性的富肽酶解物;对酶解物在化学反应体系和亚油酸氧化体系中的抗氧化活性进行综合评价。研究结果表明:碱性蛋白酶为斑鰶鱼蛋白制备抗氧化肽的最适酶,最优制备条件是:温度55℃,酶解时间5h,料水比1∶3,加酶量0.2%,pH 7.5,此时酶解物(蛋白质量浓度10 mg/mL)DPPH自由基清除率为89.54%;在化学反应体系中,酶解物的DPPH自由基清除能力、还原力和亚铁离子螯合力都随着蛋白质量浓度的增加而增强。在蛋白质量浓度为5 mg/mL的条件下,DPPH自由基清除率为78.26%;酶解物的还原力为0.372(低于抗坏血酸);亚铁离子螯合率为46.81%。在亚油酸氧化体系中,酶解物(蛋白质量浓度10 mg/mL)对亚油酸过氧化物的抑制率为59.61%。     

长白山松子抗氧化肽制备及活性研究

以长白山松子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度56.5℃、加酶量7822U/g、底物质量浓度0.021g/mL、pH9.0、酶解时间240min。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,松子抗氧化肽在4mg/mL时对ABTS自由基的清除率和Fe2+螯合率达到100%,16mg/mL时对DPPH自由基清除率达到80.95%,24mg/mL时,对羟基自由基清除率达到100%。     

油莎豆粕小分子肽的制备、鉴定及功能分析

目的 研究油莎豆粕小分子肽的制备条件并对其组成与功能进行分析。方法 利用碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶水解油莎豆粕蛋白质，同时通过液相色谱-质谱法分析多肽的序列，利用生物信息学技术分析多肽功能。结果 油莎豆粕小分子肽制备的最佳工艺参数为：酶解时间2.4 h，底物质量浓度2 mg/mL，加酶量4%，碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶1:3，水解度为14.25%。对油莎豆粕小分子肽进行鉴定，共检测到30个肽段可信度高的油莎豆粕小分子肽分子，等电点范围是3.80~9.18，所有检测到的小分子肽分子均无毒性，具有调节血压、调节血糖、抗氧化的潜能。结论 经碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶两种复合酶水解得到的油莎豆粕小分子肽具有潜在的调节血压、血糖、抗氧化功能，功能活性值均在0.6以上。本研究为油莎豆肽产品开发提供了理论依据和数据支持。     

长白山榛子抗氧化肽制备及其活性研究

以长白山榛子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度50℃、加酶量8 000 U/g、底物浓度5.0%、pH9.5。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,榛子抗氧化肽在4 mg/mL时对ABTS自由基和DPPH清除率均达到100%,8 mg/mL时对·OH清除率和总还原能力分别达到85.46%和0.859,12 mg/mL时,对Fe~(2+)螯合率达到99.3%。     

不同苦荞蛋白酶解产物抗氧化活性研究

以苦荞蛋白作为底物,采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃蛋白酶加胰蛋白酶模拟体内蛋白消化,制备苦荞麦蛋白水解物。采用DPPH及ABTS~+·法比较不同的蛋白水解物与水解前苦荞蛋白的体外抗氧化活性。结果表明:不同蛋白酶水解产物水解度由高到低的顺序为:碱性蛋白酶胃蛋白酶~胰蛋白酶胃蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶,其中碱性蛋白酶水解苦荞蛋白水解度达29.95%。苦荞蛋白本身具有一定的抗氧化能力,其中DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别达71.91%及11.25%,但均显著低于阳性对照Vc。随着水解程度的增加,苦荞蛋白水解产物抗氧化能力逐渐增强。其中,以碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性最高,其DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别为91.65%(0.5 mg/mL)及16.67%(1 mg/mL),均显著高于原苦荞蛋白。其中,碱性蛋白酶水解产物的DPPH自由基清除率在高浓度(0.5mg/mL)条件下,与阳性对照Vc持平。同时碱性蛋白酶酶解产物抗氧化性(DPPH清除率及ABTS~+·清除率)显著优于其他蛋白酶解产物。因此,苦荞麦蛋白采用碱性蛋白酶解制备苦荞水解产物可作为天然的抗氧化剂。     

椰肉蛋白酶解及其产物的抗氧化活性研究

将新鲜椰肉粉碎脱脂,利用碱溶酸沉法制备椰肉蛋白。用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、Papain木瓜蛋白酶酶解椰肉蛋白,以DPPH自由基清除能力和水解度为指标对酶解过程进行分析,筛选出最适合制备抗氧化酶解物的酶为Alcalase碱性蛋白酶。然后采用单因素及多指标正交实验设计优化Alcalase碱性蛋白酶酶解条件,其中酶解温度和底物浓度对DPPH自由基清除率影响最大。优化后的制备参数为:酶解温度50℃,pH值10.5,加酶量14000 U/g,酶解时间7 h,底物浓度2%,该条件下水解液中蛋白含量为15.8 mg/mL,水解度和DPPH.清除率分别为29.16%和89.07%,椰肉蛋白酶解物显示出较强的抗氧化活性,接近同一浓度下谷胱甘肽的抗氧能力,比同浓度Vc的DPPH自由基清除率高3.33倍。     

大豆发酵食品毛豆腐中活性肽的制备及功效评价

为探究大豆发酵食品毛豆腐中活性肽的性能,研究酶解制备徽州呈坎罗氏毛豆腐活性肽的提取工艺,并对活性肽溶液进行分离纯化、体外抗氧化功效评价和氨基酸组成分析。结果显示：采用单酶酶解法制备毛豆腐活性肽,碱性蛋白酶制备的活性肽含量最高。响应曲面法优化酶解毛豆腐提取活性肽的最优工艺条件为料液比1∶50 g/mL、碱性蛋白酶用量2 500 U/g、酶解温度50.78℃、pH 10.37、酶解时间2.08 h,验证提取活性肽含量为（69.441±1.033）mg/g,比未加碱性蛋白酶提取活性肽含量提高66.07%。碱性蛋白酶酶解毛豆腐活性肽溶液的总还原力,对ABTS、DPPH和羟基自由基的清除率,比未加酶的活性肽分别提高了37.80%,22.91%,31.75%和62.46%。超滤筛分获得分子质量<3 ku和3～10 ku的活性肽溶液,对ABTS自由基的清除率比相同浓度酶解稀释原液分别提高了145.26%,74.71%;对DPPH自由基的清除率,比相同浓度酶解稀释原液分别提高了93.41%,72.44%。碱性蛋白酶酶解毛豆腐活性肽中蛋白质氨基酸占比73.01%,必需氨基酸占比37.74%,鲜味氨...     

大米蛋白抗氧化肽的酶法制备工艺研究及其优化

以大米蛋白粉为反应底物,采用酶解法制备大米蛋白抗氧化肽。以酶解液的水解度与对DPPH自由基的清除率为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶中筛选出木瓜蛋白酶为最佳用酶。通过BoxBehnken响应面设计法优化木瓜蛋白酶酶解大米蛋白抗氧化肽的工艺条件为p H值5.25、酶解温度61.4℃、加酶量5.6 U/m L、底物质量浓度5.3 g/100 m L。其酶解液稀释5倍后对DPPH自由基的清除率为94.8%。     

抗氧化活性林蛙胎卵多肽酶解酶的筛选

以东北林蛙胎卵为原料,以酶解液对DPPH自由基和羟自由基(.OH)清除率为指标,分别研究木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和胰蛋白酶在最佳酶作用条件下酶解时间对酶解液清除DPPH自由基、.OH的影响,筛选出适合生产抗氧化活性林蛙胎卵蛋白肽的碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶,再经过复合双酶酶解林蛙胎卵实验,结果表明,以中性蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解林蛙胎卵3h得到肽液的.OH清除率与DPPH自由基清除率最高,达到80.91%和70.45%。     

水牛奶乳清蛋白制备抗氧化活性肽工艺的研究

实验是以水牛奶为原料,分离纯化后得到乳清蛋白。利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶5种不同的蛋白酶对水牛奶乳清蛋白酶解以制备抗氧化活性多肽。酶筛选结果显示,中性蛋白酶是最适宜酶解水牛奶乳清蛋白制备抗氧化活性肽,其酶解液的还原能力和DPPH自由基清除率较其他4种酶高。探讨酶解反应时pH、温度、时间、酶浓度对酶解反应的水解度、酶解液的还原能力和DPPH自由基的清除率的影响,在单因素试验基础上,采用响应面法对酶解工艺进行优化。结果表明,中性蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳工艺参数为:pH为7.4,温度为50.5℃,酶与底物浓度比为2.1%,酶解时间5.0h,此时2mg/mL酶解物的DPPH自由基清除率为32.58%。实测结果与预测值吻合效果良好。     

肉制品加工中使用的辅料——抗氧化剂

氧化是导致食品品质劣变的一个重要因素,也是影响肉及肉制品品质的一个重要因素,防止食品氧化可以通过向食品中添加抗氧化剂实现,食品抗氧化剂是防止或延缓食品氧化,提高食品稳定性和延长食品储藏期的食品添加剂。本文综述食品抗氧化剂的作用机理,抗氧化剂使用的注意事项及食品中常用的抗氧化剂,并简要介绍抗氧化剂活性的测定及对其发展前景进行展望。     

Assessing and comparing antioxidant activities of lactobacilli strains by using different chemical and cellular antioxidant methods

Some lactobacilli strains had beneficial effects on human beings due to their antioxidant activities. In this study lactobacilli strains stored in our laboratory were screened for potential antioxidant activities by investigating their 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical scavenging activity, oxygen radical absorbance capacity, resistance to H₂O₂, and hydroxyl free radical scavenging activity; then the antioxidant activities of the screened strains were evaluated by cellular antioxidant assay and protection for HT-29 cells against H₂O₂ injury assay. The results showed that Lactobacillus plantarum Y44 could scavenge oxygen free radicals, inhibit the production of intracellular reactive oxygen species without creating obvious cytotoxic effects, and protect HT-29 cells against H₂O₂ injury evidenced by the significant decrease of the Bcl-2-associated X protein (Bax)/B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) ratio and heat shock protein 70 expression, increase of superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities, and decrease of malondialdehyde level of HT-29 cells damaged by H₂O₂. It was speculated that L. plantarum Y44 protect HT-29 cells against oxygen radical injury through scavenging reactive oxygen species and activating intracellular antioxidant enzymes. A significant correlation was observed among the results of the hydroxyl radical scavenging assay, protection assay for HT-29 cells against H₂O₂ injury, and the cellular antioxidant assay. The findings indicated that L. plantarum Y44 could be a probiotic candidate with antioxidant properties and combining several chemical antioxidant methods and antioxidant cellular models could be an effective procedure to screen lactobacilli strains with antioxidant activity.     

果蔬酚类物质抗氧化活性研究

采用基于不同机理的抗氧化方法对果蔬中常见的酚类物质单体,包括黄烷酮、多甲氧基黄酮、黄酮醇、酚酸等活性成分行了较全面的评价。结果显示酚类物质的抗氧化能力与其结构有密切关系。对天然产物或抗氧化剂的抗氧化能力的评价应该采用至少两种机理不同的抗氧化方法进行测试,才能取得较为客观有效的结论。     

HPLC法同时测定五层共挤膜中4种抗氧剂的含量

目的:建立五层共挤膜中抗氧剂1010、抗氧剂330、抗氧剂1076和抗氧剂168的含量测定方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为乙腈-四氢呋喃-水[61∶29∶10];紫外检测器,检测波长为280nm;流速为1.5m L/min;进样量为20μL。结果:抗氧剂1010、抗氧剂330、抗氧剂1076和抗氧剂168在2.4μg/m L~480μg/m L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。4种抗氧剂的回收率在83%~104%之间,RSD最大为3.5%。结论:该方法具有良好的专属性、检测灵敏度、精密度、线性和准确度,可用于五层共挤膜中抗氧剂的质量控制。     

酚胺类抗氧化剂复配对生物柴油抗氧化性能影响研究

采用Rancimat法研究3种酚类抗氧化剂丁羟基茴香醚(BHA)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯(PG)与3种胺类抗氧化剂四乙烯五胺(TEPA)、邻苯二胺(OPD)、二烷基二苯胺(ADPA)及其复配对菜籽油生物柴油诱导期的影响,并对其复配后协同抗氧化机理进行了分析。结果表明:菜籽油生物柴油的诱导期为2.03 h,达不到国家标准(6 h);6种抗氧化剂在添加量为0.4%时,抗氧化效果强弱顺序为TBHQTEPAPGBHAOPDADPA;酚类抗氧化剂与TEPA复配的抗氧化效果增加最明显,其次是酚类抗氧化剂与OPD复配,而ADPA与酚类抗氧化剂复配效果最差。     

抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(二)

综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法,并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。     

虾青素性质与开发

虾青素是一种很强抗氧化剂,该文阐述虾青素抗氧化、防紫外线、抗肿瘤和其它特性及在人体健康方面许多功能作用。     

玉米抗氧化肽的分离制备及其体外抗氧化活性的研究

本实验以2709碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉制备玉米抗氧化肽，SephadexG-25、DEAE52纤维素纯化玉米抗氧化肽，并用几种不同的实验体系研究其体外抗氧化活性。结果表明，玉米抗氧化肽制备的最佳酶解条件为：pH=9．5，[E]／[S]=10％，时间4h，温度55℃。该条件下制备的玉米抗氧化肽对超氧阴离子自由基和羟基自由基有强烈的清除作用，并能显著地抑制细胞和组织脂质过氧化反应的发生（P〈0．01）。氨基酸组成分析表明其富含丙氨酸和亮氨酸，摩尔分数分别为17．39％和13．04％，并且含有5种人体必需的氨基酸，占玉米抗氧化肽氨基酸总含量的39．13％，因此在具有较高生物学活性的同时也具有较高的营养价值。     

植物抗氧化(活性)肽的研究进展

详细阐述了植物抗氧化(活性)肽抗氧化的作用机理、检测评价方法、应用领域等研究进展。     

抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(一)

综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法,并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。