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以海洋枯草芽孢杆菌FA-7为出发菌株,经紫外诱变获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,并对该菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化,确定菌株Y-22的最佳产酶条件为可溶性淀粉4%,黄豆粕粉2.5%,CaCl20.025%,MgSO4·7H:00.35%,吐温-80O.15%;接种量4%,装液量50mt:250mL,初始pH值为5.5,发酵温度30℃,180r/min振荡培养96h。在此条件下,菌株Y-22的发酵液粗酶酶活为(910±11.3)1U/mL,是出发菌株的3.05倍。 相似文献
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以枯草芽孢杆菌 YL-P2、YL-F2作为出发菌株,分别采用紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变以及紫外线和硫酸二乙酯复合诱变,以脱脂牛奶平板法为初筛方法结合纤维蛋白平板复筛的方法选育出溶纤酶活力高的菌株, 获得了高产溶纤酶菌株 UV-8。UV-8溶纤酶活力达到2 314 IU/mL,与出发菌株相比,酶活力提高了2倍。结果表明,经多次传代后菌株 UV-8的溶纤酶酶活达到稳定,具有很好的潜在开发前景。 相似文献
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产豆豉纤溶酶高产菌株的筛选及诱变育种 总被引:1,自引:0,他引:1
从豆豉中筛选出1株产纤溶酶的菌株DC33,鉴定为芽孢杆菌属,经过紫外线、^60Co、硫酸二乙酯(DES)、亚硝基呱(NTG)诱变筛选得到突变株DCDU7,其产酶活力为644.77U/mL,是出发菌株的2.4倍。对DCDU7菌株进行了10代的培养,结果表明该突变株具有稳定的遗传性能。 相似文献
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海洋源纤溶酶高产菌株的诱变育种及液体培养基优化 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过60Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得了组分更简单、用量更少、更利于菌株产酶的培养基:可溶性淀粉41.6 g/L、黄豆粕粉26.2 g/L、CaCl2 1.0 g/L,KH2PO4 2.0 g/L。在此基础上,3 L摇瓶放大试验结果显示,菌株F8-C的产酶量达到(3 231±21) U/mL,较出发菌株H-A-3提高44.8%。结果表明利用60Co辐射诱变育种,并采用统计学方法优化培养基,对于提高枯草芽孢杆菌纤溶酶的产酶量是一种有效策略。该研究结果也将为下一步发酵罐扩大试验奠定基础。 相似文献
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枯草芽孢杆菌DC-12是从豆豉中筛选得到的高产纤溶酶菌株。以黑豆为原料,曲霉前发酵制得豆豉半成品,研究以该半成品为基质的豆豉纤溶酶的固态发酵条件优化。结果表明,枯草芽孢杆菌DC-12的最佳固态发酵条件为:豆豉半成品35g/250mL三角瓶,葡萄糖8.0%,初始含水量1.2mL/g(豆豉半成品),初始pH值7.0,接种量12%,培养温度30℃,培养时间84h,优化条件下的平均产酶量达1427 IU·g-1(豆豉半成品),为未优化前酶活的3.60倍。 相似文献
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枯草芽孢杆菌产纤溶酶发酵条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在实验室筛选到一株产纤溶酶较强的枯草芽孢杆菌,通过研究发现其最适产酶的发酵条件为:ρ(葡萄糖)=20g/L、ρ(豆渣)=60g/L、ph7.0、温度37℃、种龄24h、接种量10%。发酵第四天产酶最高,最大产酶量可达713.11IU/mL。 相似文献
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产纤溶酶菌株的分离和鉴定及纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,实现纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达.方法:通过纤维蛋白平板法从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定该菌株;通过PCR扩增豆豉纤溶酶基因,构建pYES2-DFE重组质粒,转化酿酒酵母H158感受态细胞,经β-半乳糖诱导表达后,用纤雏蛋白平板法分别检测发酵液上清和菌体破碎上清的纤溶酶活性.结果:鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);活性检测结果是酿酒酵母发酵液上清具有纤溶酶活性,而菌体破碎上清没有活性.结论:豆豉纤溶酶基因在酿酒酵母中实现了分泌表达. 相似文献
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为了提高菌株产酶能力,研究了紫外线处理对枯草芽孢杆菌BF7658产酸性α-淀粉酶的影响。结果表明:采用30W紫外线照射90s获得较好的突变效果,利用变色圈法初筛结合摇瓶发酵复筛,筛选得到一株理想的突变株UV-12,其酶活为3418.8U/mL,比出发菌株提高了59.7%。对UV-12进行紫外线二次诱变,酶活提高不显著,表现出一定“抗性”。 相似文献
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从豆豉中筛选出的产豆豉溶栓酶的菌株分别有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtiilis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。其发酵工艺有固体发酵和液体发酵。豆豉纤溶酶的酶学性质包括酶的分子量、酶的等电点、酶的稳定性、酶的最适反应温度和pH值、各种抑制剂对酶活性的影响等。酶的分离纯化要根据具体实际情况,对过滤、离心、盐析、超滤、凝胶过滤和层析分离等提取方法进行不同组合。酶活的测定包括琼脂糖—纤维蛋白平板法、纤维蛋白块溶解时间法、血清板法、肽底物法、酶联免疫吸附法。 相似文献
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