海嘧啶对小白鼠S_(180)、EAC和H_(22)肿瘤细胞膜钠泵活性的影响

目的观察海嘧啶对小白鼠实体型肿瘤(S180)和腹水型肿瘤(EAC,H22)细胞膜钠泵活性的影响。方法荷瘤小鼠分为治疗组和对照组,分别测定各组瘤细胞膜钠泵活性。结果海嘧啶对小鼠S180、EAC及H22肿瘤细胞膜钠泵活性有明显的抑制作用。结论海嘧啶抗肿瘤的药理机制与其能够抑制肿瘤细胞膜钠泵活性有关。     

循环应用低剂量环磷酰胺对黑色素瘤荷瘤小鼠调节性T细胞的影响及抗瘤作用

目的观察循环应用低剂量环磷酰胺(CTX)对黑色素瘤荷瘤小鼠调节性T细胞(Treg)的影响及抗瘤作用。方法通过皮下接种黑色素瘤细胞B16制备黑色素瘤荷瘤小鼠模型;对荷瘤小鼠分别经腹腔单次或循环注射CTX,每隔7d给药1次,共3次,应用流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Treg的含量;培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC),将DC与脾T淋巴细胞混合培养,应用ELISA法检测脾T淋巴细胞干扰素γ(IFNγ)的分泌量;同时测量肿瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线,并观察各组荷瘤小鼠自身免疫病的发生情况。结果CTX的最佳应用剂量为100mg/kg。随着荷瘤时间的延长,荷瘤小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+/CD4+的比值呈逐渐升高趋势。单次应用CTX抑制Treg的时间较短,而循环应用CTX能够延长对Treg的抑制,使其维持在相对较低的水平;循环应用CTX显著提高了荷瘤小鼠脾T淋巴细胞IFNγ的分泌水平。单次和循环应用CTX均未能延缓肿瘤的生长,两组小鼠均未见免疫性白斑及明显的化疗毒副反应。结论循环应用CTX能更加有效地调控Treg,从而促进DC对T淋巴细胞的抗原特异性激活,这将会提高DC疫苗的抗瘤效果。     

治疗用卡介苗抗肿瘤动物实验方法的建立

目的 建立治疗用卡介苗在小鼠体内抗肿瘤的药效学实验方法。方法 观察治疗用卡介苗(BCG)对小鼠实体瘤S180和腹水瘤(EC)的抑瘤作用。结果BCG可明显减轻S180荷瘤鼠的瘤重,其瘤重抑制率>30％;可明显延长EC腹水瘤小鼠的生存时间,其生命延长率>75％。其中以12.5％和6.25mg/kg两剂量组的效果较佳。结论 该方法可用于卡介苗抗肿瘤动物药学实验。     

环磷酰胺对MFC荷瘤小鼠影响的1 H NMR代谢组学初步研究

实验采用核磁共振(~1H NMR)代谢组学方法,对MFC荷瘤小鼠和环磷酰胺(CTX)干预MFC荷瘤小鼠的肝脏提取物进行代谢谱分析,结合PCA和OPLS-DA多元数据分析方法,分析差异性代谢物和代谢通路,探索CTX抗肿瘤的作用机制。在肝脏提取物中分析确定了6个潜在的差异代谢物:丙酮酸、羟脯氨酸、肌苷、烟酰胺、胆碱、甘油磷酸胆碱。CTX的抗肿瘤作用可能与调节氨基酸代谢、能量代谢、核酸代谢和脂质代谢等代谢通路有关。     

皖南红豆杉枝叶中总黄酮抗肿瘤活性研究

以MTT法考察皖南红豆杉枝叶中总黄酮的体外抗肿瘤活性;以小鼠移植瘤模型测定总黄酮对荷瘤小鼠抑瘤率和腹腔巨噬细胞吞噬能力,研究其体内抗肿瘤活性和免疫调节作用。结果表明,总黄酮对S180细胞生长有显著抑制作用,呈现剂量依赖关系。体内试验表明,与生理盐水组相比,总黄酮对小鼠S180实体瘤有显著抑制作用（P〈0.01）,可提高荷瘤小鼠的脾指数。与环磷酰胺组相比,总黄酮可使荷S180实体瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力显著升高（P〈0.01）,提示其对小鼠无免疫抑制作用。     

氨氯地平对小鼠肝癌H_(22)细胞的抑制作用及其机制

目的探讨氨氯地平对小鼠肝癌H22细胞的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测氨氯地平对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响。建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,观察氨氯地平对荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织的病理改变;免疫组织化学方法检测肿瘤组织中bcl-2和bax蛋白的表达水平。结果氨氯地平作用48h可显著抑制小鼠肝癌H22细胞增殖,且呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为5.6×10-3mg/ml。体内试验显示,氨氯地平(3和10mg/kg·d)灌胃给药10d能显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长;HE染色可见,氨氯地平给药组小鼠肿瘤细胞核染色变浅,细胞排列紧密;免疫组化显示,氨氯地平给药组小鼠肿瘤组织内bcl-2蛋白表达下调,而bax蛋白表达上调。结论氨氯地平具有明显的抑瘤作用,其抑瘤机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡相关。     

大黄、当归、木香的不同配伍抑瘤作用的药效学研究

目的 观察大黄.当归,木香的不同配伍组合对Lewis肺癌.肉瘤-s180、艾氏腹水癌荷瘤小鼠抑瘤作用的影响,探讨.大黄.当归、木香的最佳配伍关系.方法 制备lewis.肉瘤-s180、艾氏腹水癌荷瘤小鼠动物模型,随机分为模型组,大黄.当归组,大黄组,大黄、木香组,大黄.木香、当归组;通过测定荷瘤小鼠的瘤重.计算抑瘤卒观察不同配伍组对肿瘤生长的影响.结果 与模型组比较,大黄当归组对Lcewis肺癌、肉瘤-sI80.艾氏腹水癌抑瘤率分别达到78.52%、44.57%.64.95%;大黄.木香.当归组对Lewis ,肺癌.肉瘤-s180,艾氏腹水癌的抑瘤率分别达到4 7.53%、32.57%、52.99%,两个用药组合均具有很好的抑瘤作用(P＜0.05).     

肿节风注射液对荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖活力及NK细胞活性的影响

目的研究肿节风注射液(ZJF)对荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖活力及NK细胞活性的影响,探讨其抗肿瘤作用的机制。方法无菌取C57BL/6纯系小鼠脾脏,制成5×106个/ml的单个脾细胞悬液,MTT法检测不同浓度(50、25、12.5、6.25和3.13 mg/ml,以生药量计)的ZJF对正常小鼠T淋巴细胞增殖的影响。将近交系615小鼠经左腋皮下注射小鼠前胃癌Fc细胞(1×106个/ml,0.2 ml/只),复制荷瘤小鼠模型,并随机分成5组:ZJF低、中、高剂量组(给药剂量分别为2、10、20 mg/kg,以生药量计)、CTX组[0.3 g/(kg·3 d)]及阴性对照组(生理盐水0.1 ml/10 g),MTT法检测ZJF对荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖及NK细胞活性的影响。结果 ZJF可显著促进正常小鼠T淋巴细胞的增殖(P<0.05),且呈剂量依赖性;ZJF低、中、高剂量组荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖活力明显高于阴性对照组(P<0.05),且呈剂量依赖性,ZJF中、高剂量组荷瘤小鼠NK细胞的活性明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论 ZJF可促进正常小鼠与荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖活力,增强NK细胞活性,为其抗肿瘤作用机制的研究提供了实验依据。     

RGD特异性结合多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因的克隆表达及其抑瘤活性

目的构建RGD多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因,进一步提高rmhTNF的临床疗效。方法应用基因重组技术构建了CRGDC与rmhTNF的融合基因,在E.coliDH5α中诱导表达重组蛋白RGDrmhTNF,采用溶菌酶法裂解菌体,裂解上清经硫酸铵沉淀、阴阳离子交换层析纯化后,用S180荷瘤小鼠模型和L929细胞体外杀伤实验测定纯化的重组蛋白RGDrmhTNF的体内、外杀伤活性。结果正确构建了编码RGDrmhTNF融合基因,重组工程菌升温诱导后以部分可溶形式表达RGDrmhTNF,纯化后纯度为96.88%,体外对L929细胞杀伤作用的比活性为3.6×108IUmg,与rmhTNF相当(3.0×108IUmg)。在S180荷瘤小鼠模型中,当RGDrmhTNF剂量为12×105IUkg时,对肿瘤的生长抑制率为84.9%,显著高于相同剂量的rmhTNF(肿瘤抑制率为59.09%,P<0.01)和环磷酰胺组(肿瘤抑制率为71.21%,P<0.01)。结论重组蛋白RGDrmhTNF可以提高rmhTNF的治疗效果。     

星点设计-响应面法优化芦荟多糖超声波提取工艺以及其抗氧化活性研究

试验采用星点设计法优化芦荟多糖超声提取工艺,以芦荟多糖对二苯代苦味酸(DPPH)自由基的清除作用评价其抗氧化活性。结果表明:最佳提取工艺是温度为43℃,时间为41 min,功率为72%,液料比为60:1,芦荟多糖的提取率为11.9%。芦荟多糖对DPPH自由基有较强的清除作用,并与多糖质量浓度呈一定的量效关系。说明芦荟多糖较好的抗氧化活性,作为一种天然的抗氧化剂具有较好的应用前景。     

旋毛虫对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞的作用

目的观察旋毛虫感染对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞生长的作用。方法用不同剂量的旋毛虫感染BALB/c小鼠,并在不同时间接种HCT-8细胞,荷瘤20 d后解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量,计算抑瘤率,并检测T淋巴细胞亚群。结果各实验组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、未长瘤小鼠比例、小鼠死亡率和抑瘤率均显著高于对照组;先接虫后荷瘤组抑瘤效果优于先荷瘤后接虫组。结论旋毛虫对BALB/c小鼠体内的人结肠癌HCT-8细胞的生长有一定的抑制作用。     

麦秆活性成分对小鼠S_(180)细胞增殖的抑制作用

为研究测定麦秆中分离的不同提取成分对小鼠腹水瘤S180细胞增殖的抑制效果,以干燥麦秆为原料,水、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和正己烷等为提取剂,透析、活性炭吸附和重结晶方法初步分离,硅胶柱层析进一步分离,得到数种麦秆提取成分,并用MTT〔3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐〕法测定了其对小鼠S180细胞生长的抑制作用;用显微摄像观察了对S180细胞的抑制作用,血细胞计数法测定了对正常脾细胞的毒性作用。结果表明,用正己烷提取得到的粗提物E对S180细胞抑制作用较强,E初步分离得到的分离组分F2抑制作用较好,F2硅胶柱层析得到分离组分I抑制效果最好,I在5～160 mg/L范围内对S180细胞的增殖均有抑制作用,呈现出良好的剂量-效应关系,IC50为68.0 mg/L;I对体外培养的正常脾细胞有轻微毒性,在68.0 mg/L质量浓度下处理48 h后的抑制率为9.3%。     

旋毛虫iRNA对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的抑制作用

目的观察旋毛虫免疫核糖核酸(iRNA)对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的抑制作用。方法以不同剂量旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫ICR小鼠、家兔和山羊,ELISA检测抗体效价达1:1024的最低免疫剂量确定为最佳免疫剂量,同时取各实验动物肝、脾和淋巴结,制备旋毛虫iRNA,并进行鉴定。以不同剂量iRNA接种BALB/c小鼠,并在不同时间接种SP2/0肿瘤细胞(试验分为先荷瘤和后荷瘤进行)。在荷瘤20d时,处死小鼠,测量肿瘤体积和重量,并检测脾脏T淋巴细胞亚群的变化。结果旋毛虫肌幼虫可溶性抗原的最佳免疫剂量分别为:ICR小鼠:300μg/只;家兔:2mg/只;山羊:20mg/只。制备的旋毛虫iRNA各项指标均合格。各试验组小鼠肿瘤体积和重量均小于相应的对照组,且差异均有统计学意义;各试验组小鼠的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值较相应的对照组均有不同程度的增高。在后荷瘤试验组中,1mg组抑瘤效果最好;在先荷瘤试验组中,4mg组抑瘤效果最好。结论旋毛虫iRNA对BALB/c小鼠体内SP2/0肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用。     

芦荟多糖的含量测定

芦荟具有很高的药用价值 ,品种极多。我们从中华芦荟中利用热水浸提法分离提取出了水溶性的多糖 ,并应用紫外可见分光光度法对多糖含量进行了测定 ,经苯酚 -硫酸显色 ,于 489nm处测定 ,其中的多糖含量为 7.6 9%,该法测定芦荟多糖含量 ,简单、快速、灵敏 ,而且结果稳定。     

索氏提取芦荟中芦荟苷的工艺研究

本实验利用索氏法提取中华芦荟中的芦荟苷,研究了料液比、乙醇浓度和提取时间这三种单因素以及正交试验,得到不同因素对芦荟苷提取率的影响。实验结果显示:当提取条件为液料比1∶10,乙醇浓度70%,提取时间12h时,芦荟苷的提取率最大,为1.22 mg/g。     

吴茱萸碱的体外抗肿瘤活性研究

采用MTT法在不同的时间点检测了不同浓度的吴茱萸碱对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源HepG2肝癌细胞的抑制情况,探讨了吴茱萸碱的体外抗肿瘤活性。结果表明,吴茱萸碱在一定浓度下对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源HepG2肝癌细胞有明显的抑制作用,且随药物浓度的增大,抑制率逐渐增大,与正常组比较作用极其显著。吴茱萸碱作用24h时,对H22肝癌细胞的生长抑制作用较好,IC50值最小(17.49μg·mL-1);作用48h时,对S180肉瘤细胞的抑制作用相对较好,IC50值最小(17.54μg·mL-1);作用72h时,对HepG2肝癌细胞的抑制作用最好,IC50值最小(13.26μg·mL-1)。     

蒺藜对卵巢癌裸鼠生长的实验研究

目的:观察蒺藜螺甾皂苷对卵巢癌动物模型肿瘤生长的抑制影响。方法:采用BALB/c小鼠接种人卵巢癌实体瘤方法建立卵巢癌模型,用蒺藜螺甾皂苷灌胃0.5ml/只,每日1次,连续30天。每周连续测量体重和肿瘤大小2次,计算瘤体的体积,观察裸鼠的生存时间,观察蒺藜螺甾皂苷对肿瘤生长的影响。结果:蒺藜螺甾皂苷对裸鼠荷瘤有明显的抑制作用;蒺藜螺甾皂苷能延长荷瘤裸鼠的生存期。结论:经初步研究,蒺藜螺甾皂苷有抑制人卵巢癌肿瘤生长作用,可延长生存期,值得进一步探讨。     

抗肿瘤重组鸡痘病毒体外抑制骨肉瘤细胞S180的效应

目的探讨Apoptin、HN和IL18融合基因的重组鸡痘病毒(vFV3)对骨肉瘤细胞S180的抑制效应。方法以vFV3感染人骨肉瘤细胞S180,应用MTT法检测细胞活性,流式细胞仪分析vFV3感染致S180细胞周期变化,并用Rhodamine123染色结合FCM检测线粒体跨膜电位,从细胞生物学角度探讨vFV3致S180肿瘤细胞凋亡的途径。结果vFV3感染可有效抑制S180肿瘤细胞,杀伤率达46.8%。感染使S180肿瘤细胞线粒体膜电位下降,导致S180肿瘤细胞凋亡。结论vFV3可诱导S180肿瘤细胞凋亡,并主要通过线粒体途径诱导凋亡。     

芦荟苷联合顺铂对A549细胞增殖和凋亡的影响

探讨抗肿瘤天然药物芦荟苷(Aloin)与一线化疗药物顺铂(Cisplatin,CDDP)联合对体外培养的肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。采用MTT法检测用不同浓度的顺铂、芦荟苷单独或联合作用于A549细胞后对其相关细胞活力的影响。用流式细胞术分析Aloin-CDDP联用对A549细胞周期、细胞凋亡以及线粒体膜电位的变化。采用Western blot法检测Cleave-Caspase 9、Cleave-Caspase 3蛋白表达的变化。MTT结果显示芦荟苷(200μmol/L)和顺铂(16μg/mL)联用具有协同作用,可以抑制A549细胞增殖并可上调Cleave-Caspase 9、Cleave-Caspase 3蛋白的表达。芦荟苷与顺铂联合作用于A549细胞后,芦荟苷能有效降低顺铂的使用浓度,并提升其诱导细胞凋亡的能力。     

金黄葡萄球菌肠毒素C2对小鼠移植瘤的抑制作用

目的采用小鼠移植瘤模型,对金黄葡萄球菌肠毒素C2的抗肿瘤作用进行研究,以进一步揭示超抗原在肿瘤治疗方面的意义。方法从金葡菌发酵液中提纯SEC2蛋白,并经SDS-PAGE及测序分析;构建小鼠S180肉瘤和Lewis肺癌移植瘤模型,分别腹腔注射高、中、低剂量(800、400、200 ng/kg)的SEC2,连续给药10 d,同时以环磷酰胺为阳性对照,生理盐水为阴性对照。于给药后第11天处死小鼠,将肿瘤组织分离并称重,比较SEC2对S180肉瘤及Lewis肺癌移植瘤的抑瘤效果。结果在相对分子质量约30 000处可见目的条带,与理论值相符,N-未端氨基酸测序与文献报道一致;SEC2对两种移植瘤均产生较明显抑制作用,高、中、低剂量SEC2对S180肉瘤的抑瘤率分别达到50.60%、31.81%和19.38%,对Lewis肺癌的抑瘤率分别达到55.62%、45.70%和37.78%。结论从动物水平上确认了SEC2的抑瘤效果,为进一步开展超抗原抗肿瘤研究奠定了基础。