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综合比较了001 ×7、201 ×7离子交换树脂、MWCO100透析袋和DA201-C大孔吸附树脂对棉籽蛋白水解液的脱盐效果,分析了DA201-C树脂脱盐对棉籽蛋白水解液ACE抑制活性和氨基酸组成的影响,并对Sephadex G-25分离纯化获得ACE抑制肽各组分进行活性测定.结果表明:DA201-C大孔吸附树脂的脱盐效果最好,控制流速为3 mL/min时,脱盐率可达到94.78%,氮回收率为86.32%,脱盐后疏水性氨基酸得到了有效富集,ACE抑制率显著提高.分离纯化后的ACE抑制肽各组分中,组分Ⅲ的抑制率最高,分子质量小于1000u. 相似文献
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本实验通过静态吸附量和吸附率的测定确定血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽分离富集的最适操作条件,考察了pH 值、盐浓度和乙醇浓度对ACE 抑制肽吸附性能的影响。结果表明,上样pH2.0 对ACE 抑制肽的脱盐效果最佳,70% 乙醇作为洗脱剂时效果最好,并且原样液的盐浓度保持不变。因此DA201-C 大孔吸附树脂综合性能较好,适合于ACE 抑制肽的分离纯化。 相似文献
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大豆肽的离子交换色谱分离及其活性评价 总被引:5,自引:0,他引:5
采用Sephadex C-25阳离子交换剂对经过DA201-C型大孔吸附树脂脱盐、乙醇梯度洗脱(75%乙醇洗脱组分)的Alcalase水解大豆肽(DH14%)进行进一步的分离纯化,并对分离得到的各组分ACE抑制活性进行了评价。试管试验确定的SephadexC-25色谱分离条件为:上样量0.004g/mLIE,起始缓冲液为1M醋酸,上样吸附率为61.19%。经SP-Sephadex C-25分离得到6个组分,其中未吸附的3个组分ACE抑制活性低,但NaCl梯度洗脱的3个组分ACE活性均为60%左右,从纯化ACE抑制活性肽的角度考虑,分离效果比SephadexG-15差。 相似文献
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本研究以燕麦蛋白为原料,分别选用Alcalase、Neutrase 和Protamex 进行单独或联合水解,经活性炭YD-303脱色、大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ脱盐及分级纯化、Sephadex G-25 凝胶色谱柱进一步分离,以获得高纯度、高活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。结果表明:单酶反应时,Alcalase 水解2h所获得的产物对ACE 的抑制率可达85.40%;YD-303 处理燕麦蛋白酶解液脱色最优工艺为添加量1.5%(W/V)、pH3.5、温度40℃、脱色时间75min。利用75% 乙醇洗脱大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ所获得的组分ACE 抑制活性最高,其经Sephadex G-25 进一步分离纯化,得到四个分离组分,第四组分的ACE 抑制活性最高,抑制率为95.6%。 相似文献
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比较6种大孔树脂对苋籽ACE抑制肽的吸附-解吸效果,从中筛选出合适该活性肽分离纯化的树脂,并对其吸附-解吸工艺进行优化.结果表明,DA201-C树脂最适合苋籽ACE抑制肽的纯化,在样品质量浓度10mg/mL,pH为5,上样量1BV,流速6mL/min时,树脂的吸附效果最佳,吸附率达83.69%,再用5BV体积分数75%乙醇,以5mL/min的流速进行洗脱,此时几乎把吸附的多肽全部洗脱下来,解吸率为98.69%.经树脂纯化,样品的蛋白纯度为89.47%,脱盐率为88.86%,短肽含量提高了20.96%,ACE抑制活性提高了27.91%. 相似文献
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以猪血红蛋白的胃蛋白酶水解液为原料,依次通过大孔吸附树脂DA201-C、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20进行纯化,最终得到了3个降血压组分;并收集ACE抑制活性最高的组分α-Ⅱ,对其进行理化性质的研究.结果表明,酶解液经过大孔树脂DA201-C脱盐后,IC50为0.87mg/mL;继续经过葡聚糖凝胶Sephadex LH-20分离得到的猪血红蛋白ACE抑制肽(α-Ⅱ)的IC50为0.21mg/mL.分离后的猪血红蛋白ACE抑制肽(α-Ⅱ)在pH为7时,溶解度最低,为50.37%;胃蛋白酶对其活性影响不显著.温度在25~55℃之间以及中性和偏酸性的条件下时,α-Ⅱ具有较好的热稳定性;当NaC1浓度大于0.6mol/L时,其活性急剧下降. 相似文献
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大孔树脂法纯化茶皂素研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了提高茶皂素的纯化效率以实现工业化生产,采用静态吸附试验与动态吸附试验相结合的方法筛选合适的大孔树脂,并在单因素试验的基础上,采用正交试验优化工艺参数.重点考察了上样速度、溶剂乙醇体积分数、上样液质量浓度对动态吸附率的影响以及洗脱剂乙醇体积分数、洗脱剂流速、洗脱剂体积对动态解吸率的影响.优化出D4020大孔树脂的动态吸附工艺参数为:上样速度0.9 mL/min,溶剂乙醇体积分数20%,上样液质量浓度27 mg/mL;动态解吸工艺参数为:洗脱剂乙醇体积分数60%,洗脱剂流速1.8 mL/min,洗脱剂体积2.0 BV. 相似文献
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研究新疆哈密大枣中环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的分离纯化工艺。以吸附解吸率为衡量指标,通过对比4种大孔树脂的静态吸附与解吸,确定纯化哈密大枣提取液中cAMP的最佳树脂;通过大孔树脂动态吸附与洗脱,考察上样浓度、p H值、流速等因素,确定cAMP分离纯化的最佳工艺。结果表明:HZ-802型树脂纯化效果较好,动态吸附的最佳条件为:上样体积220 mL,上样液流速2.0 m L/min,上样液浓度20μg/mL,上样液pH 5;动态解析的最佳条件:洗脱液40%乙醇,洗脱液体积120 mL,洗脱液流速为3 mL/min;经纯化后得到环磷酸腺苷浓度为38.24μg/mL,冷冻干燥后粗提物中cAMP含量为0.10%。 相似文献
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目的:为探索适宜分离和纯化桑白皮多糖的大孔树脂,研究其最佳纯化工艺参数。方法:通过静态吸附-洗脱试验对十种不同型号大孔树脂(H103、HP20、AB-8、X-5、D-101、DM301、DA-201、NKA-9、HPD-722、HPD300)的吸附量、吸附率及解吸率进行考察,优选最佳纯化树脂,并研究了上样液pH、上样质量浓度、上样速度、洗脱剂体积分数、洗脱剂用量及洗脱流速对其纯化工艺的影响,确定最佳纯化工艺参数。结果:D-101型为最优树脂,最佳上样条件为:pH=3.0、上样浓度为4.0 mg/mL、上样速度为2.0 BV/h;最佳洗脱条件为:75%的乙醇洗脱液、洗脱剂用量为3.5 BV、流速为1.0 BV/h。经过该工艺纯化后,桑白皮中多糖的纯度由16.12%±1.20%提高到了74.45%±1.15%。结论:D-101型大孔树脂能够很好的富集、纯化桑白皮中的多糖,为更高效的利用桑白皮资源提供了理论依据。 相似文献
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大孔吸附树脂分离纯化洋葱皮黄酮的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以黄酮含量为指标,比较6种大孔吸附树脂对洋葱皮黄酮的吸附和解吸效果。通过静态吸附与解吸实验,筛选出效果较好的X-5树脂进行动态实验研究。结果表明:X-5树脂纯化洋葱皮黄酮的工艺条件为吸附流速2mL/min、上样溶液pH5.0、上样液质量浓度0.5mg/mL、50mL 80%乙醇作为洗脱液,洗脱流速lmL/min。经X-5树脂纯化后,洋葱皮黄酮纯度从7.95%提高到80.78%。三次重结晶后其纯度可达94.5%。该方法简单可行,纯化效果好,适合于工业化生产。 相似文献
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为优化大孔树脂纯化黄芪毛蕊异黄酮提取物的最佳工艺条件,比较七种不同类型大孔树脂(H103、D101、AB-8、DM130、HPD-400、DM301、HPD-600)的静态吸附-洗脱性能,筛选合适树脂型号后,采用单因素与响应面试验确定最佳纯化工艺条件。结果表明,HPD-400树脂对毛蕊异黄酮的吸附纯化效果最佳。随着温度的升高,树脂吸附量下降,吸附过程符合二级动力学模型特征。大孔树脂纯化黄芪毛蕊异黄酮的最佳工艺为:质量浓度为2.97 mg/mL,pH4.9的毛蕊异黄酮提取液60 mL以1 mL/min流速上样至HPD-400树脂后,经140 mL体积分数为79.8%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,产物中毛蕊异黄酮含量由2.17%提高至10.36%,约为纯化前4.8倍。因此,该工艺条件适于黄芪毛蕊异黄酮纯化。 相似文献
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采用膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素。粗茶皂素经陶瓷膜和360Da纳滤膜初步分离浓缩,得率为62.1%,纯度为79%;根据静态和动态吸附筛选试验,选择大孔树脂AmberliteXAD7HP对茶皂素进一步纯化,通过单因素试验,确定最佳工艺参数为:上样流速0.5 mL/min、上样液浓度30mg/mL;以10%,40%,70%的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱剂流速1mL/min,洗脱液体积为3BV,该条件下纯化,茶皂素最终得率为55.3%,纯度可达95%。该试验表明膜分离与大孔树脂联用技术可得到高纯度的茶皂素,是一种可工业化推广的方法。 相似文献
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为研究铜藻多酚的分离纯化工艺及抗氧化活性。在超声辅助提取铜藻多酚的基础上采用大孔吸附树脂柱层析法分离纯化铜藻多酚提取物,以VC为对照采用体外实验分析其抗氧化活性。结果显示:大孔吸附树脂LX-158具有最佳的吸附和解析条件,静态吸附和解析平衡时间为5 h,动态吸附和解析的最佳条件为:粗提液和洗脱剂流速为3 mL/min,上样体积为10 mL,洗脱剂为40%乙醇溶液,洗脱剂体积为120 mL。此条件下铜藻多酚纯度从7.52%提高到40.31%。体外抗氧化活性结果显示:不同浓度的铜藻多酚对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基有明显的清除作用和Fe3+还原力,随着多酚浓度增大其抗氧化能力增强,IC50值分别为6.60μg/mL、75.70μg/mL、2.22 mg/mL、5.62 mg/mL。实验证明该纯化工艺可行且稳定,可以作为铜藻多酚纯化的工艺条件。 相似文献
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