羊肚菌胞外多糖体外降血糖降血脂活性研究

羊肚菌是一种名贵食药用真菌,具有较高的营养价值和药用功效。该研究通过深层发酵培养羊肚菌菌丝体,并分离纯化获得羊肚菌胞外多糖(Morchella esculenta extracellular polysaccharides,MEP),检测MEP的体外降血糖和降血脂活性。研究结果表明:羊肚菌在液体深层发酵条件下生长迅速,一般5 d～6 d即可获得较高的生物量,胞外多糖产量较高,通过脱蛋白、脱色和透析后,获得MEP混合物,过DEAE-纤维素52凝胶柱后发现MEP主要为中性多糖,并且含有少量的酸性多糖,MEP对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性具有一定的抑制作用,在高浓度条件下其抑制率分别可以达到20%和40%左右,同时MEP对脂肪酶活性具有较强的抑制作用,在浓度为5 mg/mL时抑制率为30%,MEP对胆酸盐的结合效率结果显示MEP对甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠的结合率达到了35%和30%,最后检测了MEP对葡萄糖的扩散速率影响,结果表明MEP可以在一定程度上抑制葡萄糖在溶液条件下的扩散。该研究结果显示,MEP具有较强的降血糖降血脂活性,有望作为相关疾病治疗的辅助药物。     

响应面法优化假单胞菌产胞外多糖发酵培养基

采用响应面法对假单胞菌（Pseudomonas sp.）FJY5-13生产胞外多糖的发酵培养基进行优化。通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken试验构建回归方程,结果表明,最佳发酵培养基成分为甘油83.0 g/L、酵母浸粉5.7 g/L、NaCl 8.2 g/L、柠檬酸钠5 g/L、（NH4）2SO4 1 g/L、玉米浆粉7.5 g/L,在此条件下,胞外多糖的产量为10.50 g/L,约为优化前多糖产量7.9 g/L的1.3倍。     

灵芝液体发酵产胞外多糖培养基的优化

采用摇瓶液体发酵法探讨了培养基组成对灵芝胞外多糖产量的影响。单因素和正交试验结果表明,摇瓶发酵培养基的最佳配方为豆饼粉0.2%、蔗糖2%、KH_2PO_4 0.1%、FeSO_4 0.05%、VB10.005%,其中豆饼粉和蔗糖为显著性因素。在此条件下,胞外多糖产量达213.9 mg/100 mL。     

产胞外多糖泰山羊肚菌液体培养条件的优化

对泰山羊肚菌产胞外多糖 (exopolysaccharides,EPS)的液体培养基组成和发酵条件进行了优化 ,最适碳源是葡萄糖 ,最适氮源是NH4NO3 。正交试验确定最佳培养基组成为麸皮 2 0 0 g/L ,葡萄糖 30 g/L ,NH4NO3 1g/L ,KH2 PO42 g/L ,MgSO4·7H2 O 1 5 g/L。最佳发酵条件为 2 5℃ ,起始 pH值 6 5 ,装液量 10 0mL/瓶 ,接种量10 % ,摇床转速 2 0 0r/min ,发酵时间 4d。在此条件下 ,其胞外多糖含量 (2 135 4 4 1mg/L)比对照(14 5 4 6 39mg/L)提高了 4 6 8%。     

基于胞外多糖和菌丝生物量的香菇发酵培养基优化

为研究液体发酵培养基对香菇胞外多糖和菌丝生物量的影响,以秦巴山区香菇808菌株为试材,采用Plackett-Burman设计实验、最陡爬坡实验和响应曲面法对其液体发酵培养基的碳源、氮源和其它营养物质进行优化。结果表明,香菇胞外多糖发酵培养基的最佳组合是（g/500 m L）:蔗糖7.18,玉米粉15.00,麦麸14.05,酵母膏0.35,KH2PO40.50,Mg SO4·7H2O 0.50,p H自然,胞外多糖实测值为0.967 g/500 m L;香菇菌丝生物量发酵培养基的最佳组合是（g/500 m L）:蔗糖7.18,玉米粉15.00,麦麸14.05,酵母膏0.35,KH2PO40.75,Mg SO4·7H2O 0.50,p H自然,菌丝生物量实测值为28.146 g/500 m L。优化后的香菇胞外多糖产量和菌丝生物量较优化前分别提高12.44%和11.00%。此研究结果可为香菇液体发酵的中试生产提供理论依据。      

黑木耳胞外多糖深层发酵培养基组成的优化

研究了营养性因子对黑木耳深层发酵的影响.结果表明,葡萄糖、酵母膏、豆饼粉有利于黑木耳菌体生长和胞外多糖的形成.正交优化实验得到最佳培养基组成:葡萄糖40g/L,豆饼粉9g/L,KH2PO44g/L,无机盐X22g/L.     

银耳芽孢多糖发酵培养基配方、发酵条件的优化及其放大发酵试验

为开发银耳芽孢高产胞外多糖深层液态发酵培养基,提高银耳芽孢多糖的发酵产量以及实现规模化生产应用,本研究采用单因素实验探索不同来源的碳氮源及营养元素对银耳多糖产量的影响,并结合Plackett-Burman和Box-Behnken响应面设计,得到高产胞外多糖的发酵培养基配方和发酵条件,进一步使用50 L发酵罐进行了发酵工...     

发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖培养基成分优化及抗氧化活性研究

采用单因素和正交试验对发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)CECT 5716产胞外多糖(EPS)的培养基成分进行优化,并通过评价胞外多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除活性以及其总抗氧化能力和Fe³⁺总还原力考察胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖的最优培养基配方：麦芽糖2.0%、蔗糖1.0%、酵母膏2.5%、L-半胱氨酸盐酸盐0.2%、乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.2%、硫酸镁0.02%、硫酸锰0.005%、柠檬酸氢二胺0.2%、吐温80 0.1%。在此条件下,EPS产量为(1 575±22.91)mg/L,是优化前的6.38倍。胞外多糖具有较好的抗氧化活性,并与其质量浓度成正比,当胞外多糖的质量浓度为8 mg/m L时,对DPPH自由基的清除率为(84.17±1.30)%、对ABTS自由基的清除率为(35.37±1.24)%,总抗氧化能力为0.31±0.01、Fe³⁺总还原力为0....     

羊肚菌胞外多糖抗肿瘤作用的研究

目的：研究羊肚菌胞外多糖（EPM）对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用与免疫功能的影响。方法：将昆明种小鼠接种S180腹水瘤后随机分组,灌胃给予200、400mg／kg剂量的EPM,以灌胃生理盐水和环磷酰胺为空白对照组和阳性对照组,研究EPM对荷瘤小鼠的抑瘤率、存活期和免疫功能的影响;通过与肿瘤细胞共培养,观察EPM对肿瘤细胞增殖的影响。结果：EPM能够显著提高荷瘤小鼠的脾脏指数、T．淋巴细胞百分率和巨噬细胞吞噬率;2个剂量的EPM对肿瘤8180的抑制率分别为49．04％和64．42％,并且可以显著延长荷瘤小鼠的存活时间;体外实验发现羊肚菌多糖EPM具有直接杀死S180肿瘤细胞的作用,最高抑制率为46．3％,结论：MEP具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。     

产胞外多糖酵母菌的分离鉴定及其发酵条件优化

为筛选新型高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的酵母菌株,满足工业化生产的要求,该研究利用WL选择培养基和产糖基础培养基筛选出高产EPS的酵母菌,通过形态特征观察、生理生化试验和18S rDNA技术对其进行鉴定,并利用响应面方法对菌株产胞外多糖条件进行优化。结果表明,从土壤中筛选得到一株高产EPS的酵母菌,经鉴定,该酵母菌为近粉红锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus),命名为S.pararoseus PFY-Z1,当葡萄糖17.34 g/L、硫酸镁1.98 g/L、初始pH值5.3时,EPS的含量为(6.74±0.13)g/L,是优化前的1.63倍。不仅为EPS的生产提供菌种来源,也为今后利用S.pararoseus大规模生产EPS提供理论基础。     

乳酸菌发酵对刺五加叶活性成分、体外抗氧化作用与降血糖相关酶的影响

为了对刺五加叶在益生菌发酵保健品领域的应用提供理论基础,以刺五加叶为原料,采用嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌3种乳酸菌进行发酵,对发酵前后刺五加叶中活性成分含量变化进行研究,并评价刺五加叶乳酸菌发酵物的体外抗氧化作用与对降血糖相关酶的影响.结果表明:不同菌种的发酵能力存在差异,植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌发酵显著增加了刺...     

黑木耳多糖的酶法生物转化工艺优化及其体外降血糖性能

以黑木耳为原料,利用生物酶法进行多糖的提取,并研究其体外降血糖性能。以降血糖性能和黑木耳多糖得率为双指标,筛选最适复合酶体系,并通过正交试验确定最佳酶转化工艺条件。采用Sevag法脱蛋白、H₂O₂法脱色,对提取的木耳粗多糖进行精制处理。利用高效液相色谱法对多糖的分子质量分布进行分析,并通过其α-淀粉酶抑制率和葡萄糖透析延迟指数对多糖的降血糖性能进行分析比较。结果表明:综合考虑木耳多糖降血糖性能与多糖得率,选择糖化酶、木瓜蛋白酶、果胶酶作为木耳多糖生物转化的酶制剂,总加酶量700 U/g,三种酶配比1:1:1,料液比1:60、pH5.0、酶解时间1.5 h、酶解温度50 ℃时,在此条件下,木耳多糖得率32.57%,α-淀粉酶抑制率为26.72%。精制处理后,黑木耳多糖提取液的颜色由棕黄色变为淡黄色,脱色率为43.15%,多糖损失率为31.27%。酶解后多糖发生了部分降解,产生了大小不一的多糖片段。此外,酶解木耳多糖的降血糖性能优于非酶解水提多糖,其α-淀粉酶抑制率提高了10.09%;葡萄糖透析延迟指数30 min时提高了13.09%,60 min时提高了3.24%,表明经酶法生物转化的木耳多糖有很好的降血糖性能。本试验通过复合酶解法对木耳多糖进行生物转化,改善木耳多糖的生物活性,对木耳多糖在保健功能方面的利用与临床应用提供了理论依据。     

黄伞胞外多糖液体培养基的优选

采用液体培养和正交试验方法研究了不同碳、氮源及不同无机盐浓度对黄伞产生胞外多糖的影响。结果表明,适宜黄伞产生胞外多糖的碳源为蔗糖、麦芽糖、红糖,适宜氮源为麦麸、酵母粉、NH4NO3;通过正交试验确定了产胞外多糖的最优液体培养基为:蔗糖2%、麦麸3%、MgSO40.15%、KH2PO40.25%。     

裂叶荨麻体外降糖活性化学成分

目的:研究裂叶荨麻体外降糖活性及化学成分。方法:利用活性追踪法,通过α-葡萄糖苷酶抑制作用比较裂叶荨麻根、茎、叶体外降糖活性,比较根不同极性溶剂萃取相的体外活性。通过硅胶色谱、重结晶进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构,再评价其体外活性成分。结果:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相体外降糖活性最强,IC₅₀值为8.499 mg/mL,从中分离出6个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇、对羟基肉桂酸甲酯、正十六烷酸、对甲氧基苯甲醛、反式-对羟基肉桂酸、胡萝卜苷。化合物反式-对羟基肉桂酸和胡萝卜苷对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较强,其IC₅₀值分别为5.234、1.693 mg/mL。结论:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相中的化学成分体外降糖活性较为明显。     

响应面法优化辣木籽降糖肽的酶法制备工艺及其体外活性评价

为提升辣木籽资源利用度,采用酶法制备辣木籽降糖肽。以蛋白水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,通过单因素实验筛选和响应面法优化最佳的酶解时间、液料比、酶解pH、酶添加量和酶解温度,通过超滤粗分离酶解液制备分子量＜3 kDa的降糖肽,并通过MTT法分析其对人肝癌细胞（HepG2细胞）的抑制作用。结果表明,酶法制备辣木籽降糖肽的最佳酶解时间为4.6 h、液料比40.5:1、pH为8.3、酶添加量5.5%、温度55 ℃,该条件下酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率为23.62%±0.14%。超滤组分中分子量<3 kDa组分的α-葡萄糖苷酶抑制率为IC₅₀值为5.56 mg/mL,当其质量浓度为300 μg/mL时,作用于HepG2细胞48 h后能显著抑制HepG2细胞的增殖（P<0.05）。研究可为辣木籽降糖肽的进一步分离纯化奠定基础。     

短梗大参多酚的提取及体外抗氧化性研究

为开发利用短梗大参树皮中的活性成分,本文对影响短梗大参多酚提取量的工艺参数(提取溶剂、乙醇体积分数、料液比、提取温度和提取时间)进行了优化;以DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率为指标,研究了短梗大参多酚的体外抗氧化性能。结果表明:短梗大参多酚提取的最优工艺条件为乙醇体积分数50%、料液比1:40 (g/mL)、提取时间50 min、提取温度45 ℃,在该参数条件下多酚提取量为(0.320±0.02)mEq GA/g;短梗大参多酚对DPPH、羟自由基均具有较好的清除效果,其半清除浓度(EC₅₀)分别为43.4 μg/mL和37.6 μg/mL。短梗大参多酚具有较好的体外抗氧化活性,可作为一种潜在的抗氧化剂进行开发利用。     

发酵乳杆菌SS-31培养基及发酵条件的优化

对分离自广西柳州酸笋发酵液中具有优良益生特性的发酵乳杆菌SS-31进行增殖培养基优化,并对其高密度发酵条件进行探索。通过单因素实验、响应面优化等方法,以发酵乳杆菌SS-31的活菌数为主要参考指标,对其发酵增殖培养基成分和培养条件进行了优化探索。最终确定发酵乳杆菌SS-31最优培养基构成为：麦芽糖16.20 g/L、酵母浸粉20.16 g/L、磷酸氢二钾9.33 g/L、硫酸锰0.50 g/L、硫酸镁1.00 g/L、吐温80 1.00 g/L;最佳发酵条件为：SS-31接种体积分数为3%、初始pH为6.8,期间添加氨水保持发酵液pH稳定,在37 ℃下培养24 h后,活菌数可达到1.19×10¹⁰ CFU/mL,为其工业化生产奠定基础。     

产右旋糖酐肠膜明串珠菌发酵培养基的优化

旨在提高肠膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides CICC-23614发酵蔗糖产右旋糖酐的效率。以单因素实验为基础,以蔗糖、细菌蛋白胨、Na₂HPO₄·12H₂O及KH₂PO₄浓度作为影响因子,以蔗糖转化率为响应值,采用响应面分析法对肠膜明串珠菌培养基中各成分浓度条件进行研究,利用高效液相色谱法(HPLC)对发酵液中的蔗糖进行定量分析,优化得到最佳发酵培养基。结果显示,经过优化的最佳的培养基为:蔗糖101.31 g/L,细菌蛋白胨5.66 g/L,Na₂HPO₄·12H₂O 1.11 g/L和KH₂PO₄0.15 g/L。以优化后的培养基进行发酵,重复试验验证,发酵24 h,蔗糖转化率可达91.9%,与预测值误差仅为2.13%,相较于原始培养基发酵结果,蔗糖转化率是原始培养基培养条件下的1.6倍。