HPLC-UV同时测定高粱红色素中两种成分的含量

建立高效液相色谱法测定高粱红色素中芹菜素和槲皮素-7-葡萄糖苷的分析方法。样品经前处理提取溶解,采用C_(18)反相色谱柱分离,用甲醇-1%乙酸溶液(60∶40,v/v)为流动相进行洗脱,检测波长为377nm,流速为1.0 m L/min,以色谱峰保留时间进行定性,外标法进行定量。结果表明,芹菜素和槲皮素-7-葡萄糖苷分别在10.2~204.0μg/m L和20.4~408.0μg/m L范围内线性关系良好,相关系数R2均大于0.999,样品中的加标回收率分别为94.3%~101.3%和89.4%~101.6%,相对标准偏差分别为1.8%~7.9%和2.1%~4.2%(n=3),检出限分别为2μg/mg和4μg/mg,该方法操作简单,精密度好,能满足高粱红色素中芹菜素和槲皮素-7-葡萄糖苷的检测要求。     

女贞子酒抗氧化活性及相关成分浸出率测定

采用DPPH法、水杨酸法和邻苯三酚自氧化法研究了不同酒精度女贞子酒提取物对DPPH·、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用,采用铝盐法及HPLC测定女贞子酒中总黄酮及木犀草素和槲皮素的浸出率。结果显示,女贞子酒提取物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率随女贞子酒中乙醇含量的升高而增强,最高清除率的为40%乙醇含量的女贞子酒提取物,对DPPH·、·OH和O2-·的EC50值分别为12.75、62.86和15.93 mg/m L。并且女贞子酒中总黄酮、木犀草素和芹菜素的浸出率亦随着女贞子酒乙醇含量的升高而升高,结果显示,40%乙醇含量的女贞子酒中总黄酮、木犀草素和芹菜素的浸出率分别为21.96 mg/g、40.07μg/g和28.99μg/g。     

响应面法优化水热酸控提取紫苏梗中木犀草素工艺

为提升紫苏梗资源利用度，采用水热酸控法提取紫苏梗粉末中木犀草素，以木犀草素提取量为响应值，运用响应曲面法优化提取工艺，结合FTIR和SEM表征分析水热酸控前后紫苏梗粉末物相结构。结果表明:在水热时间120 min、水热温度230 ℃、料液比1:20 g/mL、柠檬酸质量浓度1%的适宜条件下，2.0 g紫苏梗粉末可提取木犀草素（901.049 ± 0.60） μg/g，模型可行；FTIR表明水热酸控能破坏紫苏梗木质纤维素中C?O?C、C=O等官能团，SEM 表明水热酸控可减少木犀草素浸出传质阻力，利于木犀草素溶出。     

高速逆流色谱法从小叶金钱草中分离四种黄酮苷类化合物

为研究小叶金钱草中大极性黄酮苷类化合物,采用正丁醇萃取、DM 301大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶、反相硅胶柱层析纯化,得到大极性黄酮苷类组分。结合离线二维高速逆流色谱,分别以正己烷/正丁醇/水/冰乙酸(系统Ⅰ:1:2:1:0.1,v/v/v/v和系统Ⅱ:1:1:1:0.1,v/v/v/v)为溶剂系统,在主机转速900 r/min、流速2 mL/min、254 nm检测波长条件下进行分离。结果表明,从小叶金钱草正丁醇组分中分离得到四种黄酮苷类化合物,经¹H、¹³C NMR鉴定为杨梅素3,3’-二-α-L-鼠李糖苷(1)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(2)、槲皮素3,3’-二-α-L-鼠李糖苷(3)和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(4),高效液相色谱分析其纯度均大于95%。化合物3为首次从小叶金钱草中分离得到,本研究为小叶金钱草的化学成分研究提供依据。     

HPLC-DAD同时测定野菊不同部位8种活性成分的含量

目的建立同时测定中药野菊不同部位(花、叶、嫩茎、老茎)中绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素含量的高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)方法。方法采用Thermo Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温35℃,检测波长327 nm。结果绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素进样量分别在0.031~0.620μg、0.009~0.180μg、0.016~0.320μg、0.081~1.620μg、0.021~0.420μg、0.011~0.220μg、0.152~3.040μg、0.017~0.340μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9999,0.9998,0.9997,0.9996,0.9995,0.9996,0.9997,0.9998。绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素的平均加样回收率分别为98.29%,99.09%,99.03%,98.88%,99.22%,99.02%,98.38%,99.02%,RSD(n=6)分别为1.40%,1.05%,0.98%,1.18%,0.98%,0.91%,0.89%,1.26%。结论本法操作简便,准确性和重复性好,可用于中药野菊的质量控制,测定结果显示野菊不同部位有机酸和黄酮类活性成分含量差异较大。     

黑青稞麸皮的功能因子结构解析及其抗氧化功能研究

以黑青稞麸皮为原料，通过乙醇回流法提取黑青稞麸皮，再依次用大孔吸附树脂、高效液相色谱分离纯化得到活性物质，通过核磁共振分析推测其结构，并测定其体外抗氧化活性。从黑青稞麸皮分离纯化得到2个活性物质，经核磁共振分析和理化性质测定，最终鉴定为柯伊利素-7-O-葡萄糖醛酸、柯伊利素；体外抗氧化试验表明，柯伊利素-7-O-葡萄糖醛酸、柯伊利素DPPH自由基清除能力的IC₅₀为1.44、2.07 mg/mL,ABTS自由基清除能力的IC₅₀为0.59、0.62mg/mL，并且均具有一定的总还原能力。文章首次从黑青稞麸皮中分离纯化出2个活性物质，明确为柯伊利素-7-O-葡萄糖醛酸、柯伊利素，且均具有良好的抗氧化能力。该结果为黑青稞麸皮中活性物质作为天然抗氧化剂的开发利用提供了理论依据。     

朝鲜蓟中2种木犀草素类化合物液相制备条件优化

研究了一种通过制备液相色谱从朝鲜蓟中分离得到2种木犀草素糖苷的方法。朝鲜蓟与70%乙醇浸提液通过AB-8型大孔树脂吸附,分别用20%,50%,80%乙醇洗脱,得到50%乙醇洗脱部位A27～29(4g);A27～29用RP-C18层析柱(270mm×80mm,40～60μm)吸附,分别用30%,48%,100%甲醇洗脱,得到C16～19目标组分0.32g,其中含目标组分H-01(10.4%)和H-02(5.1%);以目标组分的分离度和峰形为优化条件,研究了5种不同流动相组合及2种流速对目标峰分离效果的影响,基于最优条件制备,得到了纯度分别为97.8%和96.5%的H-01和H-02;通过质谱、~1 H-NMR和~(13) C-NMR表征,确定H-01和H-02分别为木犀草苷-7-芸香糖苷和木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷。该方法优化了木犀草素类化合物的分离纯化生产工艺,并在保证高回收率的条件下有效降低了杂质水平。     

马齿苋功能因子的检测分析

对马齿苋有保健功效的总黄酮进行研究.采用常规提取与萃取法,柱层析方法分离并重结晶得单体,用化学鉴别与波谱相结合的方法确定结构.结果表明:从含总黄酮的乙酸乙酯部位分离到β-谷甾醇、芹菜素、山萘酚、木犀草素、槲皮素、尿囊素.芹菜素、山萘酚、木犀草素、槲皮素为首次从马齿苋分离得到.马齿苋有保健功效的总黄酮既有上述黄酮成分又有其它活性成分,但以黄酮成分为主.     

HPLC测定半枝莲中野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素的含量

建立半枝莲药材中野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素含量同时测定的HPLC方法。色谱条件为DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,检测波长为335 nm,流动相为乙腈(A)-1%冰醋酸水溶液(B)进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃。野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素浓度分别在2.0~200、0.5~50、0.5~50、0.5~50μg/m L范围内与峰面积积分值线性关系良好。在精密度实验、稳定性实验、重复性实验中,野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素峰面积的相对标准偏差(RSD)2.0%;野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素的加样回收率范围及平均值和RSD分别为97.73%~101.7%、99.72%、1.36%(n=9),97.78%~102.8%、99.53%、1.99%(n=9),97.40%~102.4%、99.39%、1.84%(n=9)和97.80%~102.0%、99.24%、1.49%(n=9)。所测12份不同产地半枝莲药材中,野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素的含量范围分别为2.41~7.08、0.26~0.56、0.31~0.90、0.28~0.95 mg/g。本方法具有良好的专属性和重现性,加样回收率实验符合要求,能准确、稳定地对半枝莲药材中野黄芩苷、黄芩素、木犀草素和芹菜素含量进行同时定量测定。     

乙醇回流法提取花生壳中木犀草素工艺条件优化

分别通过单因素和正交实验研究了乙醇回流法提取花生壳中木犀草素的影响因素和工艺条件,结果表明:乙醇体积分数、回流温度、回流时间、料液比和回流次数等因素对花生壳中木犀草素提取量均有影响,其中回流温度影响显著.优化的花生壳中木犀草素提取工艺条件为:回流温度85℃,提取液70％乙醇水溶液,料液比(g/mL)为1∶20,提取1.5h,此时木犀草素的提取量达到7.41 mg/g.     

HPLC测定显齿蛇葡萄叶中4种黄酮类化合物的含量

目的:建立显齿蛇葡萄中二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素含量同时测定的HPLC方法。方法:用色谱条件为Hypersil ODS 25 μm(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱分离,检测波长为325 nm,流动相为甲醇:乙腈(5:11)-0.1%磷酸进行梯度洗脱,流速为1.0 mL,柱温为25℃。结果:二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素浓度在7.8~7956、14.2~1174.4、2.9~290、0.7~46.5 μg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好。在精密度实验、稳定性实验、重复性实验中二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素面积的相对标准偏差(RSD)<2.0%;二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素的加样回收率范围及平均值和RSD分别为98.00%~100.12%,98.95%,0.85%;98.75%~101.86%,100.14%,1.07%;99.14%~101.24%,100.21%,0.84%;98.25%~99.45%,98.81%,0.59%。所测的85份不同产地同一采收期的显齿蛇葡萄样品中,二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素的含量范围分别为0.3003%~34.1934%,0.0722%~1.7105%,0.0033%~1.167%,0.0007%~0.3309%。24份同一产地不同采收期的显齿蛇葡萄样品中,二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素的含量范围分别为0.3362%~7.6490%,0.0391%~2.9616%,0.0017~0.8361%,0.0019%~0.1050%之间。结论:本方法具有良好的专属性和重现性,加样回收率实验符合要求,能准确、稳定地对显齿蛇葡萄中二氢杨梅素、杨梅苷、香橙素和杨梅素含量进行同时定量测定。     

当归胶囊中三种有效成分含量测定的方法学验证

目的:建立当归胶囊中三种有效成分藁本内酯、阿魏酸、粗多糖的含量测定方法,并对检测方法进行方法学验证。方法:藁本内酯、阿魏酸采用高效液相色谱法,粗多糖采用紫外分光光度法,进行系统适应性、专属性、线性、检出限、准确度、精密度、重复性、稳定性等的方法学考察。结果:藁本内酯在20~60 μg/mL线性良好,r=0.9996,平均加样回收率为99.72%(RSD=2.99%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤1%;阿魏酸在6~18 μg/mL线性良好,r=0.9990,平均加样回收率为96.11%(RSD=4.18%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤2%;粗多糖在0.05~0.15 mg线性良好,r=0.9987,平均加样回收率为103.52%(RSD=4.79%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤5%。结论:三种方法准确、可靠,可用于当归胶囊中三种有效成分藁本内酯、阿魏酸、粗多糖的含量测定。     

三种方法测定液体型保健食品中苯甲醇的含量

目的:建立气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)三种测定液体型保健食品中苯甲醇含量的方法。方法:GC采用DB-WAX毛细管色谱柱,程序升温,氢火焰离子检测器(FID)测定;HPLC采用C18色谱柱,甲醇和20mmol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,二极管阵列检测器(波长210nm)测定;GC-MS采用DB-624UI毛细管质谱柱,离子化方式EI,程序升温,全扫模式(m/z30~300)与SIM模式(79.0,107.0,108.0)定性与定量测定。比较了三种方法的线性、精密度、准确度和检出限。结果:GC在50~500μg/mL范围内线性关系良好,回收率在95%~100%之间,检出限为5mg/kg;HPLC在10~1000μg/mL范围内线性关系良好,回收率在95%~100%之间,检出限为10mg/kg;GC-MS在0.4~20μg/mL范围内线性关系良好,回收率在90%~100%之间,检出限为2mg/kg。结论:GC、HPLC、GC-MS三种方法对样品中苯甲醇含量的测定结果一致,且操作简单,稳定性好,GC-MS可作为苯甲醇的定性判定方法。     

测定食物中5种类黄酮物质的高效液相色谱法的改进

目的优化、完善分析植物性食物中5种类黄酮成分的方法。方法采用Nova-Pak C18(3.9 mm×150mm,4μm)色谱柱;流动相为0.1%三氟乙酸(A)-5%乙腈甲醇溶液(B),梯度洗脱(0～5min,90%A→60%A;5～18 min,60%A→40%A;18～21 min,40%A→10%A;21～25 min,10%A→10%A;25～30 min,10%A→90%A),流速1 ml/min;检测波长365 nm,柱温35℃。结果杨梅黄酮、槲皮素、玉米黄酮、坎二菲醇、芹菜配基5种类黄酮在0.156～20μg/ml浓度范围内与色谱峰高呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.9995～0.9999;检测限为0.0195μg/ml(S/N≥3);低、中、高浓度的平均加标回收率(n=3)为88.5%～105.6%,相对标准偏差(RSD)均小于6.32%。结论该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于植物性食物中5种类黄酮含量的检测。     

超声提取-气相色谱-串联质谱法测定煎烤鱿鱼中16种多环芳烃

本实验建立了超声提取-气相色谱-串联质谱法（polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs）测定煎烤鱿鱼中16种多环芳烃的分析方法。考察了提取试剂配比、提取试剂用量、提取温度等对回收率的影响,确定了最佳的提取和检测方法:5.00 g样品冷冻干燥后经25 mL正己烷30 ℃超声提取20 min,复提一次,经碱性氧化铝-中性硅胶复合固相萃取柱净化后,采用气相色谱-串联质谱法测定,多环芳烃氘代内标法定量。在此实验条件下,16种目标物在1~100 ng/mL范围内呈良好线性关系,线性相关系数（r）不低于0.9994,检出限为0.09~0.52 μg/kg,定量限为0.21~1.21 μg/kg。在1、2、20 μg/kg 3个加标水平下回收率分别为73.98%~128.17%、73.21%~133.24%、76.35%~133.68%,相对标准偏差（RSD,n=6）分别为1.32%~2.98%、0.93%~2.47%、1.08%~2.87%。在实际样品检测应用中,6个样品均有不同程度的多环芳烃检出,单一组分检出范围从0~48.65 μg/kg不等。结果表明,该方法选择性好,可用于煎烤鱿鱼中多环芳烃的检测,也可应用于其他类似的加工水产品中多环芳烃的提取与检测。     

采用三硝基苯磺酸法测定乳基婴幼儿配方奶粉中的有效赖氨酸

采用三硝基苯磺酸法建立了乳基婴幼儿配方奶粉中有效赖氨酸的测定方法,研究了乙醚用量、水解时间以及三硝基苯磺酸的孵化时间对水解液吸光度的影响。方法线性范围为0.02～0.12 mg/mL,相关系数r2=0.999 3,检出限为3.72μg/mL,定量限为10.23μg/mL,样品重复性相对标准偏差RSD为1.55%～5.57%,回收率为86%～115%。     

高效液相色谱法同时测定酵素原液中的乳酸和醋酸

建立了一种利用高效液相色谱法同时测定酵素原液中乳酸和醋酸的方法。通过对检测波长、流动相及其浓度和pH的筛选,建立利用高效液相色谱法同时测定酵素原液中乳酸与醋酸含量方法。结果表明,最优色谱条件为:色谱柱SinoChrom ODS-BP(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为0.01 mol/L、pH2.88的KH₂PO₄溶液,流速0.8 mL/min,波长215 nm,进样量20 μL,柱温25 ℃。该法可同时测定酵素中乳酸和醋酸,检测速度快,乳酸与醋酸的线性检测范围宽分别为0~2100、0~1800 μg/mL。精密度和重复性好(乳酸和醋酸平行测定的RSD分别为0.99%、1.21%)并得到了良好的回收率(92.31%~102.20%)。     

荧光光谱法测定淀粉中的直链淀粉

为了建立一种荧光光谱法测定淀粉中直链淀粉含量的方法,采用荧光光谱法测定了直链淀粉的激发光谱和发射光谱以及直链淀粉与支链淀粉的浓度比对荧光强度的影响。结果表明:直链淀粉的激发波长为370 nm、发射波长为422 nm;在0.10~0.70 μg/mL浓度范围内,直链淀粉荧光强度与其浓度呈良好线性关系,相关系数r=0.9996,检出限为0.026 μg/mL。用该方法测定玉米淀粉和土豆淀粉中直链淀粉的含量,加标回收率为94.5%~121.7%,相对标准偏差(RSD)为2.42%~3.24%。该方法不需加任何生化试剂,不受时间、温度、共存支链淀粉的影响,快速简便,绿色环保,检出限低,结果准确。     

分光光度法测定花生壳中总黄酮含量的研究

为建立测定花生壳中总黄酮含量的方法,比较了盐酸-镁粉法、NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH法、AlCl₃法三种络合方法的适应性、重复性与供试品溶液的稳定性,并对最优方法进行方法学验证。结果表明:三种方法测定花生壳中总黄酮含量的最佳测定波长分别为423、519、402 nm,方法重复性(RSD)分别为6.74%、1.32%、0.96%,供试品溶液60 min内的稳定性以AlCl₃法最佳(RSD=0.43%),因此,测定花生壳中总黄酮含量的首选方法为AlCl₃法。经方法学验证,AlCl₃法于波长402 nm处,以木犀草素为对照品,在19.9~100.0 μg/mL浓度范围内与吸光度成良好的线性关系,相关系数r=0.9997。样品加样回收率在97%~103%之间,相对标准偏差为2.36%。该方法操作简便快速,专属性好,灵敏度高,重复性好,稳定性高,适用于花生壳中总黄酮含量的测定。     

聚酰胺吸附-HPLC测定饮料和糖果中的20种水溶性色素

建立了聚酰胺吸附-HPLC测定饮料和糖果中的20种水溶性色素的方法。样品用水提取,经聚酰胺粉末吸附-洗脱后,以Eclipse XDB C18柱分析(250 mm×4.6 mm,5μm),采用0.02 mol/L乙酸铵-甲醇-乙腈梯度洗脱,检测波长分别选取450、520和620 nm。该方法线性范围2.00～50.0μg/mL,重现性相对标准偏差(n=6)为0.51%～7.8%,回收率71.4%～109.2%,检出限0.03～0.3 mg/kg。