北五味子多糖抗焦虑和镇静催眠作用

目的：观察北五味子多糖（Schisandra chinensis polysaccharide,ScP）的抗焦虑和镇静催眠作用并初步探讨其作用机制。方法：将40 只ICR小鼠随机分为空白对照组、ScP低剂量组（75 mg/kg,以体质量计,下同）、ScP中剂量组（150 mg/kg）、ScP高剂量组（300 mg/kg）,每天两次灌胃给药,连续7 d,采用自主活动记录仪观察北五味子多糖对小鼠自主活动的影响;观察北五味子多糖对阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠只数、睡眠潜伏期以及对阈剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响;采用国际通用的高架十字迷宫（elevated plus maze,EPM）焦虑动物模型,观察北五味子多糖的抗焦虑作用。采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测小鼠脑组织中γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）和谷氨酸（glutamate,Glu）含量,初步探讨其作用机制。结果：北五味子多糖明显减少小鼠自主活动次数（P＜0.05或P＜0.01）,增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠只数,缩短小鼠睡眠潜伏期（P＜0.05）,显著延长阈剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间（P＜0.05或P＜0.01）,增加EPM模型小鼠进入开放臂次数（open arm entry,OE）（P＜0.01）和开放臂停留时间（open armtime,OT）（P＜0.05）,并可明显降低小鼠脑组织中谷氨酸含量（P＜0.05）。结论：北五味子多糖具有镇静、催眠及抗焦虑作用,其机制可能与减少脑组织中谷氨酸含量有关。     

AB-8大孔树脂分离纯化北五味子藤茎总木脂素的研究

基于紫外分光光度法测定北五味子藤茎总木脂素含量,通过计算6种大孔树脂的吸附率和解析率,筛选出分离纯化总木脂素的最佳树脂为AB-8大孔树脂。研究各工艺因素对吸附和解析效果的影响,得到分离纯化总木脂素的最佳工艺为:总木脂素浓度为1.511 mg/mL时,最大上样量约为6倍柱床体积,洗脱流速1 mL/min,蒸馏水洗脱体积为8倍柱床体积,洗脱剂95%乙醇用量为5倍柱床体积。在此工艺条件下的洗脱率达到78.89%。     

五味子木脂素对睡眠剥夺大鼠负性情绪及行为的影响

探讨五味子木脂素对睡眠剥夺大鼠负性情绪及行为的影响。将实验大鼠随机分为3组,分别为大平台对照组,小平台剥夺组和五味子木脂素组。各组动物经水平台睡眠剥夺装置剥夺睡眠3 d后进行高架十字迷宫实验、强迫游泳实验及负重游泳实验,记录各项指标。研究结果显示,与大平台对照组相比,小平台剥夺组大鼠的进入开臂时间及次数的比例减少,强迫游泳不动时间延长和大鼠游泳至力竭时间减少。与小平台剥夺组相比,五味子木脂素组大鼠进入开臂时间和次数比例延长,大鼠强迫游泳不动时间减少和游泳至力竭时间延长。五味子木脂素对睡眠剥夺所致的焦虑、抑郁及疲劳等具有明显的保护作用。     

北五味子木脂素对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的：研究北五味子木脂素（Schisandra chinensis lignans,SCL）对酒精诱导小鼠急性肝损伤的保护作用并初步探讨其作用机制。方法：将50 只小鼠随机分为正常对照组、酒精性肝损伤模型组、SCL低剂量组（25 mg/（kg•d））、SCL高剂量组（50 mg/（kg•d））、阳性对照组（联苯双酯150 mg/（kg•d））,灌胃给药预处理15 d。末次给药1 h,造模组小鼠给予50%乙醇12 mL/kg一次性灌胃,正常对照组给予同体积蒸馏水。12 h后处死小鼠,检测血清中谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）和谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）活性,甘油三酯（triglyceride,TG）水平,肝组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量及一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性;HE染色观察肝脏病理学改变。结果：SCL可明显降低酒精致肝损伤小鼠血清ALT和AST活性以及TG水平（P＜0.05）,同时使小鼠肝组织MDA含量和NOS活性显著下降,GSH含量提高（P＜0.05）;苏木素-伊红染色结果显示SCL可显著改善酒精引起的小鼠肝细胞水肿、坏死,中央静脉充血等病理损伤。结论：SCL对小鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化有关。     

乳化剂辅助提取五味子木脂素的研究

采用乙醇水溶液提取五味子果实中的木脂素,添加4种乳化剂:单甘脂、EM、Tween20和Tween80,EM的乳化效果最好。加入EM后辅助提取五味子木脂素,结果表明:EM的适宜添加量是3%,适宜的乙醇浓度是80%,提取两次,木脂素的提取率高达96%,而未加EM的空白对照样,提取两次的提取率只有43%。     

五味子木脂素的提取优化及乳化稳定性研究

以五味子种子为原料,提取溶剂为乙醇,采用超声波辅助提取工艺,并设计正交实验,优化得到了最佳的超声波提取工艺条件,然后以提取的五味子木脂素浸膏为原料,研究了吐温80、聚甘油辛癸酸酯、亲水性辛癸酸甘油酯对木脂素浸膏的乳化稳定性。研究结果表明,五味子木脂素的最佳提取工艺为:乙醇浓度90%,料液比(m:v)为1:8,提取时间为每次50min,提取次数为2次。在此条件下五味子木脂素的提取率为3.06%;木脂素乳化回填的最佳工艺为:每100mL乳液添加29.2mg木脂素浸膏,三种乳化剂用量分别为:吐温80,16.7mg;聚甘油辛癸酸酯,41.7mg;亲水性辛癸酸甘油酯,41.7mg。木脂素乳化回填后的溶液有较好的澄清度,并且在常温下存放60d未出现破乳现象,有较好的稳定性。      

基于木脂素生物合成的内生菌发酵五味子研究

采用内生菌发酵法高效生产五味子木脂素成分,通过HPLC法,以4种木脂素成分为对照,筛选出能够提高五味子木脂素的发酵菌株,采用柱色谱法分离纯化发酵五味子中4种主要木脂素成分,并对发酵菌株进行了形态学观察和18SrDNA序列同源性分析。结果表明,内生真菌WJ1能显著提高发酵五味子样品中4种主要木脂素成分,采用柱层析法可分别得到五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素,经鉴定发酵菌株WJ1为黑曲霉(Aspergillus niger),上述研究为生产五味子木脂素成分奠定了基础。     

五味子木脂素对大肠杆菌的抑菌机理及效果

研究了五味子中的抗菌成分木脂素对食品中常见致病菌大肠杆菌的抑制作用及抑菌机理。采用牛津杯法测定抑菌圈直径、倍比稀释法测定最低抑菌浓度,评价了木脂素对大肠杆菌的抑菌效果;并通过测定微生物的生长曲线、电导率、耗糖率及扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)图来推测、观察抑菌机理。结果表明:木脂素对大肠杆菌有明显的抑制作用,抑菌圈直径达27 mm,最低抑菌质量浓度为6.25 mg/m L;生长曲线的结果表明,木脂素可抑制大肠杆菌对数期的生长;电导率和耗糖率的测定及扫描电镜表明,其抑菌机理之一是破坏了细菌细胞膜的平滑形态,内容物大量流出,造成代谢紊乱,影响对糖类等营养物质的吸收,从而发挥抗菌抑菌作用。     

超临界CO2提取五味子木脂素的工艺研究

目的研究超临界CO2流体提取（SFE-CO2）北、南五味子木脂素的工艺。方法以五味子总木脂素提取率为考察指标,以提取压力、提取温度、CO2流量等3项因素设计3个水平进行正交试验设计,确定最佳工艺。用薄层扫描色谱法测定提取物中4种主要木脂素（五味子甲素、五味子乙素、五味子酯甲和五味子醇甲）的含量,并与传统的乙醇提取法比较。结果超临界CO2流体提取五味子木脂素的优选工艺为：提取压力25 MPa,提取温度35℃,CO2流量2 L/min。北、南五味子总木脂素的平均提取率分别为93.2%、95.5%,提取物纯度分别为13.0%、9.2%,北五味子提取物中五味子乙素含量2.89%。结论 SFE-CO2法提取效率高、选择性好、操作简便,明显优于传统的乙醇提取法,可用于提取五味子木脂素。     

五味子总木脂素的提取纯化

目的提取纯化五味子总木脂素。方法以五味子总木脂素含量为指标,用正交试验筛选五味子的最佳提取工艺,并初步探讨总木脂素的纯化方法。结果五味子总木脂素的最佳提取工艺为：4倍量的75%乙醇回流提取1次,提取时间为2 h;提取物用乙酸乙酯提取。结论总木脂素纯度可提高约10倍。     

五味子糖蛋白的纯化及其抗氧化活性

本文研究了五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件,采用碱提酸沉法提取得到五味子糖蛋白,以蛋白质清除率和多糖损失率作为考察指标,分别考察氯仿与正丁醇的比例、样液与Sevage试剂的比例、振摇时间、脱蛋白次数对除蛋白效果的影响,在单因素实验的基础上采用正交及响应面实验优化工艺条件,得到响应面优化后结果最佳,即氯仿与正丁醇的比例为3:1,样液与Sevage试剂的比例为3:1,振摇时间为14 min,脱蛋白次数为3次,此条件下的蛋白质平均清除率为30.09%,多糖平均损失率为4.71%,综合评分平均值为88.11。体外抗氧化活性结果表明,五味子糖蛋白对于DPPH自由基和超氧阴离子清除能力较强(IC₅₀为1.08 mg/mL和0.80 mg/mL),并具有一定的还原能力。研究表明响应面法优选工艺简便高效;五味子糖蛋白具有体外抗氧化活性,值得进一步研究。     

中国毛虾活性肽对免疫抑制小鼠免疫调节作用的影响

本文以毛虾为原料,采用蛋白酶酶解获得毛虾活性肽,通过建立免疫抑制小鼠模型探究了毛虾活性肽对免疫抑制小鼠的免疫调节功能。小鼠随机分为六组:正常对照组、模型组、阳性对照组以及低、中、高剂量组,其中剂量组分别灌胃0.25 g·kg^-1 BW、0.5 g·kg^-1 BW、1.0 g·kg^-1 BW毛虾活性肽。结果表明,剂量组免疫抑制小鼠体重明显增加(P<0.05),免疫器官指数中的胸腺指数显著提高(P<0.05),此外,毛虾活性肽还促进了小鼠血清中免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)以及细胞因子(IL-2、IL-6和TNF-α)水平的提升(P<0.05),外周血白细胞总数基本恢复至正常水平,NK细胞活性也显著增强(P<0.05)。综上,毛虾活性肽具有改善免疫抑制剂导致的免疫功能损伤,增强免疫抑制小鼠免疫调节的作用。     

五味子酸性多糖分级产物对小鼠急性酒精性肝损伤的改善作用

目的:研究五味子酸性多糖分级产物(Schisandra chinensis acidic polysaccharides-2,SCAP-2)对酒精诱导小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用50%乙醇12 mL/kg·bw灌胃建立小鼠急性肝损伤模型。将50只小鼠随机分为正常对照组、模型组、SCAP-2低剂量(5 mg/kg·bw)、SCAP-2中剂量组(10 mg/kg·bw)和SCAP-2高剂量组(20 mg/kg·bw)。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;测定肝组织中MDA、甘油三酯(TG)含量以及SOD活性;HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果:与酒精性肝损伤模型组相比,SCAP-2高剂量可降低小鼠血清中ALT和AST水平(p<0.05),升高血清及肝组织中SOD活性(p<0.01)、降低MDA含量(p<0.05),降低肝组织中TG含量(p<0.01),并可改善肝脏病理学变化。结论:五味子酸性多糖分级产物(SCAP-2)对小鼠急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用。     

五味子、黄芪混合多糖对大鼠高脂血症的降脂作用

为了观察五味子、黄芪混合多糖(Polysaccharide from mixed Schisandra chinensis and Astragalus membranaceus,SAP)对脂代谢紊乱的调节作用及其作用机制,采用高脂饮食喂养建立大鼠(Wistar)高脂血症模型,记录SAP干预期间大鼠每周体重变化。8周后检测其血清中甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平,肝组织中TG、TC水平,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏病理学变化,Western blot法检测肝脏中胆固醇代谢相关蛋白ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、肝X受体α(Liver X receptors α,LXRα)和三磷酸结合盒转运体G1(ATP-binding cassette G1,ABCG1)的表达情况。结果表明,SAP(100 mg/kg)灌胃给药可显著降低高脂血症大鼠的体重、血清中TC、TG、LDL-C水平以及肝组织中TC、TG水平(P<0.05),显著增加血清中HDL-C水平(P<0.05),减轻肝脏组织中的脂质沉积,改善大鼠高脂血症。同时SAP显著提高了高脂血症大鼠肝脏中LXRα、ABCA1和ABCG1蛋白的表达(P<0.05)。综上所述,SAP对高脂血症大鼠有明显的调节血脂作用,且其作用机制可能与促进肝脏胆固醇代谢有关。     

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE）电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。     

荷叶提取物的镇静催眠作用

目的：研究荷叶提取物（乙醇提取物、生物碱、总黄酮和小分子水溶物）对小鼠的镇静催眠作用,筛选其活性组分。方法：利用空场实验、戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验,给予小鼠灌胃荷叶50%乙醇提取物（150、450 mg/kg）和不同分离组分（30、90 mg/kg）后,观察其对小鼠的镇静催眠作用。结果：高剂量荷叶乙醇提取物和低、高剂量荷叶生物碱均能显著抑制小鼠的自主活动,增加阈下剂量戊巴比妥钠引起的小鼠入睡率,缩短戊巴比妥钠阈上剂量的小鼠入睡潜伏期,延长睡眠时间。结论：荷叶乙醇提取物具有显著的镇静催眠作用,生物碱是其主要活性成分。     

Composition and biological activities of the essential oil from Schisandra chinensis obtained by solvent-free microwave extraction

Applicability of solvent-free microwave extraction (SFME) for extraction of the fruits of Schisandra chinensis essential oil was examined; the composition and antioxidant activities and antibacterial activities of the essential oil were assessed in vitro. An orthogonal experiment (L₉ (3)⁴) was applied to optimize the extraction process. The optimum conditions were: extraction time, 45 min; microwave power, 800 W; diameter of powder particles, 0.25 mm; and proportion of water pretreatment, 30%. Under these conditions, the extraction yield was 1.75%. Thirty-five compounds, representing 91.12% of the oil, were identified, of which the major ones, ylangene (50.11%), β-himachalene (10.76%),α-bergamotene (9.52%) and β-Chamigrene (5.41%), accounted for of 75.80% the oil.Antioxidant activity, IC₅₀ value of the essential oil was determined as 3.87 mg/mL by DPPH assay, and the inhibition values of the essential oil at 1.8 mg/mL was 41.88% by β-Carotene–linoleic acid bleaching assay. The essential oil was screened for antibacterial activity against both Gram positive (Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis) and Gram negative (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris) bacteria. The essential oil showed antibacterial effect against all the gram (+) bacteria and gram (−) bacteria tested. These results show that S. chinensis essential oil could be considered as a natural alternative to food antioxidants and preservatives.     

杜仲雄花水溶性生物碱的镇静催眠作用

目的：研究不同剂量杜仲雄花水溶性生物碱的镇静催眠作用。方法：采用酸水提取法提取杜仲雄花中水溶性生物碱。观察不同剂量杜仲雄花水溶性生物碱对小鼠自主活动的影响以及直接镇静催眠作用、与戊巴比妥钠的协同作用和抗惊厥作用。结果：杜仲雄花水溶性生物碱能有效减少小鼠的自主活动次数;与戊巴比妥钠有较好的协同作用,能显著增加阈下剂量的小鼠睡眠率,延长阈下剂量及阈上剂量的睡眠时间,并缩短睡眠潜伏期;杜仲雄花水溶性生物碱还能有效降低尼可刹米所致的小鼠惊厥率,延长惊厥潜伏期。结论：杜仲雄花水溶性生物碱具有良好的镇静催眠作用。     

天麻酵素对失眠小鼠的镇静催眠功效评价

为探究天麻酵素镇静催眠功效,该研究分析了天麻酵素理化指标以及对失眠模型小鼠脑组织内神经递质及氧化应激水平的调节。将KM雄性小鼠随机分为空白组、模型组、枣仁安神液组（阳性对照组1）、天麻粉组（阳性组对照组2）、天麻酵素低（0.10 g/kg）、中（0.30 g/kg）、高（0.49 g/kg）剂量组,以对氯苯丙氨酸建立失眠模型,连续灌胃给药7 d后通过测定小鼠自主活动的变化、小鼠脑组织神经递质和氧化应激水平的变化,分析其对失眠小鼠镇静催眠功能的影响。结果显示,天麻酵素中γ-氨基丁酸含量为0.48 mg/kg,是QB/T 5232-2018标准中要求的16倍;天麻酵素高、中剂量组与模型组相比,小鼠活动时间和站立次数显著减少（p<0.05）,分别减少13.00 s、14.63 s和10.62次、9.12次;小鼠脑组织中5-HT、GABA、IL-1β含量显著增加（p<0.01）、SOD活性显著提高（p<0.05）、MDA含量显著降低（p<0.05）,其中5-HT增加50.62 pg/mL、49.51 pg/mL,GABA增加5.47 ng/mL、5.15 ng/mL。这表明天麻酵可通过调节小鼠脑组织内神经递质及氧化应激水平来达到镇静催眠作用。