等离子体降解黄曲霉毒素B1的试验研究

为探索高效快速降解黄曲霉毒素B1的新方法,利用等离子体处理黄曲霉毒素B1溶液,以黄曲霉毒素降解率为指标,研究了等离子体处理对黄曲霉毒素B1降解效果的影响,采用响应面法对其影响因素进行了优化设计.试验结果表明:等离子体处理对黄曲霉毒素B1降解有明显的效果,各参数影响顺序为:作用功率＞作用时间＞极距,最佳工艺为:作用功率200 W、作用时间80 s、极距3 cm,降解率可达51.67％.     

低温射频等离子体降解农产品中黄曲霉毒素B1效果的研究

研究采用低温射频等离子体技术处理农产品中的黄曲霉毒素B_1(AFB_1),并通过HPLC分析其中黄曲霉毒素的降解率。结果表明,等离子体降解农产品中AFB_1效果显著,150 W等离子处理500 s,花生中AFB_1的降解率达到88.3%,玉米中AFB_1的降解率达到92.2%。等离子体功率越大,处理时间越长,AFB_1的降解率越大。在相同降解条件下,不同细度样品中AFB_1降解率有显著差异。花生、玉米粗粉试样中AFB_1的降解率低于花生、玉米细粉试样。     

降解黄曲霉毒素B1酶的提取及降解作用研究

目的:从能够降解黄曲霉毒素B1的嗜麦芽窄食单胞菌中提取主要降解成分,并对其降解作用进行研究。方法:采用硫酸铵沉淀法对发酵液进行酶的提取,并对酶的提取条件进行优化实验。结果:确定种子培养基培养12h,发酵24h后,采用65%硫酸铵沉淀后的酶活性最大,对黄曲霉毒素B1的降解率达到80.25%。结论:降解黄曲霉毒素B1的菌株于40℃下种子培养12h,发酵24h,经过65%硫酸铵沉淀得到粗酶提取液,其蛋白含量为532.9μg/mL,与黄曲霉毒素B1反应72h后酶活最大,对毒素的降解率可达到81.23%,并且经过全波长扫描得到此酶在240～267nm有最大吸收峰。      

微生物代谢黄曲霉毒素B1的研究进展

黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物,主要存在于谷类、花生、玉米等农作物中。在我国尤其是南方省份,受高温高湿环境的影响,黄曲霉毒素在农作物上的污染极易发生,造成巨大的经济损失。利用微生物代谢黄曲霉毒素,具有专一、高效、反应条件温和等诸多优点,是目前公认的理想脱毒方法。本文首先简要介绍了黄曲霉毒素B₁的形成过程、结构特征以及毒性基团,接着重点介绍了已报道的能代谢黄曲霉毒素B₁的微生物种类、关键酶以及代谢途径,最后列举了应用基础研究的例子。     

黄曲霉毒素B1的生物脱毒研究进展

简要介绍了黄曲霉毒素的分子结构、理化性质、对人体健康的危害及黄曲霉毒素B1在食品中的限量标准。重点阐述了近几年黄曲霉毒素B1生物脱毒方面的进展,其中微生物主要通过吸附和降解两方面去除黄曲霉毒素B1。     

低温射频等离子体降解乙腈中黄曲霉毒素B1的效果与途径分析

采用低温射频等离子体处理溶解于乙腈中的黄曲霉毒素B1,考察了时间、等离子体发射功率、黄曲霉毒素B1初始浓度对黄曲霉毒素B1降解率的影响,通过HPLC-MS/MS分析降解产物及其可能的降解途径。结果表明,随着等离子体功率的增大、黄曲霉毒素B1初始浓度的降低,其降解率有增大的趋势。200~500μg/L黄曲霉毒素B1经120 W等离子体处理150 s以上,黄曲霉毒素B1的降解率可达95%以上。经过对比等离子体处理不同时间后的黄曲霉毒素B1的一级质谱,推测准分子离子峰157、299、339为可能的降解产物峰。结合产物峰的二级质谱碎片信息和黄曲霉毒素B1分子结构中的活性位点,推断出降解产物的结构和降解路径。     

花生中的物质成分对低温射频等离子体降解黄曲霉毒素B1的影响

研究采用低温射频等离子体技术处理黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）,通过高效液相色谱分析其中AFB1的降解率,探究花生中的蛋白质、脂肪酸、维生素和水分对低温射频等离子体去除AFB1的影响。结果表明,添加花生蛋白和玉米蛋白后,在不同的等离子体处理功率条件下,AFB1的降解率明显下降。在相同处理条件下,添加花生蛋白比添加玉米蛋白后的降解率低;添加油酸和亚油酸后,在不同的等离子体处理功率条件下,AFB1的降解率明显下降。在相同处理条件下,油酸和亚油酸的AFB1降解率基本相同;添加VE后,AFB1的降解率先高于空白组,后低于空白组。在相同处理条件下VE的含量越多,AFB1的降解率越低。说明低温射频等离子体技术降解AFB1时,花生中的成分对降解有影响。     

食用植物油中黄曲霉毒素B1调查分析

调查了浙江省食用植物油中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的污染情况。根据浙江省食用植物油生产消费的实际情况,2016年9—12月,采用统计学方法采集151家食用植物油经销企业的花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油、葵花籽油、芝麻油、调和油8大类散装油和定型包装油,共1 208个样品,高效液相色谱法测定AFB_1含量。结果表明:22个样品检出AFB_1,检出率为1.8%,超标率为0.0%;其中花生油、葵花籽油、玉米油和调和油检出AFB_1,浙江省特产的油茶籽油和菜籽油未检出AFB_1,散装油中AFB_1检出率(3.8%)是定型包装油(0.9%)的4.22倍,食用植物油样品中AFB_1含量均低于国家限量标准。     

粮油食品中的黄曲霉毒素B1检测结果分析

本文分析了粮油食品中适用于黄曲霉毒素B₁检测的具体方法。利用酶联免疫法分析其中黄曲霉毒素B₁的具体含量。在检测过程中严格按照相关规定要求进行,并在分析检测结果时按照所规定的判定标准进行研究,验证粮油食品中是否含有黄曲霉毒素B₁。     

微生物法针对毒性位点降解黄曲霉毒素B1的研究进展

文章主要探究了黄曲霉毒素B₁(AFB₁)的毒性位点及毒性机理,并对比了微生物法破坏AFB₁毒性位点从而降解AFB₁的优势。重点综述了微生物法中的脱毒酶法对AFB₁的降解机制。同时,对脱毒酶法联合其他方法的复合应用进行展望。     

黄曲霉毒素B1降解菌的筛选鉴定及有效降解组分初探

黄曲霉毒素B₁(AFB₁)是具有强毒性、强致癌性的一种真菌毒素。为了筛选出AFB₁降解菌,将实验室保藏的真菌菌株与AFB₁共培养,选取降解率最高的菌株,经形态学和ITS rDNA分析确定其种属,分离菌株不同组分(菌悬液、菌体、孢子液、发酵液)后探究其降解AFB₁的有效组分,并将有效组分菌体破碎后作进一步探究。结果表明:培养72 h后的郝克氏青霉MD1菌悬液和未破碎菌体对AFB₁降解率分别为98.15%和28.20%,菌体破碎后对AFB₁的降解效果更好,培养24 h后对AFB₁的降解率为55.40%。因此,郝克氏青霉MD1的菌悬液和菌体内的活性组分能有效降解AFB₁。本研究筛选出的郝克氏青霉MD1扩大了AFB₁降解菌的菌种库,为AFB₁的生物降解提供了一定的参考价值。     

贵州苦荞饭中黄曲霉毒素B1物理降解技术对比

应用微波、紫外线、γ射线辐照三种物理技术降解苦荞饭中黄曲霉毒素B₁(AFB₁),采用高效液相色谱法测定AFB₁的含量。试验考察了微波功率、微波时间、紫外照射时间、紫外照射高度、γ射线辐照剂量对其降解效率的影响。结果表明,苦荞饭中AFB₁降解率依次为γ射线辐照 > 紫外降解 > 微波降解,γ射线在辐照剂量为20 kGy时,降解率分别为33.6%±1.5%(污染剂量7.5 μg/kg)、35.1%±1.7%(污染剂量30 μg/kg)、45.7%±1.3%(污染剂量60 μg/kg)。与单独降解技术相比,将任意两种或者三种降解技术联合后,其降解率均显著增加(P<0.05),微波+紫外线+γ射线辐照三种技术联合降解率可达51.9%±0.9%(污染剂量7.5 μg/kg)、66.5%±0.7%(污染剂量30 μg/kg)、71.5%±0.9%(污染剂量60 μg/kg)。三种物理降解技术对于苦荞饭中低剂量的AFB₁污染有一定的应用价值。     

Abbau von Aflatoxin B1 durch verschiedene Mikroorganismen

Zusammenfassung Bei der Untersuchung des Abbaus von Aflatoxin B₁ durch verschiedene Vertreter der Bakterien, Hefen und Schimmelpilze in wachsenden und ruhenden Kulturen zeigten wachsende Kulturen vonCorynebacterium rubrum die stärkste Fähigkeit zum Abbau. Wachsende Kulturen von anascosporogenen Hefen bauten Aflatoxin B₁ relativ gut ab, während ein Abbau durch ascosporogene Hefen nicht festzustellen war. Schimmelpilze bauten Aflatoxin B₁ zu einem hohen Prozentsatz ab. — Nach dem Verlauf des Abbaus ließen sich drei Typen unterscheiden. — In Kulturen der Schimmelpilze wurden neben Aflatoxin B₁ zwei weitere fluorescierende Verbindungen nachgewiesen.

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Degradation of aflatoxin B₁ by various microorganisms

Summary The degradation of aflatoxin B₁ by various representatives of bacteria, yeasts and moulds in growing and resting cultures was investigated. We found that growing cultures ofCorynebacterium rubrum degraded the added aflatoxin nearly quantitatively. —Growing cultures of anascosporogenous yeasts degraded most of aflatoxin B₁ while no degradation of this substance by ascosporogenous yeasts could be stated. Moulds degraded. aflatoxin B₁ to a high extent. — With regard to the course of degradation three types can be distinguished. — In the cultures of moulds two blue fluorescing compounds were found beside aflatoxin B₁.

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Die Arbeit wurde von der Deutschen Forschungsgemeinschaft unterstützt     

黑曲霉降解黄曲霉毒素B1的研究及转录组分析

为探究黑曲霉FS10对AFB_1的降解机制,使用黑曲霉FS10的不同组分(菌悬液、发酵液、孢子、菌丝体)对AFB_1进行降解,并研究了AFB_1刺激对黑曲霉FS10降解效果的影响;利用扫描电子显微镜观察降解过程中黑曲霉菌丝体的形态变化;用转录组学技术探究AFB_1可能的降解机理。结果表明:黑曲霉FS10能有效降解AFB_1,72 h时菌悬液的对AFB_1脱除率高达98.65%;黑曲霉FS10孢子对AFB_1无明显脱除作用,但菌丝体对AFB_1有一定的吸附能力,发酵液对AFB_1有明显脱除效果;经过AFB_1诱导刺激后黑曲霉FS10降解效果有明显提升,表明AFB_1处理能显著提升黑曲霉FS10对AFB_1的降解能力。微观结构分析表明AFB_1处理在一定程度上影响黑曲霉FS10的形态,但随着时间的延长这种影响逐渐减小。此外,转录组学分析表明AFB_1处理降低了一些能量代谢基因的水平,这可能是黑曲霉FS10的一种自我保护机制,同时蛋氨酸的合成基因上调,推测AFB_1的降解可能与蛋氨酸的合成有关。     

Degradation of aflatoxin B1 by fungal laccase enzymes

The enzymatic degradation of aflatoxin B₁ (AFB₁) by white rot fungi through laccase production was investigated in different liquid media. A significant (P < 0.0001) correlation was observed between laccase activity and AFB₁ degradation exhibited by representatives of Peniophora and Pleurotus ostreatus cultivated in minimal salts (MSM) (r = 0.93) and mineral salts — malt extract (MSB–MEB) (r = 0.77) liquid media. Peniophora sp. SCC0152 cultured in MSB–MEB liquid medium supplemented with veratryl alcohol and sugarcane bagasse showed high laccase activity (496 U/L), as well as 40.45% AFB₁ degradation as monitored using high performance liquid chromatography. P. ostreatus St2-3 cultivated in MSM liquid medium supplemented with veratryl alcohol resulted in laccase activity of 416.39 U/L and 35.90% degradation of AFB₁. Aflatoxin B₁ was significantly (P < 0.0001) degraded when treated with pure laccase enzyme from Trametes versicolor (1 U/ml, 87.34%) and recombinant laccase produced by Aspergillus niger D15-Lcc2#3 (118 U/L, 55%). Aflatoxin B₁ degradation by laccase enzyme from T. versicolor and recombinant laccase enzyme produced by A. niger D15-Lcc2#3 coincided with significant (P < 0.001) loss of mutagenicity of AFB₁, as evaluated in the Salmonella typhimurium mutagenicity assay. The degradation of AFB₁ by white rot fungi could be an important bio-control measure to reduce the level of this mycotoxin in food commodities.     

乳与乳制品中黄曲霉毒素M1研究进展

目的：建立基于不同序列长度适配体的纳米金（Gold nanoparticles,AuNPs）比色传感法快速定量检测牛奶中的黄曲霉毒素M₁（Aflatoxin M₁,AFM₁）,并评价目前文献报道中常用的21（A21）和72个碱基（A72）长度的AFM₁适配体在实际样品中的检测性能。方法：采用柠檬酸钠还原法制备AuNPs溶液,加入AFM₁适配体及AFM₁标准品后,适配体与AFM₁特异性结合形成特殊三维结构,随着NaCl溶液加入,AuNPs溶液的稳定性被破坏而发生聚集,导致溶液颜色变化,通过测定AuNPs溶液的吸光值和吸收光谱定量检测AFM₁。结果：通过优化适配体浓度、NaCl浓度、反应温度及pH等实验条件,基于适配体A21和A72的AuNPs比色传感法检测AFM₁的检测限分别为25.26和5.77 µg/L,线性范围均为10~800 µg/L,且均具有良好的选择性及特异性,在牛奶中的加标回收率分别为95.7%~103.6%、94.3%~98.2%。结论：A72检测牛奶中AFM₁的效果优于A21,可能与适配体长度、构型及亲和性相关。基于适配体A72建立的比色传感法简单、快速、灵敏、特异性强且可视化,为AFM₁适配体在乳制品中的应用提供数据参考。

     

高灵敏黄曲霉毒素B1免疫层析定量检测法的建立

以胶体金为标记物,借助于胶体金读取仪,建立了高灵敏的定量检测黄曲霉毒素B_1的胶体金免疫层析方法。试纸条制备时,当标记溶液pH为6.0,检测线全抗原的使用浓度为1.5mg/mL,金标抗体浓度为4μg/mL、用量为1.2μL时,所建立方法的灵敏度为5.7ng/L。通过加速保存试验,结果显示该试纸条的保存期大于1年。该试纸条应用于实际谷物及酱油加标样本检测,证明该方法可满足食品快速检测的需要。     

有机改性蒙脱土吸附黄曲霉毒素B1能力的研究

利用十八烷基三甲基溴化铵(OTMAB)作为有机改性剂对钠基蒙脱土(Na-MMT)进行改性,以提高对黄曲霉毒素B1(AFB1)的吸附能力。改性后的钠基蒙脱土利用X-射线衍射(XRD)、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)及热失重分析(TGA)等方法对其结构特性进行研究。结果表明,改性剂OTMAB插入到钠基蒙脱土的夹层内并扩大了其夹层间距(d_(0.01)),增大了其比表面积。改性蒙脱土对AFB1的吸附等温线符合Langmuir数学模型。有机改性Na-MMT对AFB1的最大吸附量(q_(max))为34.25 mg/g,Langmuir吸附常数(k)为3.65L/mg,均高于未改性的Na-MMT(q_(max)=28.74mg/g和k=2.37L/mg),说明有机改性能够有效提高Na-MMT对AFB1的吸附能力。     

Vitamins B1 and B2 contents in cultivated mushrooms

Mushrooms have long been treated as a delicacy. Nowadays however, many researchers consider them to be nutraceutical foods, which has stimulated new and existing Brazilian producers to search for more productive techniques and to introduce other species. The objective of this study was to determine the vitamin B₁ and B₂ contents in mushrooms. The main species of mushroom cultivated in Brazil and analysed in this study are: Agaricus bisporus (white button mushroom and portobello), Lentinula edodes (shiitake) and Pleorotus spp. (shimeji and oyster mushroom). The methodology employed used acid hydrolysis followed by enzymatic hydrolysis and separation of the vitamins by high performance liquid chromatography using a C₁₈ reverse phase column and fluorescence detector. The results obtained for thiamine (vitamin B₁) were from 0.004 to 0.08 mg/100 g and for riboflavin (vitamin B₂), from 0.04 to 0.3 mg/100 g.