胶体金免疫层析法检测果蔬中毒死蜱前处理的优化

采用胶体金免疫层析法检测果蔬中残留毒死蜱，并研究前处理方法条件对检测结果的影响。结果表明：最佳前处理条件为以乙酸乙酯为提取剂、样品用量4 g、提取剂用量8 mL、上清液体积6 mL、氮气吹干。前处理方法既快速又准确，能够进行现场检测，具有较好的实用性。     

胶体金免疫层析法快速检测果蔬中的三唑酮及其代谢物残留

目的 建立胶体金免疫层析法快速检测蔬菜水果中三唑酮及其代谢物农药残留的分析方法。方法 采用胶体金标记三唑酮单克隆抗体, 利用胶体金的可视化及抗体与抗原的特异性结合, 实现对果蔬中三唑酮农药残留的定性和半定量检测。结果 本方法对黄瓜和香蕉中三唑酮及其代谢物的总残留量检出限分别为0.05和0.85 mg/kg, 均低于国家标准食品中三唑酮农药最大残留限量(0.1~1 mg/kg), 该试纸条对其他农药无交叉反应, 重复性良好。结论 该方法具有高灵敏度、高特异性, 可快速准确的检测大批量样品中的三唑酮及其代谢物农药残留, 能够满足应急超标事件的现场检测需求。     

胶体金免疫层析法同时检测果蔬中克百威、水胺硫磷、百菌清及虫酰肼的应用研究

目的 研究胶体金免疫层析法同时检测果蔬中克百威、水胺硫磷、百菌清及虫酰肼残留量的适用性。方法 考察胶体金免疫层析法同时检测克百威、水胺硫磷、百菌清及虫酰肼在不同基质中的灵敏度, 并将该方法与参比方法进行比较, 验证其假阴性率和假阳性率。结果 克百威检出限为0.02 mg/kg, 水胺硫磷为 0.05 mg/kg、百菌清为3 mg/kg、虫酰肼为0.2 mg/kg, 基本满足国家标准对果蔬中这些农药的限量要求。对韭菜、大白菜进行加标实验, 均未出现假阳性及假阴性, 与参比方法无显著差异; 除丙硫克百威、丁硫克百威与克百威有交叉反应外, 水胺硫磷、百菌清及虫酰肼与非对应农药均无交叉反应。结论 该方法操作快速、准确、灵敏、简便, 适用于果蔬中克百威、水胺硫磷、百菌清及虫酰肼的同时检测。     

胶体金免疫层析法快速检测烟草中吡虫啉残留

目的建立胶体金免疫层析法快速检测烟草中残留的吡虫啉。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,并用它标记吡虫啉单克隆抗体,建立并优化胶体金免疫层析法。结果本方法对烟草中吡虫啉的检测限为5μg/mL,重复性较高,有假阳性情况出现,但假阳性率较低,与烟草中其他常用药物没有交叉反应,特异性良好,且与气相色谱检测法所得的结果差异较小。结论该方法快速、高效、可靠,可满足现场快速检测烟草中吡虫啉残留的需要,实现生物技术在烟草流通、消费领域的方便、快速检测。     

胶体金免疫层析法快速检测食品中庆大霉素残留

应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测食品中庆大霉素残留的方法。采用免疫竞争法,柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记抗庆大霉素单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,庆大霉素偶联抗原和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线)和控制线(C线),制备检测庆大霉素的胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性、准确性和稳定性进行测定。测试结果表明:庆大霉素快速检测试纸条的灵敏度为0.7μg/mL,检测时间为10min,稳定性和特异性良好,与其他同类物质无交叉反应,其检测结果与酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果呈现了很好的一致性。该方法快速简便、灵敏度高、特异性强、准确性和稳定性好,非常适合现场快速检测庆大霉素。      

胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留

目的 建立胶体金免疫层析法检测禽蛋中氯羟吡啶残留的分析方法。方法 在用间接竞争酶联免疫吸附法分析氯羟吡啶单克隆抗体灵敏度和交叉反应性的基础上,以胶体金标记单克隆抗体作为示踪标志物,以包被氯羟吡啶半抗原-卵清蛋白偶联物和羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜作为载体,制备了氯羟吡啶胶体金免疫层析试纸条。结果 氯羟吡啶单克隆抗体的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)为1.6μg/L,与地克珠利、二硝托胺、尼卡巴嗪、磺胺喹噁啉、磺胺二甲嘧啶、癸氧喹酯、盐酸氨丙啉和盐酸氯苯胍8种药物均无交叉反应。制备的胶体金免疫层析试纸条肉眼判定禽蛋中氯羟吡啶的检出限为15μg/kg,灵敏度为98%、特异性为93%、假阴性率为2%、假阳性率为7%。结论 制备的试纸条具有操作简单、检测快速、成本低等优点,可用于大批量禽蛋样本中氯羟吡啶残留的初步筛选。     

胶体金免疫层析法检测猪肉中3种磺胺类物质残留

采用胶体金免疫层析方法同时检测猪肉组织中3种磺胺类物质。用胶体金标记磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体,包被在金标垫上,磺胺二甲基嘧啶与卵清蛋白蛋白偶联物和羊抗鼠二抗分别包被在硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线(T线)和质控线(C线),制成免疫层析快速检测试剂条,用于快速检测组织中磺胺类物质残留量。T线与待测样品中所含磺胺类物质竞争结合胶体金标记的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体,并通过胶体金显色直接观察检测结果。检测阴性样品时,在检测带和质控带会形成肉眼可见的红色条带。本方法简便、快速,药物交叉反应好,适合多残留检测,具有广泛的发展前景。     

胶体金免疫层析法检测食品中花生过敏原蛋白成分

建立一种简易快速胶体金免疫层析法(GICA)用于检测食品中花生蛋白成分.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记抗花生蛋白成分的抗体,制成免疫层析测试条.食品中花生蛋白成分与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条.自制花生抗原标准品并检测该方法的灵敏度,同时检测19种食品中是否含有花生蛋白成分.结果表明:GICA测试条与花生蛋白抗原呈特异性反应.检测自制的花生抗原标准品的灵敏度可达50ng/mL,用GICA试条检测了19种食品中,其中13种食品标签上标注含有花生过敏原成分的食品检测结果均呈阳性,4种食品标签上标注不含花生过敏原成分的食品检测结果均呈阴性,而2种食品标签上没有标注过敏原成分的食品检测呈阳性.     

胶体金免疫层析技术在农药残留检测中的应用

食品安全问题是全球关注热点,近年来我国种植技术发展迅猛,农药的使用也逐步科学、规范,但仍旧无法避免食品中的农药残留问题,如何有效检测成为重难点。本文简要介绍胶体金免疫层析技术的应用原理及特点,并以克百威为例具体分析了胶体金免疫层析技术在农药残留检测中的应用,结果显示胶体金免疫层析技术操作便捷、检测结果准确,在农药残留检测中的应用效果优良。     

胶体金免疫层析法和气相色谱法测定动物产品中氯霉素残留

对动物产品中氯霉素残留检测的胶体金免疫层析法和气相色谱法进行比较研究。向样品中分别添加0.3、0.5、1.5μg/kg三个添加水平的氯霉素标准品,用两种方法进行检测。胶体金免疫层析法对0.5μg/kg以上均能检出,气相色谱法平均回收率分别为78.1%、85.3%和88.3%,变异系数为5.3%～9.0%,最低检测限为0.3μg/kg。对108个样品用胶体金免疫层析法筛选出3个阳性样品,经气相色谱法验证皆为阳性,105个阴性样品经气相色谱法检测皆为阴性,未发现假阳性和假阴性。结果表明：胶体金免疫层析法具有快速,简便,特异,灵敏度高的特点,适合基层检验机构对动物产品中氯霉素残留现场快速筛选;气相色谱法灵敏度高,适用于阳性样品的精确定量。     

同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法

该研究制备分别特异性识别百菌清、多菌灵的两种单克隆抗体,并建立一种同时快速检测蔬菜中百菌清和多菌灵的胶体金免疫层析法。在最适工作条件下,所建立的方法对百菌清、多菌灵的检测限分别为0.08 ng/mL和1.95 ng/mL,线性范围分别为0.08～10.00 ng/mL和1.95～250.00 ng/mL。黄瓜、番茄、包菜3种样品加标回收率为79.2%～112.1%（百菌清）和63.3%～97.5%（多菌灵）,变异系数均低于18.9%,试纸条所需检测时间为20 min,可应用于蔬菜中百菌清、多菌灵残留的现场高通量快速筛查。     

同时测定蔬菜中15种有机磷农药的残留方法

了解当前本市农产品市场中关于蔬菜中有机磷农药残留的相关状况,制定相关对策,建立一种适用于多种有机磷农药快速检测的气相色谱方法。根据农药的相关性质,该气相色谱法可同时检测15种有机磷农药,其中包括:敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、灭线磷、甲拌磷、氧乐果、特丁硫磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、倍硫磷、水胺硫磷。通过对不同型号色谱柱的选择、柱温箱升温程序的控制,实现对15种常见有机磷农药的快速、便捷、准确度好的定性和定量的分析。     

乙酰胆碱酯酶生物传感器法测定蔬菜水果中有机磷农药残留

研究一种快速简便测定蔬菜水果中有机磷农药残留的方法。利用乙酰胆碱酯酶生物传感器技术,以苹果、黄瓜为样品,采用标准加入法进行分析,测定蔬菜水果中有机磷农药残留。实验结果表明,该方法回收率在96.45%～100.12%,相对标准偏差为2.76%～3.09%,对马拉硫磷和甲基对硫磷的检出限分别为4.80×10-11、2.93×10-10mol/L。     

胶体金免疫层析法快速检测牛奶中环丙沙星残留

针对牛奶中恩诺沙星的代谢物环丙沙星残留的问题,该研究开发一种胶体金试纸条快速检测牛奶中的环丙沙星残留。研究制备环丙沙星包被抗原,对环丙沙星抗体进行表征,优化胶体金标记条件,选用最佳标记pH和最佳蛋白添加量,以硝酸纤维素膜为固相载体,环丙沙星包被抗原为检测带(T带),羊抗兔二抗为质控带(T带)。依据免疫竞争法原理,建立胶体金免疫层析试纸条快速检测牛奶中环丙沙星的方法,方法检出限为6.25 ng/mL,对牛奶样品的检出限为12.50 ng/mL。样品前处理方法简单,在10 min内即可目测判断结果。     

气相色谱法快速测定蔬菜水果中痕量拟除虫菊酯

目的 建立一种快速、准确测定蔬菜水果中拟除虫菊酯残留量的气相色谱法,并应用于广东省食品化学污染物网络监测工作中.方法 用石油醚提取,浓缩后经Florisil固相萃取柱净化,用气相色谱-电子捕获检测器测定,色谱柱为DB-1石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm).结果 小白菜中的平均回收率为86.2%～93.4%.相对标准差为3.4%～8.6%;苹果中的回收率为87.3%～92.8%,相对标准差为2.8%～8.1%.检测了511份蔬菜水果样品中5种拟除虫菊酯的残留量,检出率为17.4%,超标率为0.59%.结论 与GB/T 5009.146-2003比较,方法快速、准确、分析成本低,能满足拟除虫菊酯类农药痕量残留快速分析的要求.     

基于纳米抗体的胶体金免疫层析法快速检测蔬菜中腐霉利

为探索纳米抗体在小分子有害物胶体金免疫层析方法（colloidal gold immuno-chromatography assay,GICA）应用的可行性，以农药腐霉利为模型，系统研究胶体金标记参数、胶体金工作缓冲液以及样品前处理方法等对GICA的影响。结果表明：胶体金颗粒大小、标记pH值及抗体用量是保证纳米抗体-金标探针稳定性的关键因素。在最佳工作条件下，纳米抗体GICA检测腐霉利的检出限、半抑制浓度和可视检出限分别为0.44、6.29μg/L和200μg/L，其灵敏度比基于传统单克隆抗体的GICA提高了4.1倍。采用QuEChERS对韭菜、黄瓜、番茄等样品进行前处理，利用纳米抗体优良的有机溶剂耐受性，省去了有机溶剂吹干程序，加标样品平均回收率介于80.1%～109.6%之间，且对实际样品的检测与标准气相色谱-质谱法结果一致。本研究表明纳米抗体作为一种新型原料可替代传统抗体用于小分子有害物的快速检测，所建立的腐霉利GICA方法具有灵敏、准确、快速和简便等优势，可用于蔬菜腐霉利残留的快速筛查。     

果蔬中农药残留快速检测法研究进展

本文主要阐述了活体检测法、化学速测法、酶抑制原理速测法、免疫学技术、纳米金技术、色谱技术、表面等离子共振生物传感技术、红外光谱快速检测技术在果蔬农药残留快速检测中的应用现状和发展前景。     

UPLC-MS/MS法同时测定蔬菜中34种农药残留

采用超高液相色谱-串联质谱联用仪(UPLC-MS/MS)技术建立了同时检测蔬菜中34种农药多残留量的快速检测方法。样品经乙腈提取,浓缩定容后用Qu ECh ERS农残净化管净化,Acquity BEH-C18超高液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件进行优化。结果表明34种农药在10 ng/m L~200 ng/m L范围内线性良好(r≥0.993 6)。在10μg/kg~30μg/kg范围内,平均加标回收率在68.7%~116.8%之间,RSD≤12%。该方法检出限为0.001 mg/kg~0.01 mg/kg,测定结果满足蔬菜样品中多残留农药的检测要求。     

果蔬农药残留检测的预处理和检测条件优化研究

本文对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测的样品预处理方法和检测条件进行了优化研究。首次采用亚临界水萃取技术进行样品预处理,大大提高了农药残留的提取率。进一步优化了检测条件,通过温度校正公式的使用和试剂用量的调整使农药残留检测的操作更简单、费用更低廉。     

果蔬中复硝酚盐残留量检测方法的建立

建立了固相萃取-气相色谱-电子捕获检测水果蔬菜中复硝酚盐残留量的方法,样品经甲醇-水-磷酸体系提取,HLB固相萃取柱净化,乙酸酐衍生,气相色谱-电子捕获检测器测定,外标法定量,液相色谱-质谱定性。结果表明,在0.01～1.0mg/L范围内线性良好,方法定量限为0.01mg/kg。对草莓、苹果、番茄、马铃薯、菠菜、茄子6种水果蔬菜进行3个水平(0.01、0.02、0.05mg/kg)的添加回收,回收率在81.0%～106.6%之间,相对标准偏差3.9%～8.1%,该方法可靠、稳定,可满足水果蔬菜中复硝酚盐残留检测与确证的需要。