酶解黄秋葵籽蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

利用制备的黄秋葵籽粕蛋白为原料,采用酶解法以获得具有抗氧化活性的多肽,为黄秋葵籽粕的精深加工提供理论依据。首先进行蛋白酶的筛选,选取最佳的碱性蛋白酶对碱溶酸沉法制备的黄秋葵籽粕蛋白进行酶解;以水解度和DPPH自由基清除力为指标进行单因素试验,分别考察底物浓度、酶解时间、加酶量、pH值和酶解温度对制备抗氧化活性肽的影响;然后应用响应面法,以DPPH自由基清除力为响应值,对黄秋葵籽粕蛋白抗氧化肽的制备工艺进行优化,确定的最佳制备工艺参数为:底物浓度0.7%、酶解时间3.8 h、酶用量6%、酶解温度50℃和pH 8.0。抗氧化试验结果表明,制备的抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为50.83%。     

酶解牡丹籽粕蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

利用制备的牡丹籽粕蛋白为原料,对其进行酶解以获得具有抗氧化活性的多肽,为牡丹籽粕的精深加工提供理论依据。首先进行蛋白酶的筛选,选取最佳的碱性蛋白酶对碱溶酸沉法制备的牡丹籽饼粕蛋白进行酶解;以水解度和DPPH自由基清除力为指标进行单因素实验,分别考察底物浓度、酶解时间、加酶量、pH和酶解温度对制备抗氧化活性肽的影响;以DPPH自由基清除力为响应值,对牡丹籽粕蛋白抗氧化肽的制备工艺进行响应面法优化,确定的最佳制备工艺为:底物浓度0.7%、酶解时间2 h、酶用量4.60%、酶解温度56℃和pH8.0。抗氧化实验结果表明,制备的抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为52.49%;经17种水解氨基酸组成分析证明,必需氨基酸占水解氨基酸总量的32.24%,具有较高的营养价值。     

不同方法提取茶籽蛋白及其抗氧化活性研究

以茶籽粕为原料,用碱法、盐法和缓冲液法提取茶籽蛋白,并测定其抗氧化活性。结果表明:盐法的茶籽蛋白得率和蛋白质含量均高于其他两种方法;盐法最佳提取条件为硫酸铵浓度0.005mol/L,料液比1∶50,时间180 min,pH 10;在盐法最佳提取条件下,茶籽蛋白得率为5.24%,蛋白质含量为82.65%。3种提取方法所得茶籽蛋白对DPPH自由基、羟自由基、Fe3+都具有抗氧化活性,当盐法所得茶籽蛋白在质量浓度8.0 mg/mL时,对DPPH自由基的清除率为74.78%,优于碱法和缓冲液法所得茶籽蛋白。     

韭菜籽蛋白的提取及抗氧化活性研究初探

以脱脂韭菜籽粉为原料,采用磷酸盐缓冲液法制备韭菜籽蛋白。以韭菜籽蛋白的提取率、DPPH·清除率及羟基自由基(·OH)清除率为指标,对提取温度、提取时间、pH及料液比四个因素各取三个水平,进行L9(34)正交实验,确定最优的制备工艺。最优的工艺条件如下:提取温度48℃,提取时间1.5h,pH7.5,料液比1∶10。在此条件下进行验证实验,测得韭菜籽蛋白的提取率为9.87%,在韭菜籽蛋白浓度分别为1mg/mL和2mg/mL时,对·OH和DPPH·清除率分别为73.37%和25.2%,说明采用磷酸盐缓冲溶液法制备得到的韭菜籽蛋白具有抗氧化活性。      

响应面法优化辣木籽多酚提取工艺及其抗氧化活性

本研究目的是确定辣木籽多酚的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行初步研究。利用响应面法对辣木籽多酚的提取工艺进行了优化,以多酚提取量为指标,就乙醇体积分数、浸提温度、浸提时间和料液比进行了单因素实验,基于Box-Behnken和Design-Expert V8.0.6,进行了四因素三水平响应面法优化,并测定了辣木籽多酚提取物中植物活性成分含量以及其体外抗氧化活性。结果表明,回归模型极为显著(p<0.0001),可以对辣木籽多酚含量进行很好的分析和预测;优化后的最佳提取条件为:乙醇体积分数66.78%、浸提温度75.9 ℃、料液比1:12 g/mL、浸提时间1.24 h,此条件下模型预测的最大提取量为4.134 mg/g,实测值为(4.125±0.017) mg/g,与预测值无显著性差异。辣木籽多酚提取物具有较强的体外抗氧化活性,其总抗氧化活性、DPPH·和ABTS⁺·清除能力、FRAP还原力分别为(43.52±8.47)、(0.571±0.017)、(1.413±0.032)、(0.731±0.040) mg TEs/g extract。此优化工艺可行,辣木籽多酚具有一定的抗氧化能力。     

桑叶蛋白提取工艺优化及其酶解蛋白体外抗氧化活性

为提高桑叶蛋白的得率和加强桑叶蛋白的开发利用,采用超声细胞破碎法提取桑叶蛋白,并研究桑叶酶解蛋白的体外抗氧化活性。考察浸提液的pH值、液料比、超声功率、破碎时间、浸提温度、浸提时间、浸提次数7个单因素对桑叶蛋白得率的影响,并采用正交试验设计优化提取工艺。采用木瓜蛋白酶酶解桑叶蛋白,得到桑叶酶解蛋白,以DPPH自由基清除法和总还原能力的测定方法评价桑叶酶解蛋白体外抗氧化活性强弱。结果表明,最佳提取工艺条件：浸提液的pH值为8,液料比为12∶1（mL/g）,超声功率200 W下处理5 min,在30℃下水浴15 min浸提2次,在此条件下,桑叶蛋白的得率为9.85%。桑叶酶解蛋白具有一定的还原能力,且对DPPH自由基具有较强的清除能力。     

漆树籽粕多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究

以脱脂后的漆树籽粕为原料,采用热回流提取漆树籽粕多糖,通过单因素实验和正交实验优化该方法的最佳工艺条件,并进一步研究漆树籽粕多糖对羟自由基和ABTS+自由基的清除能力。结果表明:最佳工艺条件为提取时间2.5 h,料液比1∶20(g∶m L),提取温度80℃和提取次数2次,此时籽粕多糖的得率为1.561%。漆树籽粕多糖对清除羟自由基和ABTS+自由基的IC_(50)分别为8.515 mg·m L~(-1)和7.03 mg·m L~(-1),当漆树籽粕多糖的浓度为25 mg·m L~(-1)时,对羟自由基的清除率达到61.5%,当浓度为10 mg·m L-1时,对ABTS+自由基的清除率达到58.4%。体外抗氧化实验表明漆树籽粕多糖抗氧化活性作用明显。     

漆树籽粕多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究

以脱脂后的漆树籽粕为原料,采用热回流提取漆树籽粕多糖,通过单因素实验和正交实验优化该方法的最佳工艺条件,并进一步研究漆树籽粕多糖对羟自由基和ABTS+自由基的清除能力。结果表明:最佳工艺条件为提取时间2.5 h,料液比1∶20（g∶m L）,提取温度80℃和提取次数2次,此时籽粕多糖的得率为1.561%。漆树籽粕多糖对清除羟自由基和ABTS+自由基的IC₅₀分别为8.515 mg·m L^-1和7.03 mg·m L^-1,当漆树籽粕多糖的浓度为25 mg·m L^-1时,对羟自由基的清除率达到61.5%,当浓度为10 mg·m L-1时,对ABTS+自由基的清除率达到58.4%。体外抗氧化实验表明漆树籽粕多糖抗氧化活性作用明显。      

酶解荠蓝籽蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

为制备荠蓝籽抗氧化肽,以荠蓝籽分离蛋白为原料,碱性蛋白酶Alcalase2.4L为水解酶,综合研究了酶解pH、温度、加酶量、底物浓度和时间等因素对荠蓝蛋白的水解度及产物还原能力的影响,并采用二次通用旋转组合设计实验优化水解条件。结果表明,制备荠蓝籽抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.44,温度48.95℃,加酶量1198.96U/g蛋白,底物浓度1∶20,时间3.5h。该条件下的酶解产物具有较强的还原能力,酶解液浓度为2.997mg/mL,其还原能力与0.326mg/mL的Vc相当。      

微波辅助提取茶籽多糖的工艺优化及其体外抗氧化活性评价

采用微波辅助提取油茶籽粕中的茶籽多糖。在单因素实验的基础上,利用正交实验优化茶籽多糖提取条件。并对茶籽多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明,茶籽多糖最佳提取工艺条件为:微波功率800 W,微波时间6.5 min,料液比1∶60,提取时间2 h,提取温度100℃。在最佳工艺条件下,茶籽多糖得率为(7.61±0.5)%。茶籽多糖对羟自由基、DPPH自由基和亚硝酸盐都呈现出一定的清除能力,但清除超氧阴离子自由基能力和还原能力较弱。     

中华绿螂抗氧化肽的提取及其抗氧化性

利用响应面法和超滤法对中华绿螂中抗氧化肽的木瓜蛋白酶水解提取工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,利用响应面法分析建立二次回归模型。以酶与底物浓度比值([E]/[S])、酶解温度、酶解p H和酶解时间为自变量,DPPH自由基清除率为响应值,研究各因素及其交互作用对自由基清除率的影响。根据响应曲面图及其等高线图,确认木瓜蛋白酶水解中华绿螂制备抗氧化肽的最优工艺条件:底物浓度6%、pH 4.11、酶解温度40℃、酶解时间3.09 h。在此条件下,中华绿螂抗氧化肽对DPPH自由基清除率为97.64%。所得回归模型高度显著(p<0.0001),与理论预测值基本吻合。根据超滤试验可知,超滤膜截留分子质量3000~1000 Da时抗氧化性最佳,超滤所得可溶性蛋白酶解物的抗氧化性为94.96%。     

发酵紫苏粕制备抗氧化肽的工艺优化及抗氧化性

以脱脂后的紫苏炼油副产物紫苏粕为原料,选取酵母菌为发酵菌种,通过单因素和响应面试验探究紫苏粕发酵工艺对饼粕中蛋白质含量的影响,得到的优化条件为发酵液pH3.4、液料比5.0∶1（mL/g）、接菌量为8.5%（质量分数）、发酵时间24 h,此条件下蛋白质含量为0.679 mg/g。以最优条件下发酵后的紫苏粕酶解制备抗氧化肽,研究酶种类与酶用量对发酵后紫苏粕抗氧化性的影响。结果表明,发酵后紫苏粕蛋白经碱性蛋白酶水解后,其抗氧化能力强于胰蛋白酶水解后的酶解液,且当碱性蛋白酶的用量在5.0%（800 U/g）时,酶解液对DPPH 自由基、羟基自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基清除能力达到最佳。     

绿茶多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化绿茶粗多糖的提取工艺,纯化多糖并分析其结构和抗氧化活性。方法:通过单因素实验结合响应面分析的方法,优化提取工艺,采用液相色谱、气相色谱和红外光谱分析多糖结构,并通过体外抗氧化实验研究其抗氧化活性。结果:多糖最佳提取条件为:液料比30:1 mL/g,提取温度60 ℃,提取时间70 min。此条件下,绿茶多糖的得率可达10.56%。多糖结构分析结果表明,其总糖、蛋白质和糖醛酸的比例分别为90.75%±3.69%、0.92%±0.09%和0.82%±0.07%,分子量约为7.3 kDa,主要由葡萄糖和半乳糖组成（摩尔比1.00:0.13）。体外抗氧化实验结果表明,在2 mg/mL浓度下,GTP对ABTS+自由基、DPPH自由基和羟基自由基（OH·）清除率分别为39.8%、72.2%和32.5%。结论:本工艺中,绿茶多糖得率高,分子量低,且具有较高的抗氧化活性。     

蛴螬酶法制备抗氧化活性肽

建立蛴螬多肽的制备工艺,探究多肽的抗氧化活性。采用酶法将蛴螬制备成蛴螬蛋白水解肽,以蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力为衡量指标,通过单因素试验确定了酶种类、酶虫比、底物浓度、水解体系pH值、酶解温度和时间对蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力的影响。通过正交试验优化蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力,获得最佳酶解工艺,即底物浓度5%、水解体系p H 7、酶解温度40℃。在此试验条件下,蛴螬多肽的提取率为14.21%,总抗氧化能力为0.752 mmol/L。     

富硒糙米抗氧化肽酶法制备工艺优化

以富硒糙米蛋白为原料,优化富硒糙米蛋白抗氧化肽酶法制备工艺。以酶解产物抗氧化能力指数(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)和水解度为评价指标,考察酶种类、酶解时间、pH值、底物浓度、加酶量及酶解温度对酶解产物抗氧化活性的影响。在单因素试验基础上,采用三因素三水平响应面法确定富硒糙米抗氧化肽的制备工艺。结果表明:中性蛋白酶较适宜制备富硒糙米抗氧化肽,其最佳酶解工艺条件为:pH 8.0,底物浓度3%,酶解时间69 min,酶解温度55℃,加酶量12 000 U/g。在此条件下,富硒糙米蛋白酶解产物的抗氧化能力为(1 232.57±62.34)μmol TE/g,显著高于同等条件下非富硒糙米蛋白酶解物的抗氧化能力。     

西柚皮多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

以西柚皮为原料进行多酚的提取,并测定提取物的抗氧化活性。通过单因素试验结合正交试验对西柚皮多酚的超声辅助提取工艺进行优化,利用铁离子还原/抗氧化能力法测定提取物总抗氧化能力,用邻二氮菲法测定羟基自由基清除能力。研究结果表明,西柚皮中多酚的最佳提取工艺条件为提取时间60 min、提取温度60℃、乙醇体积分数40%、料液比1∶50(g/mL),该条件下西柚皮多酚提取率为（19.70±0.12）mg/g。抗氧化试验结果表明,西柚皮多酚总抗氧化能力为（0.86±0.02）μmol/L,羟基自由基清除率为（20.34±0.30）%。     

红毛藻多酚提取工艺优化及抗氧化活性

为研究红毛藻多酚提取工艺及其抗氧化活性,采用溶剂浸提法提取多酚,选取提取时间、提取温度、乙醇体积分数、料液比为单因素,进一步通过正交试验优化确定最佳提取工艺。以DPPH和ABTS自由基清除率为指标,评价红毛藻多酚的抗氧化活性。结果显示,红毛藻多酚的最佳提取工艺为:浸提温度70 ℃,浸提时间70 min,乙醇体积分数60%,料液比1:10 g/mL,此条件下多酚提取量为（9.67 ± 0.14）mg/g。抗氧化活性评价显示,红毛藻多酚对DPPH和ABTS自由基有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为0.313、0.445 mg/mL。研究结果表明正交优化提取红毛藻多酚的工艺简单可行,此方法提取多酚具有较强的抗氧化活性。红毛藻多酚具有开发为天然抗氧化剂的潜力,有较好的应用前景。     

糜子麸皮中多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

为研究糜子麸皮中多酚提取条件及抗氧化活性,利用超声波-微波协同萃取技术,以多酚提取量为指标,在单因素实验的基础上,选取料液比、乙醇体积分数、提取温度以及超声波功率进行Box-Benhnken中心组合试验,并用响应面法优化多酚的提取工艺;同时,对糜子麸皮中多酚清除DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基和还原力进行评价。结果表明,糜子麸皮中多酚最佳提取工艺条件为：料液比1︰50,乙醇体积分数60%,提取温度75 ℃,超声波功率1000 W,微波功率为200 W,提取时间10 min。在此条件下,糜子麸皮中多酚提取量为8.92 mg/g。抗氧化实验结果显示,该多酚对于DPPH自由基清除率,羟自由基清除率,超氧自由基清除率和还原力的IC₅₀值分别为：0.006 mg/mL,0.142 mg/mL,12.048 mg/mL和4.022 mg/mL,并且糜子麸皮多酚与上述抗氧化活性指标间均呈显著正相关(p<0.05),表明糜子麸皮中多酚具有较强的抗氧化和自由基清除能力。     

蛹虫草多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

以蛹虫草子实体为原料,采用响应面设计优化蛹虫草多酚提取工艺,分析蛹虫草多酚的抗氧化活性。以多酚的得率为指标,在单因素试验基础上,利用Box-Behnken设计进行响应面试验,确定蛹虫草多酚最佳提取工艺,并对多酚体外总抗氧化能力及DPPH自由基、羟自由基清除能力进行分析。结果显示：蛹虫草多酚最佳提取工艺为提取温度51℃、提取时间1.6 h、液料比49∶1(mL/g),优化条件下多酚得率为6.03 mg/g。抗氧化活性分析结果表明：浓度为0～0.4 mg/mL时,蛹虫草多酚总抗氧化能力随着质量浓度的增加而增强,且始终高于同等浓度的维生素C溶液;多酚溶液对DPPH自由基的半抑制质量浓度为19.52μg/mL,为维生素C溶液的75.25%;对羟自由基半抑制质量浓度为86.47μg/mL,是维生素C溶液的8.31%。蛹虫草多酚的提取工艺可行,蛹虫草多酚具有较强的抗氧化活性。     

东海海参多糖酶解提取工艺优化及其抗氧化活性

以东海海参（Acaudina leucoprocta）干品为原料,探究东海海参多糖的最佳提取工艺,并评价其基本组成及抗氧化活性。利用单因素试验考察木瓜蛋白酶的酶解温度、酶解时间、酶添加量、料液比对东海海参多糖提取率的影响,利用正交试验设计对工艺参数进行优化,利用红外光谱对得到的东海海参多糖进行鉴定,并检测东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除率,考察东海海参多糖的抗氧化性。结果表明,各因素对多糖提取率的影响大小顺序为酶添加量>酶解时间>酶解温度,优化的最佳提取工艺为料液比1∶20(g/mL)、酶解温度55℃、酶解时间5 h、酶添加量1.0%,此条件下,东海海参多糖提取率为（11.85±0.27）%;东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除效应随其浓度增加而提高。结果表明,东海海参多糖具有较强的抗氧化活性。