酪蛋白抗氧化肽制备工艺及酶解产物特性研究

采用不同蛋白酶酶解酪蛋白,确定AS1,398中性蛋白酶是酶解酪蛋白制备抗氧化肽的优良酶源.通过单因素和响应面回归分析.得到AS1,398中性蛋白酶酶解酪蛋白的优化工艺条件为:底物浓度30mg/mL,水解时间90min,pH7.2.酶底比为2%(w/w),温度为50℃.优化酶解条件下,10mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率为80.43%,IC50为3.96mg/mL,显现出良好的抗氧化性能.高效液相排阻色谱(HPSEC)分析表明,优化条件下产物主要是3500Da以下的一些短肽.     

酪蛋白抗氧化肽制备工艺及酶解产物特性研究

采用不同蛋白酶酶解酪蛋白,确定AS1,398中性蛋白酶是酶解酪蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到AS1,398中性蛋白酶酶解酪蛋白的优化工艺条件为:底物浓度30mg/mL,水解时间90min,pH7.2,酶底比为2%（w/w）,温度为50℃。优化酶解条件下,10mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率为80.43%,IC₅₀为3.96mg/mL,显现出良好的抗氧化性能。高效液相排阻色谱（HPSEC）分析表明,优化条件下产物主要是3500Da以下的一些短肽。      

亚麻籽降胆固醇活性肽的酶解工艺优化及分级制备

以亚麻籽分离蛋白为原料,利用酶解工艺制备降胆固醇活性肽。对蛋白酶进行了筛选,并通过单因素实验和正交实验确定最优酶解工艺,采用超滤分离技术得到具有较高降胆固醇活性的亚麻籽肽,并对超滤前后亚麻籽肽的氨基酸组成及降胆固醇活性进行了研究。结果表明:最佳酶解工艺条件为采用Protease M进行酶解、加酶量1. 5%、底物质量分数2. 0%、酶解温度50℃、酶解时间3 h,在此条件下亚麻籽肽的降胆固醇活性最强,胆固醇胶束溶解度抑制率达53. 19%;超滤后相对分子质量小于1 kDa的多肽组分降胆固醇活性最强,胆固醇胶束溶解度抑制率达72. 39%,较超滤前提高了19. 20个百分点。氨基酸分析结果表明,超滤后相对分子质量小于1 kDa的多肽组分的总疏水性氨基酸含量明显高于超滤前,提高了15. 97个百分点,而且多肽组分中赖氨酸/精氨酸的比值低于超滤前,这可能是其降胆固醇活性强于超滤前的主要原因。     

鹰嘴豆降胆固醇肽的制备及活性

为了获得降胆固醇肽,本试验以鹰嘴豆为原料,将提取的分离蛋白通过碱性蛋白酶水解,选择加酶量、料液比、酶解时间3个因素,以水解度和胆固醇抑制率为考察指标,进行单因素试验,并在此基础上,以胆固醇抑制率为评价指标,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆蛋白,制备降胆固醇活性肽的条件;并将制备的鹰嘴豆肽对Wister大鼠进行试验。结果表明:鹰嘴豆蛋白最佳酶解工艺为:p H 8.0,加酶量2%,料液比2%,酶解温度50℃,酶解时间80 min,在此条件下鹰嘴豆多肽体外胆固醇抑制率可达到71.55%;动物试验显示灌胃100 mg/kg bw剂量的鹰嘴豆肽可使大鼠体内胆固醇含量降低22.39%。     

酶解乳清蛋白制备降胆固醇活性肽的工艺研究

利用生物酶技术酶解乳清蛋白,制备具有降胆固醇活性的多肽,通过响应面试验、二次旋转回归设计建立回归模型,以胆固醇胶束溶解度抑制率为评价指标,对乳清蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,乳清蛋白的最佳酶解条件为：酶解时间8.5 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 8.0、加酶量4.7%、乳清蛋白含量5.8%,在此条件下,酶解乳清蛋白得到的活性肽的胆固醇胶束溶解度抑制率为18.21%。     

酶解制备玉米肽的工艺优化研究

为了高效制备玉米肽,对玉米蛋白粉进行超声预处理,以多肽得率为评价指标,从Protamex、Alcalase、Flavourzyme、Protex.7 L、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等6种蛋白酶中筛选出Alcalase为最佳水解用酶.通过单因素试验和响应面分析确定制备玉米肽的工艺条件为:底物浓度10.0 g/(100 ml)、加酶量2 830 U/g、反应pH9.0、反应温度58.0℃、反应时间3h.在该条件下制备的玉米酶解产物的多肽得率为(46.61±0.37)％,与理论预测值的相对误差在±1％以内.     

响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺

以辣椒籽蛋白质为原料,采用酶法制备辣椒籽抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为评价指标,在单因素试验基础上,通过响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺。结果表明：碱性蛋白酶为最适蛋白酶,最优酶解工艺参数为酶添加量0.11 g(以0.30 g辣椒籽蛋白质质量计)、pH 9.0、酶解温度55℃、酶解时间3.75 h,在此条件下,DPPH自由基清除率达到37.71%±0.83%。     

牛乳中酪蛋白磷酸肽的制备工艺优化

研究碱性蛋白酶酶解牛乳中酪蛋白制取酪蛋白磷酸肽的条件,并用响应面对其进行优化。在单因素实验的基础上,依据Centure-Composite Design中心组合实验设计原理,运用3因素3水平的响应曲面分析法,建立了碱性蛋白酶水解牛乳酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽的二次多项数学模型,并以水解度为响应值作响应面,结果表明:酶水解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽的优化工艺条件分别为,水解时间为90 min、酶用量为底物的2.3%、温度60.04℃,pH值7.73,在此条件下实际水解度为20.40%。以此酶解条件,从牛乳中制备酪蛋白磷酸肽,其得率为6.8%,并对其理化性质进行了检测。     

酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化

用Alcalage碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽.通过单因素实验研究了底物质量分数、酶解pH、酶解温度、加酶量对蛋白水解度和大豆肽得率的影响,并通过响应面分析法对酶解条件进行了优化,得出最佳条件为:底物质量分数5%,酶解pH9.5,酶解温度55℃,加酶量5 400 U/g蛋白.在此条件下,大豆分离蛋白水解度为20.16%,大豆肽得率为92.30%.     

酶解制备羊胎盘抗氧化肽工艺条件的优化

对羊胎盘下脚料为原料制备羊胎盘抗氧化肽的工艺进行了研究。以DPPH自由基清除率和水解度为考察指标,分别采用4种蛋白酶酶解制备羊胎盘抗氧化多肽,结果表明木瓜蛋白酶酶解产物的自由基清除率最高且水解度适中,因此木瓜蛋白酶被确定为水解酶。通过单因素试验与二次响应面回归分析对酶解工艺参数进行了优化。最佳酶解条件为:底物质量浓度33 mg/m L、pH 6.4、酶解温度55℃、加酶量4 900 U/g、酶解时间120 min,此时羊胎盘蛋白水解度为7.92%,10 mg/m L酶解产物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基与羟基自由基的清除率分别可达92.15%、93.45%与46.88%,显示出较好的抗氧化活性。     

微波协同辅助复合酶法制备高F值玉米肽条件的优化

对微波协同辅助复合酶法制取高F值玉米肽的条件进行优化。以超临界CO2脱脂除杂处理后的玉米蛋白粉(CGM)为原料,采用Alcalase 2.4L与木瓜蛋白酶进行分步水解。通过单因素与正交试验,确定微波协同酶解法制取高F值玉米肽的最佳条件。结果表明:Alcalase 2.4L蛋白酶最佳酶解条件为底物含量9g/100g、酶添加量([E]/[S])3g/100g、pH9.0、微波功率300W、微波时间2.5min,此条件下多肽得率为23.80g/100g CGM;木瓜蛋白酶酶解的最佳条件为酶添加量([E]/[S])4g/100g、pH7.5、微波功率100W、微波时间5min,此条件下耗碱量为6.22mL/100mL。使用微波协同酶法所制取的玉米肽F值为27.15,比传统的水浴酶法提高了21%,且极大地缩短了反应时间。     

酶水解法制备大豆肽的研究

采用酶水解法，由大豆分离蛋白制备大豆肽。对五种蛋白酶水解大豆分离蛋白的特性进行了比较。筛选出水解能力最强的碱性蛋白酶，其最佳水解条件为：温度５５℃、ｐＨ１０．５、酶用量５％（Ｖ／Ｗ，相对于底物蛋白）、底物浓度５％（Ｗ／Ｖ）、反应时间６ｈ。水解度可达到３０％～４０％，产物平均肽链长度２．５～４．０。水解产物经超滤膜分离后的混合物溶解性良好，ＮＳＩ值达９８％以上。水解产物有很强烈地的苦味，用２０％的活性炭粉可以有效地吸附脱苦。脱苦的最佳条件是：温度５０℃～５５℃、ｐＨ４．０～４．５、活性炭／蛋白质＝０．１～０．２／１（Ｗ／Ｖ），慢速搅拌２ｈ。     

大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究

以大米蛋白为研究对象,比较了几种酶对大米蛋白的水解作用效果,确定了一种合适的酶源——精制中性蛋白酶。同时通过单因素试验和响应面分析,确定了采用精制中性蛋白酶制备大米蛋自抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.0%、[E]/[S]2.0%、pH7.0、温度37.5℃、时间4.16 h,该条件下制备的大米蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为60.54%。     

酶解鱼鳞胶制备小分子多肽的研究

以鱼鳞为原料采用蛋白酶酶解，确定制备小分子多肽的最佳工艺条件。发现用混合蛋白酶进行阶段酶解效果最好；对两种脱苦、脱腥的方法进行了比较，发现用复配脱色剂比用活性碳优越；发现超滤分离技术和反渗透膜分离技术对水解液有纯化、浓缩作用；最后经微胶囊化包埋喷雾干燥等技术得到的粉末制品含有较多的小分子多肽，是医药和食品的良好中间体产品。     

酶法制备小分子大豆肽的蛋白酶筛选以及酶解条件优化

本研究对制备小分子大豆肽的蛋白酶进行筛选,并对酶解条件进行优化。综合考虑酶量对产物的水解度、平均分子量及游离氨基酸的影响,确定酶解的最佳条件为:温度55℃,pH值8.5,底物浓度为10%,分别加入1.5%的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶和3942中性蛋白酶,调pH值至4.5,再分别加入2.5%的Fromase真菌蛋白酶和537酸性蛋白酶。结果显示,多酶复合水解可提高蛋白质降解率,并尽可能降低多肽的相对分子质量。     

猪骨抗氧化肽的酶解制备研究

本文以水解度和自由基清除率为双指标,较深入地研究了两种蛋白酶在生产猪骨抗氧化肽中的应用特性,结果表明中性蛋白酶比木瓜蛋白酶适合水解猪骨明胶制备抗氧化肽,其最佳酶解工艺参数为:pH7,温度40℃,[E]/[S]=10%,[S]=2%,水解时间4h,该条件下制备的抗氧化肽对O2-·有很强的清除作用,清除率达到83.22%.     

酶解麦胚蛋白制备抗氧化肽的研究

通过单因素试验和响应面分析,确定了采用碱性蛋白酶ProleatherFG-F制备麦胚抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.00%、[E]/[S]4.90%～5.05%、pH9.5、温度53.30～54.50℃、时间3.8h,该条件下制备的麦胚抗氧化肽对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为59.55%和56.38%。     

再生半纤维素酶解法制备低聚木糖的工艺优化

采用膜分离提取再生纤维素纤维废液中的半纤维素,确定了工艺参数及半纤维素组成。半纤维素经过酶水解制备低聚木糖,通过正交试验确定了酶水解的工艺参数,分析并测定了低聚木糖的组成和产品应用性能指标。结果表明,选择浓缩倍数为3.5倍时,半纤维素的提取率可达到85%,半纤维素中木糖含量可达79.2%。确定了酶水解的工艺参数,pH为5,酶解温度为55℃,酶解时间为7 h,其低聚木糖得率可达到36.2%。所得低聚木糖的主要成分为木四糖、木三糖、木二糖和木糖,占比可达90.7%。产品性能指标满足饲料级低聚糖干粉国家标准要求,具有很好的应用价值。     

半固态酶解法制备豆粕肽工艺的优化

为优化豆粕酶解工艺,得到分子质量适中,易于消化吸收的豆粕肽。以豆粕为原料,比较胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、角蛋白酶在半固态酶解过程中,对豆粕的水解度、豆粕肽得率、豆粕肽的分子质量和苦味值的影响差异。采用酶解效果较好的胰蛋白酶进行单因素实验,选取影响因子较强的3个条件(液固比、豆粕量、温度)进行响应面试验,优化制备工艺。结果表明:用胰蛋白酶酶解,加酶量40 mg/g,酶解时间36 h,液固比1 mL/g,豆粕量30 g,温度50 ℃,在此条件下制得的豆粕肽的得率较高(18.87%)。