具抗氧化功能益生菌菌株筛选及其对丙烯酰胺诱导肠上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为指标,筛选抗氧化能力强的乳杆菌,并研究其对模拟胃肠道环境的耐受性及对丙烯酰胺所致肠上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:以DPPH自由基清除率为指标,筛选得到清除率高的2株乳杆菌GBE17和GBE29,并进行16S rDNA测序鉴定。构建丙烯酰胺诱导的Caco-2氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞培养上清液、细胞裂解液中的抗氧化物相关物质及酶活,评价其不同处理方式对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用,并分别测定其在pH 3.0、2.5及胆盐质量分数为0.05%、0.1%环境下处理1～4 h的活菌数变化。结果:植物乳杆菌GBE17和唾液乳杆菌GBE29发酵上清液的DPPH自由基清除率分别为89.44%、79.24%。GBE17的治疗组与干预组和GBE29的干预组均可降低乳酸脱氢酶的释放,提高细胞内外超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性。2株乳杆菌在pH 3.0和胆盐质量分数0.1%的环境下处理4 h,存活数均高于10⁷ CFU/mL。结论:植物乳杆菌...     

麦胚清蛋白抗氧化肽的筛选及对细胞氧化损伤的保护作用

本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)与2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfo...     

乳酸菌发酵乳蛋白水解物对RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用

利用乳酸菌发酵乳蛋白水解物(milk protein hydrolysates, MPH)有助于提高乳酸菌水解蛋白的能力,促进功能成分的产生与挖掘。基于不同乳酸菌发酵MPH上清液的体外自由基清除能力和铁离子还原力综合评价,筛选获得一株抗氧化活性较强的鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)ST(LST)。LST发酵MPH所得上清液产物(FPS)中,游离氨基酸总量比MPH提高了66.98%,分子质量低于180 Da组分增加8.66%。在H₂O₂诱导的RAW 264.7细胞氧化损伤模型中,FPS能显著提高细胞存活率,上调核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和谷胱甘肽过氧化酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)等抗氧化基因的转录水平。由此表明,鼠李糖乳酪杆菌LST发酵MPH可以有效缓解...     

抗氧化活性乳酸菌的筛选

以获得高抗氧化活性乳酸菌菌株为目的,从泡菜汁、鹅肠、鸡嗉囊等材料中分离获得20株乳酸菌。以对DPPH自由基和O2－ ·的清除率为初筛指标,总抗氧化(T-AOC)能力和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力为复筛指标,筛选得到两株具有较高抗氧化活性的菌株L8和L17。利用糖发酵实验、生理生化实验和16S rDNA序列比对的方法对其进行鉴定,发现它们均为干酪乳杆菌。     

槟榔多糖对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

采用CCK-8法测定细胞的存活率、Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,利用蛋白质免疫印迹检测人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax及细胞间紧密连接蛋白的表达情况,研究槟榔多糖对DMNQ诱发Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明：槟榔多糖能显著抑制促凋亡蛋白Bax的表达并同时促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制DMNQ引起的细胞凋亡并减轻内质网应激,显著上调Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin 1的表达,维持细胞紧密连接的完整性,即槟榔多糖能显著改善DMNQ诱导的Caco-2细胞氧化损伤。     

高抗氧化活性乳酸菌的筛选

比较了15株乳酸菌的抗氧化能力,旨在筛选出高抗氧化活性的乳酸菌,为天然抗氧化剂的开发及乳酸菌在功能性食品中的应用提供理论依据。通过羟自由基清除试验、超氧阴离子自由基清除试验以及还原能力评价试验,系统评价了15株受试乳酸菌的菌体及其胞外分泌物的抗氧化能力。结果表明,抗氧化活性具有显著的菌株特异性。菌株L14（植物乳杆菌）在上述3种评价体系中均表现出最强的抗氧化能力,其次是菌株L15（唾液乳杆菌）,表明这两株乳酸菌在减轻机体氧化损伤方面具有一定的应用价值。     

高抗氧化乳酸菌的筛选鉴定

为了寻找天然的抗氧化剂,对18株乳酸菌的菌体细胞和无细胞提取物的DPPH自由基清除能力、羟自由基的清除能力、超氧阴离子自由基的清除能力、还原能力、抗脂质过氧化能力等5项抗氧化指标进行比较,并对高抗氧化活性的乳酸菌进行抗性筛选,鉴定出符合要求的菌株。结果表明:18株乳酸菌具有不同的抗氧化能力,编号为L4、L5、L8、L14、L18的菌株具有较高的抗氧化活性,其中,菌株L14抗人工胃液和胆盐的能力较强,有作为天然抗氧化剂的应用前景。结合生化特性鉴定和16S r DNA鉴定,确定其为类干酪乳杆菌类干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)。     

抗氧化乳酸菌的筛选及其益生特性评价

为筛选出具有高抗氧化能力和优良益生特性的乳酸菌,该研究应用乳酸菌选择性培养基从传统发酵浆水中分离纯化得到120株乳酸菌,利用DPPH自由基清除率对120株乳酸菌进行初选,获得10株DPPH自由基清除率>30%的乳酸菌,通过羟自由基、超氧阴离子自由基清除率复选,获得5株羟自由基清除率>50%,超氧阴离子自由基清除率>40%的乳酸菌。经16S rDNA序列鉴定,5株乳酸菌中有2株为植物乳杆菌(Z12、Z13)、2株为副干酪乳杆菌(Z33、Z45)、1株为鼠李糖乳杆菌(Z41)。对5株乳酸菌的益生特性研究表明,Z12、Z45、Z33菌株在pH 2～3的酸性环境中存活率>50%,在胆盐质量分数为0.1%～0.5%环境下存活率>10%,自凝聚率>29%,表明这3株乳酸菌具有较强的耐酸、耐胆盐能力及较高的黏附特性,可用于抗氧化功能食品的开发。     

具抗氧化功能益生菌菌株筛选及其对丙烯酰胺诱导肠上皮细胞氧化损伤的保护作用

为提高发酵蓝莓汁中的胞外多糖（exocytopolysaccharide,EPS）含量,以蓝莓为原料,选择三株高产胞外多糖的乳酸菌,采用单因素法、响应面法（RSM）对发酵条件进行优化,筛选出影响最大的四个因素：初始pH、接种量、发酵温度、发酵时间。在此基础上,采用人工神经网络（ANN）和遗传算法（GA）求解得到最佳发酵工艺条件为植物乳杆菌9sh、发酵乳杆菌SR2-6、柠檬明串珠菌GM11的菌种比例2:1:1,乳糖6%,大豆肽0.6%,蓝莓汁初始pH4.5,接种量8%,发酵温度30 ℃,发酵时间60 h,此时EPS含量为3.537 g/L。研究表明RSM和ANN可用于优化发酵蓝莓汁产EPS工艺。     

乳酸菌抗氧化活性的研究进展

介绍了乳酸菌的抗氧化活性、可能机制及其研究进展。在体外实验中，乳酸菌及其无细胞提取物能清除机体羟自由基(HO)、过氧化氢(H2O2)、二苯代苦味肼基自由基(DPPH)；可抑制脂质过氧化、螯合金属离子，具有总还原能力及SOD酶活性。并介绍了乳酸菌抗氧化活性的体内实验结果。     

乳酸菌粘附肠道上皮细胞的研究进展

近些年来,乳酸菌因对人体健康功能的促进作用而成为研究热点。目前普遍将乳酸菌的粘附能力作为评价乳酸菌益生性的首要指标。乳酸菌对肠道上皮细胞或细胞外基质组分的粘附会引起机体产生有益的生物学效应。本文从乳酸菌的黏附素和宿主受体的相互作用阐述乳酸菌的粘附机制以及影响其粘附能力的内、外因。归纳目前国内外有关评价乳酸菌粘附特性的方法,以期为乳酸菌粘附特性的研究和应用奠定理论基础。     

Effects of Lactic Acid Bacteria and Fermented Milks on Eicosanoid Production by Intestinal Epithelial Cells

ABSTRACT: Fermented milk products produced with probiotic lactic acid bacteria (LAB) have attracted interest due to their potential health benefits. Probiotic bacteria have a range of immunomodulatory activity, interacting with a variety of cell types in the immune system. Interactions with intestinal epithelial cells (IEC) are an avenue through which probiotics and their fermented milks can influence production of key immunoregulatory molecules, including cytokines and eicosanoids. The eicosanoids, which include the prostaglandins (PGs), are lipid mediators implicated in both acute and chronic inflammatory processes. The primary objective of this study was to determine the ability of probiotic LAB and their ferments to interact with IEC and influence their eicosanoid production. Effects of LAB and their milk ferments on prostaglandin E₂ (PGE₂) and prostaglandin F_2α (PGF_2α) production by human IEC lines were determined using a competitive enzyme immunoassay. LAB alone did not alter interleukin (IL)-1β-induced prostaglandin production by IEC. However, milk fermented with Lac-tobacillus (L.) rhamnosus strain R0011 significantly suppressed IL-1β-induced levels of PGE₂ and PGF_2α, an effect which was counteracted by the addition of strain R0011. Milk ferments prepared withL. acidophilus strain R0052 were less effective in down-regulation of PG production by IEC. Naltrexone, an opioid receptor antagonist, blocked the suppressive effects of L. rhamnosus R0011 milk ferments on PGF_2α production by IEC, suggesting that the bioactivity the ferments is opioid receptor-mediated. These findings support immunomodulatory potential of fermented food components through interactions with intestinal epithelial cells.     

鱼肠道中抗氧化活性乳酸菌的筛选及鉴定

从海水和淡水鱼肠道的乳酸菌中筛选具有抗氧化活性的乳酸菌菌株,旨在降低和预防水产品加工过程中氧化导致的质量问题.结果表明:从48株乳酸菌中筛选出5株具有较强抗氧化活性的乳酸菌,进一步复筛获得来源于草鱼肠道的菌株CY1-2的活性最强.菌株CY1-2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率和抗...     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对乙酰水杨酸诱导小肠上皮细胞损伤的修复作用

本实验研究胰岛素样生长因子-I（insulin-like growth factors,IGF-I）对乙酰水杨酸（acetylsalicylic acid,ASA）所致的小肠上皮细胞（intestinal epithelial cells,IEC-6）损伤的影响。通过构建ASA诱导IEC-6损伤模型,采用CCK-8法检测IGF-I对IEC-6损伤的修复作用;同时测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力,以及细胞中丙二醛（malondialdelyde,MDA）浓度、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力、细胞总蛋白质量浓度和Na+,K+-ATP酶活力。结果表明：与对照组相比,不同质量浓度的IGF-I均可以显著促进细胞的增殖（P＜0.05）;与损伤模型组相比,IGF-I能提高细胞存活率,降低细胞培养液中LDH活力,降低细胞ALP活力和MDA浓度,提高细胞总蛋白质量浓度,提高Na+,K+-ATP酶活力。IGF-I对ASA所致损伤的IEC-6可以促进增殖,抑制脂膜氧化,维持细胞形态的完整性,具有损伤修复作用。     

降胆固醇乳酸菌的筛选及对大鼠血脂的影响

对分离自发酵品及肠道排泄物的乳酸菌进行降胆固醇体外筛选及体内评价。结果显示：所分离得到的菌株中,对MRS-CHOL培养基胆固醇降解率最高的是R-2菌株(26.97±0.51)%和I-2菌株(23.72±0.41)%;R-2和I-2菌株对酸(pH3.0)有一定耐受性,在0.3g/100mL胆盐质量浓度条件下培养6h后,I-2的活菌数为1.1×104CFU/mL,R-2的活菌数为2.2×106CFU/mL。与对照组相比,采用I-2菌株和R-2菌株饲喂高脂大鼠,均可明显抑制大鼠总胆固醇(TC) (P＜0.01) 和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(P＜0.05)升高;经鉴定,I-2菌株和R-2菌株分别为海氏肠球菌(Enterococcus hirae)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)。     

去除脱氧雪腐镰刀菌烯醇乳酸菌的筛选及其作用条件

为了探讨乳酸菌对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的脱毒效果,本文利用腌鱼、泡菜、酸马奶中分离得到的乳酸菌,采用共培养的方式,旨在筛选出一株能够高效去除DON的乳酸菌,并对菌体浓度、反应温度、pH进行了研究,同时测定了该乳酸菌对DON的耐受能力。结果表明,从150多株乳酸菌中筛选得到了一株对DON有较高去除能力的副干酪乳杆菌,当菌体浓度达到10¹⁰ CFU/mL以上,反应温度为37℃,pH为7时,去除率为40.4%。且副干酪乳杆菌对DON有一定的耐受能力,中低浓度(0~50 μg/mL)的DON几乎不影响乳酸菌的生长,其为应用于饲料以及谷物中霉菌毒素的脱毒提供了依据。