中药复方颗粒对D-半乳糖致衰老模型小鼠尿液的核磁共振氢谱代谢组学研究

目的采用基于核磁共振氢谱(hydrogen-nuclear magnetic resonance, ~1H-NMR)的代谢组学研究方法探讨一种中药复方颗粒对D-半乳糖致衰老模型小鼠尿液代谢的影响。方法昆明小鼠48只,雄性,随机分为正常对照组、衰老模型组、阳性对照组、中药复方颗粒低、中、高剂量给药组;采用D-半乳糖致小鼠衰老模型,用中药复方颗粒进行药物干预,各组小鼠末次给药后收集24h内的尿液进行~1H-NMR检测,随后采用偏最小二乘法-判别式分析(partialleastsquares-discriminantanalysis,PLS-DA)及正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA)的方法对6组小鼠尿液代谢物进行模式识别分析并构建相应的代谢通路。结果代谢组学分析发现小鼠尿液中有超低密度脂蛋白(very low-densitylipoprotein,VLDL)、异亮氨酸、亮氨酸、乳酸、丙氨酸、胆碱、蛋氨酸、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、二甲胺、三甲胺、牛磺酸、甘氨酸、肌酸、尿囊素、尿素、马尿酸、甲酸等20个差异代谢物;以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,柠檬酸循环(TCA循环),丙酮酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸代谢等7个相关代谢通路。结论 D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的能量代谢、氨基酸代谢和炎症反应相关通路紊乱,而中药复方颗粒对其紊乱有一定的改善作用。     

裸燕麦球蛋白源多肽作用于D-半乳糖致衰老小鼠的代谢组学研究

本实验研究裸燕麦球蛋白源多肽(peptide from naked oat globulin,PNOG)在D-半乳糖(D-galactose D-gal)致衰老小鼠体内的抗氧化作用机制。利用超高效液相色谱-二级质谱联用技术对小鼠进行脑组织非靶向代谢组学研究,并采用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析方法结合变量投影重要度与非参数检验共同筛选出与PNOG在体内抗氧化机制有关的差异显著的代谢标志物及其作用通路。结果表明:PNOG治疗组小鼠体内存在甘油磷酸胆碱、乙酰胆碱、L-肉碱、一磷酸腺苷、尿酸、S-腺苷-L-同型半胱氨酸、N-乙酰天冬氨酰氨基甲酸酯等17种显著差异代谢标志物,PNOG可通过调节17种显著差异代谢标志物对应的6条代谢通路(甘油磷脂代谢、脂肪酸代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、嘌呤代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、神经活性配体-受体相互作用)使D-gal致衰老小鼠体内代谢紊乱得到恢复,表明PNOG在体内具有抗氧化、抗衰老的作用。研究结果可为进一步揭示裸燕麦蛋白肽的抗氧化作用机制提供参考。     

虾青素对D-半乳糖致衰老小鼠认知功能障碍的改善作用及机制研究

目的 探究虾青素改善D-半乳糖致衰老小鼠认知功能的作用及作用机制。方法 采用随机数表法将小鼠分为正常组、模型组、虾青素低剂量组、虾青素中剂量组、虾青素高剂量组。除正常组外，其余各组均给予腹腔连续注射D-半乳糖，采用腹腔注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型。通过水迷宫实验观察各组小鼠学习记忆能力的变化情况；采用分光光度法测定小鼠脑组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)和谷胱甘肽(glutataione, GSH)的含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性；通过酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)的表达水平；通过免疫印记法检测小鼠脑中突触素(synaptophysin, SYN)、突触后致密物-95 (postsynaptic density-95, PSD-95)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinasep, p38MAPK)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(Phosphorylated p38 mitogen activated protein kinase, p-p38)的表达水平。结果 行为学实验结果显示，虾青素各剂量组对于D-半乳糖致衰老小鼠认知功能障碍均有改善作用，并且存在剂量依赖性。生物学检测结果显示，虾青素可以降低衰老小鼠脑组织中MDA的含量，升高GSH的含量，并且提高SOD的活性；降低小鼠血清中IL-6和TNF-α的表达水平，提示虾青素可以通过抗氧化和抗炎，改善D-半乳糖致衰老小鼠引起的认知功能障碍。此外，蛋白质免疫印迹(Western Blot, WB)结果显示，给予虾青素干预后，衰老小鼠脑中突触相关蛋白SYN和PSD-95的表达水平显著提升，p-p38蛋白的表达水平显著降低，提示虾青素可以通过抑制P38MAPK信号通路的过度激活，改善突触可塑性。结论 虾青素对D-半乳糖致衰老小鼠认知功能障碍具有改善作用，其作用机制可能与抑制P38MAPK信号通路过度激活，抗氧化、抗炎和改善突触可塑性有关。     

贡菊多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

目的:探讨贡菊多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老的作用。方法:将小鼠随机分为5组:空白对照组,D-半乳糖衰老模型对照组(80mg/kg·d bw),贡菊多糖低、中、高剂量组(50、100、150mg/kg·d bw),考察血清和肝中SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC和血清、肝及脑中的MDA等指标。结果:贡菊多糖能拮抗D-半乳糖所致的小鼠衰老,使小鼠血清及肝组织SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活性明显回升,血清、肝脏和脑组织中MDA的水平下降。结论:贡菊多糖具有延缓衰老的作用。     

平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的抗氧化作用

为了探讨平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的体内抗氧化作用,采用颈背皮下注射D-半乳糖(500mg/(kg ·d))建立亚急性衰老小鼠模型,通过对各组小鼠一般体征、脏器指数、血清或肝组织抗氧化酶活性及脑组织单胺氧化酶(MAO)活力的比较分析,全面评价平贝母多糖FUP-1的抗氧化衰老作用。结果表明：与模型组相比平贝母多糖FUP-1能显著降低D-半乳糖诱导衰老小鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量(P＜0.05),提高肝组织中总抗氧化能力(T-AOC)、显著提高肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P＜0.05),同时降低脑组织中MAO活力。提示平贝母多糖FUP-1具有一定的延缓衰老作用,其作用可能与其提高抗氧化酶活性和抗脂质过氧化有关。     

蜂王浆对D-半乳糖致衰老小鼠肾脏的作用

蜂王浆具有延缓衰老的功效,对多种条件造成的肾脏损伤也具有一定的保护作用,但蜂王浆是否具有延缓衰老引起的肾脏功能衰退的作用尚不清楚。为研究蜂王浆对衰老小鼠肾脏的作用,以SPF级昆明小鼠为研究对象,50只小鼠(雌雄各一半)分为5组,对照组注射和灌胃生理盐水;另外4组注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型的同时,衰老模型组灌胃生理盐水,2个阳性对照组分别灌胃维生素E和六味地黄丸,实验组灌胃蜂王浆,实验期持续90d。研究通过肾脏指数、肾脏病理组织切片、血液尿素氮和肌酐水平评价小鼠的肾脏功能情况,通过总抗氧化能力和超氧化物歧化酶水平评价组织的抗氧化能力;利用非靶标血清代谢组解析蜂王浆调控的主要代谢物和代谢通路。结果表明:衰老小鼠肾脏发生明显变化,肾小囊囊腔明显扩张,肾小球球体萎缩;血液尿素氮、肌酐水平显著上升,总抗氧化能力和超氧化物歧化酶水平显著下降;灌胃维生素E、六味地黄丸和蜂王浆均能不同程度地缓解肾脏生理功能和抗氧化能力的下降,而蜂王浆和六味地黄丸更加明显地减轻了小鼠肾脏病变。衰老小鼠血清代谢结果显示,与六味地黄丸组相比,蜂王浆调控的代谢途径更具有针对性,主要在氨基酸代谢、能量代谢和脂质代谢途径发挥调控作用;与模型组相比,蜂王浆组雌雄小鼠分别有308和343种代谢物发生了显著变化,分别富集在19和15条代谢通路上,这些代谢通路主要涉及抗氧化、提高能量供应和维持肾脏基本功能方面。结果表明,蜂王浆对D-半乳糖致衰老小鼠的肾脏具有较好的保护作用,研究旨在为进一步应用蜂王浆开发功能性食品提供理论依据。     

鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化性的研究

目的:采用D-半乳糖注射昆明种成年小鼠,建立衰老模型,研究鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化能力的影响。方法:昆明种成年小鼠,随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组及VE对照组。以小鼠血清、肝脏及脑组织中的SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA含量为指标,考察鸡骨胶原蛋白肽在体内的抗氧化性能。结果:鸡骨胶原蛋白肽能够显著提高致衰小鼠体内肝组织、脑组织中的GSH-Px、CAT(P<0.05)和SOD活力(P<0.05),而血清、肝组织和脑组织中的MDA含量(P<0.05)则显著降低。结论:摄入适当的鸡骨胶原蛋白肽可以有效地增强小鼠机体的抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的小鼠衰老。     

五味子乙素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用

目的：观察五味子乙素（schisandrin B,SCB）对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用。方法：ICR小鼠随机分为4 组,即正常对照组（灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水）、衰老模型组（灌胃蒸馏水,皮下注射220 mg/kg D-半乳糖）、SCB（M）组（灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射D-半乳糖220 mg/kg）、SCB（C）组（灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射生理盐水）,连续给药7 周。通过避暗实验及Morris水迷宫实验观察SCB对小鼠学习记忆能力的影响;通过WST-1法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;通过硫代巴比妥酸法检测小鼠脑组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;通过实时定量聚合酶链式反应及Western blot法,检测小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达情况。结果：SCB能够明显改善D-半乳糖诱导的脑衰老小鼠的学习记忆能力,提高脑衰老小鼠脑组织中SOD活力,降低MDA水平,明显降低脑组织中的p19、p53、p21基因的表达水平。结论：SCB能够改善D-半乳糖诱导的小鼠脑衰老,该作用可能与其提高小鼠抗氧化能力及下调小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达水平有关。     

两种甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的:研究两种甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用。方法:80只小鼠随机被分为正常组、D-半乳糖组、两种甜叶菊废渣提取物低、中、高剂量组(100,200,500 mg/kg bw)。采用颈背部皮下注射D-半乳糖(500 mg/kg bw)构建衰老模型,正常组颈部皮下注射等体积的生理盐水,样品组同时给予不同剂量的甜叶菊废渣提取物。持续11周后,测定小鼠血清、肝脏和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性和丙二醛(MDA)的含量,以及脑组织中抗氧化酶基因的相对表达量。结果:与D-半乳糖组相比,两种甜叶菊废渣提取物均在不同程度上提高小鼠血清、肝和脑抗氧化酶(SOD和GPx)的活力,降低MDA含量,且在高剂量时(500 mg/kg bw)效果最为显著。两种甜叶菊废渣提取物高剂量组小鼠脑组织中抗氧化酶基因(Nrf-2,SOD1,GPx1,HO-1)的相对表达量显著增加。结论:两种甜叶菊废渣提取物通过促进抗氧化酶基因表达,增加D-半乳糖致衰老小鼠体内相关抗氧化酶的活力并减少氧化损伤产物MDA的含量,具有潜在的延缓衰老的作用。     

肌醇与D-手性肌醇抗氧化作用的研究

目的:肌醇、D-手型肌醇对D-半乳糖致衰老小鼠体内抗氧化能力的研究。方法:采用颈背部皮下注射D-半乳糖的方法建立衰老小鼠模型,然后分别以100、200、400mg/(kg·bw)剂量的肌醇、D-手型肌醇灌胃。给药八周后,将小鼠处死,观察其对血清、肝脏和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)的影响。结果表明:与模型组相比肌醇、D-手性肌醇各剂量组均能不同程度增加血清和组织中SOD和CAT的活性,提高T-AOC,降低MDA含量。说明肌醇和D-手型肌醇可以通过提高抗氧化酶的活性,显著提高D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化能力。     

基于UPLCQTOF/MS的黑灵芝多糖对大鼠急性肠道炎症作用机制研究

探究黑灵芝多糖（PSG）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肠道炎症的作用机制。本实验将大鼠随机分为正常组（Con）、模型组（LPS）、阳性对照组（DEX）和黑灵芝多糖低、中、高剂量组（PSG）,每组10只。PSG低、中、高剂量组分别灌胃黑灵芝多糖20、40、80 mg/kg。Con组、LPS组与PSG组则每天灌胃等量的生理盐水,连续灌胃7 d。第7 d灌胃结束后,腹腔注射0.8 mg/kg的LPS溶液建立急性肠道炎症模型。通过观察大鼠空肠组织形态、检测细胞因子IL-1β及IL-10含量等指标,结果发现,PSG对LPS诱导的大鼠具有抗炎作用。与LPS组相比,PSG组空肠组织形态明显得到改善,肠道组织中IL-1β和IL-10含量被调节至正常水平。进一步,利用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）方法获得了四组大鼠盲肠内容物样品的代谢轮廓图。结果发现,与Con组相比,LPS组大鼠盲肠内容物中存在22种代谢物。同时,PSG干预可回调PC （24:0/20:4（5Z,8Z,11Z,14Z））、DG （16:0/20:3（5Z,8Z,11Z）/0:0）等12种差异代谢物,进而影响甘油磷脂代谢、亚油酸代谢和α-亚麻酸代谢等三条代谢通路,发挥其对LPS诱导大鼠的抗炎作用。综上,PSG可改善LPS所致急性肠道炎症,作用机理与其抑制促炎因子的释放和代谢紊乱有关。     

红花籽油对D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗衰老作用

为了研究红花籽油的抗衰老作用,采用红花籽油灌胃D-半乳糖致衰老小鼠模型,利用试剂盒测定这些小鼠脑肝组织的丙二醛(MDA)含量,单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。统计分析各组之间与衰老和抗衰老有关成分含量的差异显著性。结果表明:红花籽油组小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性显著(P0.05)或极显著(P0.01)低于衰老模型组;GSHPx、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性极显著高于衰老模型组。红花籽油的抗衰老机制可能是:通过清除自由基,抑制自由基诱导的脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物产生;通过改善机体新陈代谢,促进D-半乳糖分解和代谢,改善物质能量代谢,调节与衰老有关的基因表达,抑制MAO基因表达,降低脑肝组织的MAO含量;促进GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD基因表达,提高脑肝组织GSHPx、CuZn-SOD和Mn-SOD含量。红花籽油能显著降低衰老模型小鼠脑肝组织MDA含量和MAO活性,显著提高GSH-Px、SOD-1和SOD-2活性,具有显著的抗老作用。     

沙棘多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

评价PBP(polysaccharide from Hippophae rhamnoides,PBP)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用。小鼠分为空白组、衰老模型组、阳性组(V_E 170 mg/kg)、PBP低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,连续灌胃30 d,测定其脏器指数、肝、脑组织及血清的SOD、GSH-Px活性及MDA含量;HE染色观察各组动物肝脏及脑组织细胞及结构变化。结果表明,与模型组相比,PBP高剂量及V_E组小鼠体质量增长幅度最大,PBP高、中及V_E组的脑、心脏及脾脏指数与模型组相比均显著提高(P<0.05,P<0.01);PBP高、中剂量组中肝、脑及血清中的GSH-Px均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量中肝、脑及血清中的SOD均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量及V_E组中肝、脑及血清中的MDA均极显著低于模型组(P<0.01)。组织切片HE染色发现PBP对衰老导致小鼠肝、脑组织细胞及结构损伤具有保护作用。PBP对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的保护作用可能与其具有抗氧化作用有关。     

辣木多肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化功能的影响

探讨辣木多肽(MOPP)对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响。小鼠腹腔注射D-半乳糖(120mg/kg)建立衰老模型。建模成功后,分设正常组,D-半乳糖衰老组,维生素C组,MOPP低剂量(10 mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)组。连续给药6周后,依试剂盒说明分别测定血清总抗氧化力(T-AOC),脑、心脏和肝脏及血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)和丙二醛(malondiadehycle,MDA)水平。q RT-PCR法测定肝内Mn-SOD、Gu/Zn-SOD和CAT的m RNA表达。与衰老对照组相比,MOPP能分别有效提高衰老小鼠血清T-AOC能力(至13.73～17.98U/m L),及血清SOD(8.04～11.65 U/mg protein)、CAT(4.56～6.45 U/mg protein)和GSH-Px(7.28～10.65 U/mg protein)活性,并显著提升脑、心脏及肝组织中抗氧化物酶(SOD、CAT、GSH-Px)活力(p0.05)。同时,高浓度MOPP还能使血清、脑、心脏和肝组织中MDA水平显著降低43.6%,44.7%,31.4%和56.0%(p0.05)。此外,MOPP干预还能增强肝脏中SOD、CAT和GSH-Px的m RNA转录。本研究结果提示MOPP能明显提高D-半乳糖致老龄小鼠体内的抗氧化状态。     

刺梨预防D-半乳糖诱发小鼠皮肤衰老的作用研究

考察刺梨对D-半乳糖引起的皮肤衰老模型小鼠的保护作用。实验测定服用刺梨期间动物皮肤水含量,服用结束后皮肤超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)及透明质酸(hyaluronic acid,HA)水平,同时对血清中抗氧化指标进行检测,并以苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察皮肤组织结构。结果表明:在慢性注射D-半乳糖诱发皮肤衰老的小鼠模型中,刺梨能显著增加皮肤水含量,增强皮肤中SOD活力,减少脂质过氧化产物MDA的积累,增加HYP和HA水平,改善衰老皮肤的组织结构。可见,刺梨能显著减轻D-半乳糖引起的小鼠皮肤衰老。     

水牛乳多肽对衰老模型小鼠机体抗氧化作用的研究

采用小鼠D-半乳糖致衰老模型,研究水牛乳多肽对亚急性致衰老小鼠机体抗氧化的作用,测定各模型组小鼠全脑、肝、心组织脏器指数以及小鼠血清、脑组织、心、肝中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物酶(CAT)活性。结果表明:水牛乳多肽对小鼠脏器以及血清中SOD活性水平的升高有明显作用,其中,对小鼠心脏、全脑以及血清中SOD活性水平有显著影响(P<0.05),能明显降低小鼠脏器以及血清中的MDA含量,说明水牛乳多肽在一定程度上能够提高D-半乳糖模型衰老小鼠的抗氧化能力。     

青藏高原牦牛酸奶中具有抗氧化活性乳酸菌的体内外益生特性

目的:筛选出性状优良的具有抗氧化性的益生乳酸菌并研究其对D-半乳糖致衰老模型大鼠的抗氧化作用。方法:以从青藏高原牦牛酸奶中初步筛选的3株具高抗氧化活性乳酸菌为研究对象,通过耐受模拟胃肠道、耐胆盐和疏水能力实验评价3株乳酸菌的体外益生特性,并将体外益生特性优良的菌株饲喂D-半乳糖致衰老模型大鼠。通过检测各处理组大鼠的脏器指数,肝脏、脑组织和血清中的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SoD)活力、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AoC)以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量来评价乳酸菌的体内抗氧化益生特性。结果:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XM5具有较强的耐模拟胃肠液和耐胆盐能力,同时具有较强的疏水能力。植物乳杆菌XM5的摄入能有效缓解D-半乳糖对大鼠脑组织的氧化损伤;使衰老模型大鼠肝脏中的GSH-Px活力,血清中的GSHPx、T-SoD活力和T-AoC显著提高(P0.05);同时使肝脏、脑组织和血清中的MDA含量显著降低(P0.05)。结论:植物乳杆菌XM5是一株性能优良的抗氧化益生乳酸菌,具有潜在的应用价值。