山东省烟草病毒病毒原鉴定

１９９６年鉴定出５种为害烟草的病毒，它们是马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、烟草蚀纹病毒（ＴＥＶ）、普通花叶病毒（ＴＭＶ）、马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）。其中，烟草蚀纹病毒病（ＴＥＶ）和马铃薯Ｘ病毒病（ＰＶＸ）在山东烟区未见正式报道。烟草马铃薯Ｙ病毒病和烟草黄瓜花叶病毒病是当前生产上发病率较高、造成损失较大的两种病害；同时，黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）和马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ）的复合侵染也是当前生产上亟待解决的主要问题。     

烟草蚀纹病毒的鉴定和主要特性研究

采用人工摩擦接种和桔斑分离技术，从陕西烟田普遍表现叶脉坏死的自然感病烟草（NC89）叶片上分离到蚀纹病毒源，经鉴别寄主测定，琼脂免疫双扩散试验和病叶超薄切片的电镜观察，初步鉴定出所分离的毒源为烟草蚀纹病毒（TobaccoEtchVirus－TEV）。病毒粒子呈弯曲线状，多为723nm×11．5nm，在细胞质中有风轮状和其它形状的内含体。TEV在烟草病汁液中的3种物化特性为：钝化温度为56℃，稀释限点为10－4，在室温条件下体外存活期为7～9天。将提纯的病毒样品进行有关理化分析试验。结果显示：病毒粒子的沉降系数为S20,w=153S,A260/280=1.15,A=2.56.粒子外壳蛋白为单一多肽，分子量为3.1×104。核酸为单分子RNA，分子量为3．2×104。桃蚜传播所需的最短获毒和传播时间均为10S，最长持毒时间为2h，表明桃蚜可进行非持久性传毒。     

山东烟区主要病毒的株系鉴定

1995年至1997年间,从山东烟区各主要产烟县(市)采集病毒样品,经鉴定、分类、分离、纯化后,对纯化物进行了生物学特性、病毒粒体形态、血清学关系等方面的比较,从而明确了山东烟区主要烟草病毒病病原物的株系:烟草黄瓜花叶病毒的普通株系(CMVc)、坏死株系(CMVTN)、黄化株系(CMVY);烟草普通花叶病毒的普通株系(TMVC)、坏死株系(TMVN)、黄化株系(TMVY)、环斑株系(TMVRS);烟草马铃薯Y病毒的普通株系(PVYO)、坏死株系(PVYN);烟草蚀纹病毒的轻症株系(TEVM)、重症株系(TEVs)。其中烟草黄瓜花叶病毒的普通株系(CMVC)、烟草普通花叶病毒的普通株系(TMVC)、烟草马铃薯Y病毒的坏死株系(PVYN)、烟草蚀纹病毒的重症株系(TEVS)是优势株系。烟草蚀纹病毒(TEV)的株系毒力分化属国内首次报道。      

安徽省烟草病毒种类的血清学鉴定

2007 年从安徽亳州、宣城和芜湖等地的烟草产区共采集181 个表现明显病毒病症状的病样,采用Tas-ELISA 和间 接ELISA 方法共检测112 个病样,其中分别检测宣城黄渡、宣城金坝、芜湖红杨、芜湖三元各16 个病样以及亳州陈店48个病样。结果显示,安徽宣城32 个病样中,TMV、CMV、PVY 的阳性率分别为91%、3%、50%,芜湖32 个病样中,TMV、CMV、PVY 的阳性率分别为66%、0、75%,说明宣城、芜湖烟区侵染烟草的病毒种类以TMV、PVY 为主,CMV 为零星侵染;亳州48 个病样中,TMV、CMV、PVY 的阳性率分别为100%、48%、8%,说明亳州烟区侵染烟草的病毒种类以TMV、CMV 为主,PVY 侵染发生较少。     

HPLC法检测辣椒不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

辣椒果实中的辣味成分包括辣椒碱及其衍生物(统称为辣椒碱类化合物),其中,引起辛辣味的主要化学成分辣椒碱和二氢辣椒碱约占总量的90%以上.本试验的目的是检测不同辣椒品种的不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱含量.因此建立了高效液相色谱方法,采用色谱条件为:C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),1‰磷酸水溶液-乙腈(600:400)为流动相,流速为1.5mL/min,柱温为30℃,检测波长为281nm.该法简便,结果准确,可用于测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量.利用该方法,检测了不同辣椒品种的不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量,结果发现印度Teja中辣椒碱和二氢辣椒碱含量最高;辣椒果实不同部位辣椒碱和二氢辣椒碱含量的趋势为胎座>果肉>种子,为合理选择果实不同部位生产辣椒碱提供参考.     

辣椒红色素提取与检测方法的研究进展

辣椒红色素是一种优质天然类胡萝卜素。广泛应用于食品、医药、保健品、化妆品及嗜好品工业中。本文综述了国内外辣椒红色素研究的理化特性、提取、分离纯化、分析测定等方法及应用前景。     

云南省烟草正番茄斑萎病毒属病毒的调查和鉴定

  背景和目的  烟草是云南省支柱产业,近年来烟草斑萎类病害发生严重。了解烟草斑萎类病害在云南的病原种类、病害发生、流行和分布势在必行。  方法  2012以来,本课题组从云南省10个地州市共采集疑似Orthotospovirus属病毒侵染的烟草样品38份,采用症状学观察、酶联免疫吸附反应以及RT-PCR鉴定。  结果  结果显示有20份烟草样品感染Orthotospovirus属病毒,其中番茄斑萎病毒单独侵染样品11份、朱顶红褪绿环斑病毒单独侵染样品4份、番茄环纹斑点病毒单独侵染样品2份、马蹄莲褪绿斑病毒单独侵染样品2份、番茄斑萎病毒和朱顶红褪绿环斑病毒复合侵染1份。  结论  本研究首次报道朱顶红褪绿环斑病毒侵染烟草,同时发现番茄斑萎病毒和朱顶红褪绿环斑病毒复合侵染烟草,鉴定结果对于科学制定烟草斑萎病害综合防治措施,保障云南省烟草种植业的持续健康发展具有重要意义。      

黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的分子鉴定

为了揭示贵州省黔南烟区马铃薯Y病毒(PVY)株系分布及分子变异规律,先利用血清学方法初步鉴定PVY株系,再选择19个PVY分离物进行分子鉴定.结果表明,克隆的19个PVY cDNA片段全长均为1074 nts,包含1个801 nts的完整cp基因,编码266个氨基酸.序列比对发现,19个黔南PVY分离物cp基因核苷酸序列相似性为87.0％ ～ 99.9％,与GenBank登录的其他17个PVY株系cp基因序列相似性为86.6％ ～ 99.9％.系统进化树分析表明,黔南烟区19个PVY分离物中,有3个PVY分离物与PVYN株系和PVYNTN亲缘关系较近,而其他16个PVY分离物与PVYNN:O株系的亲缘关系最近.     

贵州黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的血清学鉴定

2010年从贵州省黔南州烟草产区共采集201个表现明显马铃薯Y病毒病症状的烟草样本。采用Tas-ELISA检测PVY的3个株系PVYN、PVYO和PVYC。结果显示,201个样本中共检测出171个样本受到PVY侵染,其中PVYN37个,占21.6%;PVYO133个,占77.8%;PVYC0个,PVYN和PVYO复合侵染1个,占0.6%。PVY株系分布具有一定规律,侵染黔南州烟草的PVY以PVYO为主要株系,PVYN侵染相对较少,为次要株系,所有样本均没有检测到PVYC侵染,复合侵染零星发生。     

自然发酵辣椒中天然微生物的分离与鉴定

为探究自然发酵辣椒中的天然微生物,对其进行微生物的分离和鉴定,通过生理生化实验结果并对比《伯杰氏系统细菌学手册》,其结果为自然发酵辣椒中G(+)菌为优势菌种:筛选出的9株G(+)菌中R1,R3,T1,T2为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),M3,R2为植物乳球菌(Lactococcus galactococcus),M2,M4为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),M1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus).     

重庆烟区烟草叶斑病的诊断与鉴定

在重庆市烟草病害调查中,从彭水县润溪镇烟田发现一种未知的烟草叶斑病。为明确其病原物的分类地位,通过田间采集症状典型病害样品,经组织分离、菌株纯化并采用科赫氏法则测定其致病性,结合rDNA-ITS分子鉴定方法,对该叶斑病进行了诊断和鉴定。结果表明：该叶斑病的病斑在叶片上呈不规则形,周围有淡黄色晕圈,病部中央灰白色,且密生有黑色小点;分离物菌株psrx-1能引起健康烟株叶片发病,具有致病性;病原菌株的形态学特征表现为分生孢子座垫状、黑褐色,呈球形或半球形,分生孢子梗紧密排列、梗短小、直立,分生孢子暗褐色、球形或近球形,无隔膜,表面有颗粒状凸起或褶皱。经rDNA-ITS基因序列比对分析,将该病害鉴定为附球菌（Epicoccum sp.）引起的烟草叶斑病害,为重庆烟区首次发现的一种烟草新病害。     

烟草种质资源抗马铃薯Y病毒病基因型鉴定

  背景和目的  从作物种质资源中进行等位基因鉴定,特别是优异等位基因的发掘和应用,是使种质资源加速转变为基因资源的关键所在。  方法  采用苗期汁液摩擦接种的方法,对烟草种质资源的马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）抗病性进行鉴定;通过烟草隐性抗PVY基因eIF4E1（又称为感PVY基因eIF4E1）等位性测验、等位基因分子标记检测和RT-PCR扩增测序,对PVY抗病资源进行基因型分析。  结果  （1）从收集到的900多份来自国内外的烟草种质资源中筛选出19份高抗PVY资源。（2）根据等位性测验结果推断19份抗源所具有的PVY抗性均由eIF4E1基因所控制。（3）等位基因分子标记检测和RT-PCR扩增测序结果将19份抗源的eIF4E1基因区分为4种突变类型。  结论  本研究结果丰富了我国对抗PVY烟草种质资源的筛选和利用的内容,为后续烟草PVY抗性优异等位基因的发掘和育种利用提供了基础材料和信息支撑。      

生香酵母筛选鉴定及其对辣椒酱发酵的影响

为了获得适用于辣椒酱发酵的生香酵母,从自然发酵辣椒酱中筛选优良菌种,并对菌种形态特征、生理生化特性、菌种发酵辣椒基料等进行了研究。经筛选,获得一株生香能力较强的菌株LA-Y09,该菌株被鉴定为鲁氏酵母（Saccharomyces rouxii）。菌种LA-Y09的最适生长温度为28 ℃,在NaCl质量分数为12%的培养基中仍有较高菌数,说明其具有良好的耐盐特性,在质量分数为8%的辣椒基料中能够生成多种呈现蜜香和果香的香气成分,使辣椒发酵醪香气得到明显提升。     

原子吸收光谱法测定辣椒及辣椒食品中的微量元素

应用火焰原子吸收光谱法对辣椒及辣椒食品中的Cu、Na、Fe、K、Sr、Mg、Ca、Mn、Zn等9种微量元素的含量进行测定分析。结果显示:Cu、Na、Fe、K、Sr、Mg、Ca、Mn、Zn的标准曲线相关系数为0.9999、0.9820、0.9997、0.9927、0.9982、0.9965、0.9991、1.0000和0.9985;辣椒及辣椒食品中均能检出这9种微量元素,其中辣椒籽中的Cu、Mg、Mn、Zn含量很高;制成辣椒食品后,Na含量大幅度增加,而相对于其他香辣酱,鲜食辣椒酱Na含量最低;辣椒制成辣椒食品后部分微量元素富集(如Cu、Na、Fe、Ca等)比鲜冻辣椒中微量元素含量高。      

Detection and identification of transgenic virus resistant papaya and squash by multiplex PCR

Two separate multiplex PCR assays were developed for the detection of transgenic papaya and transgenic squash. Papaya line 55-1 contains a genetic insertion consisting of the coat protein gene of Papaya ringspot virus strain p and is resistant to infection by this virus. A multiplex PCR was developed to specifically amplify the papaya ringspot virus coat protein transgene construct and an endogenous papaya gene sequence. A third primer set was designed to amplify the -glucuronidase gene construct, which can distinguish between the commercial and noncommercial papaya lines 55-1 and 63-1. Squash line ZW-20 contains genetic insertions of the coat protein genes from Watermelon mosaic virus II and Zucchini yellow mosaic virus and is resistant to these two viruses. Squash line CZW-3 is similar to ZW-20 but additionally confers resistance to Cucumber mosaic virus. A second multiplex assay was developed to detect and differentiate squash lines ZW-20 and CZW-3 in a single reaction.     

耐二氧化硫乳酸菌的筛选鉴定及其在泡野山椒中的应用

筛选出2株源于泡蒜的耐SO2乳酸菌,对其形态学观察、生理生化测试及16S rDNA序列测定,菌株2-2被鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),菌株2-5为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。利用2株菌耐SO_2特性,将其应用于野山椒泡制中,对含SO_2的泡野山椒基础配方进行优化,结果表明:2株菌均在含SO_2 150mg/L的MRS培养基中能正常生长;将2菌株按1∶1的比例混合,以2%(v/w)的接种量接种至含SO_2 75 mg/L,盐含量4%,蔗糖含量2%的野山椒中,室温发酵,成熟的泡野山椒酸咸适宜,色泽金黄、味道鲜美,具有泡野山椒典型的香气,为其工业生产提供了数据参考。     

河南烟区烟草根茎类病害调查及病原鉴定

为明确病害发生分布及病原种类,对河南省11个烟叶产区烟草根茎类病害进行了普查,采集644份典型病害样本,通过综合形态学特性分析、分子鉴定及致病力测定对分离病原菌进行了鉴定.结果表明,镰刀菌属(Fusarium spp.)真菌的平均检出率最高,占52.60％,其次是疫霉菌(Phytophthora nicotianae)...     

干辣椒及辣椒粉中罗丹明B含量的调查与分析

目的了解我国市售干辣椒及辣椒粉中罗丹明B的含量状况,分析违法添加罗丹明B的可能性和含量,为提出罗丹明B经济获利水平下添加行为的评判提供数据支持。方法使用随机抽样原则,在餐饮店、食品商店超市和农贸市场,随机采集干辣椒及辣椒粉,采用液相色谱-串联质谱法检测。结果在2 107份样品中,检出罗丹明B72份(干辣椒21份,辣椒粉51份),检测值在0.2×10-3~11.9 mg/kg之间,干辣椒检测值均0.1 mg/kg;辣椒粉中,23份样品检测值0.1 mg/kg,12份样品检测值在0.1~0.5 mg/kg之间,13份样品检测值在0.5~5.0 mg/kg之间,仅3份样品检测值5.0 mg/kg,且农贸市场和散装样品罗丹明B的检出率高。结论市售干辣椒及辣椒粉中存在违法添加罗丹明B的情况,辣椒粉问题为更严重。     

辣椒及辣椒食品中可溶性多糖抗氧化活性研究

研究辣椒及辣椒食品中的可溶性多糖及其抗氧化活性,用硫酸-苯酚法测定了辣椒及辣椒食品中可溶性多糖含量,并测定了多糖提取物对羟基自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)、二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)的清除能力。结果表明,干辣椒可溶性多糖含量较高,为2.06g/100g,制成辣椒食品后,可溶性多糖含量有所损失;辣椒及辣椒食品的可溶性多糖提取物对.OH,O2-.和DPPH.均有一定的清除能力,而且各个样品的可溶性多糖含量与自由基清除能力间呈正相关关系。     

烟草蚜传病毒病的发生与防治方法的初步研究

通过研究，明确了安徽省烟草蚜传病毒毒源主要为烟田及田边杂草，以及烟田周边菜地、中草药田等；明确了安徽省烟田发生的主要病毒病为PVY、CMV，其次为TMV、TEV、TRSV和PVX；探索了防治烟草蚜传病毒病的较为有效的方法，通过物理阻断蚜虫法基本可以控制烟草病毒病的为害。研究开发了烟草病毒病抑制药剂。