芳樟醇对生姜枯萎病菌的抑制作用

为明确芳樟醇对生姜枯萎病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的抑菌效果与作用机制,以不同质量浓度的芳樟醇处理尖孢镰刀菌,对尖孢镰刀菌菌丝体生长、孢子萌发和细胞膜的损伤以及防治效果进行系统研究。结果表明：芳樟醇可显著抑制尖孢镰刀菌的菌丝生长,其半数有效浓度为1.183 g/L,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)为2.0 g/L,抑制效果与芳樟醇质量浓度呈剂量效应关系;以芳樟醇MIC处理尖孢镰刀菌6 h,其孢子浓度为(1.43±0.12)×10⁴ spores/mL,显著低于对照组((5.79±0.19)×10⁴ spores/mL)(P<0.05);MIC芳樟醇处理枯萎病菌尖孢镰刀菌12 h,其孢子萌发率仅为(5.83±2.16)%,显著低于对照组((95.12±3.78)%)(P<0.05)。1/2 MIC与MIC芳樟醇处理破坏了细胞膜的完整性,导致菌丝悬液中相对电导率、核酸渗漏量显著增加,菌丝中丙二醛浓度也显著增加,麦角固醇含量显著降低,减弱了尖孢镰刀菌的致病...     

ε-聚赖氨酸对柑橘酸腐菌的抑菌活性及作用机制

聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)是一种高安全性、可生物降解的天然食品防腐剂,对环境和人体健康无毒性。为探究ε-PL对柑橘酸腐菌(Geotrichum citri-aurantii)的抑菌活性,并分析其抑菌作用机制,本实验测定ε-PL处理对柑橘酸腐菌的菌丝体生长抑制率及孢子萌发抑制率,ε-PL作用下的胞外相对电导率、A_(260 nm)的变化,并采用激光共聚焦显微镜与扫描电子显微镜观察ε-PL处理对细胞膜完整性及菌丝体形态的影响。结果表明:ε-PL对柑橘酸腐菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为400 mg/L,对菌丝生长和孢子萌发抑制的半最大效应浓度分别为128.79 mg/L和214.77 mg/L;质量浓度为1 600、3 200、6 400 mg/L的ε-PL处理可显著降低柑橘果实酸腐病的损伤接种发病率和病斑直径(P0.05);经1×MIC和2×MIC的ε-PL处理后的柑橘酸腐菌胞外相对电导率、A_(260 nm)和红色荧光强度显著上升(P0.05),表明其细胞膜通透性增加,核酸等胞内物质外渗流出,细胞膜完整性遭到破坏;经ε-PL处理后柑橘酸腐菌菌丝体发生了褶皱变形、断裂。因此,ε-PL通过破坏柑橘酸腐菌的细胞膜结构,造成内容物外渗,使菌丝体形态结构畸变与孢子萌发受阻,进而抑制了菌体细胞的生长繁殖。     

香叶醇对柑橘酸腐病菌的抑菌机制

为研究香叶醇对柑橘酸腐病菌（Geotrichum citri-aurantii）的抑菌机制,用不同质量浓度的香叶醇处理柑橘酸腐病菌,通过生理生化分析及微观结构观察研究其对酸腐病菌孢子和菌丝体的影响。结果表明,香叶醇对柑橘酸腐病菌的最小抑菌质量浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌质量浓度（minimal fungicidal concentration,MFC）均为0.500 g/L;MIC香叶醇处理酸腐病菌12 h后其孢子萌发率仅为（3.28±1.28）%,显著低于对照组的（92.17±1.88）%(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现,香叶醇处理破坏了酸腐病菌细胞的完整性,细胞壁与细胞膜发生质壁分离,细胞器无法分辨,呈现空泡化。细胞通透性发生改变,碱性磷酸酶和核酸发生外泄,相对电导率升高,膜脂质过氧化反应增强,活性氧积累。综上所述,香叶醇通过抑制柑橘酸腐病菌孢子萌发和菌丝生长、破坏细胞结构、促进脂质过氧化和活性氧积累从而影响其正常生理功能,本实验可为有效防治柑橘酸腐病提供新思路。     

等离子体活化水对青椒尖孢镰刀菌的抑制作用

本文旨在研究等离子体活化水（Plasma activated water,PAW）对青椒腐败菌-尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）AF93247的抑制作用。着重研究了制备功率（0~1.18 kW）和制备时间（0~420 min）对PAW物理性质的影响;PAW制备时间（0~60 min）对AF93247菌丝生长和分生孢子萌发的影响,PAW处理时间（0~60 min）对染菌青椒腐败率和品质的影响。实验结果表明,制备功率越高,PAW的氧化还原电位、电导率和温度越高,pH值越低。同一制备功率（0.90 kW）时,随制备时间延长,PAW对AF93247的抑制作用增强。制备60 min的PAW（即PAW60）处理AF93247样品后,其菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率分别为（15.00±1.14）%和（54.44±5.03）%,显著高于其他各组（p<0.05）;PAW60处理后的孢子受损程度也高于其他各组。贮藏实验中,PAW60处理30 min组的染菌青椒色差?E降低率和硬度H降低率与对照组无显著性差异（p>0.05）,青椒腐败率、叶绿素a和总叶绿素损失率显著低于其他各组（p<0.05）。综上,PAW60对尖孢镰刀菌AF93247的有良好抑制作用,用其处理青椒30 min可在14 d内有效抑制青椒腐败的同时最大程度保持其品质。     

烟草根茎部病原真菌的分离与鉴定

为系统了解烟草根茎部主要病原真菌,采集根茎部发黑腐烂病株进行室内分离与鉴定,共分离到病原真菌64株。根据菌落、菌丝和孢子形态特征观察以及多基因位点系统发育分析对病原菌进行分类鉴定,并在烟草叶、茎和根部进行病原菌致病力测定。结果表明,分离得到的病原菌包括：尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、接骨木镰刀菌（F. sambucinum）、共享镰刀菌（F. commune）、苏拉威镰刀菌（F. sulawesiense）、柑橘镰刀菌（F. citri）、番薯镰刀菌（F. ipomoeae）、条纹孢壳属（Lasiodiplodia brasiliense）、小孢根霉（Rhizopus microspores）和枝状枝孢菌（Cladosporium cladosporioides）。致病力测定表明,这些病原真菌对烟草都有致病力,其中接骨木镰刀菌、尖孢镰刀菌、共享镰刀菌和L. brasiliense的致病力较强,苏拉威镰刀菌、番薯镰刀菌、柑橘镰刀菌、小孢根霉和枝状枝孢菌致病力稍弱。病原真菌的分离与鉴定结果将为科学、合理、有效地防治烟草根茎部病害提供依据。     

小麦中致病真菌的分离鉴定及熏蒸对其毒力的影响

小麦受镰刀菌的感染会导致赤霉病、真菌毒素污染和减产,镰刀菌对粮食安全有着严重威胁。通过对小麦中镰刀菌株进行分离鉴定,分离出的三种菌株N1、N2、N3分别属于禾谷镰刀菌属、亚洲镰刀菌属和高秆镰刀菌属。利用产毒基因检测和真菌毒素检测对三株菌株玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和伏马毒素的产毒情况进行分析,结果一致显示N1和N3能产生玉米赤霉烯酮和呕吐毒素,均含有PSK和Tri5两种产毒基因,而N2不产生这三种毒素。进一步通过臭氧和二氧化氯进行气体熏蒸,探究气体熏蒸对分离出的三株菌株的影响,通过观察孢子形态、菌丝体长度、菌丝形态,结果表明二氧化氯熏蒸能有效抑制菌丝生长和孢子萌发,低浓度二氧化氯（300 mg/L）处理0.5 h,可明显抑制菌丝的生长。而臭氧只能抑制孢子萌发,对菌丝的生长没有明显的抑制作用。     

壳聚（寡）糖对柑橘酸腐、黑腐病菌的抑制作用及对采后病害的防治

通过体外实验测定不同浓度的壳聚糖和壳寡糖对酸腐和黑腐病菌孢子萌发、芽管长度和菌丝生长的抑制作用;采用刺伤接种方法评价壳聚糖和壳寡糖对柑橘果实两种病害的防治作用。离体实验结果表明,壳聚糖和壳寡糖浓度为10mg/mL时几乎完全抑制两种病原菌的菌丝生长;浓度为0.5mg/mL壳聚糖和壳寡糖能完全抑制柑橘酸腐病菌（Geotrichum candidum）孢子萌发和芽管伸长的效果,而2mg/mL的壳聚糖才能完全抑制柑橘黑腐病菌（Alternaria citri）孢子萌发和芽管伸长,但相同浓度的壳寡糖抑制A.citri的孢子萌发和芽管伸长效果较差。体内实验结果表明,其病害防治效果具有浓度依赖性,高浓度（1%）的壳聚糖和壳寡糖对果实病害的防治效果较低浓度的防治效果好。     

串珠镰刀菌辐照效应的研究

为研究γ射线在常温下对生理盐水和玉米中不同浓度串珠镰刀菌（Fusarium momiliforme）孢子的辐照杀灭效果，用不同剂量的^60Co γ射线对生理盐水和玉米中高、低2种浓度串珠镰刀菌孢子进行辐照，采用PDA培养基平板稀释法计数孢子数。γ射线辐照剂量与存活串珠镰刀菌数有明显的剂量-反应关系，生理盐水中高、低浓度串珠镰刀菌孢子试样中D10值为0．57、0．60kGy，最小杀灭剂量为4．0、3．0kGy；玉米中高、低浓度串珠镰刀菌孢子试样中D10值为0．66、0．81kGy，最小杀灭剂量为4．0、3．0kGy。γ射线对串珠镰刀菌孢子有明显的杀灭作用，4．0kGy可全部杀灭实验浓度的串珠镰刀菌孢子。     

空气放电处理诱导尖孢镰刀菌孢子的凋亡过程

尖孢镰刀菌是莲藕采后的主要腐败菌。本研究采用空气放电技术对从腐烂莲藕分离到的尖孢镰刀菌进行处理，以孢子致死过程中存在的典型凋亡特征为切入点，详细探究空气放电处理下尖孢镰刀菌以线粒体为核心的凋亡进程。实验设置3 个处理组，分别以臭氧含量6.87 mg/m3、负离子含量5×106 ions/cm3、臭氧6.87 mg/m3＋负离子5×106 ions/cm3处理尖孢镰刀菌，以未经处理的尖孢镰刀菌作为对照组，检测孢子凋亡、活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）荧光强度、线粒体膜电位、胞浆和线粒体Ca2＋浓度、半胱天冬氨酸酶（metacaspase）活力。结果表明：空气放电处理后，孢子内ROS含量增多，线粒体膜电位下降，即发生膜电位去极化；胞浆Ca2＋浓度先迅速上升后下降，最终趋于稳定，线粒体内Ca2＋浓度大幅升高后减幅稳定上升；同时凋亡过程中还会引起Metacaspase的激活。其中负离子处理组只出现孢子凋亡，臭氧处理组和臭氧、负离子同时处理组出现孢子凋亡和坏死。通过实验结果可推断空气放电首先引起孢子内ROS的积累和Ca2＋浓度的增加，线粒体ROS的产生引起线粒体膜电位的去极化，导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质，激活Metacaspase，最终导致孢子凋亡。     

辣椒籽抗菌肽对黄曲霉的抑制作用

研究辣椒籽抗菌肽对玉米中分离的致腐菌(黄曲霉)的作用方式,包括最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、以及对黄曲霉生长、孢子萌发、养分吸收及细胞膜透性的影响。辣椒籽抗菌肽能够抑制黄曲霉生长,在1MIC浓度下萌发率降至18. 51%,浓度达到4MIC时能完全抑制黄曲霉孢子的萌发。在黄曲霉菌快速生长但还未产生孢子的时期(24 h)加入抗菌肽,能有效抑制孢子的产生。在黄曲霉生长的不同阶段(0、24、48 h)加入辣椒籽抗菌肽,其利用培养基中营养物质能力显著降低;通过核酸染料Sytox Green(SG)结合荧光显微镜来研究辣椒籽抗菌肽对黄曲霉的细胞通透性,结果显示,抗菌肽处理后黄曲霉菌丝体细胞内出现荧光,说明细胞膜受到损伤导致通透性发生了改变。     

柠檬皮中柠檬苦素对根霉的抑菌活性和机理

通过测定柠檬皮中柠檬苦素对根霉的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、孢子萌发抑制率、菌丝萌发抑制率确定其抑菌活性,根据测定各因素对抑菌活性的影响确定抑菌活性的稳定性;并通过扫描电镜观察和测定根霉细胞外碱性磷酸酶(AKP)含量和蛋白质含量,菌丝体的总糖含量,分析柠檬皮中柠檬苦素对根霉的抑菌机理。结果表明:柠檬皮中柠檬苦素对根霉的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为1250、5000 μg/mL;对根霉孢子萌发的抑制效果更强,对孢子萌发和菌丝生长抑制的EC₅₀值分别为918.34和1707.31 μg/mL。柠檬苦素对根霉的抑菌活性不受温度和明胶的影响;pH为4时,抑菌活性最强;Fe3+、Fe2+均能显著(p<0.05)提高柠檬苦素的抑菌活性。柠檬苦素能使根霉的糖、蛋白质、AKP等胞内物质渗出;扫描电镜观察也发现经柠檬苦素处理的根霉孢子凹陷和皱缩严重,且溶出物明显;菌丝出现断裂扭曲、变形、变细。因此,柠檬苦素能破坏根霉的细胞壁和细胞膜的完整性,使胞内物质渗出,菌丝体和孢子变形,从而使根霉生长代谢受到影响。     

Antimicrobial assays of natural extracts and their inhibitory effect against Listeria innocua and fish spoilage bacteria, after incorporation into biopolymer edible films

The antimicrobial activity of twelve natural extracts was tested against two fish spoilage bacteria (Pseudomonas fluorescens and Aeromonas hydrophila/caviae) and Listeria innocua, in order to assess their potential utilization in the preservation and safety of minimally processed fish products. After a screening of the active extracts by agar diffusion and vapour diffusion methods, oregano and thyme essential oils and citrus extract were selected. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the selected extracts was determined by disc diffusion method against target bacteria and at two temperatures: bacteria's optimal growth temperature (30°C or 37°C) and refrigeration temperature (4°C). Due to its better solubility, lack of odour and greater inhibitory effect obtained against L. innocua at refrigerated temperature, citrus extract was selected and incorporated at 1% (v/v) into different biopolymer film forming solutions (gelatin, methyl cellulose and their blend 50:50 w/w). The antimicrobial activity of the developed films was then evaluated, just after preparation of the films and after one month of storage at 43±3% relative humidity and 24±3°C. Regardless of the biopolymer matrix, all the developed films showed antimicrobial activity against the target bacteria. The most sensitive bacterium towards active films was L. innocua while P. fluorescens appeared as the most resistant one, in accordance with the previously performed antimicrobial tests for pure extracts. The differences in activity of the films between the tested two temperatures were not significant except for L. innocua, for which three times higher inhibition diameters were observed at refrigerated temperature. The inhibitory effectiveness of the films against the tested strains was maintained regardless of the biopolymer matrix for at least one month. Therefore, these edible films show potential for their future use in fresh fish fillets preservation.     

二氢杨梅素抑制黄曲霉菌生长的机制

本研究探讨了二氢杨梅素对黄曲霉的抗真菌活性和潜在的抗真菌机制。首先,通过抑菌实验证明,二氢杨梅素对黄曲霉孢子和菌丝的最小抑菌质量浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）均为4 mg/mL。通过荧光增白剂（calcofluor white,CW）和碘化丙锭（propidium iodide,PI）染色实验证明,二氢杨梅素处理后黄曲霉细胞壁和细胞膜受损。与对照组相比,1/2 MIC和MIC组黄曲霉细胞内容物释放量（OD260 nm）分别增加了3.14 倍和5.93 倍,细胞外相对电导率和pH值均升高,MIC的二氢杨梅素对黄曲霉的呼吸抑制率达25.82%。这些结果表明,二氢杨梅素通过破坏细胞壁和细胞膜的完整性以及干扰呼吸代谢发挥抗菌活性。此外,二氢杨梅素在MIC时能够完全抑制黄曲霉在花生和玉米籽粒上的萌发,因此,二氢杨梅素可作为一种有效的抗真菌天然化合物应用于粮食及农产品储藏中。     

着-聚赖氨酸/淀粉抑菌膜的制备及性能检测

对以淀粉为成膜基质,海藻酸钠和甘油为增塑剂,ε-聚赖氨酸为抑菌剂的淀粉基抑菌膜进行研究,并对其抑菌性和膜性能进行检测。结果表明,ε-聚赖氨酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌的最低抑菌浓度分别为1、2、2μg/mL,而将ε-聚赖氨酸添加到淀粉膜后,最低抑菌浓度都提高到64 mg/g,对淀粉膜和抑菌膜的力学性能、红外光谱检测、透气性和透油性及膜液的流变性、接触角等比较,差异较小。     

柑橘精油对致草莓腐烂的菌种的抑菌效果研究

从自然腐烂的草莓中分离纯化得到两株革兰氏阳性细菌（标记为B1和B2）及一株青霉菌,研究了柑橘精油对这三种菌株的抑制效果,并分析了三种菌株的最低抑菌浓度,以及不同贮存时间和pH对柑橘精油的抑菌效果影响。结果表明,柑橘精油对细菌B1、B2和青霉菌均有抑制作用;柑橘精油对三种菌株的最低抑菌浓度为1.25%;贮存时间对柑橘精油的抑菌效果有一定影响,在贮存6 d后柑橘精油的抑菌作用趋于稳定;pH对柑橘精油的抑菌效果影响较大,最佳的作用pH值为5。     

包载山苍子油的醇溶蛋白纳米粒子对明胶膜结构和性能的影响

本文以明胶、玉米醇溶蛋白和山苍子油为基材,通过流延法制备包载山苍子油的醇溶蛋白纳米粒子/明胶复合膜,研究了纳米粒子与明胶的相互作用,以及不同纳米粒子添加量对复合膜的透光性、微观结构、热稳定性、机械性能、疏水性、抑菌和抗氧化性能的影响。结果表明,纳米粒子与明胶之间发生了氢键相互作用,具有良好的相容性。随着纳米粒子添加量的增大,复合膜的透明度显著降低,其疏水性和抗氧化性显著增强（P<0.05）。复合膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显的抑菌活性,其抑菌圈直径分别为（9.17～10.00） mm和（10.02～11.10） mm。当纳米粒子分散液添加量为30%(v/v)时,复合膜的截面最致密,其热稳定性最好,断裂伸长率最大。本研究为开发含有山苍子油的食品活性包装材料提供了一定的参考依据。     

南瓜皮提取物的体外抑菌活性

为了揭示南瓜较长贮存期与其皮部活性物质功能之间的关系,通过使用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、水5种不同极性强度的溶剂对南瓜皮进行连续梯度提取,采用孢子萌发抑制法、琼脂孔扩散法和对倍稀释法测定了不同提取物对5种真菌:扩展青霉(Penicillium expansum)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黑根霉(Rhizopus stolonifer)、互格交链孢(Alternaria alternate)和粉红单端孢(Trichothecium roseum)和5种细菌:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄葡萄球菌(Staphylicoccus aureus)、荧光假单孢杆菌(Pseudomonas fluorescence)和乳酸菌(Lactobacillus plantarum)的抑菌活性和最低抑菌浓度;并用扫描电镜观察了水提取物对菌体形态的影响。结果表明:除石油醚提取物外,四种提取物对供试菌有不同程度的抑制活性,其中水提取物的抑菌活性最强,水提取物处理使菌体外表形态发生明显的伤害性变化。初步说明南瓜皮中的预存抗菌物质是有助于南瓜较长贮存期的一个因素。     

燕麦种子萌发过程中提取物的抑菌作用研究

以4种食品腐败菌为指示菌,采用滤纸片法和液体倍比稀释法对裸燕麦(Avena nuda L.)种子萌发过程中不同溶剂提取物的抑菌作用和最低抑菌浓度(MIC)进行了比较研究。试验结果表明,乙酸乙酯提取物的抑菌作用较好,但在种子萌发过程中抑菌效果不同,萌发24 h时燕麦种子的乙酸乙酯提取物的抑菌作用最强,其中对大肠杆菌的抑菌圈直径达(22.31±0.05)mm;其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度MIC小于6.25%,对鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度MIC小于12.5%,旨为燕麦的综合利用及新型天然防腐剂的研发提供理论依据。     

油茶皂素在香蕉保鲜中的应用

以天宝香蕉为试材,分离纯化并鉴定出1株镰刀菌,采用不同浓度（5、10、15、20 mg/mL和25 mg/mL）的油茶皂素测定对镰刀菌的抑制效果;通过测定不同浓度油茶皂素处理（15、20、25 mg/mL和30 mg/mL）在温度为16 ℃,相对湿度为85%的恒温恒湿的条件下贮藏25 d对香蕉的失重率、硬度、可溶性固形物、可滴定酸以及呼吸强度等主要品质指标的影响,研究油茶皂素对香蕉的保鲜效果。结果显示,油茶皂素对镰刀菌的抑菌率随浓度的升高而不断增强。当油茶皂素浓度为20 mg/mL时抑菌率可达86.52%,而当浓度再升高时抑菌率没有明显提高。在此基础上,测定油茶皂素对镰刀菌的MIC、MBC值分别为5 mg/mL和10 mg/mL。综合各品质指标表明,20 mg/mL浓度油茶皂素溶液对采后香蕉的保鲜效果最佳,在贮藏20 d时与对照组（清水组和阳性对照组）相比失重率分别降低了48.04%、51.67%;可溶性固形物相较于对照组（清水组）延缓了高峰值的出现;可滴定酸提高了56.09%、23.07%,呼吸强度增强了65.68%、14.82%;贮藏第10 d时与阳性对照组相比硬度提升了13.76%。研究结果为油茶皂素对香蕉保鲜提供一定的理论与技术支撑。