二氢茉莉酸丙酯对烟草黑胫病的控制作用及对osmotin基因表达的影响

二氢茉莉酸丙酯(PDJ)对烟草黑胫病的控制及其对osmotin基因表达有影响。PDJ处理可显著减轻烟草幼苗黑胫病的病情,用量为100mg/L时,控制效果可达69.57%,持续时间大约在15d;另外,PDJ诱导了烟草幼苗osmotin基因的表达,接种烟草黑胫病菌也可以诱导此基因表达,和不处理接种烟草比较,PDJ处理后接种的烟草osmotin基因表达强烈且时间长。      

酶解蝇蛆低聚几丁糖抗烟草黑胫病及对寄主同工酶的影响

对酶解蝇蛆低聚几丁糖抗烟草黑胫病茵(phytophthora nicotiana)及其作用机制进行了初步研究.结果表明,酶解蝇蛆低聚几丁糖对烟草黑胫病菌茵丝形态、产孢能力具有重要影响,引起茵丝生长扭曲、细小以及分支膨大,同时可抑制游动孢子囊的产生.烟苗经过酶解蝇蛆低聚几丁糖处理后,再接种烟草黑胫病菌,酶解蝇蛆低聚几丁糖能够诱导接种烟株对烟草黑胫病产生抗性,过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)同工酶活性增强,喷施酶解蝇蛆低聚几丁糖后接种病原茵的烟株,同工酶表现为酶带较多、色浓.由此可认为酶解蝇蛆低聚几丁糖抗烟草黑胫病与此两种同工酶有关.     

蝇蛆低聚几丁糖诱导烟株抗黑胫病研究

对蝇蛆低聚几丁糖防治烟草黑胫病的作用机制进行了初步研究.烟苗经过蝇蛆低聚几丁糖处理后,再接种烟草黑胫病菌,测试结果表明,处理烟草植株对黑胫病产生抗性.在0.1～1.5 mg/mL浓度范围内,随着浓度增高诱导抗性效果增强,当浓度达1.0 ms/mL时,诱导抗.性相对防效为92.21%,与浓度1.5 mg/mL的处理间差异不显著.同时可导致烟草叶片苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活性不同程度地升高,分别在第8天、第5天和第3天达到高峰,比对照分别提高了94.62%、160.44%和89.76%.     

采后β-氨基丁酸处理对梨果实黑斑病的抑制

本文研究了采后β-氨基丁酸(BABA)处理对苹果梨损伤接种互隔交链孢(Alternaria alternata)果实病斑扩展以及苯丙烷代谢的影响。结果表明,50μg/m L的BABA可有效抑制损伤接种果实病斑直径的扩展;用BABA浸泡果实10min,以及处理和损伤接种间隔12h的处理效果最佳。果实经BABA处理后,体内的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性明显提高,总酚和类黄酮含量也显著增加。由此表明,BABA可通过诱导果实体内的苯丙烷代谢来增强对黑斑病的抗性。     

几种激发子处理对苹果梨采后青霉病的控制

研究了β-氨基丁酸(BABA)、水杨酸(SA)、Na2SiO3和NO供体硝普钠(SNP)处理对苹果梨抗青霉病诱导的时效性及其作用机理。结果表明,各激发子处理后不同时间损伤接种均能不同程度地抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的侵染和扩展,处理后18h接种各处理的病斑直径明显低于对照,其中BABA处理效果最为明显,病斑直径比对照降低了14.59%,SNP次之。进一步研究表明,各激发子处理对果实组织抗性相关酶过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)均有一定的影响,其中SNP能明显提高POD活性,PAL活性能显著地被SNP和BABA诱导,而对于PPO活性,SNP和Na2SiO3处理的诱导作用高于BABA和SA。     

β-氨基丁酸处理对桃果实采后灰霉病的影响及其诱导抗病模式研究

以"白凤"水蜜桃果实为试材,研究了β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)处理对桃果实由Botrgtis.cinerea导致的灰霉病的影响并分析其相关诱导抗病模式。结果显示,单一20 mmol/L BABA处理不能直接诱导未接种病原菌桃果实的防卫反应,但经BABA处理的桃果实在接种B.cinerea后,其展现出较单一B.cinerea接种而未进行BABA处理果实更为强烈的H2O2迸发、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性上升以及Pp NPR1-like和Pp PRs基因表达,说明经BABA处理桃果实只在病原激发子侵染时才可表达出较强的系统抗性,由此可推断BABA诱导桃果实防卫反应的机制可归因于Priming(敏化)反应而不是直接诱导作用。此外,经BABA处理的桃果实在贮藏结束后未出现明显的品质劣变和抗氧化活性下降现象,说明Priming反应可有效平衡采后桃果实防卫反应和底物消耗。     

蝇蛆几丁低聚糖抗烟草黑胫病研究

在室内进行了蝇蛆几丁低聚糖对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasiticavar.nicotianae)的抑制效果和诱导抗性试验。试验结果表明:①蝇蛆几丁低聚糖对烟草黑胫病菌具有抑制作用,不同浓度的蝇蛆几丁低聚糖的抑制效果有差异,在一定范围内,随着几丁低聚糖浓度的提高,其抑制率也相应提高,1.0mg/mL的蝇蛆几丁低聚糖抑制效果显著,10d后抑制效果达到97.0%;②蝇蛆几丁低聚糖能够诱导接种烟叶对黑胫病产生抗性,浓度为1.0mg/mL的蝇蛆几丁低聚糖处理烟叶,第6d其诱抗效果达82.9%。     

两株烟草根际拮抗菌的生防和促生效果研究

使用植物根际促生细菌(PGPR)来防治土传病害是目前生物防治的研究热点。在温室内进行盆栽试验以研究从烟株根际筛选出的两株生防细菌对烟草黑胫病的防治和促生效果,试验设4个处理,分别为接种生防菌YC0573、YC0136、药剂对照(甲霜灵锰锌)和发病对照。结果表明,温室条件下YC0573和YC0136的防治效果分别达到90.9%和95.4%,均高于甲霜灵锰锌(86.4%);接种生防菌的烟株生长状况明显好于对照烟株。对不同生长期烟株叶片叶绿素含量、电解质相对渗透率以及超氧化物歧化酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、过氧化氢酶等系统抗性相关指标进行测定,结果显示,两株拮抗菌可诱导烟株产生系统抗性(ISR),增强对病害的防御力,并且能有效防治烟草黑胫病,促进烟株生长,具有良好的应用潜力。     

利用DH群体分析白肋烟黑胫病抗性的遗传规律

利用抗和感黑胫病的白肋烟品种Burley37(P1)、Burley67(P2)配制F1代经花药培养获得的DH群体,进行了黑胫病抗性的遗传分析.将P1、P2和DH群体连续两年种植并人工接种黑胫病(Phytophthora parasitica var. nicotianae)0号生理小种,同时调查发病率和计算病情指数,并采用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型分析法对黑胫病抗性进行遗传分析,估算DH群体的其他遗传参数.结果表明:黑胫病发病率和病情指数分别由2对具有互补作用的主基因+多基因(E-1-7)和2对具有等加性作用的主基因+多基因(E-1-3)控制;主基因遗传率分别为54.14%和50.68%;多基因遗传率分别为26.60%和19.31%;多基因有效因子数分别为0.61个和1.31个.因此,白肋烟黑胫病抗性主要由2对主基因及多基因控制.在育种实践中,烟草品种对黑胫病抗性的遗传相对比较稳定,但温度和湿度等环境因素在一定程度上也影响该病的发生与流行.     

BABA诱导烟草抵御高锌胁迫的初步研究

通过测定抗氧化体系、离子含量及基因表达探讨了β-氨基丁酸(BABA)诱导烟草抵御高锌胁迫作用机理。结果表明:0.2 mmol/L BABA能够诱导烟草缓解高锌胁迫,相比对照组增加了幼苗叶片中脯氨酸、还原性谷胱甘肽及可溶性蛋白含量且使丙二醛含量恢复到几乎正常水平;APX、POD、CAT酶活性略有下降但SOD酶活性增加最终使信号分子H_2O_2含量上升;等离子体发射光谱仪测试表明BABA处理使叶片中Zn~(2+)含量下降,而对根部Zn~(2+)含量影响不大;基因表达得出0.2 mmol/L BABA处理后PR1、PR2、Nt MTP1A、Nt MTP1B、Nt C477及Nt YSL基因表达上调。综合来看0.2 mmol/L BABA缓解烟草高锌胁迫是通过激发植物体抗氧化系统、限制Zn~(2+)向上运输以及抗病蛋白和离子转运蛋白相关基因表达量上调的综合结果。     

不同浓度β-氨基丁酸处理对葡萄果实抗病性的诱导模式

分析了不同浓度（1～500 mmol/L）β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid,BABA）处理对采后葡萄果实抗病反 应的诱导作用并明确相关抗性反应的模式。结果显示,10～500 mmol/L BABA处理可有效抑制果实在20 ℃贮藏期 间灰葡萄孢（Botrytis cinerea）的侵染,从而降低果实发病率。在有效作用浓度中,经高浓度（100、500 mmol/L） BABA处理的模拟接种和B. cinerea接种葡萄果实均出现H2O2迸发、病程相关基因（VvNPR1.1、VvChit4和VvPR2） 表达量提升、抗病相关酶（几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶）活力升高和植保素单体（白藜芦醇和白藜芦醇脱氢二聚 体）积累等一系列典型抗病性反应。10 mmol/L BABA处理不能直接诱导果实上述抗病反应,但经10 mmol/L BABA 处理的果实在接种B. cinerea后则出现最显著的H2O2生成量、PRs转录水平和植保素含量上升现象。同时,低浓度 （10 mmol/L）BABA处理的葡萄果实中可溶性糖含量和甜度指数均显著高于高浓度（100、500 mmol/L）处理果 实。这些结果暗示,高浓度（100 mmol/L或500 mmol/L）BABA处理可诱导葡萄果实的直接抗病反应;10 mmol/L BABA处理则诱导Priming（敏化反应）作用,以使果实在病原菌侵染时展现强烈抗病性;同时,Priming抗性较直 接诱导作用可有效防止底物的过度消耗,以维持果实贮藏品质。     

β-氨基丁酸处理对采后桃果实还原势的影响及抗病性的诱导作用

采用10 mmol/L β-氨基丁酸（β-aminobutyric acid,BABA）和病原菌Rhizopus stolonifer处理采后‘白凤’水蜜桃,以此研究BABA处理诱导水蜜桃防卫反应的模式,并从还原势变化角度分析相关诱导抗性机理。结果显示：经10 mmol/L BABA处理的桃果实在20 ℃下贮藏2 d后,伴随着果实的发病,其还原性内源信号分子NO含量以及PpNPR1-like、PpCHI和PpGNS基因表达丰度均明显高于对照组;而BABA＋病原菌处理组PpNPR1-like、PpCHI和PpGNS表达丰度在贮藏前3 d整体上显著高于BABA处理和病原菌接种果实（P＜0.05）,在整个贮藏期间3 种基因的表达丰度均处于较高水平。此外,与对照组相比,BABA处理和BABA＋病原菌接种均可显著诱导NO的积累,并同时提升桃果实中磷酸戊糖途径关键酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶活力,促使果实中还原型辅酶II（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）和还原型谷胱甘肽大量生成,并降低NADP＋和氧化型谷胱甘肽含量,因而有效提高果实组织还原势。通过这些结果可推测,10 mmol/L BABA可通过诱导Priming反应的方式赋予桃果实在受病原菌侵染时更强的抗病性,从而抑制采后软腐病的发生;同时,BABA处理可通过诱导还原性信号分子积累并提高磷酸戊糖途径关键酶活力,进而提升桃果实还原势、活化相关转录因子,以此诱导PRs基因的表达。     

寡雄腐霉发酵液对烤烟的促生及防黑胫病效应分析

为了研制高效、无毒、成本低廉的生物农药,安全有效地防治烟草黑胫病,利用自主分离的寡雄腐霉生防菌株(Pythium oligandrum CQ2010)制备发酵液(Pythium oligandrum broth,POB),通过拮抗、盆栽和田间试验研究了POB对烤烟生长和黑胫病的防治效果,以及对小鼠的急性毒性。拮抗试验表明,POB能显著抑制离体烟草黑胫病菌的菌丝生长和孢子萌发。在盆栽试验中,POB能显著提高烟草叶片叶绿素含量(质量分数),增强烟株根系活力,增加烤烟对氮、磷、钾的吸收,促进烟苗生长,生物量比对照提高58.91%,效果优于寡雄腐霉卵孢子制剂。POB还能激活烟草叶片中与抗病性相关酶如过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,诱导烟株产生抗病性反应,有利于消除活性氧和过氧化氢,使病害减轻。烤烟幼苗接种黑胫病菌后,施用POB使烟株发病率下降42.95%~65.77%,相对防治效果达到46.99%~57.32%,并显著降低烟草叶片中丙二醛含量,减轻病原菌对细胞膜的伤害。在田间试验中,POB对烟草黑胫病的防治效果达47.91%,烟叶产量提高44.47%,产值增加36.33%。小鼠急性毒性试验表明,用POB大剂量灌胃给药对小鼠体质量无显著影响,供试小鼠外观和行为均无异常,心、肝、肾、肺等器官未见病理改变。因此,POB能有效防治烟草黑胫病,促进烟株生长,提高烟叶产量和产值,且对动物安全无毒。     

硅和苯并噻二唑诱导烟草抗青枯病的机理分析

为了揭示叶面喷施矿质元素硅(Silicon,Si)和植物诱抗剂苯并噻二唑(Benzothiadiazole,BTH)对烟草抗青枯病的影响机制,分析测定了Si和BTH处理后烟株根系青枯病菌及根茎叶的硅含量(质量分数)、叶片防御酶系活性、叶片抗性相关基因的表达量,以及室内、田间烟草青枯病发病情况。结果表明,Si和BTH处理后的烟草根系青枯病菌含量[log(CFU)/g]均显著降低,且Si处理能够显著增加烟草根系的硅含量;Si和BTH处理后烟株叶片中的防御酶系活性均增强,其中Si处理可显著提高过氧化物酶(POD)与β-1,3-葡聚糖酶(GLU)的活性,BTH处理能显著增强β-1,3-葡聚糖酶(GLU)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性;Si和BTH处理对烟草抗性基因的表达量也有显著影响,EFE26、ACC Oxidase、HIN1和PR2的表达量均显著提高,其中BTH处理后PR1、PR1a/c、EFE26、ACC Oxidase和HIN1的表达量显著高于Si处理,而Si可显著提高PR2的表达量,且显著高于BTH处理。Si是通过烟草根系硅含量的积累来抵抗青枯病菌的侵染,BTH则是以抗性相关基因表达量的显著提高来诱导烟草对青枯病的抗性。由此可见,叶面施用Si和BTH是以不同的途径诱导烟草抵抗青枯病。     

β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理

以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。     

β-氨基丁酸抑制鸭梨果实采后青霉病的机理研究

以鸭梨果实为试验材料,研究了β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对采后常温贮藏条件(20±1℃)下鸭梨果实青霉病的抑制效果及相关酶活性。鸭梨果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种Penicillium expansum孢子,然后在(20±1)℃的条件下贮藏6 d,结果发现BABA处理显著抑制了青霉病的发生和病斑直径的扩展,提高了鸭梨果实中几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活性,诱导了鸭梨果实中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)和过氧化物酶(peroxidase,POD)等抗病相关酶活性的提高,降低了多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和果胶甲酯酶(pectinmethylesterase,PME)的活性,减少了鸭梨果实中超氧阴离子和过氧化氢的含量。结果表明,BABA通过诱导提高抗病性、减少水果组织中的活性氧和延缓果实软化,减轻鸭梨果实采后青霉病的发生。     

BABA 诱导烟草抵御高盐胁迫的初步研究

通过外源BABA 处理观察其对高盐胁迫下烟草生长的调节作用,并从抗氧化系统和相关基因表达探讨其作用机理。结果表明:在高盐胁迫下,外源0.2 mmol/L BABA 和0.5 mmol/L BABA 处理均能显著促进烟草的生长,根长和鲜重均显著增加;与盐胁迫组相比,外源BABA 处理能显著提高高盐胁迫下烟草幼苗体内还原型谷胱甘肽(GSH)、脯氨酸、叶绿素和H₂O₂ 的含量,同时还能增加烟株超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸还原酶(APX)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;外源BABA 还可通过降低高盐胁迫下烟株丙二醛(MDA)含量和相对电导率值来减轻高盐胁迫对细胞膜的损害。半定量PCR 结果表明:BABA 能够诱导脱落酸(ABA)调控基因NtRAB18、NtERD10D 和NtERD10B 表达。由此认为BABA 提高烟草的耐盐性是通过激发植物体内抗氧化系统和通过ABA 途径诱导逆激基因上调的综合结果。      

棘孢木霉T-6对烟草促生及对黑胫病和根黑腐病的抗病作用

利用生防菌防治土传病害是植物病害防治中的重要措施,在温室盆栽条件下研究了棘孢木霉T-6对烟草促生和抗病效果。结果表明,棘孢木霉T-6对烟草黑胫病菌、烟草根黑腐病菌的菌丝生长抑制率分别达49.62%、59.23%;温室盆栽条件下,棘孢木霉T-6对黑胫病和根黑腐病的防治效果分别达到74.45%和75.14%。棘孢木霉T-6处理后提高了烟草叶片叶绿素含量、类胡萝卜素含量和超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶的活性,棘孢木霉T-6处理的烟株生长状况明显好于对照。棘孢木霉T-6能够促进烟株生长和提高烟草对黑胫病和根黑腐病的抗性,具有良好的应用潜力。     

烟草根系分泌物对黑胫病菌菌丝生长的影响

为了探讨烟草品种对黑胫病的抗性机制,以抗黑胫病品种Florida 301、L8、Beinhart1000-1和革新3号,以及感黑胫病品种中烟100、贵烟13、红花大金元和小黄金1025的盆栽烟苗为试验材料,采用生长速率法测定了抗感黑胫病烟草品种根系分泌物对黑胫病菌菌丝生长的影响。结果表明,抗病品种Florida301、L8、Beinhart1000-1和革新3号的根系分泌物对黑胫病菌菌丝生长具有较明显抑制作用,抑制率为5.93%～20.78%;4个抗病品种根系分泌物处理的菌落直径明显小于对照,且差异达到显著水平(P0.05)。感病品种贵烟13、红花大金元和小黄金1025根系分泌物处理与对照相比对黑胫病菌菌丝生长具有一定的促进作用,菌落直径大于对照,差异达到极显著水平(P0.01),菌丝生长抑制率为-16.47%～-2.15%,但感病品种中烟100没有表现出对黑胫病菌菌丝生长的促进作用。因此,烟草根系分泌物对黑胫病菌菌丝生长的作用与烟草品种的抗性有关。     

烟草体内外拮抗细菌协同控制根黑腐病及诱导寄主抗性试验

烟草内生细菌T295 和烟草土壤根际细菌R27 均能有效抑制烟草根黑腐病,为探索烟草体内外拮抗细菌协同作用于烟株的防病效果及控病机理,测定了菌株T295 和R27 协同作用对烟草根黑腐病的防效和对菌丝、孢子的抑制作用,以及对烟草体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)等相关防御酶活性的影响。结果表明:内生细菌T295 和土壤根际细菌R27 协同作用于烟草能明显提高对烟草根黑腐病的控制效果,其无菌发酵液混合处理可以明显提高病原菌菌丝生长的抑制效果,但对孢子萌发抑制作用不明显。经内生细菌T295 处理后的烟草,其体内5 种酶活性高于R27 处理,但混合菌液与T295处理的烟草酶活性变化差异不显著,内生细菌T295 和土壤根际细菌R27 两者诱导抗性未表现出累加效应,表明混合菌液处理的烟株诱导抗性主要与内生细菌T295 能提高烟草中相关防御酶活性有关。