苦丁茶总黄酮纯化工艺及其黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

以D101大孔树脂对苦丁茶粗提物中的总黄酮进行分离纯化,确定最佳纯化工艺条件,测定纯化前后的样品总黄酮的纯度,并检测纯化前后样品对黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的体外抑制活性。通过单因素试验得到最佳优化工艺条件为上样液pH值为3、洗脱液乙醇浓度70%、上样液浓度3.0 mg/mL、上样液流速2.0 mL/min、洗脱液流速2.0 mL/min、上样量55 mL、洗脱液体积40 mL。纯化后样品纯度由75.53%提高至94.40%,对XOD的IC50分别为（228.22±1.07）μg/mL 和（135.74±1.02）μg/mL。     

黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶活性的抑制作用

黄嘌呤氧化酶是尿酸生成的关键酶,通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性可以有效降低机体内尿酸的含量。为探究黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,采用紫外分光光度法测定单位时间内酶促反应体系中酶活力的变化,计算不同质量浓度的黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶的抑制率,得到半抑制浓度IC₅₀。双倒数作图法判断黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶的抑制类型,并计算抑制常数Ki值,等毒法评价黄芪多糖与别嘌呤醇的联合作用效果。黄芪多糖能够抑制黄嘌呤氧化酶的活性,其IC₅₀为1.37 mg/mL。动力学分析表明,黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶为竞争性可逆抑制作用,抑制常数Ki为0.59 mg/mL。黄芪多糖与别嘌呤醇的联合作用表现为拮抗作用,黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶的活性有抑制作用。     

青钱柳粗多糖CP50制备工艺优化及对黄嘌呤氧化酶抑制作用研究

青钱柳是珍贵的药食同源型植物,青钱柳多糖CP50是具有较强生物活性的果胶类酸性多糖。黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO)是一种嘌呤分解代谢酶,与高尿酸血症和痛风形成有关。该研究采用正交法优化了从青钱柳干叶中制备青钱柳多糖CP50的最佳工艺为提取温度100℃、料液比1∶40(g∶mL)、提取时间2 h,此条件下多糖得率为1.67%。以黄嘌呤氧化酶作为靶点,并结合分子模拟手段探究了青钱柳多糖CP50对XO的抑制机理。试验结果显示,青钱柳多糖CP50(0～1 mg/mL)对XO有一定抑制作用,且对XO的抑制活性呈浓度依赖性,IC₅₀为0.825 mg/mL。分子对接结果进一步表明,青钱柳多糖作用于XO时,CP50分子插入XO的疏水腔,占据催化中心,导致XO活性受到抑制而达到降低尿酸的效果。该研究旨在为青钱柳CP50作为一种有效的膳食多糖应用于高尿酸血症患者的日常饮食提供方法借鉴和数据支持。     

黄蜀葵花总黄酮提取工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

通过十二烷基硫酸钠（SDS）协同超声波提取黄蜀葵花中总黄酮,并研究其对黄嘌呤氧化酶（XOD）的抑制作用,从而达到高效利用黄蜀葵花资源的目的。以总黄酮含量为指标,通过单因素实验确定料液比、超声波功率、SDS浓度为主要影响因素,再采用Box-Behnken中心组合设计结合响应面分析法,对黄蜀葵花总黄酮提取工艺进行优化,并对提取液抑制XOD的效果进行测定。结果表明:最佳提取方案为料液比1:48 g/mL,超声功率320 W,SDS浓度0.05 g/mL,在此条件下对黄蜀葵花中总黄酮进行提取,含量为4.63 mg/g;在抑制剂浓度为0.38~1.92 mg/mL范围内,黄蜀葵花提取液XOD抑制率最高为98.35%,对XOD有良好的抑制作用。     

黑树莓总黄酮的醇提工艺优化及对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的:确定黑树莓总黄酮提取的最佳工艺条件,并评价其对黄嘌呤氧化酶的抑制效果.方法:将黑树莓总黄酮的提取率作为试验考察要素,经单因素试验后,采用响应面分析法进行试验设计与优化;采用体外酶促反应动力学方法,探讨总黄酮对黄嘌呤氧化酶的抑制效果.结果:黑树莓总黄酮提取的最佳工艺条件:料液比1:11、提取时间5.6 h、乙醇体积...     

超声细胞破碎辅助提取江永香菇多糖工艺及其抗氧化活性研究

为优化江永香菇多糖提取工艺,采用超声波细胞破碎辅以热水浸提,通过单因素试验考察超声时间、超声功率、料液比、浸提时间、浸提温度5个因素对香菇多糖得率的影响,以香菇多糖得率为响应值,采用响应面设计优化工艺,同时对提取的香菇多糖进行抗氧化活性研究。结果表明,提取的最佳工艺条件为:超声时间6 min、浸提温度78℃、浸提时间51 min。在此条件下,江永香菇多糖的得率可达到29.71%。超声波细胞破碎法辅以热水浸提得到的江永香菇多糖体外清除DPPH自由基能力的IC_(50)值为0.35 mg/mL,清除ABTS+自由基能力的IC_(50)值为1.76 mg/mL,相同浓度下,其DPPH自由基清除能力和ABTS~+自由基清除能力均高于热水回流法提取得到的江永香菇多糖。     

超声波辅助提取紫薯多糖工艺优化的研究

为了研究超声波辅助提取紫薯多糖的最佳工艺,在超声波频率60Hz下,考察超声波功率、提取温度、提取时间、液料比等4个单因素对紫薯多糖得率影响的基础上,采用响应面分析法对紫薯多糖的超声波辅助提取工艺进行优化。结果表明,紫薯多糖超声波辅助提取的最佳工艺条件为:超声波功率270W、提取温度44℃、提取时间84min、液料比46:1(m L/g),在此条件下,多糖得率为8.45%~8.75%,与理论预测值一致。与传统热水浸提法、超高压辅助提取法相比,采用超声波法的紫薯多糖得率分别提高了341.03%和46.01%。这表明,超声波辅助提取工艺可以有效地提取紫薯多糖。     

梅花总黄酮对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及其抗氧化活性评价

评价了梅花总黄酮对黄嘌呤氧化酶（XOD）的抑制作用及其抗氧化活性。通过体外评价实验测定梅花总黄酮对XOD的抑制作用,并分别采用DPPH自由基法、铁离子还原法（FRAP）和血液总抗氧化能力测定法评价其抗氧化活性。结果显示,梅花总黄酮对XOD的抑制呈现浓度依赖关系,半抑制浓度（IC50值）为85.45μg/mL;梅花总黄酮清除DPPH自由基的能力强于竹叶黄酮,但弱于维生素C和芦丁;梅花总黄酮还原铁离子的FRAP值为3.38mmol/mg,是芦丁的1.44倍和竹叶黄酮的1.29倍;血液总抗氧化能力的测定结果从强到弱依次为：维生素C〉梅花总黄酮〉竹叶黄酮〉芦丁。研究表明,源自青梅花的生物总黄酮具有优良的生物抗氧化能力和显著的XOD抑制活性,可作为潜在的抗氧化应激和预防高尿酸血症的膳食功能因子进行深入研究和开发。     

诃子超微粉的工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的制备诃子超微粉进行粉体学性质检测,对其制备工艺进行优化。方法:以黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)抑制率为评价指标,以球料比、冷冻时间、转速、球磨时间为影响因素进行单因素试验;在此基础上,正交实验试验优化诃子超微粉碎工艺。建立优化后的诃子超微粉的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)指纹图谱,并与诃子超微粉进行对比。结果: 采用球磨法制备了诃子超微粉,诃子超微粉可显著改善普通粉的粉体学性质,降低药粉粒径;诃子超微粉最优制备条件为：球料比5:1、冷冻时间40 min、转速400 r/min、球磨时间1 h,优化后的超微粉粒径为22.4μm,5 mg/mL黄嘌呤氧化酶抑制率为69.10%。经HPLC分析,优化前后的二种诃子超微粉末指纹图谱主要成分基本一致,超微粉碎工艺未破坏诃子成分。结论:优化后的诃子超微粉抗黄嘌呤氧化酶活性更佳,为诃子超微粉在高尿酸血症中的应用提供了基础。     

马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备 工艺优化及抗氧化活性研究

目的 探究马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽制备的最佳条件及其抗氧化活性。方法 以马鲛鱼为原料，黄嘌呤氧化酶抑制肽采用超声辅助酶法制备，并筛选最佳反应用酶；以单因素实验为基础，通过Box-Behnken响应面分析法，以黄嘌呤氧化酶抑制活性为响应值，优化得到酶解最优条件。通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除等方法测定膜分离物的抗氧化活性；肌肽和鹅肌肽的含量测定采用了高效液相色谱法。结果 最佳反应用酶为复配的中性蛋白酶与复合蛋白酶，总加酶量0.3%（中性蛋白酶∶复合蛋白酶=1:1, m:m）。优化所得的最佳酶解条件为：酶解温度50℃，加酶量为0.2%，pH为7.0。在此条件下黄嘌呤氧化酶抑制率37.49%，与回归理论模型基本符合。3个组分的膜分离物中，相对分子量小于1 kDa的酶解产物的抗氧化性能力最强。马鲛鱼中鹅肌肽的含量为1.558 mg/g，而肌肽含量则为0.10 mg/g。结论 马鲛鱼制备及工艺优化所得的黄嘌呤氧化酶抑制肽对黄嘌呤氧化酶有较好的抑制作用，为工业化制备马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽提供了数据基础和理论依据，肌肽和鹅肌肽的含量测定为分离纯化马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽试验奠定了基础。。     

大叶冬青皂苷与牛血清蛋白的相互作用研究

为研究不同温度下大叶冬青皂苷G（Latifoloside G）、大叶冬青皂苷C（Latifoloside C）及苦丁皂苷G（Kudinoside G）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用情况，为大叶冬青皂苷在体内运输及作用机制研究提供实验依据，本文采用荧光光谱法研究小分子与蛋白的结合机制、结合模式、结合常数和结合位点等，采用圆二色谱法研究蛋白质的构象变化。结果表明:三种皂苷均能有效猝灭BSA内源荧光，Kudinoside G为静态猝灭，Latifoloside G、Latifoloside C为动态猝灭。随着三种药物小分子浓度的增加，BSA的内源荧光强度降低，两种温度下BSA的最大发射峰皆发生轻微蓝移，三种皂苷的发射波长皆由347 nm蓝移到345 nm，三种皂苷与BSA结合能力的顺序为Latifoloside G>Latifoloside C>Kudinoside G。Kudinoside G与BSA之间主要作用力类型为氢键和范德华力，Latifoloside G及Latifoloside C与BSA之间主要作用力为疏水作用。发现Latifoloside G和Kudinoside G两种小分子与BSA的结合能力与C-28位所连的极性基团有关，且齐墩果烷型的Latifoloside C比Kudinoside G更易于插入到BSA的疏水腔中。圆二色光谱表明，三种皂苷与BSA的结合均可使BSA内部结构环境发生改变，α-螺旋含量增加，微环境极性减小，疏水性增加。     

Xanthine Oxidase Inhibitory Activity and Hypouricemic Effect of Aspalathin from Unfermented Rooibos

Rooibos is rich in flavonoids such as aspalathin, which is a unique C‐glycosyl dihydrochalcone, that is used as a traditional herbal tea. This study was designed to evaluate the in vitro xanthine oxidase (XOD) inhibitory activity of the aspalathin‐rich fraction (ARF) and purified aspalathin from rooibos. The hypouricemic effects of the ARF and aspalathin on hyperuricemic mice were also assessed. The ARF was prepared from aqueous extract of unfermented rooibos leaves and stems, and it was collected by column chromatography; the aspalathin content in this fraction was 21.4%. The ARF and aspalathin inhibited XOD in a dose‐dependent manner. The concentrations of the ARF and aspalathin required to inhibit XOD at 50% (IC₅₀) were 20.4 μg/mL (4.4 μg/mL aspalathin equivalents) and 4.5 μg/mL, respectively. Lineweaver–Burk plot analysis indicated that aspalathin was a competitive inhibitor of XOD, and the inhibition constant (Ki) was 3.1 μM. In hyperuricemic mice induced by inosine‐5’‐monophosphate, treatment with the ARF and aspalathin significantly suppressed the increased plasma uric acid level in a dose‐dependent manner. The suppressed plasma uric acid level in mice could be attributed to the XOD inhibitory activity of the ARF and aspalathin. Further study is required to determine the effect of aspalathin or its metabolites on XOD activity in vivo.     

超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚的工艺优化及其体外活性

本实验以辣木籽为原料,研究纤维素酶添加量、乙醇体积分数、纤维素酶解时间、超声时间对辣木籽多酚提取量的影响,并采用响应面法优化超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚工艺。此外,研究辣木籽多酚的体外抗氧化和降糖降脂活性。结果表明,超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚最佳工艺为:酶添加量0.30%、乙醇体积分数53.00%、酶解时间31.00 min、超声时间33.00 min,在此条件下,所得辣木籽多酚的提取量为6.90 mg/g,与预测值无显著性差异。辣木籽多酚提取物具有较好的抗氧化活性,对ABTS自由基和DPPH自由基的清除能力的IC₅₀分别为0.76和0.61 mg/mL。同时,辣木籽多酚提取物具有较好的胰脂肪酶和α-淀粉酶抑制活性,其对胰脂肪酶和α-淀粉酶抑制率的IC₅₀分别为1.35和6.55 mg/mL。该研究为辣木籽多酚提取物的提取和应用提供理论依据。     

红旱莲总黄酮对黄嘌呤氧化酶抑制作用及抗氧化研究

通过抑制率及抑制动力学的测定,研究红旱莲总黄酮(HAF)对黄嘌呤氧化酶(XOD)的抑制作用及抑制机理。利用对羟基自由基清除能力、总抗氧化能力和总还原能力的测定,评估了红旱莲总黄酮体外抗氧化能力。结果表明,红旱莲总黄酮是一种可逆的竞争型XOD抑制剂,红旱莲总黄酮对XOD的抑制呈现浓度依赖关系,其半抑制质量浓度(IC50)为11.73μg/mL,抑制常数Ki为0.61μg/mL。红旱莲总黄酮有较好的羟基自由基清除能力(IC50=0.135μg/mL)及明显的总还原能力和总抗氧化能力。红旱莲黄酮可作为潜在的抗氧化剂和预防高尿酸血症的药物或膳食功能因子。     

胭脂果多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为了考察超声辅助水提法对胭脂果多糖得率的影响,本研究应用单因素实验对超声功率、超声时间、提取温度和液料比展开了研究。在此基础上,采用响应面法优化了工艺参数,并分析了胭脂果粗多糖的体外抗氧化活性。结果表明,当胭脂果多糖最佳提取工艺为超声时间6 min、超声功率97 W、提取温度86℃、提取时间150 min和液料比40 mL/g时,粗多糖得率可达12.55%±0.31%,仅低于预测值0.23%,而且其中多糖含量达到了(413.75±0.41)mg/g,说明该模型能较好地预测实际得率。胭脂果多糖对DPPH·和·OH以及总还原能力与质量浓度呈量效关系,对DPPH·和·OH的IC₅₀分别为0.0203、1.44 mg/mL。因此,响应面法优化超声辅助水提法提取胭脂果多糖工艺方便可行,得到的多糖有较好的体外抗氧化活性,可为进一步的合理开发利用提供理论依据。     

桑葚多糖超声提取、脱色工艺优化及其抗氧化活性分析

本文研究桑葚多糖超声提取工艺、树脂脱色工艺和体外抗氧化活性。以桑葚粗多糖得率为指标,通过单因素实验、正交试验考察超声提取温度、料液比、超声时间、超声功率的影响;以脱色率为指标,通过单因素实验、正交试验考察脱色时间、多糖溶液浓度、脱色温度的影响;通过ABTS法、DPPH法、邻二氮菲法、邻苯三酚法考察其抗氧化能力。结果表明,超声提取桑葚多糖的最佳工艺为:超声温度50 ℃、料液比1:30 g/mL、超声时间70 min、超声功率500 W,该条件下多糖得率为4.59%±0.25%;AB-8大孔吸附树脂脱色的最佳工艺为:脱色时间5 h、桑葚粗多糖溶液浓度4 mg/mL、脱色温度25 ℃,该条件下脱色率为62.34%±1.27%;桑葚多糖清除ABTS+自由基、DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC₅₀分别为0.14、0.68、0.19和3.14 mg/mL。     

肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶的抑制作用研究

为研究肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶(XOD)的抑制作用,以黄嘌呤为底物,测定肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶活性的IC50、抑制类型和抑制常数.抑制类型由Lineweaver-Burk双倒数作图法来判断,并计算相应的抑制常数(KI和KIS).还研究了肉桂醛缩氨基脲对小鼠血尿酸质量浓度、血清XOD活性和肝脏XOD活性的影响....     

载鲣鱼鱼籽肽微球模拟消化过程中黄嘌呤氧化酶抑制活性变化

在体外模拟鲣鱼鱼籽肽不同消化阶段对黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的抑制活性,分析不同消化阶段鱼籽肽的分子量分布、氨基酸组成;并利用海藻酸钙对鱼籽肽进行包埋,分析鱼籽肽微球在模拟胃/肠液中的累计释放率及XOD 抑制活性变化。结果表明,经胃消化后鱼籽肽XOD 抑制活性最高,为（76.09±0.12）%;肠消化后,鱼籽肽XOD 抑制活性下降到（53.02±0.48）%;分子量小于3 000 Da 的多肽以及疏水性氨基酸在鱼籽肽XOD 抑制活性中起重要作用;载鱼籽肽海藻酸钙微球在肠液中的累计释放率为（88.79±0.65）%,肠液中XOD 抑制活性为（81.82±0.28）%,利用海藻酸钙包埋鱼籽肽明显提高了其对XOD 的抑制活性。     

红蓝草多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为探究红蓝草多糖的最佳提取工艺及其体外抗氧化活性。试验以红蓝草为原料,探究料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对红蓝草多糖得率的影响,并结合响应面法优化红蓝草多糖提取工艺,通过测定红蓝草多糖对DPPH·、·OH、ABTS+·等自由基的清除能力探究其抗氧化活性。结果表明:在料液比1:31 g/mL、浸提温度85 ℃、浸提时间118 min、提取3次的条件下,红蓝草多糖得率最高,可达11.05%。在一定范围内,红蓝草多糖清除自由基能力与多糖的浓度呈量效关系,红蓝草多糖溶液清除DPPH · 、 · OH和ABTS + ·等自由基的IC₅₀值分别为0.18、0.73、0.64 mg/mL,说明红蓝草粗多糖具有一定的抗氧化活性。通过探究红蓝草多糖提取的最佳工艺及抗氧化活性,为今后红蓝草多糖的进一步开发与应用提供理论基础和参考。