红豆杉植物和愈伤组织培养物中紫杉醇含量的检测

采用UV和HPLC两种方法，对南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)、曼地亚红豆杉(Taxus media cv.Hicksii)天然植物和组织培养物中紫杉醇含量进行了检测。检测结果：南方红豆杉天然植物中未能检测出紫杉醇，南方红豆杉愈伤组织培养物中紫杉醇含量最高，为万分之4．09，是曼地亚红豆杉愈伤组织培养物中的2—27倍，是曼地亚红豆杉天然植物中的6—8倍。     

HPLC测定曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量

曼地亚红豆干杉枝叶粗提液采用正己烷萃取,碳酸钾水溶液碱洗两步除杂处理后,再用HPLC测定分析紫杉醇含量。采用外标峰面积法进行定量分析。经分析曼地亚红豆干杉枝叶中紫杉醇含量为0.012%,RSD为1.46%。     

HPLC法分析南方红豆杉植株中紫杉醇的分布规律

采用高效液相色谱法对野生和人工栽培南方红豆杉约20年生植株各器官、组织中紫杉醇含量进行检测分析后发现,紫杉醇在南方红豆杉植株中具有极显著向下、向根际积累分布的规律。野生和载培红豆杉,在器官水平,从上部枝叶到根部须根,紫杉醇的积累分别为 0.007 61 %~0.100 54 %和 0.015 25 %~0.061 75 %(干重,质量分数,下同);在组织水平,从形态学上部到根部,木质组织中紫杉醇积累分别为 0.010 95%~0.044 76 %和0~0.017 58 %,周皮组织中紫杉醇的积累量也具有从形态学上部到下部增高的规律,在主枝皮中的含量分别为 0.013 32 %和 0.006 77 %,在根皮中的含量分别为 0.086 33 %和 0.059 74 %。野生南方红豆杉中紫杉醇产量比人工栽培的要高。分析过程中紫杉醇在21~105 mg/L范围内线性关系良好,r²为0.999,平均加标回收率为85.78%,相对标准偏差为1.03%。     

高效液相色谱法测定野生东北红豆杉浸膏中紫杉醇的含量

建立了利用高效液相色谱法测定野生东北红豆杉提取物中紫杉醇含量的方法 ,该方法以甲醇 /水 /乙腈为流动相 ,采用 2 5 0mm× 10mmC18柱 ,于紫外检测器 2 5 4nm波长进行测定 ,采用外标法进行定性和定量分析。该浸膏中含紫杉醇2 0 9% ,方法回收率为 112 2 2 % ,标准偏差为 0 0 12 6 ,变异系数为 1 5 3%。     

从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究

紫杉醇(Taxol)是从红豆杉树皮中分离得到的一种二萜化合物,具有独特疗效的抗癌物,现已被多个国家批准应用于临床治疗卵巢癌和乳腺癌等疾病。由于红豆杉中的紫杉醇含量非常低(仅为0.010%~0.013%),而且大量结构类似的紫杉烷类物质存在,使得紫杉醇的分离纯化非常困难。本文通过对比5种不同提取方法 (液液萃取、固相萃取、硅胶层析、氧化铝层析、薄层层析),提出一种新的以氧化铝层析结合固相萃取工艺,具有紫杉醇高回收率的特点。     

红豆杉细胞两液相耦合培养过程中细胞凋亡与紫杉醇含量的关系

以油酸作为有机相与改良B5液体培养基组成耦合培养体系 ,研究了在该体系中悬浮培养的红豆杉细胞凋亡与紫杉醇含量的关系 .结果表明 ,紫杉醇的总含量随凋亡率呈抛物线规律变化 ;耦合培养法有效地促进了胞内紫杉醇向胞外释放 ,绝大部分储存于有机相中 ,从而降低了紫杉醇影响细胞凋亡发生的可能性 ,因此推测是细胞凋亡促进了紫杉醇的大量合成     

固定化对红豆杉细胞膜脂肪酸组分和紫杉醇合成的动态影响

采用气相色谱法对红豆杉细胞膜的脂肪酸组分进行了测定,研究了在固定化状态下红豆杉细胞膜脂肪酸组分与紫杉醇合成的动态变化关系.结果表明,固定化细胞的停滞期缩短.同时膜脂肪酸代谢也发生了显著的变化,从第20天后,膜亚油酸和亚麻酸的含量开始增多,而硬脂酸的含量开始下降,油酸的含量没有变化,膜脂肪酸组分趋向不饱和化,脂肪酸的不饱和指数（IUFA） 增高.与此同时紫杉醇的含量也大幅度上升.固定化细胞的紫杉醇含量与IUFA变化有较好的同步性,而与硬脂酸的含量变化呈负指数关系.     

超临界CO2流体萃取短叶红豆杉树皮中紫杉醇的研究

用超临界CO2萃取方法，对短叶红豆杉树皮中主要成分紫杉醇的萃取进行了研究。采有正交试验优化萃取工艺条件，HPLC分析萃取液中紫杉醇的含量。重复优化试验5次结果表明：用超临界CO2萃取的收率为0．120‰，是传统工艺收率（0．093‰）的1．29倍。     

电刺激对红豆杉悬浮培养细胞产紫杉醇的影响

以红豆杉悬浮培养细胞为材料产紫杉醇,在细胞生长的不同时期分别用脉冲电刺激及微交流电刺激处理。结果表明,两种电刺激均不同程度促进了红豆杉悬浮培养细胞的生长、紫杉醇的产生,其中脉冲电刺激效果优于微交流电刺激。最佳作用时间是在红豆杉细胞生长的衰亡期,微交流电刺激的紫杉醇含量较对照提高3倍多,脉冲电刺激的紫杉醇含量约为对照的7~9倍,最高达到12.24 mg.L-1。脉冲电刺激可有效提高紫杉醇的胞外释放率,达对照的4~5倍。     

磁场对水杨酸诱导下红豆杉紫杉醇产量的影响

研究了电磁场对水杨酸(SA)诱导下悬浮培养的南方红豆杉细胞的生长和紫杉醇产量的影响。结果表明在磁场强度为3.5 mT直流稳恒磁场下细胞活力、生物量和胞内蛋白含量均有明显升高;培养液碱化加剧;胞内苯丙氨酸转氨酶(PAL)活力峰值及胞外酚累积均提前。磁场作用后紫杉醇的产量第2天出现大量累积;最高产量出现在第6天,比SA单独处理组提前2天,但产量有所降低。     

硝酸银作用下南方红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇动力学研究

研究了诱导子硝酸银对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响,表明１０μｍｏｌＬ＾－１的硝酸银量有利于紫杉醇的生成,并通过动力学模型对硝酸银的作用位点进行分析,确定了硝酸银在紫杉醇代谢路径中的作用位点位于ＢａｃｃａｔｉｎⅡ和紫杉醇之间。     

极谱法测定天然水及污水中NTA的含量

利用Ｂｉ（Ⅲ）－ＮＴＡ（氨基三乙酸）配合物的单扫描极谱波来测定ＮＴＡ的含量。配合波在ｐＨ２．０的硝酸底液中峰形良好,在０．６０～３０．０ｍｇＬ－１的范围内呈线性关系。用此法测定天然水和工业废水中的ＮＴＡ含量,得到满意结果。此外还对Ｂｉ（Ⅲ）－ＮＴＡ配合吸附波的性质进行了研究。     

寡聚糖诱导悬浮培养红豆杉细胞生理态势的改变

运用顺磁共振、电镜、能谱等手段研究了寡聚糖对红豆杉细胞氧化还原生理态势的影响 .结果表明 ,诱导前红豆杉细胞处于相对稳定的生长态势 ,细胞完整 ,细胞器发达 ;氧化还原电势较低 ,活性氧相关酶系统相对稳定 ,细胞初生代谢旺盛 ,紫杉醇合成速率很低 .诱导后红豆杉细胞向产物合成态势转移 ,SOD酶活性迅速提高 ,CAT和POD酶活被强烈抑制 ;细胞出现活性氧迸发 ,4h达最大值 ;细胞的氧化还原电势增高 ,细胞膜上离子通道被激活 ,H⁺ 和Ca^{2 +} 内流 ,Cl^-外流 ;液胞内出现大量含Ca^{2 +} 离子的高电子致密区并呈规律性变化 ,培养环境碱化 ;细胞生长被抑制 ,紫杉醇合成速率升高 ,其产量提高了 5.5倍 ,达 76.1mg·L^-1.     

APOPTOSIS AND TAXOL PRODUCTION IN SUSPENSION CULTURES OF Taxus spp.CELLS

The hallmark of apoptosis, in suspension cultures of Taxus spp. cells induced by fungal extractive or by abiotic means, was studied by total DNA agarose gel electrophoresis and in situ end-labeling. The cleavage of nuclear DNA (nDNA) into oligonucleosomal fragments(DNA laddering) was a characteristic of apoptosis, which involved cell shrinkage, condensation of cytoplasm and tracheary elements differentiation. Terminal deoxynucleotidy transferase-mediated dUTP nick end in situ labeling (TUNEL) assay of Taxus spp. cells showed that fungal extractive or abiotic elicltors (Ce4+, Taxol, H2O2) induced TUNEL positive. Also, the increase of the apoptotic cell ratio was accompanied by the increase of secondary metabolites (especially Taxol). These results suggest that apoptosis may have some coincidence with biosynthesis of Taxol. The implication of apoptosis for the production of secondary metabolites in plant cell cultures is discussed.     

高效液相色谱分离定量硝基芳香族化合物

本文采用反相高铲液相色谱法，择用国产液相色谱填料ＹＷＧ－Ｃ１８Ｈ３７自行装柱，甲醇、水为流动相、分离定量硝基芳香族化合物，获得优佳色谱条件及满意的定量结果。     

气相色谱法测定腈纶聚合装置混合单体中AN和VA的含量

用气相色谱法测定了腈纶厂聚合装置混合单体中丙烯腈（ＡＮ）和醋酸乙烯酯（ＶＡ）的含量。用该方法测定出变异系数ＡＮ为０．０９％，ＶＡ为０．５６％，回收率ＡＮ为９６％～１０６％，ＶＡ为９９％～１０５％。     

紫外分光光度法测定锅炉给水中微量异抗坏血酸含量

提出应用紫外分光光度法测定锅炉给水中微量异抗坏血酸残留量的方法,并对可能的干扰进行了讨论。该法准确,快速,简便,适用于现场控制分析。     

陶瓷结合剂中二氧化钛的高灵敏度光度分析的不确定度评定

报道了二氧化钛与新显色剂对溴偶氮羧-M的高灵敏显色反应的研究结果。对光度法测定陶瓷结合剂中二氧化钛的不确定度的产生原因进行了分析，并对陶瓷结合剂样品中二氧化钛含量测定结果的不确定度进行了评定。     

高效液相色谱法测定尼龙6样品中的环状齐聚物

用高效液相色谱法 (HPLC)测定了尼龙 6切片中的己内酰胺和环状齐聚物。使用甲醇 /水作流动相 ,采用梯度洗脱法分离齐聚物 ,对色谱条件进行了优化 ,使每一个峰都得到了很好的分离 ,且分析时间缩短为 15min,有利于高齐聚物的检测。讨论了聚合温度和初始水含量对环状齐聚物的影响。