鸡蛋过敏原表位研究进展

鸡蛋过敏是一种常见的食物过敏反应,是人体对鸡蛋中蛋白质成分产生的一种变态反应。食物过敏反应的物质基础是抗原表位与抗体对位,解决食物过敏反应问题的关键一点即需要深入研究出过敏原的表位。本文介绍了鸡蛋中6种主要过敏原,简述了过敏原表位的定位方法,并详细综述了卵白蛋白、卵类粘蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶的过敏原表位研究进展。本文可为进一步鸡蛋过敏研究提供理论指导,也可为表位成分的定量检测以及无毒副作用鸡蛋过敏原疫苗的开发等方面提供一些参考。      

牛奶过敏原表位研究进展

详细地综述了牛乳酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、牛血清白蛋白的过敏原B细胞表位以及T细胞表位的研究进展,介绍了牛乳过敏原之间构象性表位的相似形以及线性表位序列位置的特异性,同时也简述了牛乳过敏原表位定位的方法及表位定位的应用。     

食物过敏原构象性表位鉴别的研究进展

构象性表位是表位的重要组成之一,在过敏反应中起重要作用。表位定位工作是过敏原研究的重要领域。目前应用于构象性表位研究的方法主要有3类:基于线性表位的氨基酸组成和特性预测构象性表位;利用噬菌体筛选得到模拟肽,通过生物信息学定位构象性表位以及利用光谱学等方法测定构象性表位与抗体结合的相关参数确定构象型表位。前两种方法比较常用,而光谱学方法是近年来发展的一种新方法,准确性更高。这3类定位方法可为过敏原的研究提供认识和了解构象性表位的途径,并为构象性表位在过敏中的作用机制提供部分理论依据。     

噬菌体展示技术定位主要食物过敏原表位的研究进展

噬菌体展示技术是一项可以在噬菌体颗粒的表面展示外源多肽的体外筛选技术。由于该技术实现了基因和蛋白质的体外统一,现已被广泛应用于生命科学和医学等领域。目前噬菌体展示系统主要有丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统和T7噬菌体展示系统。本文主要介绍了噬菌体展示技术以及该技术在八类食物抗原表位分析的应用。      

噬菌体展示技术定位主要食物过敏原表位的研究进展

噬菌体展示技术是一项可以在噬菌体颗粒的表面展示外源多肽的体外筛选技术。由于该技术实现了基因和蛋白质的体外统一,现已被广泛应用于生命科学和医学等领域。目前噬菌体展示系统主要有丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统和T7噬菌体展示系统。本文主要介绍了噬菌体展示技术以及该技术在八类食物抗原表位分析的应用。     

鸡蛋过敏人群中主要过敏原的反应性及卵类粘蛋白抗原表位的初步研究

目的分析年龄、性别对鸡蛋过敏人群中主要过敏原反应性的影响,初步探索我国鸡蛋过敏儿童卵类粘蛋白的主要抗原表位。方法以卵类粘蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白纯品为抗原,采用免疫斑点印迹,检测21例鸡蛋过敏儿童血清特异性免疫球蛋白E(SIgE)与蛋白反应性,分析年龄、性别因素对过敏原反应性的影响;应用DNAStar生物分析软件,预测并合成卵类粘蛋白抗原表位肽段,采用免疫斑点印迹检测抗原表位与鸡蛋过敏儿童血清的反应性。结果 A(≤1岁)组、B组(2~3岁包括3岁)、C组(3岁)的卵类粘蛋白反应率差异有统计学意义(P0.05),卵白蛋白、卵转铁蛋白反应率各组间均差异无统计学意义(P0.05);性别对各过敏原的反应率差异无统计学意义(P0.05);卵类粘蛋白抗原表位反应率较低。结论卵类粘蛋白sIgE在不同年龄段存在差别,卵白蛋白sIgE在21例患者均可检测出,卵转铁蛋白s Ig E在各年龄段无明显差别;应用DNAStar生物软件预测的卵类粘蛋白抗原表位,在天津地区反应性低,不是该地区主要抗原表位。     

鸡蛋卵转铁蛋白过敏原B细胞线性表位的预测研究

为预测鸡蛋过敏原卵转铁蛋白的B细胞线性表位,以GenBank中提供的鸡蛋卵转铁蛋白氨基酸序列为基础,分别用Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法和Karplus-Schulz法对鸡蛋卵转铁蛋白的抗原指数、亲水性、蛋白表面可及性及柔韧性进行预测,并用Chou-Fasman法和Deleage-Roux法预测其二级结构,综合分析以上预测结果,得出鸡蛋卵转铁蛋白可能的B细胞线性表位区。结果表明鸡蛋卵转铁蛋白存在7个潜在表位区,包括蛋白第174～181、215～222、231～240、288～294、332～344、415～429、547～555位可能为B细胞线性表位优势区域。该结果将有助于鸡蛋卵转铁蛋白B细胞表位的进一步精确定位。     

生物信息学技术在食物过敏原表位预测中的应用

表位是过敏原与抗体结合的物质基础。基于生物信息学技术的表位预测包括线性表位预测和构象性表位预测。其中线性表位预测主要是基于过敏原蛋白的理化性质进行预测;构象性表位预测主要包括基于蛋白结构信息和结合噬菌体展示技术的两大类预测。利用生物信息学技术预测食物过敏原表位主要应用在牛乳、鸡蛋、鱼、甲壳类水产动物等动物性食物过敏原和花生、大豆、小麦、果蔬类等植物性食物过敏原方面。     

牛乳β-乳球蛋白过敏原表位及其潜在应用

过敏原表位是过敏原直接参与免疫反应的物质基础, 也是导致过敏反应的“元凶”。牛乳β-乳球蛋白是lipocalin家族的代表和常用模式蛋白, 它的表位信息比较完整, 拥有7个人血清IgE和6个IgG的线性表位、3个IgE结合的构象性表位以及7个T细胞表位。另外, 它的动物源血清IgE、IgG和T细胞表位也在不断被发现。牛乳β-乳球蛋白的表位信息为基于表位的应用提供了重要的支撑, 它们的应用主要涉及到预测食物过敏原的致敏性, 食物过敏的交叉反应, 食物过敏的诊断, 食物过敏的免疫治疗以及食物过敏原的检测等5个方面。     

腰果过敏原Ana o 2结构及抗原表位预测

腰果是引起人们过敏的主要食物之一。作者采用生物信息学方法,通过Pubmed网络服务器、生物信息分析软件SOPMA、swiss-model网络服务器、DNAStar生物分析软件等对腰果主要过敏原Ana o 2的结构和抗原表位进行预测,分析Ana o 2蛋白的抗原表位可能是108-111,181-186,217-218,234-238,244-255,283-287。这为腰果过敏原的进一步研究提供理论参考,并对开发低过敏腰果制品提供帮助。     

加工对鸡蛋过敏原的影响

卵类黏蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶是鸡蛋中的主要过敏原,适当的物理、化学和生物加工可以降低它们的致敏性。其中物理法生产的低致敏性蛋制品可供鸡蛋轻微过敏人群食用或作为免疫治疗药物;而化学和生物法制备的低过敏鸡蛋制品存在安全风险,它能否应用于生产,还有待进一步研究。另外,各种加工方法可以影响过敏原蛋白二硫键及高级结构甚至一级结构,从而导致该蛋白的致敏性发生变化。总之,加工对鸡蛋过敏原结构和致敏性的影响仍然是值得深入探索的科学问题,对指导生产和研发低致敏性或无致敏性蛋制品具有重要作用。     

苦荞过敏原TBa 的表位突变及免疫活性鉴定

前期研究曾分离获得一种纯度均一的天然苦荞过敏蛋白(tartary buckwheat allergen a,TBa ),免疫检测发现其为苦荞中的主要过敏原。本实验采用定点突变的方法对得分较高的表位E1 的基因进行分子改造,构建5 个突变体L39R、L42R、L47R、V52R、L54R。在大肠杆菌BL21 中分别进行表达,经Ni2+-NTA 亲和纯化后得到纯度较高的重组突变体蛋白。ELISA 和点杂交检测发现,与突变前的E1 相比,突变体L42R、L47R、L54R 的免疫活性明显降低,这表明Leu42、Leu47、Leu54 在TBa 的过敏性中起着至关重要的作用。     

TBa过敏原表位区段的融合表达及免疫活性分析

为了确定苦荞过敏原TBa(tartarybuckwheatallergen)的抗原表位及进一步了解荞麦过敏反应机制,本实验以苦荞过敏原TBacDNA序列为模板,设计引物,克隆苦荞过敏原TBa表位区段基因,分别构建TBa及两个表位区段原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达并纯化,采用竞争ELISA对其免疫活性进行分析与比较。SDS-PAGE及WesternBlot鉴定和检测结果表明,目的蛋白在E.coliBL21(DE3)中可高效表达,其N端带有6个组氨酸标签。Ni2+-NTA琼脂糖柱亲和纯化得到了纯度较高的目的片段。ELISA实验结果显示,表达产物与荞麦食品过敏病人血清中的IgE具有特异的结合活性。本研究为揭示苦荞过敏蛋白结构与功能的关系奠定了基础。     

种子过敏原研究进展

全世界相当多的人口依赖于来自种子的植物蛋白，所以研究种子蛋白过敏性有着极为重要的意义。论述了目前有关种子过敏原研究取得的进展，包括种子蛋白的特性、过敏的相关理论、加工对种子过敏原的影响和降低消除过敏原的途径等。     

芝麻主要过敏原Ses i 6抗原表位预测及敏感人群分析

芝麻蛋白是一类营养全面的完全蛋白。Ses i 6作为芝麻蛋白质的主要成分同时也是主要过敏原。本研究旨在探明Ses i 6的致敏表位。经过生物信息学分析预测,B细胞线性表位为QTREPRLTQ、RTMERTEASEQQDRG、RSGEQEQQAR、QEHRGRQL,空间上共分布有10处B细胞构象表位,HLA-DQA10601-DQB10402基因携带者为主要的敏感人群。     

榛子主要过敏原Cor h 1单克隆抗体识别抗原表位区域的确定

目的 确定已获得的四株榛子主要过敏原Cor h 1单克隆抗体识别的抗原表位区域。方法 构建谷胱甘肽疏基转移酶 (GST)与Cor h 1不同截短体的表达载体并表达GST-Cor h 1融合蛋白, 采用ELISA和Western blot检测单抗与不同融合蛋白的反应, 并结合DNAstar表位分析软件推知不同单抗的抗原识别表位区域。结果 确定了四株Cor h 1单抗的抗原识别表位区域, 分别是4G7和2H3抗体的抗原表位位于Cor h 1第120~126位氨基酸, 5F2和1G4抗体的抗原表位位于Cor h 1第43~52位氨基酸。结论 四株Cor h 1单抗的抗原识别表位区域的确定, 为Cor h 1的进一步研究和食品安全检测奠定了基础。     

基于表位预测的花生过敏原Ara h 6 免疫交叉反应性研究

为了探讨花生过敏原Ara h 6 与其他同源蛋白之间的交叉反应,通过各种生物信息数据库(Genbank,DiscoTope)以及网络工具及软件(BLAST,NPS@和Protean,Clustal x,PyMOL),开展基于表位预测的Ara h 6交叉免疫反应性研究。结果表明：肽段AA10～15、45～48、53～60、116～118 区域可能是Ara h 6 的线性表位优势区域;Ara h 6 的构象型表位优势区有4 个,它们存在的区域为AA1～13、35～51、53～59、89～105;基于线性表位预测的15 种蛋白质与Ara h 6 可能具有交叉反应性,其中4 种(Ara i 6,conglutin,Ara d 6 和conglutin 8)发生交叉反应的概率为100%;基于构象型表位预测的17 种蛋白质与Ara h 6 可能具有交叉反应性,其中4 种(Ara i 6,conglutin,Ara d 6 和conglutin 8)发生交叉反应的概率为100%。本结果对进一步了解Ara h 6 的过敏性以及指导开展食品中Ara h 6 的免疫学检测具有重要作用。     

食物过敏原消减研究进展

如今食物过敏是困扰人类健康的一大重要食品安全问题,发病率持续升高,受到全世界的广泛关注。本文简要介绍了食物过敏及其机制,详细分析了近五年相关文献的研究内容,发现这五年文献数保持稳定,各国的研究重点仍集中于八大类主要过敏食物,过敏原的3大类消除方法中以物理化学法的研究最为丰富。因此本文在总体介绍各种消除方法的同时,详细介绍了最常用的4种物理消除方法：热处理、辐照、超声和超高压技术。此外,文中还介绍了消减机制的4种主要研究方法,但如今机制研究还处于初始阶段,尚未得出系统明确的结果,因此相关的深入研究具有良好的前景。可以以体外模拟消化为基础,继续研究消化片段的致敏性变化与构象变化的关系,有针对性的实现过敏原的消除。     

虾类过敏原的研究进展

虾口感鲜美、营养丰富,但易致敏。本文综述国内外致敏虾品种和主要过敏原以及虾类过敏原消减技术的研究,为进一步对虾类过敏原的研究提供一定参考。     

海虾过敏原的研究进展

综述引起海虾过敏的机理及其症状,阐述海虾过敏原种类、生物化学性质、检测方法以及过敏原活性降低的方法,为低过敏性海虾食品的深加工提供参考.