四川腊肉中产脂肪酶霉菌筛选及产酶条件研究

对四川腊肉中高产脂肪酶霉菌进行分离鉴定,并对其产酶条件进行研究。以罗丹明B为显色剂,利用平皿生化反应法对四川腊肉中高产脂肪酶的霉菌进行筛选,对分离菌株进行分子生物学鉴定,研究其在不同时间、温度及初始p H条件下产酶情况。结果表明:分离获得一株产脂肪酶能力较强的霉菌,经鉴定为团青霉(Penicillium commune),其最适产酶条件为,当发酵时间为48h,温度为30℃,初始p H为8.0时,其脂肪酶活力可达384.05U/100m L。     

产β-葡萄糖苷酶非酿酒酵母的筛选及酶学特性研究

通过对新疆石河子葡萄产区葡萄中的酵母菌的筛选,采用酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)培养基分离纯化菌株,并对分离菌株进行分子生物学鉴定。利用对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物筛选产β-葡萄糖苷酶酶酵母菌,得到一株高产糖苷酶毕赤酵母属(Pichia sp.)的非酿酒酵母菌株Y8,并研究该菌株的产β-葡萄糖苷酶酶学特性。结果表明,β-葡萄糖苷酶的最适初始p H值为5.0,最适产酶温度为30℃,反应时间为15 min,最适葡萄糖质量浓度为15 g/100 m L。     

一株产β-葡萄糖苷酶烟曲霉菌株的鉴定及其产酶特性

从酿造大曲中分离筛选出一株产β-葡萄糖苷酶真菌菌株L1,根据对该菌株形态学观察和分子生物学18S r DNA分析,将其鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigates),并对其所产β-葡萄糖苷酶酶学性质进行了研究。结果表明,该酶的最适反应温度为50℃,热稳定性较好,在50℃保温120 min仍能保持79.6%酶活性;最适反应p H值为4.0,在p H值3.0~5.0酶活性稳定。     

调控爪哇正青霉生物合成8-异戊烯基柚皮素的关键酶鉴定及性质研究

采用对硝基苯酚法建立爪哇正青霉生物转化合成8-异戊烯基柚皮素体系中O-脱甲基酶酶活的分光光度测定方法;研究生物催化合成8-异戊烯基柚皮素的过程;采用3种经典的细胞色素P450酶抑制剂对P450酶和生物转化反应之间的关系进行鉴定;研究O-脱甲基酶的酶学性质。研究结果表明,生物转化体系中O-脱甲基酶酶活力在第4天达到最大值,其最适反应温度60℃,最适p H 8.0。     

产β-糖苷酶菌株的筛选及酶活的研究

利用对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物筛选酿酒酵母菌,得到1株高产糖苷酶的酿酒酵母菌。以该菌株作为实验菌株,研究该菌株的酶活特性,对酿酒酵母菌酶活性测定条件进行研究。通过单因子试验,确立了该菌株发酵对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷酶的最适培养条件：pH4．0,温度为40℃,发酵时间为6h。高浓度的葡萄糖、果糖对酶活没有抑制作用,酒精度超过14％vol时对产酶有抑制作用。     

南海深海链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 13580脂肪酶的酶学性质

对从南海深海链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 13580中的新颖脂肪酶L-1进行了酶学性质鉴定。脂肪酶L-1对对硝基苯酚己酸酯的催化活性最高,最适反应温度为40℃,最适反应p H为8.0,在最适条件下的酶活力为51.5 U/mg。脂肪酶L-1对大部分有机溶剂和表面活性剂具有极好的耐受性。同时该南海深海微生物脂肪酶能在温和条件下催化制备多种短链酯食品香料产品,具有较好的工业应用前景。     

五粮液大曲中嗜热红曲霉的筛选及初步研究

从五粮液大曲中筛选到1株嗜热产红色素霉菌,通过理化性能测定,形态分析,该株菌为一种嗜热红曲霉,命名为MH-1。该菌生长温度范围35~60℃,最适生长温度45℃。最适p H值为5,最低可耐受的p H值为3,酯化酶活可高达280 U。     

脂肪酶产生菌的筛选及不同保藏方法对其产酶活性的影响

从校园食堂附近富含油脂的污泥中分离筛选具有高效脂肪酶活性的菌株。首先以3种不同的平板初筛培养基筛选脂肪酶产生菌,获得的菌株经摇瓶复筛后选出其中一株传代性质稳定,产酶活性高的脂肪酶产生菌,研究其产酶条件及酶学性质,然后分析了斜面法、液体石蜡法、甘油液态冷冻法对此株脂肪酶产生菌的存活率和酶活的影响。实验结果表明,3种平板初筛培养基均能筛选到脂肪酶产生菌,吐温-80琼脂平板培养基筛选效果最佳。经过复筛选定的一株脂肪酶产生菌,最佳产酶条件:发酵液初始p H值9.0,37.0℃培养48 h。酶最适作用温度为38℃,最适作用p H值为9.0,并在p H8.0~10.0之间稳定。液体石蜡法及甘油液态冷冻法在中短期可以使菌种保持较高的存活率和酶活力,为进一步的应用研究奠定了基础。     

超嗜热细菌Thermotoga maritima酯酶Tm1350克隆、表达及其酶学性质研究

以超嗜热细菌Thermotoga maritima基因组DNA为模板,通过PCR法扩增酯酶Tm1350基因,构建重组质粒p ET15b-Tm1350,在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中实现表达,并采用p-NPA方法测定其酶活性。研究结果表明,酯酶Tm1350可以水解不同碳链长度（10C）的对硝基苯酚酯,其中对硝基苯酚戊酸酯（p NP-C5）是该酶最适合底物;该酶最适反应温度和p H分别为70℃和6.5,90℃处理5h,仍有50%以上的酶活力,具有较强的热稳定性。酯酶Tm1350对金属离子、抑制剂、变性剂和有机溶剂具有较强的抗性。      

超嗜热细菌Thermotoga maritima酯酶Tm1350克隆、表达及其酶学性质研究

以超嗜热细菌Thermotoga maritima基因组DNA为模板,通过PCR法扩增酯酶Tm1350基因,构建重组质粒p ET15b-Tm1350,在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中实现表达,并采用p-NPA方法测定其酶活性。研究结果表明,酯酶Tm1350可以水解不同碳链长度(10C)的对硝基苯酚酯,其中对硝基苯酚戊酸酯(p NP-C5)是该酶最适合底物;该酶最适反应温度和p H分别为70℃和6.5,90℃处理5h,仍有50%以上的酶活力,具有较强的热稳定性。酯酶Tm1350对金属离子、抑制剂、变性剂和有机溶剂具有较强的抗性。     

纤维素降解菌的筛选及酶学性质的研究

从土壤样本中分离得到1株酶活性质较高的菌株,采用3,5-二硝基水杨酸显色法(DNS)进行酶活性测定,测定结果表明该菌株产酶的最适反应温度为50℃;温度在40℃~60℃时,酶有较高的热稳定性;最适反应p H 5.0;p H在4~6时,酶稳定性达到75%以上;Ca2+、Mn2+是酶反应的促进剂,Pb2+、Hg2+为酶反应的抑制剂。     

黑曲霉F5菌株产高温糖化酶的液体发酵优化分析

实验通过对黑曲霉F5菌株进行了温度、p H值、碳源、氮源、磷酸盐的筛选及正交优化,结果表明,发酵培养基最优条件为:30%马铃薯汁,2%蛋白胨,0.4%磷酸二氢铵,p H4.5,在30℃下发酵培养4 d糖化酶活力达到87.3 IU/m L;糖化酶的最适反应温度为65℃,p H5.0。     

传统发酵豆酱中产α-淀粉酶菌株的筛选

α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等,是食品工业中应用最为广泛的酶制剂之一。从东北三省传统的家庭自制豆酱上获得纯培养真菌389株,通过可溶性淀粉平板初筛获得具有α-淀粉酶活性的菌株34株,其中曲霉属的真菌14株、青霉12株、毛霉2株、镰孢菌2株、帚霉1株、犁头霉1株、木霉2株。米曲霉(Aspergillus oryzae)、橘灰青霉(Penicillium aurantiogriseum)和疣状青霉(Penicillium verrucosum)出现频率较高,是豆酱发酵过程中产生α-淀粉酶的优势种群。     

脂肪酶生产菌株的筛选及其发酵条件优化

为获得具有高产脂肪酶能力的菌株,以橄榄油为唯一碳源进行富集,再经过维多利亚蓝B平板初筛和两次摇瓶复筛,从自然界中筛选得到一株具有较高酶活的革兰氏阴性短杆菌G1。通过提取16S r DNA进行同源比对,确定该菌属于伯克霍尔德氏菌属。该菌经紫外和ARTP复合诱变得诱变株G1-7-4,酶活较原始菌株提高了51.87%。在单因素试验考察各因素对脂肪酶酶活的影响的基础上采用响应面法对影响酶活的重要因素进一步优化,得到最佳发酵条件:玉米油33.09 m L/L,酵母膏31.90 g/L,初始p H 6.67。该条件下酶活最高达到80.62 U/m L,为初始条件下的24.81倍。该脂肪酶的最适p H为8.0,在30~80℃范围内均具有较高酶活,最适反应温度为50℃。     

包埋培养法筛选白酒窖泥中一株功能细菌

采用微包埋培养法结合流式细胞分选技术,对白酒窖泥中的细菌进行分离和筛选,分离到95株细菌。经菌株生长实验从中筛选出8株生长较缓慢的菌株LS4、LS27、LS32、LS37、LS64、LS66、LS69’、LS85,经气相色谱分析,LS66菌株产白酒香味物质较为丰富,确定其为出发菌株。对其进行形态学观察、生理生化和16S r DNA鉴定,该菌株可能为一株窖泥未培养功能菌株uncultured bacterium clone N8-7,对该菌株的培养条件进行初步研究,菌株生长的最适温度、最适p H值和最佳发酵接种量分别为35℃、p H 6.5和4%。     

一株产耐高温碱性脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化

用Tween平板法从采集自河北省的122份土样中筛选到一株脂肪酶活性较高的菌株Lipa1318。综合其形态学和生理生化特征以及16S r DNA的序列比对结果,确定该菌株为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）。其所产胞外脂肪酶的最适反应温度为60℃,最适p H为8.0,是一种耐热的碱性脂肪酶。摇瓶发酵实验证明该菌株的最适产酶条件为:葡萄糖1.0%,牛肉膏1.0%,Triton X-100 1.5%,橄榄油0.50%,Ca Cl20.50mmol/L,发酵液初始p H为8.0,30℃培养96h,通过发酵条件的优化使酶活提高了3.6倍。      

嗜热脱氮芽孢杆菌产α-半乳糖苷酶影响因素的研究

该文对前期筛选出的嗜热脱氮芽孢杆菌YWX5产α-半乳糖苷酶的影响因素进行了初步的研究,通过测定α-半乳糖苷酶酶活,探究了培养基成分(包括碳源、氮源、无机盐)及培养条件(初始p H值、培养温度、培养时间)对该嗜热脱氮芽孢杆菌产α-半乳糖苷酶能力的影响。实验结果表明,对该菌产酶最有效的碳源为3%豆粕,氮源为0.5%硝酸钾,附加氮源为0.5%酵母浸出物;添加0.5%氯化钠和0.1%磷酸氢二钾有助于该菌产酶。另外,该菌最佳产酶培养温度为60℃,培养基最适初始p H在7.0~8.0,培养时间为65 h。     

一株耐盐高效苯酚降解菌的分离、鉴定及其应用

从新疆盐碱土壤中分离筛选得到一株能在高盐条件下降解苯酚的微生物菌株HNA-14,经16S r DNA序列及系统进化分析,鉴定其为芽孢杆菌属的一株菌。通过对HNA-14的生理生化特征及苯酚降解能力的研究,确定该菌的最适生长温度为30℃,p H值为8.0,Na Cl浓度为7%,且在10%的高盐浓度下,HNA-14能在96h内完全降解浓度为500mg/L的苯酚。并将该菌株成功应用于皮化企业的含苯酚废水处理。     

高效利用棉籽糖菌种的筛选及酶学性质研究

为筛选出可高效利用棉籽糖的菌种并对其酶学性质进行研究,采用高效液相色谱法测定了棉籽糖含量,平板计数法测定菌种生长量,p NPG法测定α-半乳糖苷酶酶活。结果显示,该实验筛选出屎肠球菌、粪肠球菌和凝结芽孢杆菌3株可以高效利用棉籽糖的菌种,发酵后培养基中棉籽糖剩余含量分别为0、0. 36%和1. 05%(质量分数)。屎肠球菌α-半乳糖苷酶最适p H值为5,最适温度为45℃。粪肠球菌α-半乳糖苷酶最适p H为5,最适温度为50℃。凝结芽孢杆菌α-半乳糖苷酶最适p H为8,最适温度为45℃。所产α-半乳糖苷酶具有较为稳定的酶学性质,可为今后饲料和食品中棉籽糖的去除提供研究方向。     

产耐热普鲁兰酶菌株的分离、筛选与鉴定

从某火山口的土壤样品中分离筛选得到了一株产耐热普鲁兰酶菌株T-10,酶活力为1.22 U/m L。经形态特征观察、生理生化特征实验以及16S r DNA序列同源性分析,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。酶学性质研究表明:该普鲁兰酶的最适温度是60℃,在70℃保温4 h后活力残留60%以上;最适p H值为6.0,p H 3.0~8.0在室温保存4 h后相对酶活力大约为70%。目前,鲜有发现产耐热普鲁兰酶的菌株为解淀粉芽孢杆菌,其具备良好的应用前景。