酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

响应面法优化西藏核桃蛋白酶解工艺

目的研究西藏核桃蛋白酶解的最佳蛋白酶及酶解条件。方法以水解度为指标,筛选最佳蛋白酶,并在单因素试验基础上,通过Box-Benhnken试验设计及响应面分析法确定西藏核桃蛋白酶解最佳条件。结果碱性蛋白酶为最佳蛋白酶,最佳酶解条件为:加酶量3.09%,酶解温度50.48℃,pH为7.46,液料比为4.88:1(m L/g),酶解时间为3 h。测得西藏核桃蛋白水解度为20.40%。结论经响应面分析法优化酶解条件后,实际值水解值与理论值间相对误差较小,本研究为西藏核桃酶解生物活性肽的功能性研究提供基础。     

核桃蛋白最佳酶解条件研究

以水解度为指标,研究五种蛋白酶对核桃蛋白水解作用;结果表明,AS.1398中性蛋白酶为水解核桃蛋白最佳酶,最佳酶解条件为:底物浓度2.5%,E/S为7%,温度40℃,pH7.5,酶解3h;在该实验条件下,AS.1398中性蛋白酶酶解核桃蛋白水解度可达45.37%,水解液仅微苦。     

碱性蛋白酶对核桃蛋白水解条件的优化研究

根据核桃蛋白的氨基酸组成以及碱性蛋白酶的水解特性,选用碱性蛋白酶2.4 L水解核桃蛋白,制备核桃多肤.以水解度(DH)表征其反应程度.在单因素实验基础上,通过二次回归正交旋转组合实验设计确定核桃蛋白的水解条件模型及最佳工艺是:pH 7.7,温度62.4℃,加酶量7.9%,酶解时间5.9h.在此水解条件下水解度可达8.82%.     

核桃多肽制备酶解关键技术研究

以核桃仁为原料,以水解度和对α-淀粉酶抑制率为评价指标,正交设计研究核桃蛋白酶解中相关的单酶水解、多酶水解、酶添加顺序、复合酶最佳配方等关键因子。结果表明,单酶对核桃蛋白的水解度大小依次为:碱性蛋白酶中性蛋白酶≈酸性蛋白酶胃蛋白酶胰蛋白酶,而酶解产物对α-淀粉酶抑制率大小依次为:酸性蛋白酶中性蛋白酶碱性蛋白酶胃蛋白酶胰蛋白酶,并发现依次添加单酶比同时添加的效果更好。综合考虑,先加中性蛋白酶再加碱性蛋白酶的添加方式最佳,可使核桃蛋白水解度达到40%左右,同时还保证酶解产物对α-淀粉酶抑制率较大,可达到85.9%。     

核桃蛋白的酶解工艺优化及产物特性研究

将核桃饼脱脂、碱溶酸沉制备核桃蛋白,再利用碱性蛋白酶对核桃蛋白酶解,采用单因素实验研究底物质量分数、酶解pH、酶用量、酶解温度、酶解时间对水解度的影响,在此基础上采用正交实验对酶解工艺条件进行优化,同时测定了酶解产物的溶解特性、乳化特性和起泡特性。结果表明：碱性蛋白酶酶解核桃蛋白最优酶解条件为底物质量分数5.0%、酶解pH 9.0、碱性蛋白酶（活性为10 000 U/g）用量4.0%、酶解温度50 ℃、酶解时间2 h;相较核桃蛋白,不同水解度的核桃蛋白酶解产物的表面疏水性下降,溶解特性、乳化特性和起泡特性提高。     

三种蛋白酶酶解核桃饼粕的抗氧化活性研究

该研究以核桃饼粕（WC）、石油醚脱脂核桃饼粕（PEWC）、石油醚及丙酮脱脂核桃饼粕（PEAWC）、核桃饼粕分离蛋白（WCP）、石油醚脱脂核桃饼粕分离蛋白（PEWCP）、石油醚及丙酮脱脂核桃饼粕分离蛋白（PEAWCP）为研究对象,分别采用碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶超声水解,以抗氧化活性为评价指标,筛选最佳的蛋白酶及原料处理方法。结果表明,碱性蛋白酶水解PEWC对OH·、O2-·和DPPH·清除率最高,分别为18.74%、28.44%和79.96%;胰蛋白酶酶解PEWC的总还原力最大;胰蛋白酶水解PEWCP的OH·和DPPH·清除率最高,分别为21.44%和80.22%,但O2-·清除率较低;胃蛋白酶水解PEWCP的O2-·清除率最高,达30.23%;碱性蛋白酶酶解PEWCP的总还原力最大;核桃饼粕经石油醚脱脂后的酶解产物抗氧化活性最高,且以碱性蛋白酶为最佳水解酶。     

多酶协同水解核桃蛋白的研究

以核桃蛋白为原料,采用酶法制备核桃多肽,对单一酶解、多酶酶解、加酶顺序进行了研究。试验结果表明:蛋白酶种类对核桃蛋白水解作用影响较大,单酶水解度大小依次为碱性蛋白酶中性蛋白酶酸性蛋白酶菠萝蛋白酶木瓜蛋白酶;分步依次加酶方式优于同时加酶方式;选择碱性、中性、酸性3种蛋白酶对核桃蛋白进行分步依次加酶水解,水解度达到45.58%。     

酶法辅助制备核桃蛋白的工艺优化及超滤回收核桃蛋白

为提高核桃蛋白得率,分别探索了以碱性蛋白酶、纤维素酶和α-淀粉酶为辅助酶,碱溶酸沉法制备核桃蛋白的工艺,采用超滤工艺回收酸沉废液中核桃蛋白,比较醋酸纤维素(CA)膜、聚醚砜树脂(PES)膜和聚偏氟乙烯(PVDF)膜3种不同超滤膜的回收效率。结果表明,酶法辅助碱溶酸沉法制备核桃蛋白的最佳工艺条件为以纤维素酶为辅助酶、酶解时间60 min、酶解pH 3.6、酶添加量0.5%、酶解温度37℃,在最佳工艺条件下核桃蛋白得率为84.11%。CA膜能显著提高核桃蛋白得率,在原料液质量浓度0.363 mg/mL、原料液温度30℃的条件下,CA膜的截留率可达92.33%,核桃蛋白得率可达87.64%。     

核桃分离蛋白酶解产物结构与功能的变化

核桃蛋白是优质植物蛋白,但其溶解度较低,限制了其在食品中的应用。为拓宽核桃蛋白的应用范围,采用不同的蛋白酶（碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶）对核桃分离蛋白进行酶解,然后分析不同蛋白酶酶解产物的水解度、二级结构和功能性（溶解性、吸水性、吸油性、乳化特性和起泡特性）。结果表明：碱性蛋白酶酶解产物的水解度最高,为22.16%,其次是木瓜蛋白酶的,为20.06%,而胰蛋白酶的最低,为13.95%;FTIR结果显示这5种蛋白酶酶解产物的二级结构中均以β-折叠及β-转角为主;在pH 7.0时,与核桃分离蛋白的吸水性（2.36 g/g）和吸油性（4.65 g/g）相比,5种蛋白酶酶解产物的吸水性和吸油性分别提高了11.58～17.15 g/g和7.58～15.44 g/g;与核桃分离蛋白相比,在不同pH（2～12）下,5种蛋白酶酶解产物的溶解度显著提高;在不同的pH和NaCl浓度下,5种蛋白酶酶解产物的乳化特性和起泡特性也不同。从提高蛋白功能性角度考虑,碱性蛋白酶为核桃分离蛋白的最佳酶解用酶。