合浦珠母贝抗氧化肽的性质及应用研究

以合浦珠母贝肉抗氧化肽为原料,研究其抗氧化活性、DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除能力、羟自由基清除能力、亚油酸过氧化反应、红细胞溶血实验、保湿活性及添加到化妆品中的抗氧化效果。结果表明：合浦珠母贝肉抗氧化肽具有较强的抗氧化能力,DPPH自由基清除率为77.7%;超氧阴离子清除率为46.3%;羟自由基清除率为33.5%;抗亚油酸过氧化能力和抑制膜脂质过氧化能力均较强;具有良好的吸湿及保湿能力。合浦珠母贝抗氧化肽在营养霜中的最佳添加量为1%,此时DPPH自由基清除率和羟自由基清除率分别为48.34%±2.96%、33.52%±2.34%,具有良好的抗氧化活性和稳定性,为合浦珠母贝抗氧化肽在化妆品种的应用提供了理论基础。     

羟脯氨酸小肽的体外抗氧化活性

羟脯氨酸作为胶原蛋白的特征成分,其在肽序列中可使胶原衍生低聚肽对肽酶或蛋白酶产生高度抗性,口服后经过胃肠消化吸收至血液中仍能以肽的形式存在。羟脯氨酸小肽可在肠上皮细胞膜部位被完整吸收,并在血浆达到较高的水平,具有良好的吸收率和生物利用度以及更稳定、高效的生物活性。本实验以15 条羟脯氨酸小肽为研究对象,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS）阳离子自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基4 种体外方法对其抗氧化活性进行评价。结果表明：在15 条羟脯氨酸小肽中,Leu-Hyp的DPPH自由基清除率最高,为23.6%;Leu-Hyp、Ile-Hyp的ABTS阳离子自由基清除率最高,分别为57.8%和57.7%;其他小肽的DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除能力均较低,清除率均小于15%或不具有ABTS阳离子自由基清除能力。浓度为3 mmol/L时,15 条小肽的羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力均较强,清除率分别可达30%～50%和60%～80%。综上,本实验所选15 条羟脯氨酸小肽均具有一定的羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力,其中Leu-Hyp、Ile-Hyp的体外抗氧化性最好。     

核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

大蒜多糖对几种自由基的影响

为探寻大蒜多糖清除自由基的能力,测定大蒜多糖对DPPH、超氧阴离子自由基和羟自由基三种自由基的影响.结果显示:大蒜多糖对于DPPH无清除作用,但对超氧阴离子自由基在浓度为1-10mg/mL时,清除率为24.04%～85.13%;对羟自由基在浓度为1～10 mg/mL时,清除率为46.11%～66.46%.     

乳酸菌对自由基清除能力的研究

研究了52株乳酸菌的细胞和无细胞提取物清除DPPH自由基的能力,从中筛选出了3株对DPPH自由基清除率较高的乳酸菌,并对它们清除超氧阴离子自由基、羟自由基的能力及其还原能力做了进一步研究。结果表明,ZS-2的无细胞提取物对DPPH的清除率最高(46.53%),对羟自由基具有较高的清除率(48.72%),但对超氧阴离子自由基没有清除作用;而FS-3和BCX-9细胞对羟自由基的清除率均高于它们的无细胞提取物,同时也具有较强的清除超氧阴离子的能力。其中,FS-3无细胞提取物对超氧阴离子自由基的清除率最高,3株菌均有一定的还原能力。研究表明,乳酸菌的细胞和无细胞提取物在体外实验中对各种自由基具有不同的清除能力。     

红葡萄酒、啤酒和白酒抗氧化作用研究

采用二苯苦味酰肼(2,2-Diphenyl-1-picryl-hydrazyl radical,DPPH)法、ABTS(3-ethyl benzot hiazoline-6-sulfonic acid)法、邻苯三酚自氧化法及羟自由基抑制法对红葡萄酒、啤酒和白酒的清除自由基活性进行比较.结果表明,红葡萄酒对DPPH自由基、ABTS·+自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为73.05%、64.37%和50.08%.啤酒对上述3种自由基的清除率分别为2.31%、1.40%和4.03%.白酒对这3种自由基的清除率分别为0.19%、0.04%和0.11%.红葡萄酒、啤酒和白酒对羟自由基的抑制率分别是43.39%、4.99%和1.24%.结果显示,葡萄酒对DPPH自由基、ABTSS·+自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除作用最强,啤酒其次,白酒最弱.     

不同乳酸菌胞外分泌物抗氧化活性的研究

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力和还原能力为评价指标,以维生素C作阳性对照,分析不同来源的28株乳酸菌的胞外分泌物体外抗氧化活性,并研究不同抗氧化活性测定方法间的相关性。结果表明,菌株GB8、WC5和GC2抗氧化能力较强,其中菌株GB8对超氧阴离子自由基清除率（98.26%）和还原能力最高（0.964）,菌株WC5对DPPH自由基的清除率最高,为74.90%;菌株GC2对羟自由基、DPPH自由基及超氧阴离子自由清除率分别为58.67%、73.09%、87.50%,还原能力为0.806,表现出最强的综合抗氧化能力。4种体外抗氧化活性分析方法的相关性结果表明,羟自由基与DPPH自由基（R2=0.633）、超氧阴离子与还原能力（R2=0.488）方法间达到了极显著相关（P＜0.01）;羟自由基与还原能力（R2=0.295）方法间达到了显著相关（P＜0.05）。     

云南松花粉酶解肽的抗氧化作用研究

目的探讨云南松花粉酶解肽的抗氧化作用。方法采用连苯三酚自氧化法、Fenton法、DPPH自由基清除法检测云南松花粉酶解肽对超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基的清除作用。结果用3种方法检测云南松花粉酶解肽均具有一定清除自由基的作用,浓度7．5mg／mL时超氧阴离子自由基清除率达到64．45％,浓度30mg／mL时羟自由基清除率达到72．99％,浓度3mg／mL时DPPH自由基清除率为42．48％。结论云南松花粉酶解肽具有显著的抗氧化作用。     

芸豆肽的抗氧化活性研究

采用Sephadex-G50 凝胶柱层析分离具有强抗氧化活性的小分子芸豆肽,以VC 为对照,研究3 种肽分离组分的还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力。结果表明：随着相对分子质量的减小和肽质量浓度的增加,其还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力逐渐增大;小分子芸豆肽(C 组分)的还原能力低于VC;对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的半清除质量浓度分别为2.301、2.553、1.386mg/mL。该小分子肽组分的相对分子质量主要集中在100～1000,该组分疏水性氨基酸含量为36.78%,其疏水值达到364.73 kcal/mol。说明小分子肽组分的抗氧化活性与其氨基酸种类和组成、相对分子质量分布密切相关。     

水牛乳风味蛋白酶解肽的分离与抗氧化活性研究

通过蛋白纯化系统,采用Superdex peptide凝胶过滤层析柱,对水牛乳风味蛋白酶解肽进行分离,按洗脱体积收集不同组分,以肽含量、还原能力及3种自由基清除能力为评价指标,跟踪高抗氧化肽组分。结果表明, 15号样品的还原能力、DPPH自由基清除率及羟自由基清除率最强,分别为0.154, 50.56%及15.22%,样品肽含量为2.45 mg/mL;16号样品的超氧阴离子清除率最强,为54.88%,样品肽含量为1.93 mg/mL; 15号及16号样品同属于蛋白纯化系统分离的F2组分,分子量范围在89.09～1 245.32 Da。     

狼爪瓦松提取物的抗氧化活性的研究

为研究狼爪瓦松的药用价值,通过DPPH自由基清除能力,羟自由基清除能力和超氧阴离子清除能力来评价其抗氧化活性。实验结果显示狼爪瓦松乙醇提取物对DPPH自由基的清除率为99.15%,羟基自由基清除率为94.55%,超氧阴离子清除率为61.33%。狼爪瓦松中黄酮类化合物对清除自由基有一定的作用,其清除效果在一定范围内随着总黄酮质量浓度的增加而增强。     

乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

葛根抗氧化肽的分离及清除自由基活性研究

目的：分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法：以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行还原能力的测定,还原能力最强的命名为PE1。对PE1进行茚三酮反应和分子质量测定。采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测PE1体外对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果：反相高效液相色谱检测PE1纯度,显示为单一峰,PE1与茚三酮反应呈阳性,分子质量约为746D,PE1在体外可以有效清除以上3种自由基。在质量浓度为0.652mg/mL时,羟自由基清除率可达到80.01%;在5mg/mL质量浓度条件下,对超氧阴离子自由基的清除率高达97.35%;在3.5mg/mL质量浓度条件下,对DPPH自由基的清除率达到75.02%,其IC50为2.83mg/mL。结论：PE1具有较强的清除自由基活性。     

黄鳍金枪鱼头多肽体外抗氧化活性的研究

以VC为对照品,测定TIP3C对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力,研究黄鳍金枪鱼头多肽TIP3C的体外抗氧化活性。结果表明,TIP3C对4种自由基均具有较强的清除作用,且清除率都随着质量浓度的增大而显著增加(p0.05),剂量效应关系明显;TIP3C对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除IC_(50)分别为1.724,0.985,2.434和0.242 g/L。TIP3C具备较高的抗氧化能力,为其作为抗氧化肽的开发利用提供理论依据。     

蛋清肽的工艺优化、抗氧化作用及特性

以对DPPH自由基清除率为考察指标,筛选适宜蛋清肽制备蛋白酶。研究酶活、温度、蛋清含量及pH值对蛋清肽清除DPPH自由基的影响,利用正交试验探讨制备蛋清抗氧化肽的最佳工艺;以抗坏血酸(VC)为对照,研究蛋清肽总还原力大小、对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用;研究蛋清肽的部分特性。结果表明:风味蛋白酶适宜蛋清肽的制备,酶解时间选择90 min。最佳工艺为:pH 5,45℃,蛋清体积分数8%,酶活1 125 U。此条件下对DPPH自由基清除率为53.273%。蛋清肽对羟自由基(0.308 4～1.542 mg/mL)、超氧阴离子自由基(0.089～0.443 mg/mL)具有一定的清除能力,清除率随其质量浓度的增大而增加,且具有一定的还原力。对羟自由基,VC的IC50=0.092 mg/mL,蛋清肽IC50=1.24 mg/mL,对超氧阴离子自由基,VC的IC50=0.021 6 mg/mL,蛋清肽的IC50=0.054 mg/mL。在0.667～10.667 mg/mL范围内,蛋清肽对脂质过氧化的抑制作用随其质量浓度增加而减小,在0.667～10.667μg/mL范围内反而具有促进脂质过氧化作用。蛋清肽等电点在pH 3左右,其对羟自由基清除率随温度增加逐渐下降;在pH 2～10范围内,其溶解度几乎成线性增加。     

驼乳与牛乳乳清蛋白酶解工艺优化及其产物抗氧化能力分析

为了研究不同蛋白水解酶对驼乳和牛乳抗氧化能力的影响,向驼乳和牛乳乳清蛋白中添加不同蛋白水解酶,探究乳清蛋白抗氧化活性肽的最佳制备条件,并对其抗氧化能力进行比较分析。首先从3种蛋白酶中筛选出最佳用酶,在此基础上以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-Trinitrophenylhydrazine,DPPH)自由基的清除率为响应值,进行单因素和响应面试验,同时研究了驼乳和牛乳乳清蛋白抗氧化肽对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的清除效果。结果表明,木瓜蛋白酶水解物的能力最强,水解度可达15%。驼乳乳清蛋白最佳酶解工艺为酶解pH6.4,酶解温度55 ℃,底物浓度2.73%,DPPH自由基清除率可达71.9%。牛乳乳清蛋白最佳酶解工艺为酶解pH6,酶解温度54 ℃,底物浓度4%,DPPH自由基清除率达69.9%。在最佳酶解条件下,驼乳乳清蛋白酶解液的·OH清除率为58.2%,O₂-·清除率为67.2%;牛乳乳清蛋白酶解液·OH清除率为52.2%,·O₂-清除率为60.7%。驼乳乳清蛋白酶解液的抗氧化性在不同程度上均高于牛乳乳清蛋白酶解液,驼乳和牛乳乳清酶解液的DPPH自由基清除能力较强,其次是O₂-·清除能力,·OH清除能力最弱。     

云南奇楠沉香茶鞣质测定及抗氧化

测定沉香茶中鞣质含量并对其抗氧化性进行评价。沉香茶鞣质测定参照2015版《中国药典》四部中鞣质测定方法进行;采用体外方法评价沉香茶的抗氧化活性,并与维生素C进行对照。0.087μg/mL沉香茶叶多酚量对超氧阴离子自由基的抑制率达67.8%, 0.091μg/mL沉香茶叶多酚量对清除DPPH自由基的清除率达91.5%, 0.412μg/mL沉香茶叶多酚量对羟自由基清除率达39.2%。沉香叶中含有少量鞣质,为0.001 2%,沉香茶中多酚类对超氧阴离子自由基和1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)有良好清除作用,对羟自由基有一定抑制率,说明有一定抗氧化性。     

黑蒜蓝莓酒抗氧化能力及活性成分研究

检测了3种配方黑蒜蓝莓酒的总酚、总黄酮和花色苷含量,并且测定了黑蒜蓝莓酒对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子的清除能力以及对LPO的抑制率。结果表明,3种配方黑蒜蓝莓酒中,配方2总酚及总黄酮含量最高,分别为356.8 mg/L和84.5 mg/L;配方1花色苷含量最高,为9.72 mg/L。3种配方的黑蒜蓝莓酒对于3种自由基的清除能力基本与其多酚含量呈正相关。配方2对DPPH自由基和超氧阴离子的清除率最好,分别为95.32%和96.24%;配方1对羟基自由基、DPPH自由基清除能力最好,分别为79.79%和97.93%;原酒对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除率分别为96.92%,72.06%和79.55%;3种配方黑蒜蓝莓酒对脂质过氧化的抑制能力与总黄酮和花色苷含量有极显著相关性,配方2的抑制率为81.31%,原酒为89.95%;配方1和配方2可作为黑蒜蓝莓酒的2个基础配方加以改进。     

玉米须黄酮清除自由基活性的研究

利用二苯代苦味酰基自由基体系、H2O2/Fe2+产生的羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系对玉米须黄酮粗提物、乙酸乙酯与正丁醇萃取物的体外清除自由基的能力进行研究,并以芦丁的测定值为对照.试验结果为:清除DPPH自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物.各试样达到最大清除率的浓度及清除率分别为:1、2、2g/L及93%、78%和71%;清除羟自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物,当试样浓度为20 g/L时,清除率达到最大,依次为92.04%、82.6%和56.5%;清除超氧阴离子自由基的能力依次为:玉米须黄酮粗提物>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物,当试样的浓度为20g/L时,清除率达到最大,依次为94.8%、90%和58%.结果表明,各试样清除羟自由基和超氧阴离子自由基的效果优于芦丁的效果,玉米须黄酮具有较好的清除自由基的能力.     

杜仲素抗氧化活性研究

以VC 为阳性对照,对杜仲素和高纯绿原酸清除羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)及1,1- 二苯基-2- 苦苯肼自由基(DPPH 自由基)活性进行研究,并通过计算清除率比较清除各种自由基活性的效果。结果表明：杜仲素在不同自由基体系中抗氧化活性不同,清除自由基能力为O2·＞ DPPH 自由基>·OH,对3 种自由基的最大清除率依次为95.85%、75.31% 和31.10%。因此,杜仲素具有较强的抗氧化作用。