沙门氏菌的分离与鉴定能力验证

目的 参加安徽省质量技术监督局举办的食品中沙门氏菌检出能力验证实验, 提高实验室的检测水平和综合能力。方法 依据能力验证作业指导书和GB 4789.4-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》的检验要求, 对6份样品进行检验, 并对分离的疑似菌进行鉴定。结果 CODE5检出肠炎沙门氏菌、CODE6检出甲型副伤寒沙门氏菌, 而CODE、CODE2、CODE3、CODE4未检出沙门氏菌。检验结果与能力验证组织单位结果一致, 结果满意, 顺利完成能力验证实验。结论 本次能力验证活动提高了实验室检测能力和检测技术水平。     

能力验证试验中沙门氏菌的分离与鉴定

目的研究能力验证试验中沙门氏菌的分离与鉴定。方法以中国合格评定认可委员会提供的冻干细菌混合物作为能力验证样品,根据能力比对试验中给定盲样可以水化的特性,采用GB 4789.4-2010中的方法对沙门氏菌进行传统鉴定和快速鉴定,并对检出的沙门氏菌进行生化鉴定和血清学鉴定。结果采用沙门氏菌快速鉴定方法,盲样的鉴定结果与GB 4789.4-2010中的结果一致,确定所检出的沙门氏菌为都柏林沙门氏菌。结论与传统鉴定方法相比,沙门氏菌快速鉴定方法在同等试验条件下具有快速准确、操作简单的特点,可以作为一种快速筛查方法运用在微生物能力验证领域。     

沙门氏菌能力验证样品制备

目的研究制备适用于沙门氏菌(Salmonella)能力验证(PT)检测项目的冷冻干燥样品,通过能力验证确定实验室或检查机构的校准、检测能力。方法对目标菌与干扰菌进行10倍梯度稀释,对不同稀释度的菌液进行菌落计数并计算菌浓度,确定沙门氏菌与干扰菌的添加量,以冻干的绿豆粉为基质,脱脂奶粉为冻干保护剂,将细菌混合物与冻干保护剂混合均匀,采用真空冷冻干燥方式分别制备沙门氏菌能力验证阳性样品与阴性样品,采用西林瓶真空包装、4℃冷藏贮存;通过随机抽样和鉴定以评估样品的均匀性,通过观察样品在90 d内不同温度下目标菌的测试结果以评估样品的稳定性。结果每个样品最终添加10~100 CFU目标菌,添加104 CFU干扰菌;抽检的样品均能有效鉴定,显示PT样品具有较好的均匀性;通过保存温度和时间的稳定性检验显示测试结果符合预期效果,PT样品具有较好的稳定性。结论建立了有效的沙门氏菌能力验证样品制备的方法与评价程序。     

食品能力验证中沙门氏菌的分离和鉴定

目的为了提升实验室食品中沙门氏菌检测能力,增强实验室竞争能力,本实验室参加了中国食品药品检定研究院组织的沙门氏菌检测能力验证活动。方法依据中华人民共和国国家标准GB 4789.4-2010,采用传统分离方法和血清学鉴定,联合全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2-compact)对分离出的疑似菌进行生化鉴定。结果编号为CODE1样品+CODE1奶粉混合样检出纽波特沙门氏菌和科林德尔沙门氏菌,CODE3样品+CODE3奶粉混合样检出维普拉沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和埃科沙门氏菌,其余8个样品未检出。结论顺利完成本次能力验证活动。     

食品能力验证中沙门氏菌的分离鉴定与血清分型

目的参加沙门氏菌分离鉴定与血清分型的能力验证,以加强实验室整体水平与能力。方法参照GB4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学沙门氏菌检验》进行沙门氏菌检测,将生化试验与VITEK2鉴定结果符合沙门氏菌编号的样品进行血清学试验。结果编号CODE 1样品检出巴尔多沙门氏菌,CODE 3样品检出鼠伤寒沙门氏菌,其余8个样品均未检出沙门氏菌。本实验室顺利完成能力验证实验,与组织方结果一致,结果为满意。结论参加能力验证是提高检验机构内部质量控制最有效的手段之一,可有效提高检验机构出具检验数据的可靠性和有效性,确保实验室持续维持较高的检验水平。     

乳粉能力验证中沙门氏菌的分离鉴定和血清分型

目的参加编号为NIFDC-PT-220的能力验证,考核从乳粉中检出沙门氏菌及血清分型能力。方法参照国标方法对中国食品药品检定研究院提供的随机乳粉样品(CODE140、CODE121)进行沙门氏菌的检验,并将荧光酶联免疫法和荧光定量PCR技术作为辅助方法。对分离出的疑似菌进行生化鉴定,并且采用全自动微生物鉴定系统进行全面鉴定。结果编号CODE140血清分型为O:4,5,12, H:i; 1,2被确定为鼠伤寒沙门氏菌。编号CODE121未检出。结论荧光酶联免疫法和荧光定量PCR技术缩短了检测时间,特异性和敏感性好,与国标方法配合可确保实验结果的准确性。     

能力验证中沙门氏菌的分离鉴定与血清分型

目的通过参加NIFDC-PT-098乳粉中沙门氏菌检验的能力验证,提高本实验室的检测能力,增强实验室竞争力。方法依据GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》中的方法,对2份样品中的沙门氏菌进行分离和血清学鉴定。并以全自动荧光免疫分析系统(MINI VIDAS)进行快速初筛,利用全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2)对分离出的疑似菌进行生化鉴定。结果编号CODE423检出鼠伤寒沙门氏菌,其血清分型为O:4,5,12,H:I;1,2。编号CODE484未检出。结论本次能力验证获得满意结果,发现以国标法为基准,优先选用沙门氏菌属显色培养基平板和XLD平板为参照,同时使用VITEK2和MINI VIDAS作为辅助进行检测,综合这几种方法可确保实验结果的准确性,这为以后检验使用辅助方法检测提供了参考依据。同时本次能力验证也促进了实验室保持较高的检验水平。     

食品检测能力验证中沙门氏菌的分离鉴定

目的 参加编号为CFAPA-375的食品中沙门氏菌能力验证,提高检验技能,验证实验室沙门氏菌的检测能力。方法 采用国标法对沙门氏菌能力验证样品进行检测,同时采用实时荧光PCR法作为辅助方法。对分离出的可疑菌落,采用全自动微生物鉴定系统和实时荧光PCR法进行全面鉴定。结果 样品N1和N3中检出沙门氏菌,样品N2中未检出沙门氏菌,实时荧光PCR法与国标法检测结果一致。结论 本次实验室的能力验证结果为“满意”,验证了实验室沙门氏菌的检测能力。实时荧光PCR法快速、简便、特异性强,可与国标法配合使用,以确保实验结果的准确快速。     

巧克力中沙门氏菌检验能力验证的分析

目的分析参加中国食品药品检定研究院组织的NIFDC-PT-135巧克力中沙门氏菌检验能力验证实验结果。方法巧克力样品的前处理按照作业指导书要求进行,沙门氏菌的分离及鉴定按照GB4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物检验沙门氏菌检验》进行,传统生化试验结合VITEK 2鉴定结果进行综合判定。结果 CODE0559样品中检出沙门氏菌属,CODE0205样品中检出肠沙门氏菌双相亚利桑那亚种,CODE0863样品中未检出沙门氏菌, 3个样品能力验证结果均与组织方一致。结论基于国标法检测沙门氏菌时,应综合使用几种分离平板,传统生化试验并结合VITEK2作为辅助检测,以确保检测结果的准确性。     

2018年巧克力中沙门氏菌检测能力验证结果与分析

目的参加中国食品药品检定研究院组织的NIFDC-PT-135巧克力中沙门氏菌检验能力验证,提高实验室的检测技术能力与水平。方法按照盲样作业指导书的要求对样品进行前处理后,依据GB4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》中的方法,对3份样品进行沙门氏菌的分离和血清学鉴定,对分离出的可疑菌落用全自动微生物鉴定系统进行鉴定。结果CODE0109样品中检出鼠伤寒沙门氏菌、CODE0143样品中检出肠沙门双相亚利桑那亚种(沙门氏菌Ⅲb),CODE0835样品中未检出沙门氏菌。本实验室顺利完成考核,测定结果与考核结果一致。结论本次能力验证检出的肠沙门双相亚利桑那亚种在沙门氏菌显色平板上出现蓝色菌落,而以往则为紫红色菌落,因此在检测中应引起重视。通过此次能力验证,本实验室的沙门氏菌检测技术水平得到了有效验证和提高。     

TaqMan实时荧光PCR对沙门氏菌能力验证样品的快速检测与鉴定

本研究依据GB 4789.4-2016标准对沙门氏菌ACAS-PT526能力验证样品进行常规培养法检测,同时使用TaqMan实时荧光聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术对预增菌培养物进行快速检测和鉴定。本研究首先以沙门氏菌特异性基因hut基因为靶基因,设计合成特异性引物和探针,提取各类食源性菌种的核酸DNA进行实时荧光PCR反应,仅沙门氏菌属出现阳性扩增,非沙门氏菌属、阴性对照和空白对照均无扩增信号,验证设计合成的引物探针具有较高的特异性。其次将能力验证样品和加标样品经预增菌、增菌、分离、纯化、生化试验和血清学鉴定,同时将预增菌培养物经实时荧光PCR测定后,18-D319和加标样品有显著的S型扩增曲线,Ct值分别为24.34和26.21,为沙门氏菌阳性,18-M906无显著荧光信号,Ct值>40.00,为沙门氏菌阴性。经API20E试剂条鉴定,18-D319为猪霍乱沙门菌亚利桑那亚种,鉴定百分率为99.90%,T值为0.97,18-M906为大肠埃希氏菌,鉴定百分率为99.80%,T值为0.94。实时荧光PCR检测结果与常规培养法检测结果一致,且更为简单快速,从预增菌到结果判定仅需12 h,结果准确度高,一批次可检测多个样品,可用于大量样品中沙门氏菌的快速筛查和对能力验证样品的检测验证。     

奶粉样品中沙门氏菌能力验证结果与分析

目的验证分析实验室对奶粉样品中沙门氏菌检测能力。方法依据GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》、SN/T 1059.7-2010《进出口食品中沙门氏菌检测方法实时荧光PCR法》进行改进,参照能力验证计划参试指导书来进行测定和结果判断。结果通过荧光定量PCR法进行快速初筛,初步判断样品含有阳性沙门氏菌;传统平板法结合生化鉴定套装和VITEK2进行复筛,将可疑沙门氏菌进行血清分型,检出2种血清型O:4,12 H:i,2和O:9,12 H:m,g:-,分别为鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌;同时采用Ribo Printer全自动微生物基因指纹鉴定系统对可疑单菌落进行确证性鉴定,结果与血清分型一致。结论本次实验室的奶粉样品中沙门氏菌检测能力验证结果合格。     

熟制加工食品-鹅肝中沙门氏菌分离与鉴定

从市场抽检的熟制食品-鹅肝中分离出一株细菌,经细菌形态学观察、生化反应、BBL Crystal微生物自动分析系统以及血清凝集试验鉴定为鼠伤寒沙门氏菌,抗原摸式为4,5:i:-,-.该菌株对先锋V、氟哌酸、环丙沙星、氯霉素高敏,对复方新诺明、青霉素、红霉素耐药.     

实验室检测与能力验证——对话英国政府化学家、LGC研发与技术部总监Derek Craston博士

检测的准确性除了与检测方法、仪器性能以及分析人员的操作能力有关外,还与标准物质密不可分。近年来,标准物质的重要性受到越来越多的关注;而实际上仅有标准物质进行内部检测管理的控制还远远不够,必要的能力验证对于实验室,尤其是专注于提供检测服务的第三方检测实验室来说,更是至关重要。为更好的了解由实验室检测的准确性而经常引发的检测数据纠纷及解决办法,实验室检测准确性与实验室能力验证的关系,本刊记者与英国政府化学家、LGC（政府化学家实验室）研发与技术部总监Derek Craston博士进行了一番对话。     

冻鸡肉中肠炎沙门氏菌的分离与鉴定

通过全自动微生物鉴定仪,对送检的5份冻鸡肉进行沙门氏菌的分离与鉴定,并对检验过程和结果进行分析。结果表明:5份送检的冻鸡肉中有两份含有肠炎沙门氏菌。本结果为动物产品中肠炎沙门氏菌等致病菌的检验提供依据,确保肉品安全。     

显色培养基上沙门氏菌及干扰菌的分离鉴定

研究比较沙门氏菌显色培养基(CAS)上干扰菌与沙门氏菌的区别,提高沙门氏菌的分离鉴定效率。使用沙门氏菌和7株干扰菌(铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、施氏假单胞菌、荧光假单胞菌、斯氏普罗威登斯菌、摩氏摩根菌摩根亚种、粪产碱菌亚种)分别接种CAS、BS、XLD和HE培养基,观察菌落形态特征,分析生化试验结果,考察TTB和SC选择性增菌液对7株干扰菌的选择效果。7株干扰菌在CAS培养基上都是紫色菌落,仔细辨认大部分都可与沙门氏菌区分,无法从菌落形态区分的恶臭假单胞菌和荧光假单胞菌通过在BS上的生长情况或生化试验可以排除,TTB和SC选择性增菌液对7株干扰菌的选择效果各不相同,提示检测过程中TTB和SC两种增菌液须同时使用,相互补充,提高检出率。     

不同选择性培养基中沙门氏菌和干扰菌的分离鉴定

目的提高食品中沙门氏菌的检测水平。方法将4种沙门氏菌(甲型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门菌双相亚利桑那亚种、沙门氏菌食品分离菌株)和6种干扰菌(铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、奇异变形杆菌、粘质沙雷氏菌和恶臭假单胞菌)分别接种到不同选择性培养基中,观察菌落形态特征及显色情况,结合生化实验和血清学实验结果比较不同选择性培养基的分离鉴定效果。结果研究发现沙门显色培养基的分离鉴定效果最好,甲型副伤寒沙门氏菌不产H_2S,而弗氏柠檬酸杆菌和奇异变形杆菌这2种干扰菌产H_2S,肠炎沙门菌双相亚利桑那亚种在沙门显色培养基中的菌落形态区别于其他沙门氏菌。结论在实际检测过程中,不能将产H_2S作为判定是否检出沙门氏菌的唯一标准。在挑取和鉴定典型、可疑菌落时必须结合不同的选择性平板和显色平板进行综合分析,不能只从单一平板上的菌落形态下结论。     

生鲜猪肉中沙门氏菌的分离、鉴定及耐药性检测

调查本地区生鲜猪肉中沙门氏菌的污染情况及耐药性情况,为进一步对肉及肉制品中耐药性沙门氏菌的风险评估奠定基础。采集超市和集贸市场的生鲜猪肉,采用实时荧光定量PCR对生鲜猪肉中沙门氏菌污染进行初筛,然后根据沙门氏菌检验国家标准进行分离鉴定,并对分离到的沙门氏菌进行耐药性检测。结果从83份肉样中分离到21株沙门氏菌,沙门氏菌检出率为25.3%。21株沙门氏菌中有7株对11种抗生素中的至少一种产生耐药性,耐药率33.3%。结果表明本地区生鲜猪肉微生物污染较为严重,沙门氏菌检出率较高且四环素耐药严重;另外在菌落总数和沙门氏菌检出率方面冷却肉的质量好于热鲜肉,超市和集贸出售的肉的质量无显著差异。     

速冻调制食品中沙门氏菌及干扰菌的分离与鉴定

为研究速冻调制食品中沙门氏菌及干扰菌的污染状况和生化特性,参照国家标准对6个类别307批次速冻调制食品进行沙门氏菌检测,对分离出的目标菌及干扰菌进行初筛试验和生化鉴定.结果显示,在选择性琼脂平板上沙门氏菌可疑率为41.69％,初筛试验后可疑率降至16.29％,沙门氏菌检出率为0.98％,鉴定出19种干扰菌.速冻调制食品...     

实验室能力验证样品的均匀性和稳定性检验

国家认监委《关于下达2007年能力验证计划的通知》中,批准由国家人造板质量监督检验中心对《中/高密度纤维板中甲醛释放量检测》项目承担协调和实施工作。