响应面法优化波纹巴非蛤糖胺聚糖提取工艺的研究

利用SAS和响应面分析相结合的方法,对波纹巴非蛤糖胺聚糖的提取工艺进行优化.确定酶解法(酶由枯草杆菌中性蛋白酶与胰酶按2:3的酶活比混合组成)提取糖胺聚糖的最佳条件为:水料比2.5:1、酶解时间3.5 h、酶添加量的质量分数为1%(以底物质量计).在此条件下,糖胺聚糖提取率可达到0.413%.     

响应面法优化酸水解制备波纹巴非蛤小分子肽工艺

应用响应面分析法优化酸水解制备波纹巴非蛤小分子肽的工艺条件。采用二次正交旋转组合设计试验,以波纹巴非蛤肽得率为响应值,进行3因素5水平的响应面分析,建立二次回归模型,其拟合优度为92.09%。获得的最优酸水解条件为：固液质量比1:3、盐酸浓度6.4mol/L、酸水解温度92℃、酸水解时间5.3h。在此条件下肽得率为82.21%,与模型预测的肽得率84.04%接近。SDS-PAGE电泳测得酸水解液组分的最小分子质量小于2kD。     

响应面法优化波纹巴非蛤低温保活工艺研究

利用低温方法对波纹巴非蛤进行保活实验,并利用响应曲面法对提取工艺参数进行优化研究,在单因素试验基础上选取试验因素与水平,根据中心组合（Box-Benhnken）试验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,依据回归分析确定各工艺条件的影响因子,通过典型性分析得出最优工艺为：温度-1℃,相对湿度100％,海水密度1．012×10^3kg／m3。在此工艺条件下波纹巴非蛤的存活率为99．125％。验证实验条件下实际存活率为97．8％±0．4472％。     

巴非蛤蛋白酶解工艺条件的研究

以巴非蛤肉为原料,利用木瓜蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标确定最佳水解条件。在此基础上通过正交试验,对水解条件进行了优化,结果表明在温度40℃、水解时间4h、加酶量6000U/g原料、料水比为1∶10(w/v)、pH6.5条件下可以获得较好的水解效果。水解液的氨基酸分析结果表明,游离氨基酸含量丰富,约为492.32mg/100mL(色氨酸未计),其中必需氨基酸占30.6%,尤其是谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸含量丰富。结果为巴非蛤肉水解液作为氨基酸口服液或高级调味料提供了依据。     

响应面法优化豆粕蛋白酶解条件

采用响应面法对豆粕蛋白酶解条件进行优化研究.以水解度为指标,采用单因素试验的方法考察了pH值、底物质量浓度、加酶量、水解温度和水解时间等因素对水解度的影响.在单因素试验基础上,根据中心组合(Box-Behnken)试验设计原理采用3因素3水平的响应面分析法,在分析各个因素的显著水平和交互作用后,得出最佳工艺条件为pH值6.96、底物质量浓度5.2 1g/100mL、加酶量3％、酶解温度53.8℃、酶解时间6h.在该条件下水解度达到23.67％.     

超声波技术在波纹巴非蛤酶解反应中的应用

将超声波技术应用到波纹巴非蛤制备的酶解反应中,在单因素试验的基础上采用响应面分析法对试验条件进行优化。运用Box-Benhnken 的中心组合试验设计原理,选择对短肽产率显著影响的4 个因素：辐照时间、辐照温度、超声功率和固液比,进行四因素五水平的响应面分析试验,确定在超声波条件下波纹巴非蛤的酶解反应最佳工艺条件为辐照时间4h、辐照温度55℃、超声功率140W、固液比1:2(g/mL)。对模型预测结果进行验证,得到短肽产率为样品的5.15%,是无超声波作用下的短肽产率的1.1 倍。     

波纹巴非蛤酶解蛋白脱腥技术研究

研究比较了NaCl盐析法、菊花茶掩蔽法、活性炭吸附法、β-环糊精包埋法4种方法对波纹巴非蛤酶解蛋白脱腥效果的影响。结果表明,活性炭吸附法脱腥效果最佳。进一步通过正交实验确定了活性炭对波纹巴非蛤酶解蛋白腥味脱除的最佳吸附条件:活性炭添加量为3.0%,作用温度为40℃,作用时间为35min,其脱腥值为2。      

响应面法优化荞麦蛋白酶解工艺

以荞麦蛋白为研究对象,在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化荞麦蛋白酶解工艺。结果表明:水解温度64℃、pH9、酶用量3704U/g、底物质量浓度7.8g/L,荞麦蛋白的水解度达到最大值。该条件下荞麦蛋白水解度预测值为37.43%,验证实验所得实际值为37.35%,实测结果与预测值符合良好。     

波纹巴非蛤净化中试研究

采用紫外线制备无菌海水,根据最佳净化工艺(室温:29～30℃,湿度:80%～95%,每24 h海水循环36次)对波纹巴非蛤进行中试研究,综合分析了中试净化的微生物指标、重金属和贝类毒素指标、物理指标,并对经济成奉进行了核算.结果表明:波纹巴非蛤净化中试后,微生物指标、量金属和贝类毒素指标均符合净化海水贝类(DB35/575-2004);产品得率在95%以上;净化成本645元/吨.     

响应面法优化松仁蛋白酶解工艺条件

在pH、酶与底物比、温度和酶解时间4个单因素实验的基础上,利用响应面分析法对松仁蛋白最佳酶解条件进行了研究。结果表明,Alcalase2.4L碱性蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件为pH8.0,水解温度53℃,酶与底物比8800U/g蛋白,底物浓度1.2%,水解时间50min。      

响应面法优化腊肉酶解工艺条件

为探究腊肉最佳酶解工艺,为其进一步深加工奠定理论基础。以川味腊肉为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶及动物蛋白酶对其进行酶解,以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为测定指标,确定中性蛋白酶与风味酶的复配酶为最佳用酶;选取中性蛋白酶与风味酶的配比、料液比、加酶量、时间、p H及温度进行单因素实验,再在此基础上,以水解度为响应值,采用响应面法优化工艺条件,确定最佳酶解条件为中性蛋白酶与风味酶配比为1∶2、自然p H(5.9~6.0),加酶量0.35%、料液比1∶2(g/m L)、酶解温度47℃,酶解时间5 h。在此条件下,水解度实测值为8.77%,理论值为8.84%,实测值与理论值相差较小。      

波纹巴非蛤蛋白酶解产物的抗氧活性及分子量分布研究

以波纹巴非蛤为原料,分离得到肌浆蛋白、肌原纤维蛋白、基质蛋白3种蛋白组分,分别研究其氨基酸组成及其胰蛋白酶酶解产物的体外抗氧化活性及分子量分布。结果表明该三种蛋白质中必需氨基酸、碱性氨基酸、疏水性氨基酸和支链氨基酸含量较高。抗氧化实验结果显示,三种蛋白对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与酶解液浓度存在一定的量效关系。与其它两种蛋白酶解产物相比,肌浆蛋白酶解液中小分子肽含量最高,分子量小于1500 u占42.55±0.27%,其对自由基清除效果也明显高于其它两种蛋白酶解液,对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由清除活性的IC50值分别为4.82、4.70和3.75 mg/mL。肌浆蛋白和肌原纤维蛋白酶解产物的还原能力相当,浓度为10 mg/mL时,其OD700分别为0.58和0.57,基质蛋白酶解产物的还原能力较弱。     

波纹巴非蛤蛋白酶解产物的抗氧活性及分子量分布研究

以波纹巴非蛤为原料,分离得到肌浆蛋白、肌原纤维蛋白、基质蛋白3种蛋白组分,分别研究其氨基酸组成及其胰蛋白酶酶解产物的体外抗氧化活性及分子量分布。结果表明该三种蛋白质中必需氨基酸、碱性氨基酸、疏水性氨基酸和支链氨基酸含量较高。抗氧化实验结果显示,三种蛋白对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与酶解液浓度存在一定的量效关系。与其它两种蛋白酶解产物相比,肌浆蛋白酶解液中小分子肽含量最高,分子量小于1500 u占42.55±0.27%,其对自由基清除效果也明显高于其它两种蛋白酶解液,对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由清除活性的IC50值分别为4.82、4.70和3.75 mg/mL。肌浆蛋白和肌原纤维蛋白酶解产物的还原能力相当,浓度为10 mg/mL时,其OD700分别为0.58和0.57,基质蛋白酶解产物的还原能力较弱。     

基于人工神经网络的酶解波纹巴非蛤制备小分子肽的研究

结合人工神经网络(artificial neural networks,ANNs)的良好特性,利用正交试验获得的数据作为神经网络的训练样本,建立输入为酶解实验条件参数,输出为短肽产率的神经网络模型,并通过随机选取的样本检验了ANNs 模型的准确性。利用ANNs 模型所预测出的数据,再次结合正交试验法,对酶解波纹巴非蛤实验条件进一步优化。实验结果表明：人工神经网络优化结果的小分子肽产率为4.944%,优于正交试验4.670% 的小分子肽产率。将神经网络与正交试验结合用于酶解实验条件优化可以缩短优化实验参数的时间,获得比单纯的正交试验更优化的实验条件。     

响应面法优化鸡胸肉肌原纤维蛋白酶法水解工艺条件

以鸡胸肉为原料,提取肌原纤维蛋白,测定其蛋白质浓度及氨基酸组成;以水解度为测定指标,利用响应面法优化该肌原纤维蛋白酶解工艺条件,并考察其产物肽分子量分布。结果表明:提取的肌原纤维蛋白浓度为59.27%;该蛋白氨基酸种类齐全,组成比例均衡,必需氨基酸含量高达40.90%;碱性蛋白酶是肌原纤维蛋白酶解的最佳用酶;在单因素实验基础上,经Box-Behnken实验优化得到碱性蛋白酶水解肌原纤维蛋白最佳工艺条件为:加酶量3500 U/g、p H7.8、温度44℃,此条件下经6 h酶解,水解度达33.17%;肽分子量分布分析知,最佳水解条件下酶解液中<1000 u的小肽含量高达61.5%,说明碱性蛋白酶能较高程度的水解肌原纤维蛋白。      

低温条件对波纹巴非蛤营养成分的影响研究

采取常规方法分析常温(25.0℃)和低温(5.0±0.5℃)下波纹巴非蛤(Paphia undulata)的营养成分和氨基酸组成,并对蛋白质进行营养评价,从而分析低温对贝肉成分的影响。结果表明,波纹巴非蛤是一种高蛋白、低脂肪的食品;两种状态下呈味氨基酸和必需氨基酸含量丰富,组成均衡;两种状态下的第一限制氨基酸均为色氨酸。实验表明,波纹巴非蛤是一种优良的蛋白质源。      

响应面法优化龙须菜蛋白酶解工艺及酶解液的抗氧化活性

为获得高抗氧化活性的龙须菜蛋白酶酶解液,运用响应面(RSM)分析方法对龙须菜蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,在单因素实验基础上,以亚铁离子螯合率和DPPH自由基清除率为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、p H、酶解温度、底物质量浓度、加酶量对龙须菜蛋白酶解液抗氧化活性和水解度的影响。结果表明:在所选的5种蛋白酶中,复合蛋白酶是龙须菜蛋白酶解的最适用酶;酶解液抗氧化活性的最优酶解条件为酶解时间8.1 h、酶解温度50.1℃、p H7.0、底物浓度10 g/L、加酶量0.1%(0.15 AU/g)。在此条件下,酶解液的亚铁离子螯合率为74.61%,DPPH自由基清除率为47.66%,水解度为17.58%。对比常用抗氧化剂,酶解液在亚铁离子螯合能力方面显著高于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05),而在DPPH自由基清除能力和还原能力方面,酶解液低于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05)。优化后的龙须菜蛋白酶酶解液具有一定的抗氧化活性。      

响应面法优化腾冲雪鸡肌肉的酶解工艺

腾冲雪鸡是云南省著名的特色珍稀优良鸡种之一,是腾冲市地方特色优势禽种资源,肉骨乌黑、味香肉嫩。本文以腾冲雪鸡肌肉为原料,以水解度为指标,在单因素试验的基础上,选取对肌肉酶解效果影响较大的液固比、酶解时间、酶解温度3 个因素,进行响应面试验设计并对其酶解工艺参数进行优化。结果表明,腾冲雪鸡肌肉酶解的最佳工艺参数为：动物蛋白酶加酶量0.66%、液固比3 ∶1（g/mL）、酶解时间5.25 h、酶解温度51 ℃,此条件下蛋白质的水解度为57.13%。试验结果为腾冲雪鸡风味物质和复合调味料的开发与利用提供了参考。     

波纹巴非蛤糖胺聚糖抗氧化作用的研究

目的:研究波纹巴非蛤糖胺聚糖体外清除自由基作用及对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用。方法:采用体外实验研究波纹巴非蛤糖胺聚糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·的清除作用。体内实验采用小鼠腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,同时给药组灌服高、中、低3个剂量的波纹巴非蛤糖胺聚糖溶液,4周后检测各组小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果:波纹巴非蛤糖胺聚糖精制品(PUG-1)体外对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均具有较好的清除作用,IC50分别为:4.23、3.19、4.36mg/mL。与衰老模型组小鼠比较,200、400mg/kg·dPUG-1可以极显著提高衰老小鼠血清、肝脏、脑组织中SOD、GSH-Px和CAT含量(p<0.01),降低MDA含量(p<0.05)。结论:波纹巴非蛤糖胺聚糖具有体外清除自由基作用,其体内抗衰老作用可能与提高机体抗氧化酶活性有关。     

波纹巴非蛤糖胺聚糖抗氧化作用的研究

目的:研究波纹巴非蛤糖胺聚糖体外清除自由基作用及对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用。方法:采用体外实验研究波纹巴非蛤糖胺聚糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·的清除作用。体内实验采用小鼠腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,同时给药组灌服高、中、低3个剂量的波纹巴非蛤糖胺聚糖溶液,4周后检测各组小鼠超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量。结果:波纹巴非蛤糖胺聚糖精制品（PUG-1）体外对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均具有较好的清除作用,IC50分别为:4.23、3.19、4.36mg/mL。与衰老模型组小鼠比较,200、400mg/kg·dPUG-1可以极显著提高衰老小鼠血清、肝脏、脑组织中SOD、GSH-Px和CAT含量（p<0.01）,降低MDA含量（p<0.05）。结论:波纹巴非蛤糖胺聚糖具有体外清除自由基作用,其体内抗衰老作用可能与提高机体抗氧化酶活性有关。