蚕蛹蛋白肽酶水解条件优化

为了降低蚕蛹过敏风险,提高蚕蛹优质蛋白利用价值并制备免疫活性肽,对蚕蛹蛋白进行了酶解优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这5种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解。通过对小鼠脾细胞增殖和水解度的检测,选取最佳蛋白酶。在此基础上对最佳蛋白酶的四个单因素(酶和底物量,初始p H,水解温度和底物浓度)进行优化,从而确定最佳的酶解条件。结果表明,5种蛋白酶中碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好。对碱性蛋白酶进一步优化,通过Box-Behnken实验和回归分析获得碱性蛋白酶酶解脱脂蚕蛹蛋白的最佳条件为加酶量=6.0%,温度=55℃,酶解时间=2.00 h,p H=8.0,水∶底物=20∶1,测得的水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD490 nm为0.2512±0.0125。     

蚕蛹蛋白酶解工艺及其水解产物抗氧化性

以蛋白水解度为指标,利用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白。通过单因素试验和正交试验对影响蚕蛹蛋白水解度的因素进行优化试验,分析了两种蛋白酶对蚕蛹蛋白酶解效果的影响,并测定水解产物抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.2%、酶解时间3.5 h、酶解pH 10.0、酶与底物比5.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为27.38%;木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.5%、酶解时间5.0 h、酶解pH 10.0、酶与底物比9.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为18.26%。最佳工艺条件下,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物DPPH清除率分别为83.84%和81.24%,超氧阴离子自由基清除率分别为6.36%和9.72%,羟基自由基清除率分别为43.30%和62.24%。综上所述,木瓜蛋白酶对酶解产物的抗氧化效果较好。     

酶解法提取柞蚕蛹油的工艺研究

本实验以新鲜柞蚕蛹为原料,采用生物酶水解法制备柞蚕蛹油.结果表明:采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶水解柞蚕蛹,得油率较高.最佳酶解条件为:底物蚕蛹蛋白的质量分数为2.5%,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的加入量分别是底物蛋白浓度的1%;酶解温度为:50℃;pH值=9;酶解时间:8小时.在此条件下,蛹油得率为:5.6%.同时,经双酶水解的蚕蛹蛋白水解液,通过截留分子量为一万的超滤膜过滤,可得到蚕蛹生物活性肽.     

蚕蛹蛋白的酶法水解工艺及其口服液的制备

为了制得蚕蛹免疫活性蛋白肽口服液,对蚕蛹蛋白酶解工艺进行了优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这五种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解,以水解度和小鼠脾细胞的增殖为检测指标,得出碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好,并通过单因素和响应面实验确定蚕蛹蛋白肽酶解的最佳工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量6%,酶解时间2 h,pH8,水和底物比20:1,此条件下水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD₄₉₀为0.2512±0.0125。并进行蚕蛹蛋白肽免疫活性口服液的研制,通过感官评定得到最佳工艺为:蔗糖量8%,柠檬酸量1%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

不同酶水解鱼蛋白起泡性对比研究

以鱼蛋白粉为原料,采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶分别水解鱼蛋白粉,研究酶解条件对鱼蛋白起泡性的影响。首先通过单因素试验研究了底物浓度(w/v)、加酶量(w/w)、水解时间、p H值、水解温度对鱼蛋白起泡性的影响,在单因素试验的基础上设计响应面试验,探究各因素及其交互作用对鱼蛋白起泡性的影响,优化酶解条件。结果表明:经木瓜蛋白酶水解得到产物的起泡性较好,优化的酶水解条件为:底物浓度5.65%,加酶量1.47%,p H值8.04,水解温度56.5℃,水解时间3.0 h,此时起泡性为57.3%。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

酶解大豆粉蛋白条件优化研究

从底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解促进剂和酶解时间等方面研究了碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶复合对全脂大豆粉酶解的影响,并运用单因素和正交试验设计优化酶解条件.结果表明,底物体积分数4.5%、pH值8.5、温度60℃、复合酶加酶量(碱性蛋白酶Alcalabe与木瓜蛋白酶活力之比为2∶1)2 640 U/...     

复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的工艺优化

以带鱼下脚料蛋白为原料,以水解度及亚铁螯合率为考察指标,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选试验,然后进行复合酶解试验.采用二次正交旋转组合设计,以水解度及亚铁螯合率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH值及温度对制备亚铁螯合多肽工艺的影响.综合考虑水解度和螯合率因素,最终确定复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的最佳工艺条件为:总加酶量22 000 U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比4:6先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶9h、木瓜蛋白酶8 h;pH值为碱性蛋白酶8.0、木瓜蛋白酶6.0;酶解温度为45℃.该条件下制备的带鱼蛋白亚铁螯合多肽产物水解度和螯合率分别为52.22％、82.31％.     

胰酶水解猪血蛋白工艺条件的优化

为拓展猪血蛋白利用途径,提高猪血蛋白的水解率,得到更丰富的Maillard反应底物——小分子肽及氨基酸,采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶7种酶,在固定条件下分别对猪血进行水解,以水解度为指标筛选出水解度最高的酶,然后再对该酶进行从单因素试验到正交试验的水解工艺参数优化。结果显示:胰酶的水解效果最好,其最佳的水解条件是酶加量0.5%、水解时间5h、温度55℃、初始pH8.5、底物蛋白质量分数7%,通过一次水解,可使水解度达到38.72%。