茶枝柑皮多糖对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究茶枝柑皮多糖对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:MTT法检测细胞存活率,建立H2O2诱导PC12细胞氧化损伤模型。比色法测定细胞内丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。结果:100μmol/L H2O2诱导PC12细胞4h,细胞呈现明显损伤形态,细胞内MDA含量升高,SOD和GSH-Px活性降低。茶枝柑皮多糖可明显改善PC12细胞损伤,显著降低细胞MDA含量,极显著提高SOD和GSH-Px活性。结论:茶枝柑皮多糖对H2O2诱导PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化酶活性有关。      

番茄红素对鱼藤酮损伤PC12细胞的保护作用研究

目的:探讨番茄红素（Lycopene）对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶（LDH）释放量;碘化丙啶（PI）染色流式细胞术检测细胞周期变化;比色法测定细胞内谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）;DCFH-DA染色检测细胞内活性氧类物质（ROS）水平。结果:番茄红素能明显提高鱼藤酮损伤PC12细胞存活率（p<0.05）,恢复细胞增殖;明显减轻了细胞损伤的形态的改变,降低LDH的释放、MDA和ROS含量（p<0.05）,提高PC12细胞内SOD活性、GSH含量、T-AOC能力（p<0.05）。结论:番茄红素拮抗鱼藤酮致PC12细胞的损伤,其机制可能与抗氧化,清除细胞内ROS,诱导抗氧化酶的活性有关。      

番茄红素对鱼藤酮损伤PC12细胞的保护作用研究

目的:探讨番茄红素(Lycopene)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)释放量;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;比色法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC);DCFH-DA染色检测细胞内活性氧类物质(ROS)水平。结果:番茄红素能明显提高鱼藤酮损伤PC12细胞存活率(p<0.05),恢复细胞增殖;明显减轻了细胞损伤的形态的改变,降低LDH的释放、MDA和ROS含量(p<0.05),提高PC12细胞内SOD活性、GSH含量、T-AOC能力(p<0.05)。结论:番茄红素拮抗鱼藤酮致PC12细胞的损伤,其机制可能与抗氧化,清除细胞内ROS,诱导抗氧化酶的活性有关。     

胶原蛋白多肽铬对四氧嘧啶损伤肝细胞的保护作用

研究了胶原蛋白多肽铬(CPCC)对四氧嘧啶损伤肝细胞HL-7702的保护作用,并探讨其作用机理.方法是将肝细胞HL-7702分为正常对照组、四氧嘧啶组、胶原蛋白多肽铬组及四氧嘧啶 胶原蛋白多肽铬组,分别检测细胞存活率、细胞胞内活性氧(ROS)、胞外超氧阴离子(O2.-)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,并检测胶原蛋白多肽铬在过氧化氢(H2O2)模型组中的作用.结果表明胶原蛋白多肽铬处理使四氧嘧啶损伤肝细胞存活率增加,胞内ROS生成减少,O2.-含量、SOD与GSH-Px低偿性升高及MDA含量降低.结论是胶原蛋白多肽铬处理对四氧嘧啶损伤肝细胞具有一定的保护作用,其作用机制可能与三价铬抗氧化性能有关.     

红酵母红素对氧化受损PC12细胞的保护作用

研究红酵母红素对氧化受损PC12细胞的保护作用。将培养的PC12细胞分为7组:对照组和模型组(在培养液中加入200μmol/L H2O2),番茄红素组(阳性对照组)和实验组Ⅰ—Ⅳ在氧化应激条件下分别添加红酵母红素(1、2、3、4μmol/L)。采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察细胞的存活率以及毒性变化;通过酶标法测定胞内抗氧化酶系的活性和丙二醛(MDA)的含量变化;应用流式细胞术分析细胞内活性氧(ROS)的聚集变化。结果显示,实验组Ⅰ—Ⅳ都明显提高了细胞存活率(p0.01)和降低了细胞毒性(p0.05),也显著增强了胞内抗氧化酶系的活性(p0.05),减少了丙二醛(MDA)的生成(p0.05),还抑制了细胞内活性氧的聚集。其中,实验组Ⅲ的抗氧化效果最好。红酵母红素对氧化受损PC12细胞有保护作用,在红酵母红素的四个浓度梯度中,3μmol/L红酵母红素抗氧化能力最强。     

鱼皮胶原蛋白及胶原活性多肽的研究进展

胶原蛋白是生物体内的重要蛋白质,是结缔组织的主要蛋白质成分。胶原蛋白具有多样性及组织分布的特异性,是与各种组织和器官功能相关的功能性蛋白质。鱼皮胶原蛋白及其酶解产物胶原活性多肽已引起人们的广泛关注。现对鱼皮胶原蛋白的种类、性质、提取方法以及胶原活性多肽生理活性等的研究进展作一综述。     

仿刺参胶原蛋白多肽对Ⅱ型糖尿病小鼠肾脏的保护机制

目的:研究仿刺参胶原蛋白多肽对db/db糖尿病小鼠的保护机制。方法:通过仿刺参多肽分组喂养糖尿病小鼠,测定小鼠血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量及胰岛素浓度。采用双向电泳研究小鼠的肾脏蛋白,通过差异蛋白筛选,GO功能注释,代谢通路等分析确定仿刺参多肽对糖尿病小鼠肾脏的保护机制。生化指标显示:仿刺参多肽可以降低血清中TC、TG、LDL-C的含量和胰岛素浓度,提高HDL-C水平。双向结果表明:相对于模型组,试验组共检测出上调蛋白81个,下调蛋白51个。GO结果显示:差异蛋白的功能主要集中在蛋白转运和信号传导过程。KEGG分析发现,差异蛋白主要富集在代谢途径、胰岛素抵抗和胰岛素信号传导过程。结论:喂养仿刺参多肽的小鼠体内视黄醇结合蛋白4的表达下调,血糖水平下降,胰岛素信号通路恢复正常,可以有效缓解糖尿病的症状。     

冰岛刺参生物活性成分及其功能活性研究进展

对冰岛刺参生物活性成分的组成、功能活性等研究进行综述,指出,冰岛刺参含有脂类、多糖类、皂苷类、多肽及蛋白质类等多种生物活性成分,具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎、抗衰老等功能活性,在功能性食品、营养保健品等方面具有潜在用途。未来可创新冰岛刺参深加工技术,加强冰岛刺参活性成分的功能活性、药理效力研究,提高内脏等副产物的附加值,以期为冰岛刺参的高值化利用和全产业链开发提供参考。     

鱼皮胶原蛋白及胶原活性多肽的研究进展

胶原蛋白是生物体内的重要蛋白质,是结缔组织的主要蛋白质成分。胶原蛋白具有多样性及组织分布的特异性,是与各种组织和器官功能相关的功能性蛋白质。鱼皮胶原蛋白及其酶解产物胶原活性多肽已引起人们的广泛关注。现对鱼皮胶原蛋白的种类、性质、提取方法以及胶原活性多肽生理活性等的研究进展作一综述。     

冰岛刺参缩醛磷脂和醚磷脂对神经生长因子诱导PC12细胞的促神经分化作用

目的:分离纯化冰岛刺参(Cucumaria frondosa)中的缩醛型磷脂酰乙醇胺(plasmenylethonoamine, pPE)和烷氧型磷脂酰胆碱(plasmanylcholine,aPC),并对其促进神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(pheochrom...     

基于PC12细胞模型分析大豆蛋白水解物对神经元氧化损伤的保护作用

本文基于PC12细胞模型研究大豆蛋白水解物(Soybean protein isolate hydrolysates,SPIHs)对神经元氧化损伤的保护作用。以大豆蛋白为原料,经过酶解和膜分离得到四种分子量不同的水解物,我们首先检测了SPIHs的抗氧化能力;然后用H2O2刺激P12细胞,建立神经元氧化损伤模型,并以适当浓度的SPIHs处理细胞,通过检测各种生物学指标评价对细胞氧化损伤的保护作用。结果显示,低分子量的SPIHs表现出最强的抗氧化活性;能够提高损伤细胞的存活率和抗氧化酶活力,减少乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和丙二醛(MDA)的生成,抑制细胞活性氧(ROS)的累积(p0.05或p0.01),且变化呈现一定的剂量依赖关系。研究认为,低分子量的SPIHs对神经元氧化损伤具有保护作用,可以作为功能性成分用于保护神经元氧化损伤相关的功能食品和保健品的开发。     

仿刺参精低分子质量多肽的制备及抗氧化作用

本实验以仿刺参精为原料,制备出多肽并考察其体外和体内抗氧化活性。以清除羟自由基（•OH）能力为指标,考察木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶的5 种酶解方式产生的酶解产物的活性,优化实验用酶。经超滤分级后,测定各级组分的分子质量分布、可溶性蛋白质含量、多肽含量和清除•OH能力。选择清除•OH能力较好的低分子质量多肽组分,测定氨基酸组成,设定低、中、高剂量组（100、200、600 mg/kg（以体质量计,下同））、模型对照组、和空白对照组进行42 d小鼠灌胃实验。实验完成后,检测小鼠血液中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和蛋白质羰基含量。结果表明,由木瓜蛋白酶水解,经超滤制备的＜1 000 u仿刺参精多肽具有较好的体外清除•OH能力,其半数抑制浓度为6.02 mg/mL,含量占比为58%,氨基酸组成中谷氨酸等酸性氨基酸和酪氨酸等疏水性氨基酸含量丰富。小鼠抗氧化模型实验表明,实验组生长正常,高剂量多肽组小鼠体内SOD活力显著提高（P＜0.05）,GSH的含量提高极显著（P＜0.01）、GSH-Px活力也呈剂量依赖性升高,但未达到差异显著（P＞0.05）。MDA和蛋白质羰基含量得到有效降低,后者达到差异显著（P＜0.05）。研究结果显示：＜1 000 u仿刺参精多肽具有提高小鼠抗氧化能力的效果,可以作为相关功能产品开发的原材料。     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

白肉灵芝水提物对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的对采自四川省凉山州会东县的白肉灵芝进行种属鉴定及抗氧化功效评价。方法基于样本的ITS序列完成系统发育分析,采用H_2O_2处理PC12细胞建模,MTT法检测细胞存活率,验证白肉灵芝水提物对PC12细胞的保护作用。结果样本与白肉灵芝Ganoderma leucocontextum同属于一个分支,相似度98%。样本水提物能显著提高H_2O_2处理后的PC12细胞的存活率并降低Caspase-3活性。结论样本鉴定为白肉灵芝Ganoderma leucocontextum,对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡有保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中Caspase-3的表达有关。     

响应面优化冰岛刺参内脏团抗氧化肽制备工艺及其组成分析

以冰岛刺参内脏团蛋白为原料,利用复合蛋白酶酶解制备抗氧化肽。在单因素实验基础上,通过响应面法优化酶解工艺条件,并分析其抗氧化活性、分子量分布和氨基酸组成。结果表明,最佳工艺条件为底物质量分数4.4%,加酶量4887 U/g,pH7.0,酶解温度56 ℃,酶解时间4.2 h,在该条件下,2 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率可达89.18%±0.11%,0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由基清除率和Fe2+螯合率分别为68.11%±0.12%、72.59%±0.08%,1.5 mg/mL酶解产物的羟基自由基清除率和还原力分别为71.86%±0.09%、0.7473±0.0105;分子量分布和氨基酸分析表明,冰岛刺参内脏团抗氧化肽中分子量低于1000 Da的肽占94.26%,富含酸性氨基酸和疏水性氨基酸,具有较高的抗氧化活性和营养价值。该研究为冰岛刺参深加工产业的发展提供了技术参考。     

仿刺参精、卵多肽体外抗氧化及对H2O2诱导巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的 为研究仿刺参精、卵多肽体外抗氧化及对H₂O₂诱导巨噬细胞氧化损伤的保护作用。方法 采用切向流超滤法对多肽进行分级制备,通过测定清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O_2^-.)的能力来评价体外抗氧化活性,并对多肽的相对分子质量(Mr)、氨基酸(AA)组成及氧化稳定性进行检测分析,通过构建氧化损伤细胞模型,考察多肽对H₂O₂诱导RAW 264.7巨噬细胞氧化损伤的保护作用。结果 仿刺参精、卵多肽均具有较强的清除DPPH.、.OH和O_2^-.能力,并且在一定范围内呈现量效关系,Mr<1×10^₃ Da的多肽AJS1和AJE1抗氧化活性表现更强,两者Mr 95.56%和91.89%在1×10^₃ Da以内,疏水性AA和酸性AA比例均较高,并具有极佳的耐盐性和热稳定性,但在贮存和加工过程中仍要注意过酸环境和金属离子对氧化稳定性的影响。所有多肽组对巨噬细胞不存在毒性影响,并且多肽质量浓度为200、400 μg/mL时均对H₂O₂损伤的RAW 264.7巨噬细胞体现出显著的保护作用(P<0.05)。结论 仿刺参精、卵多肽具有良好的体外抗氧化和对氧化损伤细胞的保护作用,具有开发为功能性食品、医药和化妆品等的潜力。     

玉簪多糖对细胞氧化应激损伤的保护作用机制

本实验以紫萼玉簪（Hosta ventricosa）为原材料,采用响应面法优化其根系多糖（Hosta ventricosa root polysaccharide,HVRP）的提取工艺,探索HVRP对叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,t-BHP）诱导的HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用机制。结果表明：在提取温度84 ℃、提取时间3 h、料液比1∶31条件下,HVRP平均提取率达到23.9%;HVRP中还原性糖、蛋白质、糖醛酸的质量分数分别为11.17%、0.6%、12.31%,含有多糖类物质的特征吸收峰,不存在三螺旋构象。体外抗氧化和细胞实验结果表明,HVRP具有较强的抗氧化活性,能显著或极显著降低t-BHP诱导氧化损伤HepG2细胞内活性氧、丙二醛含量并提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽及谷胱甘肽过氧化物酶水平（P＜0.05、P＜0.01）。通过实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹分析发现,HVRP可通过调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路促进抗氧化酶表达,从而改善t-BHP诱导的HepG2细胞氧化损伤。本研究可为阐明HVRP抗氧化作用机制及其在功能性食品中的应用提供理论依据。     

核桃多酚对皮质酮损伤PC12细胞的作用机制

核桃多酚为核桃粕中的生物活性物质,具有重要的开发和应用价值。为探讨核桃多酚的潜在抗抑郁活性,采用皮质酮诱导的大鼠嗜铬瘤(PC12)细胞损伤模型,以细胞活力、细胞凋亡、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放量、细胞内钙离子水平评价核桃多酚在皮质酮损伤模型上的作用,并进一步采用蛋白免疫印迹法探讨核桃多酚对皮质酮损伤PC12细胞作用的机制。结果表明:核桃多酚(75、150μg/mL)预处理可显著逆转皮质酮损伤引起PC12细胞活力降低、细胞凋亡、LDH释放量增加和钙超载,发挥细胞保护作用;此外,核桃多酚可显著逆转皮质酮诱导的PC12细胞中cAMP依赖性蛋白激酶A(cAMP-dependent protein kinase A, PKA)活性降低,并下凋cAMP反应原件结合蛋白(cAMP-response element binding protein, CREB)133位丝氨酸的磷酸化和下游靶蛋白脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表达量;进一步应用PKA阻断剂H89预处理消除了核桃多酚对皮质酮诱导的PC12细胞的保护作用,说明增加PKA/CREB/BDNF 信号通路活性是核桃多酚发挥抗皮质酮损伤作用必需的。研究结果表明,核桃多酚具有潜在的抗抑郁活性,可能是核桃饮食发挥抗抑郁作用的重要物质基础,其对皮质酮损伤的PC12细胞的保护作用与上调PKA/CREB/BDNF 信号通路有关。研究结果旨在探明核桃多酚的潜在抗抑郁活性及机制,并为核桃粕的高值化利用提供理论参考。     

甲状腺素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用

研究甲状腺激素(T3)对人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。体外建立HepG2细胞H2O2氧化损伤模型,添加不同浓度T3进行保护,测定T3对细胞ROS、存活率、抗氧化酶及相关基因的影响。10-9、10-7、10-5mol/L的T3预处理24 h可分别有效降低50、100、200μmol/L H2O2处理细胞的ROS水平,提高细胞存活率(p0.05)。但10-5mol/L的T3反而会增加50μmol/L H2O2处理细胞的ROS水平,降低存活率(p0.05)。适量T3可显著降低H2O2氧化损伤的HepG2细胞MDA含量(p0.05),显著提高T-AOC、GSH-Px以及SOD活性(p0.05)。但过量T3会增加细胞MDA水平,降低酶活。基因表达也有类似趋势,T3预处理使损伤细胞内PI3K、Nrf2的表达显著提高(p0.05),且与T3作用剂量相关。可见T3对H2O2氧化损伤的HepG2细胞的氧化还原状态具有明显的改善作用,其抗氧化保护功能与提高抗氧化酶的活性及细胞内抗氧化相关基因的表达有关,且T3作用效果与其剂量及细胞损伤水平相关。