食品中金黄色葡萄球菌检测方法研究进展

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的重要致病菌之一,检测食品中金黄色葡萄球菌对于预防和控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。论述和分析了传统培养方法、传统检测方法的改进、免疫学方法、以分子生物学为基础的快速检测方法以及商业化快速检测方法。     

食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及其检测方法

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,在自然界中广泛分布,其引起的食物中毒是世界性的公共卫生问题。金黄色葡萄球菌肠毒素是引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要致病因子。目前共发现22种金黄色葡萄球菌肠毒素或类肠毒素(SEA-SEE、SEG-SET、SElU、SElU_2和SElV),其中具有催吐活性的被定义为肠毒素,没有催吐活性或者尚待验证的被定义为类肠毒素(SEl)。传统肠毒素SEA~SEE被报道是引起金黄色葡萄球菌食物中毒的主要肠毒素类型,但是大多数新型肠毒素或类肠毒素与食物中毒的关系还没有被真正认识。本文对近几年关于金黄色葡萄球菌肠毒素与食物中毒的关系、肠毒素的表达调控以及肠毒素检测方法的研究进展进行了总结,以期更好地了解金黄色葡萄球菌新型肠毒素致病性,为今后金黄色葡萄球菌食物中毒的预防和控制提供依据。     

金黄色葡萄球菌肠毒素在食源性微生物中的研究进展

由细菌污染引起的食源性疾病依然是影响人类公共健康和食品安全的最大问题之一。其中,金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,引起许多严重感染。金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性球菌,广泛分布于自然界,是引起化脓性疾病的重要病原菌,也是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种重要细菌。食品受金黄色葡萄球菌污染后,不仅会腐败变质,而且部分菌株产生金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins,SEs）而引起食物中毒,由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的首位。所以,对SEs的研究以及快速、精确的检测和筛查,成为关键环节。本文拟对金黄色葡萄球菌肠毒素生物学性状、致病．洼、检验方法等方面的研究进展进行综述。当然,对金黄色葡萄球菌及其主要致病因子肠毒素的研究有待进一步深入与发展。     

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测乳中携带sea基因金黄色葡萄球菌的研究

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的一种常见的致病菌,而其产生的肠毒素A是乳及乳制品食物中毒事件的主要原因。本研究建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。该方法能快速、稳定地在8h内完成对乳中金黄色葡萄球菌的检测,对人工污染乳中金黄色葡萄球菌检测的最低检出限为83CFU/ml。     

SYBR Green I荧光定量PCR检测乳中携带sea基因金黄色葡萄球菌的研究

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的一种常见的致病菌,而其产生的肠毒素A是乳及乳制品食物中毒事件的主要原因.本研究建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测.该方法能快速、稳定地在8h内完成对乳中金黄色葡萄球菌的检测,对人工污染乳中金黄色葡萄球菌检测的最低检出限为83CFU/ml.     

食品中金黄色葡萄球菌概况及新型检测技术研究进展

金黄色葡萄球菌是食品中常见的食源性致病菌,是引起细菌性食物中毒最普遍的原因之一,感染后可引起人食物中毒、急性肠胃炎和动物腹泻等疾病,严重危害人类安全及健康。因此研究食品中金黄色葡萄球菌的特性及快速准确的检测方法、对及时有效控制病原菌传播、预防食物中毒,减少食源性疾病事件的发生具有重要的现实意义。     

快速检测金黄色葡萄球菌活菌的研究进展

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的常见食源性致病菌之一,如何快速准确检测食品中的金黄色葡萄球菌是预防其引起大规模疾病爆发的关键环节。传统的检测方法不易区分死活菌,易导致假阳性或假阴性结果的出现。重点综述了近些年建立的常用金黄色葡萄球菌活菌快速检测的方法,分析比较了各检测方法的优缺点,以期为金黄色葡萄球菌活菌检测技术的进一步开发利用提供方法参考。     

一起由沙门氏菌和金黄色葡萄球菌混合引起的食物中毒病原分析

目的对引起食物中毒相关样品进行病原菌的分离、鉴定和耐药分析。方法参照GB 4789系列标准的方法流程对采集的食物样本进行沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、副溶血弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌共5项致病菌指标检测,按照纸片扩散法(K-B法)进行药敏实验。结果从食物中毒样品中检出肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌,确定为二者混合感染引起的食物中毒。药敏结果显示肠炎沙门氏菌对多数抗生素敏感,金黄色葡萄球菌耐药性强,对链霉素、头孢噻肟、氯霉素、红霉素有一定的耐药性。结论本起事件是由肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌混合感染引起的食物中毒事件,建议食品卫生监管人员应加强对餐饮环节的监督引导,避免类似事件发生。     

金黄色葡萄球菌及其快速检测方法

金黄色葡萄球菌(Saphylococcus aureus)是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种重要细菌,在自然界中分布广泛.对金黄色葡萄球菌的生物学特性、流行病学特点及其致病性进行了简要综述,并重点介绍了金黄色葡萄球菌的几种快速检测方法.     

生乳中金黄色葡萄球菌污染半定量风险评估研究

目的探索上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染的风险。方法按微生物风险评估的程序,应用半定量风险评估软件(risk ranger)结合流行病学调查和微生物检测等。结果上海市金黄色葡萄球菌肠毒素性食物中毒列报告的细菌性食物中毒暴发事件第3位;金黄色葡萄球菌肠毒素性食物中毒的严重性中等、全人群易感;4—6月上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染率为72.0%,乳及乳制品日均消费量达86.60 g/人;假设生乳在加工前金黄色葡萄球菌超过105 CFU/g的概率为1/1 000,则每人每天因食用污染金黄色葡萄球菌污染乳及乳制品引起食物中毒的概率为2.5×10-7,每年因金黄色葡萄球菌污染乳及乳制品食物中毒病例数862人,风险等级49。结论上海市生乳中金黄色葡萄球菌污染的风险程度属于中等,需加强监管。     

食物中毒事件中致病菌肠毒素检测和分子分型研究

目的 对一起食物中毒事件样本进行检测,查明食物中毒原因,并对分离菌株进行相关性分析。方法 参照国家标准方法GB4789.10-2016,对采集样本进行细菌学检验。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测葡萄球菌肠毒素。通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型,分析菌株之间的相关性。结果 食物中毒事件中5名患者洗胃液、食物、分离菌株,均检测出E型葡萄球菌肠毒素。3株分离菌株PFGE分子分型提示来源不同克隆株,除了产生E型葡萄球菌肠毒素外,还有B、C、D型。结论 该起食物中毒由不同PFGE型别的产毒金黄色葡萄球菌污染食物引起,菌株产葡萄球菌肠毒素的型别不完全相同。金黄色葡萄球菌引起的食物中毒应关注多污染源及菌株肠毒素基因表达情况。     

食源性金黄色葡萄球菌的危害及其快速检测方法研究进展

金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病菌,可通过污染乳制品、肉制品等蛋白质或淀粉含量丰富的食品引起食物中毒,还易引发人体局部化脓性感染、肺炎、心包炎等疾病,严重时甚至会出现败血症。采用准确、高效的金黄色葡萄球菌检测方法,是预防食源性金黄色葡萄球菌及食品安全质量控制的关键。金黄色葡萄球菌检测方法主要有免疫血清学检测技术、聚合酶链式反应检测技术和生物传感器检测技术等。本文总结了各类检测方法的核心技术特征和应用实例,为食源性金黄色葡萄球菌的快速检测方法的研发和使用提供思路。     

一起食物中毒事件中产独特肠毒素表型的金黄色葡萄球菌病原学分析

目的对一起疑似为金黄色葡萄球菌所导致的食物中毒事件进行葡萄球菌肠毒素检测,结合金黄色葡萄球菌病原学分析,为明确食物中毒诊断提供依据。方法根据流行病学调查,采用ELISA方法对可疑食物进行葡萄球菌肠毒素检测,同时对可疑食物和患者呕吐物进行金黄色葡萄球菌分离,运用Vitek2 Compact全自动细菌鉴定仪和血浆凝固酶试验鉴定为金黄色葡萄球菌,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对病原菌进行同源性分析,以ELISA方法对检出的金黄色葡萄球菌菌株进行肠毒素检测,用PCR方法对肠毒素基因进行分型。结果食物和患者样品中分别分离出2和11株金黄色葡萄球菌,PCR方法及ELISA方法对肠毒素分型结果显示,其中12株同时存在SEA、SEB、SED、SEE 4种肠毒素及相关基因,PFGE聚类分析显示,其中12株产肠毒素金黄色葡萄球菌具有高度同源性。结论本起食物中毒事件为具有独特肠毒素表型的金黄色葡萄球菌导致,在金黄色葡萄球菌中毒实验室调查过程中,肠毒素检测结合病原菌溯源分析可以为相关公共卫生事件提供科学依据。     

Mini VIDAS与国标法检测金黄色葡萄球菌的比较及其在食物中毒中的应用

笔者使用Mini VIDAS方法和GB4789.10-2010第一法检测金黄色葡萄球菌,并对二者进行比较。GB4789.10-2010第一法(国标法),只检验金黄色葡萄球菌,对可疑食物中毒样品或产生葡萄球菌肠毒素的金黄色葡萄球菌菌株的鉴定,应检验其肠毒素。利用Mini VIDAS检测金黄色葡萄球菌肠毒素与检测金黄色葡萄球菌致病菌相比较,从检测时间、检出率、中毒判断等方面来说明检测肠毒素的重要性。Mini VIDAS检测金黄色葡萄球菌肠毒素检测时间一般为25.5小时,最快只需要90分钟,而GB4789.10-2010第一法检测金黄色葡萄球菌平均检测时间为78小时,而且检出率较前者低。可见,Mini VIDAS能在较短时间内直接检出金黄色葡萄球菌肠毒素,并克服了食物中毒时致病菌已死,无法检出,造成判断失误的弊端。     

2003年～2015年金黄色葡萄球菌食物中毒事件特征分析

为了解2003年～2015年金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件发生规律,对中国知网收录的2003年～2015年金黄色葡萄球菌食物中毒暴发资料进行统计与分析。结果为共收集到发生在2003年～2015年间的金黄色葡萄球菌食物中毒事件86起,累计发病2 431人,死亡0人。肠毒素A（enterotoxin,sea）所引起的食物中毒事件最多,其次为肠毒素C（enterotoxin C,sec）。金黄色葡萄球菌所引起的食物中毒事件大多发生在夏、秋两季,然而食物中毒人数以春季最多,其次为夏季和秋季,冬季中毒人数最少。发生在集体食堂的食物中毒事件最多。肉及其制品引起的食物中毒事件数最多。因此,应针对重点人群、重点场所开展主动监测,指导合理加工或保藏食物,防止食物交叉污染或腐败变质,从而防止食物中毒事件的发生。     

2015年南宁市动物源性食品中金黄色葡萄球菌污染状况及耐药调查

目的调查2015年南宁市市售的动物源性食品中金黄色葡萄球菌的污染情况以及流行菌株的耐药情况,为食源性疾病监控提供数据支撑。方法随机采集市售的不同种类的动物源性食品383份,按照国标法进行金黄色葡萄球菌分离鉴定,并对分离到的28株金黄色葡萄球菌进行K-B纸片法耐药试验和PCR方法检测耐药基因。结果从383份动物源性食品中分离到28株金黄色葡萄球菌,耐药试验结果发现,其中10株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,28株分离株对不同的抗菌药物有不同程度的耐药,并检测到了4类耐药基因。结论市售动物源性食品中有金黄色葡萄球菌污染,存在引发食物中毒的风险;分离株的耐药试验结果可以为南宁市金黄色葡萄球菌引起的食物中毒提供用药参考。     

VIDAS~实现致病菌的全自动检测——访生物梅里埃公司行业科学事务总监Stan Bailey

据统计,我国每年发生的由致病菌引起的食物中毒事件占食物中毒事件总数的30%-90%,中毒人数占食物中毒总人数的60%-90%。因此,致病菌的检测应引起我们足够的重视。食物中致病菌的种类很多,如沙门氏菌、李斯特菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等。但由于中西方饮食习惯的差异,检测重点有所不同。如中国饮食以米饭、蔬菜为主,而这类食品适合蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,因此检测也以这两类致病菌为主。     

一起由金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌引起食物中毒的实验室检测分析

目的：通过实验室微生物检测查清山东省淄博市淄川区一起学校食物中毒事件的原因,为相似的食源性疾病暴发事件提供处置依据。方法：采集可疑食品及其包装袋8份、病例呕吐物2份至实验室进行常见致病菌检测,用实时荧光PCR方法测定增菌液中的金黄色葡萄球菌肠毒素类型。结果：1份面包屑检出金黄色葡萄球菌,1份吃剩的鸡腿检出蜡样芽胞杆菌,其余样品未检出可疑致病菌。结论：根据采集样品实验室微生物检测结果,结合现场流行病学调查以及中毒病例临床症状综合分析,此事件因食物保存不当,导致金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌滋生,食入引起食物中毒。     

肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌的抗菌机理

该研究主要探讨了肉桂精油的抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机制,实验采用气相熏蒸法研究精油的气相抗菌活性,通过TEM、电导率实验、FT-IR、荧光光谱等方法探讨肉桂精油的气相抗菌机制。结果表明肉桂精油具有显著的气相抗菌活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.25μL/m L,最低杀菌浓度(MBC)为0.5μL/m L。TEM观察显示,经肉桂精油气熏后的金黄色葡萄球菌菌体细胞膜破损溶解,细胞皱缩,从而引起内容物外泄。电导率实验进一步表明气熏后的菌体细胞膜通透性提高,并通过测试OD260发现核酸外泄与精油浓度变化的正相关关系。通过FT-IR图与荧光光谱图,发现肉桂精油引起金黄色葡萄球菌菌体蛋白构象的变化,并通过分析酰胺Ⅰ带推测在气熏过程中菌体蛋白二级结构发生无序变化,以及通过荧光强度和波长峰位的变化判断肉桂精油气熏后菌体蛋白发生了改变,暴露出更多的发色基团。由此可见,肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌可能的抑菌机理是改变菌体细胞膜通透性和形态,并改变了菌体蛋白的二级结构和三级结构。     

食品中定量检测金黄色葡萄球菌方法的比较

金黄色葡萄球菌作为致使食物中毒的主要病菌之一,广泛分布于自然环境当中,同时也多存在于人体黏膜、鼻咽及皮肤等部位,大多数人群身上都携带有金黄色葡萄球菌。同时,由于金黄色葡萄球菌对食品的威胁性极大,因此现阶段应当提高对金黄色葡萄球菌定量检测的重视程度,尽快探索出高效率高质量的检测方法。