桃仁多肽的分离及其抗氧化性能研究

桃仁是一种优质的油料和蛋白质资源,为获得具有高抗氧化活性的桃仁多肽,通过超滤技术对酶解法制备的桃仁多肽(PSP)进行分级分离,得到3种相对分子质量分布不同的组分PSP-1、PSP-2和PSP-3,并以4种不同的抗氧化能力实验为指标进行评定。结果表明:相对分子质量分布不同的桃仁多肽其抗氧化能力差异明显,其中相对分子质量低于1 k Da的PSP-1具有最高的DPPH·清除能力(IC_(50)=1.44 mg/m L)、OH·清除能力(IC_(50)=1.04 mg/m L)、O_2~-·清除能力和还原能力。因此,采用截留相对分子质量为1 k Da的超滤膜可有效分离得到具有高抗氧化活性的桃仁多肽。     

响应面法优化酶解制备核桃多肽工艺

以高蛋白核桃粉为原料,采用酶解法制备核桃多肽。在单因素实验基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以多肽质量浓度和水解度为响应值,研究p H、温度、加酶量和时间对其影响,在此基础上将酶解液通过超滤系统分离得到不同分子量多肽,并测定不同分子量多肽的抗氧化活性。结果表明:料液比1∶20 g/m L磨浆时蛋白质溶出较充分,碱性和木瓜蛋白酶按1∶1复配,风味蛋白酶添加量2000 U/g辅助酶解时水解效果较好,酶解法提取核桃多肽最优工艺:p H 7.10,温度50℃,加酶量8000 U/g,时间3.0 h,该条件下多肽质量浓度为10.01 mg/m L,水解度为11.45%,接近理论值。经超滤分离后得到≤5、5~10、10~30和≥30 k Da四种分子量多肽,不同分子量多肽都具有一定的抗氧化活性,并且≤5 k Da多肽的还原力(IC_(50)=5.47 mg/m L)、DPPH·清除能力(IC_(50)=1.03 mg/m L)、·OH清除能力(IC_(50)=5.02 mg/m L)、O-2·清除能力(IC_(50)=0.68 mg/m L)和总抗氧化能力(14.18 U/m L)均高于其它三种多肽。本研究为核桃产品的深加工和开发提供了一定的理论指导。     

低分子量核桃仁蛋白酶水解物抑制MCF-7细胞增殖

用木瓜蛋白酶制备核桃仁蛋白酶水解物,通过细胞增殖分析试验,研究其对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖的影响,结果显示:水解物具有明显的抑制细胞生长作用,IC50值为1.62mg/m L。用超滤方法将核桃仁蛋白酶水解物,分为10~5k Da、5~3k Da和3k Da3个组分,研究不同分子量范围的组分对MCF-7细胞增殖影响的结果表明,MW3k Da的低分子量组分具有较强的增殖抑制作用。对3个不同组分进行氨基酸含量分析,结果表明:具有较强抑制癌细胞生长作用的低分子量组分中,疏水性氨基酸及中性极性氨基酸含量较高,酸性极性氨基酸含量少于其他组分。     

茶花粉提取物对酪氨酸酶的抑制作用

为研究茶花粉不同溶剂提取液对酪氨酸酶的抑制作用,以提取液对酪氨酸酶的抑制作用(IC50值)为指标,探讨溶剂体积分数、料液比、提取时间3个因素对茶花粉提取物酪氨酸酶抑制作用的影响,并对茶花粉各提取物中多酚及黄酮类化合物的含量与酪氨酸酶抑制活性进行相关性分析。试验结果表明:与甲醇和蒸馏水提取液相比,茶花粉乙醇提取液对酪氨酸酶的抑制作用最大(IC50值为2.07 mg/m L);茶花粉3种因素最优的提取条件是:乙醇体积分数80%,料液比1∶10 g/m L,提取时间5 min。相关性分析结果表明:茶花粉提取物的酪氨酸酶抑制活性和多酚、黄酮类化合物的含量呈中度正相关关系,相关系数分别为0.404,0.400,且均不显著(P0.05)。     

龙眼核多酚提取物对酪氨酸酶抑制作用的研究

研究龙眼核多酚提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用。用龙眼核多酚提取物,分别以L-酪氨酸、L-多巴为底物,在475 nm处测定溶液吸光度和吸光度的变化,观察龙眼核多酚对单酚酶、双酚酶活性的影响。结果表明龙眼核多酚对酪氨酸单酚酶、二酚酶均有抑制作用,半抑制浓度IC_(50)分别为12.68、11.81 mg/m L。龙眼核多酚为酪氨酸酶可逆竞争性抑制剂,抑制常数(KI)为0.538 mg/m L。     

牡蛎酶解产物的组成特点及其体外免疫活性

香港牡蛎是我国南方高产低值的一种海洋贝类。为了提高其附加值,本研究以香港牡蛎为原料,通过酶法水解结合细胞实验对酶解产物及其超滤组分进行组成特点分析和免疫活性评价。结果表明:牡蛎酶解产物及各超滤组分分子量分布主要集中在2.5 k Da范围内,含量达53.00%~85.00%,且氨基酸组成齐全;牡蛎酶解产物可促进脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫功能,各超滤组分(10、10~5、5~2.5和2.5 k Da)在浓度为0.25~4.0 mg/m L范围内,其体外免疫活性强弱具有一定的浓度相关性,且2.5 k Da组分和5~2.5 k Da组分的免疫功能优于其他组分。牡蛎酶解产物各超滤组分中2.5 k Da组分和5~2.5 k Da组分可作为进一步研究的对象。     

鲢鱼肽美拉德反应产物超滤组分的抗氧化活性研究

鲢鱼肽美拉德反应产物(MRPs)经5 k Da、1 k Da超滤膜分离、然后再经溶剂分级后,获得了不同组分,分析其抗氧化活性与理化特性。通过对不同组分的DPPH自由基清除活性、金属离子螯合活性和总抗氧化能力的测定可以看出,水溶性组分中的高分子量化合物比低分子量化合物具有较高抗氧化活性,而醇溶性组分中高分子量的抗氧化活性比低分子量的低。MRPs中水溶性组分F-3(5 k Da)对DPPH自由基清除活性、对金属离子的螯合活性和总抗氧化力最高;水溶性组分中F-3和F-2(1 k Da~5 k Da)的褐变程度较高,F-3的荧光强度最高;FI-IR分析发现,F-2和F-3在860.01 cm-1和948.61 cm-1处有强烈的吸收峰,这表明肽因美拉德反应发生了结构的变化。因此,鲢鱼肽MRPs中起主要抗氧化作用的为水溶性物质,且其中相对高分子量的有色水溶性产物抗氧化活性较强。     

螺旋藻中香豆酸的提取及其生物活性研究

试验选取螺旋藻粉为试验材料,探究了螺旋藻中活性物质香豆酸的最佳提取条件。通过核磁共振分析确定该提取物为香豆酸,化学式为C_9H_8O_3。采用紫外分光光度法和酶动力学的方法研究香豆酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制效果、抑制机理及抑制类型,并检测其对DPPH自由基的清除能力。结果表明:香豆酸最佳提取工艺为:料液比1:20(g/mL),乙醇体积分数65%,浸提时间3 h,溶液pH 6;香豆酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,其IC_(50)为55mmol·L~(-1),对酪氨酸酶的抑制过程是可逆的混合型抑制,抑制常数KI=0.221 1 mg·mL~(-1);香豆酸对DPPH自由基具有较好的清除作用,IC_(50)为0.155 g·L~(-1)。     

沙棘籽粕原花青素制备、体外抗氧化及细胞活力评价

本实验优化了沙棘籽粕原花青素的提取方法,条件为80%乙醇,提取温度35℃,液料比8∶1 m L/g,时间1.5 h,p H3.0,在该条件下的原花青素提取率为(97.31±0.48)mg/g沙棘籽粕;对提取得到的原花青素提取物进行了DPPH自由基和羟自由基清除能力实验,并分析得到IC_50,发现沙棘籽粕原花青素提取物的DPPH自由基清除能力较维生素C强;羟自由基清除能力较弱;MTT法测定了沙棘籽粕原花青素提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞活力的抑制作用,分析得到24、48、72 h处理时间下提取物IC_50分别为542.78、199.25、82.58μg/m L。结论:沙棘籽粕提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞具有一定的抑制作用,随着剂量和时间的增加,呈逐渐增强的趋势。     

蔷薇花抑制酪氨酸酶活性成分提取工艺研究

以左旋多巴为底物,研究蔷薇花提取物对酪氨酸酶的抑制。研究提取溶剂、提取料液比、提取温度和提取时间等因素对蔷薇花提取液抑制酪氨酸酶的影响,在单因素的基础上采用正交试验确定蔷薇花提取液的最佳提取工艺。试验结果显示,蔷薇花提取液对酪氨酸酶有显著的抑制作用,最佳提取条件为:提取溶剂50%乙醇溶液、料液比1︰20 g/m L、提取温度20℃、提取时间10 min,此时测得的蔷薇花提取液对酪氨酸酶的抑制率为87.32%,抑制酪氨酸酶的IC50值为2.269 mg/m L。     

花椒籽壳蛋白与籽仁蛋白理化性质分析

以花椒籽为原料,主要研究花椒籽仁与籽壳脱脂后的基本化学成分、蛋白等电点、氨基酸组成、亚基组成以及蛋白组分等理化性质的差异。结果显示,脱脂后的花椒籽仁和籽壳中蛋白质含量分别为61. 17%、8. 54%,其蛋白等电点分别为3. 5、4. 5。花椒籽仁脱脂粉的氨基酸总量为43g/100 g,必需氨基酸占总量的27. 31%,籽壳脱脂粉的氨基酸总量为4. 07 g/100 g,必需氨基酸占总量的26. 78%,两者主要的氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸。采用Osborne法对蛋白分类,花椒籽仁中清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白的含量分别为7. 76%、72. 06%、15. 80%、1. 22%,籽壳中相对应的蛋白含量分别为13. 12%、56. 54%、21. 45%、3. 25%。SDS-PAGE电泳分析表明:花椒籽仁粗蛋白有7个条带,相对分子质量在0～66. 200 k Da之间,籽壳粗蛋白有2个条带,相对分子质量在18. 400～35. 000 k Da之间;花椒籽仁4种蛋白组分相对分子质量较小,亚基相对分子质量分布在0～45 k Da之间,花椒籽壳4种蛋白组分分布范围较小,亚基相对分子质量分布在14. 4～35 k Da之间。     

柠檬精油抑制酪氨酸酶活性的研究（英文）

本文通过测定抑制酪氨酸酶活性,DPPH(1,6-双(二苯基膦)己烷)清除自由基能力以及铜离子螯合能力,研究了柠檬精油和其组成中的六种挥发性成分抑制酪氨酸酶的机理。结果表明:柠檬精油和挥发性成分对酪氨酸酶均产生良好的抑制作用,通过空间位阻效应和清除氧自由基等非抑制酪氨酸酶活性部位的机理;其中柠檬醛(含量为2.16%)和乙位蒎烯(含量为14.30%)对酪氨酸酶的抑制率分别为76.64%和61.82%,表现出显著的抑制能力;然而,D-柠檬烯(含量为61.41%)的抑制率仅有33.25%;六种挥发成分的协同效应使得这些物质的混合物对酪氨酸酶的抑制作用强于柠檬精油;随着浓度的增加,柠檬精油抑制能力增加,其中达到50%的抑制能力的浓度为620±15.72μg/m L;Linewear-Burk曲线说明柠檬精油的抑制类型为非竞争性,并且Km=0.30±0.003 m M;基于DPPH实验得知柠檬精油和柠檬醛具有较强的清除自由基能力,两者的50%清除率浓度分别为123.65±20.20 mg/m L和176.54±23.20mg/m L;铜离子螯合实验证明六种组分虽然表现为良好的抑制酪氨酸酶作用但均不与酪氨酸酶活性部位相结合。以上结果表明柠檬精油在食品和化妆品行业中可作为潜在的生物性和功能性天然原料。     

高酸值薏米糠油脱酸技术及其活性研究

为降低薏米糠油酸值,提高其品质,采用响应面法优化了薏米糠油的碱炼脱酸工艺条件,并研究了精炼薏米糠油的活性。结果表明:薏米糠油碱炼脱酸最佳工艺条件为超量碱0.21%、碱炼时间33 min、碱液质量分数26.58%、碱炼温度58℃,在最佳工艺条件下薏米糠油酸值(KOH)从45.9 mg/g降到0.59 mg/g;精炼薏米糠油在质量浓度0.75~12 mg/m L范围内对酪氨酸酶的抑制率表现出良好的剂量依赖关系,IC_(50)为2 mg/m L;同时精炼薏米糠油对DPPH自由基的清除能力IC_(50)为6.36 mg/m L,表明其具有一定的美白、抗氧化功效。精炼薏米糠油是一种高品质、高生物活性的天然植物油,有望开发为功能性油脂产品。     

碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉制备抗氧化多肽

为优化碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉蛋白制备抗氧化多肽的条件,采用响应面分析法,以·OH清除率为响应值,研究酶解温度、酶用量、酶解p H值对制备抗氧化肽的影响。此外,还研究了不同分子质量魔芋多肽的抗氧化活性,结果表明:最佳酶解工艺参数:底物质量分数2.25%、温度55℃、酶用量3 228 U/g底物、p H 7.84、水解时间270 min。该条件下抗氧化多肽(18.35 mg/m L)的·OH清除率为73.41%,多肽得率为75.37%。通过Sephadex G-25和Sephadex G-15串联柱分离得到5个多肽组分,其中分子质量为1 500 u和1 000 u的组分抗氧化活性较高,其清除DPPH·的IC50分别为2.82 mg/m L和3.65 mg/m L;清除·OH的IC50分别为9.03mg/m L和14.16 mg/m L;抑制大鼠肝脏自发性脂质过氧化的IC50分别为0.21 mg/m L和0.66 mg/m L;抑制大鼠红细胞H2O2诱导氧化溶血的IC50分别为0.11 mg/m L和0.22 mg/m L。     

籽瓜瓤提取物对酪氨酸酶抑制作用及其成分分析

探讨籽瓜瓤提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用,以期为天然酪氨酸酶抑制剂提供新的原料选择。以水和30%、60%、95%乙醇为提取剂采用热回流提取法对籽瓜瓤冻干粉、烘干粉、鲜瓤进行提取,以酶活性测定方法检测提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用,以化学显色法和色谱法检测分析籽瓜瓤的有效成分。结果表明烘干粉水提物的酪氨酸酶抑制活性最强,50 mg/mL时抑制率高达60.15%,其活性成分至少含有6种,对主要成分糖类和有机酸检测酶活发现,抑酶效果有机酸好于多糖,烘干粉中还可能有其它抑酶成分。籽瓜瓤拥有多种生物活性成分,其中有机酸和多糖具有一定的抑酶效果,烘干籽瓜粉水提物具有较强酪氨酸酶抑制作用,可作为潜在天然酪氨酸酶抑制剂以提高籽瓜的综合利用率。     

超声辅助萃取辣木茎生物碱工艺及抑制α-葡萄糖苷酶作用研究

为进一步促进辣木药用价值的开发利用,该实验采用超声辅助萃取辣木茎中生物碱类物质,利用响应面试验优化萃取参数,分析辣木茎中的生物碱对α-葡萄糖苷酶的体外抑制能力。结果表明,超声辅助萃取辣木茎中的生物碱类物质的最佳工艺参数为超声功率250 W、超声波时间30 min、料液比1∶9 (g∶m L),在此条件下辣木茎生物碱提取率为32. 78 mg/g,提取率较优化前提高了约33%。辣木茎生物碱对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用优于阿卡波糖,主要以剂量依赖性、时间依赖性的方式抑制α-葡萄糖苷酶,120 mg/L的生物碱对α-葡萄糖苷酶抑制率达到86. 11%,抑制作用的IC_(50)为0. 034 g/L,其抑制属于竞争性和可逆性抑制。因此基于辣木茎生物碱对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,可将其进一步用于天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发。     

桑叶DNJ提取物体外降血糖及抗氧化作用研究

研究桑叶DNJ提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶活性和体外抗氧化能力。以4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,以拜糖平为阳性对照,测定桑叶DNJ提取物在体外对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。分别采用普鲁士蓝法、DPPH法、邻二氮菲-Fe2+法测定桑叶DNJ提取物体外抗氧化作用。桑叶DNJ提取物在体外对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用(IC_(50)=0.350 mg/m L),是阳性对照拜糖平(IC_(50)=0.982 mg/m L)的2.7倍。桑叶DNJ提取物具有较强的体外总抗氧化能力(OD=1.490),具有一定的清除DPPH·(IC_(50)=0.589 mg/m L)和·OH(IC_(50)=1.788 mg/m L)的能力。     

对香豆酸、阿魏酸和低聚糖阿魏酸酯对酪氨酸酶的抑制效果

通过测定酶的稳态活力、迟滞时间和动力学参数,研究对香豆酸、阿魏酸及低聚糖阿魏酸酯对酪氨酸酶的抑制效果。结果表明,3种物质对酪氨酸酶单酚酶活性均有抑制作用,其中对香豆酸的抑制作用最强,其次为低聚糖阿魏酸酯和阿魏酸。对香豆酸、低聚糖阿魏酸酯和阿魏酸对单酚酶的IC_(50)值分别为0.75,3.20,9.30 mmol/L。对香豆酸和阿魏酸抑制二酚酶活性,IC_(50)值分别为4.3,12.7mmol/L;但低聚糖阿魏酸酯对二酚酶活力没有影响。对香豆酸能明显延长单酚酶反应的迟滞时间,阿魏酸影响很小,而低聚糖阿魏酸酯则缩短迟滞时间。动力学研究结果显示,阿魏酸和低聚糖阿魏酸酯对单酚酶的抑制作用表现为混合性抑制,而对香豆酸为竞争性抑制。     

蚕蛹油和蚕蛹蛋白组成及潜在过敏原分布研究

为了进一步加强蚕蛹的综合利用,以鲜蚕蛹为原料,对蚕蛹油中脂肪酸组成和不同溶解特性蛋白的等电点、相对含量和亚基组成进行研究,并进一步分析了潜在过敏原在不同蛋白中的分布。结果表明:蚕蛹油中不饱和脂肪酸相对含量为60. 83%,其中油酸相对含量最高,为35. 43%。鲜蚕蛹蛋白中不溶性蛋白相对含量最高,为53. 00%,亚基分布在27~85 k Da之间;水溶性蛋白占23. 63%,等电点为3. 8,亚基分布在25~85 k Da之间;碱溶性蛋白占19. 73%,等电点为4. 4,亚基分布在13~29 k Da之间;盐溶性蛋白占2. 58%,等电点为2. 0,亚基分布在15~35 k Da之间;醇溶性蛋白仅占1. 06%,等电点为4. 2,亚基分布在12 k Da和20 k Da附近。过敏原分布研究表明:水溶性、醇溶性、盐溶性、碱溶性蛋白和不溶性蛋白中分别检出6、8、8、12种和3种过敏原,其相对含量分别为1. 33%、25. 64%、1. 21%、17. 93%和9. 86%。过敏原含量较多的蛋白须经过相关脱敏处理方可应用于食品工业。     

螺旋藻多糖对酪氨酸酶的抑制作用及抗氧化性能

以螺旋藻粉作为原材料,研究了螺旋藻多糖的最佳提取条件;采用酶动力学的方法,研究螺旋藻多糖对酪氨酸酶的抑制作用效果、类型和机理;通过DPPH自由基法评价其抗氧化能力。研究表明,在提取时间2 h,料液比1∶40,提取温度90℃,p H 8的条件下,可获得螺旋藻多糖的最佳提取效果;酶动力学研究结果表明,螺旋藻多糖对酪氨酸酶具有明显的抑制效果,其IC50为1.193 mg/mL,其抑制作用表现为可逆的混合型抑制,其抑制常数KI为0.544 mg/mL;螺旋藻多糖对DPPH自由基表现出较好的清除作用,其IC50为0.463 g/L,其自由基清除能力为同浓度下L-抗坏血酸的83.24%。