葡萄糖氧化酶的固定化及其性能的研究

本文对葡萄糖氧化酶的固定化进行了研究,考查了载体、缓冲溶液pH值,以及酶担载量对固定化酶性能的影响,确定了固定化过程的工艺条件,并对固定化葡萄糖氧化酶的自由态葡萄氧化酶的性能进行了比较。研究结果表明,以TiCl_4处理的5A分子筛作载体所制备的固定化葡萄糖氧化酶具有良好的化学与物理性能,在主要指标上优于文献报道的结果。     

蚕丝固定化葡萄糖氧化酶的研究

研究了蚕丝固定化葡萄糖氧化酶的工艺条件和稳定性。结果表明：蚕丝与对-β硫酸酯乙砜基苯胺（SESA）进行反应的最适条件是pH＝10．8，SESA：蚕丝＝1．9：1（W／W）。生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝（ABSE─蚕丝）经重氮化后与葡萄糖氧化酶偶联的最适条件是：pH＝7．5，偶联时间＞12h。加酶量为70－110U／g蚕丝时，所得固定化脂肪酶活力为35～45U／g蚕丝，此时固定化酶的活力回收率较高（＞40％）。固定化葡萄糖氧化酶稳定性较高，其操作半衰期约为21d。     

壳聚糖膜固定化葡萄糖氧化酶的研究

研究以壳聚糖膜为载体、戊二醛为交联剂,固定化葡萄糖氧化酶的最佳条件。结果表明,采用脱乙酰度为86.40%,分子量为1.288×106的壳聚糖制作壳聚糖膜,与浓度0.025%的戊二醛交联后做为载体,室温状态下,在pH为6.5、酶浓度为0.2mg/ml的酶液中固定12h,固定化酶活力最大。在此条件下,固定化酶活力为186.8U/cm2,相对活力78.69%,活力回收>40%。      

壳聚糖膜固定化葡萄糖氧化酶的研究

研究以壳聚糖膜为载体、戊二醛为交联剂,固定化葡萄糖氧化酶的最佳条件。结果表明,采用脱乙酰度为86.40%,分子量为1.288×106的壳聚糖制作壳聚糖膜,与浓度0.025%的戊二醛交联后做为载体,室温状态下,在pH为6.5、酶浓度为0.2mg/ml的酶液中固定12h,固定化酶活力最大。在此条件下,固定化酶活力为186.8U/cm2,相对活力78.69%,活力回收>40%。     

壳聚糖微球固定化葡萄糖氧化酶的研究

以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,固定葡萄糖氧化酶,对葡萄糖氧化酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行了研究,确定了酶固定的最佳条件为0.1g壳聚糖微球与5ml5%戊二醛交联,固定6mg葡萄糖氧化酶,在此条件下酶活力回收可达60%。固定化酶的最适温度为50℃,最适pH为6.0,通过Lineweaver-Burk作图,确定动力学参数Km值为18.3mmol/L,表观米氏常数较游离酶有所降低,固定化酶的热稳定性较游离酶明显提高,该固定化酶具有良好的操作及保存稳定性。     

壳聚糖微球固定化葡萄糖氧化酶的研究

以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,固定葡萄糖氧化酶,对葡萄糖氧化酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行了研究,确定了酶固定的最佳条件为0.1g壳聚糖微球与5ml5%戊二醛交联,固定6mg葡萄糖氧化酶,在此条件下酶活力回收可达60%。固定化酶的最适温度为50℃,最适pH为6.0,通过Lineweaver-Burk作图,确定动力学参数Km值为18.3mmol/L,表观米氏常数较游离酶有所降低,固定化酶的热稳定性较游离酶明显提高,该固定化酶具有良好的操作及保存稳定性。      

壳聚糖膜固定化葡萄糖氧化酶的特性研究

研究了以壳聚糖膜为载体、戊二醛为交联剂的固定化葡萄糖氧化酶的特性。结果表明：固定化酶、溶液酶的最适pH均为5．5；固定化酶、溶液酶的最适温度分别为40℃，35℃；固定化酶的Km值为12．16mmol／L，溶液酶的Km值为20．86mmol/L；固定化酶比溶液酶更耐热，且贮藏稳定性及操作稳定性也有所提高；该固定化酶重复使用率较高。     

葡萄糖氧化酶的固定化及其在快速检测中的应用研究现状

游离葡萄糖氧化酶在生产应用中易失活、储存稳定性差的缺点促进了人们对葡萄糖氧化酶固定化的方法及固定化载体的研究。固定化葡萄糖氧化酶在稳定性、重复使用率等方面具有显著的优势,在食品、医药、药物残留检测等领域发挥着重要作用,使得葡萄糖氧化酶的固定化技术成为人们热衷的前沿生物技术之一。本文主要综述了葡萄糖氧化酶的固定化方法与固定化载体,并对固定化葡萄糖氧化酶在快速检测中的应用进行了阐述。     

葡萄糖氧化酶的固定化及其在快速检测中的应用研究现状

游离葡萄糖氧化酶在生产应用中易失活、储存稳定性差的缺点促进了人们对葡萄糖氧化酶固定化的方法及固定化载体的研究。固定化葡萄糖氧化酶在稳定性、重复使用率等方面具有显著的优势,在食品、医药、药物残留检测等领域发挥着重要作用,使得葡萄糖氧化酶的固定化技术成为人们热衷的前沿生物技术之一。本文主要综述了葡萄糖氧化酶的固定化方法与固定化载体,并对固定化葡萄糖氧化酶在快速检测中的应用进行了阐述。      

漆酶固定化及其性质研究

本文就漆酶的固定化及固定化酶的性质作了初步研究。利用明胶和海藻酸钠的聚合作用与海藻酸钙凝胶球的包埋作用制备固定化漆酶．结果表明：固定化酶米氏常数Km为12.0mg／ml，游离酶米氏常数Km为7．0mg／ml，固定化酶最适温度为40℃，游离酶为30℃．同时固定化酶明显提高了游离酶的耐热性、储藏稳定性和操作稳定性。     

葡萄糖氧化酶及其在食品工业上的应用

介绍了葡萄糖氧化酶的性质、作用原理以及在食品工业上的应用。     

多酚氧化酶的固定化及其酶学性质研究

游离多酚氧化酶在使用过程中容易流失,无法重复利用。文章主要研究了低成本、高效率的两种固定化方法:海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法,确定了其最优固定化条件,分别为海藻酸钠包埋法:2.5%CaCl₂,2.5%海藻酸钠,固定化时间2h;戊二醛交联法:1.25%戊二醛,振荡固定pH 4.5,酶与载体质量比75(mg/g),固定化反应时间6.5h。同时对游离多酚氧化酶及固定化多酚氧化酶的酶学性质进行了研究。结果表明:游离酶、海藻酸钠包埋法固定多酚氧化酶(polyphenol oxidase immobilized by sodium alginate,A-PPO)和戊二醛交联法固定多酚氧化酶(polyphenol oxidase immobilized by glutaraldehyde crosslinking,C-PPO)的比活力分别为864,490,371U/mg,A-PPO和C-PPO的酶活回收率分别为18.6%和24.0%。同时,固定化酶在pH稳定性、热稳定性上优于游离酶,戊二醛交联法固定酶的效果优于海藻酸钠包埋法。     

壳聚糖凝胶固定葡萄糖氧化酶制备酶电极的工艺

以壳聚糖作为固定GOD载体 ,研究了壳聚糖溶液的粘度 ,交联剂戊二醛的浓度、用量以及铂丝在酶膜母液中浸涂时间等对葡萄糖传感性能的影响。在优化固定化条件的基础上 ,建立了通过调整固定化条件来适应载体溶液粘度变化的工艺 ,制备出性能基本一致的酶电极     

葡糖异构酶菌株筛选及固定化研究

目的筛选高产葡糖异构酶的嗜热放线菌优良菌种,并将其固定化。方法分离、诱变育种筛选出高产葡糖异构酶放线菌优良菌种,用离子交换树脂作载体进行葡糖异构酶固定化的研究。结果筛选出葡糖异构酶放线菌高产优良菌种,用离子交换树脂进行葡糖异构酶的固定化,其固定化酶活性为18000～20000U/g(干)。结论筛选到葡糖异构酶放线菌高产优良菌种,用离子交换树脂作载体进行固定化,所得到的葡糖异构酶酶活性较高。     

葡萄糖氧化酶法去除蛋清中葡萄糖的工艺研究

脱糖处理是干燥蛋白制品加工中的必要步骤 ,文中采用葡萄糖氧化酶 (GOD)法对蛋清的脱糖工艺进行了探讨。实验中采用酶 比色法测定葡萄糖含量 ,通过单因素试验分析了时间、pH、温度等参数对脱糖率的影响 ,并采用二次响应面法分析了GOD和双氧水的交互作用 ,确定了GOD法脱糖的最优工艺条件为 :GOD酶制剂添加量 92 . 3g/t(蛋清 )、每小时加入 7%双氧水 3. 5 g/kg(蛋清 ) ,反应体系pH5 5～ 7 0 ,温度 2 0～ 30℃ ,反应时间 2h。在此工艺条件下脱糖率达到 95 %以上 ,可以有效防止干燥蛋白制品生产和储藏中美拉德反应的发生。另外 ,文中还进一步比较了脱糖前后蛋清的性质 ,发现GOD脱糖可以保持并部分提高蛋清原有的功能性质 ,还能够改善蛋清的气味和流动性质。     

葡萄糖氧化酶的研究进展

葡萄糖氧化酶是一种需氧脱氢酶,对人体无毒、副作用,能利用氧将葡萄糖氧化成葡萄糖酸而有效除氧,因而广泛用于抗氧化剂、葡萄糖酸、尿糖试纸和生物传感器的生产。本文综述了葡萄糖氧化酶的研究进展。     

磁性壳聚糖微球固定化黄嘌呤氧化酶及其酶学性质的研究

本文利用化学共沉淀法制备Fe_3O_4磁性颗粒,并以此为磁核通过乳化交联法制备磁性壳聚糖微球,以环氧氯丙烷对微球表面进行活化,用于黄嘌呤氧化酶的固定化研究。以微球表面的环氧基密度为活化指标,确定了活化过程的最适工艺条件:环氧氯丙烷体积分数为40%,Na BH4浓度为0.60 g/L,NaOH浓度为1.20 mol/L。对微球进行结构表征,结果表明:壳聚糖成功包裹了Fe_3O_4磁性粒子,且已活化微球的表面具有环氧基活性基团;Fe_3O_4磁性粒子、未活化和已活化磁性壳聚糖微球的中径分别为2.16、20.30和24.69μm。活化结束后,将黄嘌呤氧化酶固定在磁性微球上。以酶活为指标,确定最适固定化工艺为:时间1 h,温度30℃,pH8.0。对固定化黄嘌呤氧化酶的酶学性质研究,结果表明:酶的最适作用温度为48℃,最适作用pH为8.5,酶具有良好的热稳定性、pH稳定性及操作稳定性。     

绿色木霉耐高温葡萄糖氧化酶的特性分析

从绿色木霉（Trichoderma viride）WX24菌株发酵中分离、纯化葡萄糖氧化酶（T. viride glucose oxidase,TvGOD）,研究其酶学特性,为葡萄糖氧化酶的应用提供理论基础。将绿色木霉胞外产酶发酵液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析纯化,并研究酶学性质。由十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得TvGOD表观分子质量93 kDa,达到电泳纯。经纯化,TvGOD比活力为426.67 U/mg,纯化倍数为14.36,活力回收率19.15%。TvGOD最适pH 6.0,最适反应温度60 ℃。70 ℃以下、pH 4～7之间,TvGOD稳定性好。所测金属离子中,Na＋和K＋对酶活力无影响,Fe2＋、Cu2＋和Zn2＋有轻微抑制作用,Mg2＋和Ca2＋对TvGOD有显著激活作用,而重金属离子Hg2＋和Pb2＋几乎完全抑制酶活力;丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟和金属螯合剂乙二胺四乙酸二钠对TvGOD抑制作用较为强烈;TvGOD对表面活性剂十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、Triton X-100和吐温80表现出强稳定性。以葡萄糖为底物,酶Km和Vmax分别为11.62 μmol/L和8.244 mmol/（L·min）。基于TvGOD在高温、酸性下的高活性与高稳定性以及对表面活性剂的高耐受性、对底物葡萄糖高亲和性等优良特性,TvGOD很有希望在面粉加工、食品饮料、饲料及生物传感器领域以及需要在高温、高酸环境下使用的生物技术工业中应用。     

黄嘌呤氧化酶酶学性质及共价交联固定化

研究了节杆菌Arthrobacter M3黄嘌呤氧化酶酶学性质,并利用修饰的琼脂糖介质及大孔阴离子交换树脂固定化黄嘌呤氧化酶,提高酶热稳定性。研究发现,该酶为异质二聚体,相对分子量为135 000;最适反应温度为37℃,最适反应pH为7.5。固定化结果表明,以修饰的琼脂糖介质共价交联固定化的酶热稳定性均优于大孔阴离子交换树脂类,其中以谷氨酸为连接臂的琼脂糖介质(Sepharose-Glu)固定化效果最佳。在50℃下保温3 h,相比于游离酶酶活仅剩余8.0%,Sepharose-Glu介质固定化的酶仍保留48.3%的酶活,半衰期提高了1.6倍,酸碱耐受性亦优于游离酶。