川芎提取物的多模型体系抗氧化活性测定

目的:研究川芎醇提物和水提物在几种自由基体外模型中的抗氧化作用位点与活性强度,以及此两种提取物在小鼠氧化损伤模型中的综合抗氧化作用.方法:建立DPPH体系,观察川芎醇提物和水提物对DPPH自由基的清除率;建立OH和O<,2><'->化学发光体系观察川芎的两种提取物对发光强度的抑制作用;采用CHP、Vc,Fe<'2+>和CCl<,4>/NADP<'+>作为激发剂,建立微粒体脂质过氧化(LPO)损伤模型,观察川芎两种提取物对MDA生成的抑制作用.建立小鼠氧化损伤模型,观察川芎两种提取物对SOD和CAT蛋白表达水平的影响,以及对MDA生成的抑制作用.结果:在DPPH体系中,川芎的醇和水两种提取物对DPPH的清除率均显著高于对照组(P<0.01),且呈明显剂量-效应关系,川芎醇提物和水提物对DPPH的IC<,50>,分别为3.47和6.19 mg/ml;在两种化学发光体系中,川芎的醇提物和水提物对O<,2><'->和OH的清除率均显著高于对照组(P<0.01),且呈明显剂量-效应关系,川芎醇提物对O<,2><'->和OH的IC<,50>分别为2.56和4.21 mg/ml,水提物对O<,2><'->和OH为2.34和2.80ml;3种LPO损伤模型中川芎两种提取物各浓度组的MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);在体内实验中,与对照组相比,川芎水提物和醇提物组均明显降低肝组织和血清内MDA的含量(P<0.05);川芎水提物和醇提物能明显提高肝组织内SOD蛋白表达水平;川芎醇提物可以提高肝组织内CAT蛋白表达水平.结论:川芎提取物在几种体外模型和体内模型中均具有较好的抗氧化作用.     

三七醇提物对大鼠肝组织体内外抗氧化作用的研究

目的:研究三七(panax notoginseng,PNG)醇提物对大鼠肝组织的体内外抗氧化作用.方法:采用羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-)两种化学发光体系,观察三七醇提物对化学发光强度的抑制作用;采用过氧基异丙苯(cumene hydroperoxide,CHP)、维生素C(VC)/硫酸亚铁(Fe2+)和四氯化碳(CCl)4/还原型辅酶Ⅱ(NADPH)作为激发剂,建立3种微粒体脂质过氧化(lipid peroxidation,LPO)损伤模型,观察三七醇提物对丙二醛(MDA)生成的抑制作用.用60Co γ射线辐照大鼠建立氧化损伤模型,观察三七醇提物对肝组织的氧化型谷胱甘肽(GSSG)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量及活性的影响,以及对MDA生成的抑制作用.结果:在两种化学发光的体系中,三七醇提物对O2-和·OH的抑制率均显著高于阴性对照组(P<0.05),且呈明显剂量-效应关系,三七醇提物对O2-和·OH的IC50分别为1.25和0.625 mg/ml;3种LPO损伤模型中三七醇提物不同浓度组的MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);在体大鼠氧化损伤模型实验的肝组织中,三七醇提物不同剂量灌胃组[(50、225和450 mg/(kg·d)],其MDA的含量均较阳性对照组(仅做60Co γ照射)降低(P<0.05);225和450 mg/(kg·d)剂量组CAT活性较阳性对照组显著升高(P<0.05);其450mg/(kg·d)剂量组SOD的活性较阳性对照组显著升高(P<0.05);而225和450 mg/(kg·d)剂量组GSSG含量较阳性对照组显著降低(P<0.05).结论:三七醇提物对体外氧化损伤模型具有很强的抗氧化作用,对辐射引起的大鼠体内肝脏氧化损伤具有一定的抗氧化修复功效,并呈剂量-效应关系.     

远志茯苓醇提物改善学习记忆障碍的实验研究

目的 通过观察中药远志茯苓醇提物对学习记忆障碍动物模型的影响,研究其改善学习记忆障碍的药理作用,并探讨其作用机制,为中药远志茯苓能够预防和治疗老年性痴呆即阿尔茨海默病提供可靠的依据.方法 通过避暗法观察远志茯苓醇提物对东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型小鼠的影响;通过跳台法观察远志茯苓醇提物对30%乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠的影响;通过Morris水迷宫法观察远志茯苓醇提物对戊巴比妥钠所致空间方向辨别障碍模型小鼠的影响;应用放射免疫分析方法测定东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠血清和脑组织中乙酰胆碱酯酶的含量.结果 远志茯苓醇提物能减少东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠5 min内学习及记忆实验的错误次数,延长潜伏期;能减少30%乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠5 min内进入暗室内的次数(错误次数),延长进入暗室的潜伏期;能缩短戊巴比妥钠所致空间方向辨别障碍模型小鼠在空间搜索实验中第一次到达原平台所在位置的时间,并增加穿越原平台的次数;能有效降低东莨菪碱所致记忆获得性障碍模型小鼠血清和脑组织中乙酰胆碱酯酶的含量.结论 远志茯苓醇提物能改善多种化学药物所致学习记忆障碍模型小鼠的学习记忆能力,可能通过抑制乙酰胆碱酯酶合成,减少乙酰胆碱水解,提高血清和脑内乙酰胆碱水平而发挥改善学习记忆的作用.     

野生蒲公英联合高山红景天对糖尿病模型小鼠的降血糖作用研究

[目的]探讨长白山野生蒲公英(Taraxacum mongolicum)联合高山红景天(Rhodiola sachalinensis)对糖尿病小鼠的降血糖影响.[方法]选取30只昆明种小鼠,其中24只造成糖尿病模型,分为5组,分别为正常对照组、四氧嘧啶模型组、高山红景天组、长白山野生蒲公英组和联合剂量组.采用自制的水煎液进行灌胃给药,1次/d,连续5 d,测定糖尿病模型小鼠的血糖值.[结果]给药5 d后,各试验组小鼠血糖浓度均明显降低,与四氧嘧啶模型组相比存在极显著差异(P<0.01).[结论]高山红景天、长白山野生蒲公英、高山红景天与蒲公英联合对糖尿病小鼠都有明显的降血糖作用.     

菲律宾蛤仔提取物提取条件优化及其体外清除自由基的作用

[目的]研究菲律宾蛤仔全脏器提取物体外对自由基的清除作用,为其综合利用提供基础.[方法]分别采用邻二氮菲-Fe<'2+> 氧化法、DPPH 反应法和邻苯三酚自氧化法,检测菲律宾蛤仔提取物体外对羟自由基(HO·)、DPPH·和超氧阴离子自由基(0<,2><'->·)的清除作用.[结果]以0.1 mol/L NaCl 溶液为浸提液,料液比为1:8,75 ℃水浴浸提100 min,提取液经透析浓缩,再以70%乙醇终浓度沉淀,提取物(PPS-O)的得率达到3.30%,总糖与可溶性蛋白含量分别为42.40%和14.40%.PPS-O 对HO·和 DPPH·清除作用的IC<,50>分别为3.100、3.500 mg/ml,对O<,2><'->·的清除率可达到39.4%.[结论]菲律宾蛤仔盐提取物具有一定的体外清除自由基作用.     

N-乙酰氨基葡萄糖对乙醇致肝组织损伤的保护作用及其机制

目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制.方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时间,HE染色观察模型组和干预组小鼠肠道组织和肝组织的病理损伤程度.结果:与模型组比较,GlcNAc低、中、高剂量组小鼠的开始醉酒时间逐渐延长(P<0.05或P<0.01),醉酒持续时间逐渐缩短(P<0.05或P<0.01).组织切片观察,模型组小鼠肠道组织结构受损,腺体萎缩,管腔内可见脱落的肠黏膜细胞,肝组织多数细胞胞膜破裂,少许细胞核破碎、溶解消失,肝小叶中央静脉及其周围肝窦明显扩张,肝细胞索间充满淡红色嗜酸性均质状物,周围组织结构疏松;GlcNAc干预组小鼠肠道及肝组织损伤均有不同程度的减轻,且随着GlcNAc剂量的增加,肠道组织和肝组织损伤逐步减轻.结论:GlcNAc可不同程度减轻乙醇对肠道组织和肝组织的损伤,GlcNAc对肝脏的保护作用可能与GlcNAc稳定肠黏膜屏障作用有关.     

HO/CO在糖尿病肾病大鼠肾脏组织中的表达及其意义

目的:观察糖尿病肾病模型大鼠血浆一氧化碳(CO)的变化和血红素氧合酶-1(HO-1)、血红素氧合酶-2(HO-2)在肾脏组织的表达,探讨血红素氧合酶/一氧化碳(HO/CO)系统在糖尿病肾病发生和发展中的作用.方法:将24只SD大鼠随机分为对照组和模型组,按Anderson等方法建立糖尿病肾病模型.8周后收集尿液测定24 h的尿蛋白(Upro)和尿肌酐(Ucr);大鼠断头取血测定CO、尿素氮(BUN)和肌酐(Scr),计算肌酐清除值(Ccr);剖取肾脏组织,采用免疫组织化学法检测肾脏组织HO-1和HO-2的表达.结果:与对照组比较,模型组大鼠Upro、BUN和Scr明显升高(P<0.01),Ccr降低(P<0.01);模型组大鼠血浆CO与对照组比较明显降低(P<0.01),肾脏组织HO-1和HO-2的表达强度显著减弱(P<0.01).结论:HO/CO的调节失常参与了糖尿病肾病的发生和发展.     

亚麻籽木脂素对大鼠前列腺增生的抑制作用及其机制

目的:研究亚麻籽木脂素(SDG)对丙酸睾酮诱导的大鼠前列腺增生的抑制作用,并阐明其作用机制.方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(非那雄胺1.0 mg·kg-1)组及SDG(1.2和0.4 g·kg-1)组.ELISA方法检测前列腺组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白细胞介素8(IL-8)的变化.结果:模型组大鼠前列腺组织中NO、SOD和CAT水平均低于空白组(P<0.01),TNF-α、bFGF和IL-8水平均高于空白组(P<0.01);SDG 1.2 g·kg-1组NO、SOD和CAT水平均高于模型组(P<0.01),TNF-α、bFGF和IL-8水平均低于模型组(P<0.01).结论:SDG抑制睾酮诱导的大鼠前列腺增生的机制可能与提高抗氧化酶活力、清除自由基及减少TNF-α、bFGF和IL-8相关因子含量有关.     

20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达激活的影响

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制.方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20 μg·L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48 h后流式细胞仪检测细胞的凋亡峰,半定量RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学染色方法检测PPD处理后Siha细胞中caspase-9和caspase-3基因的转录与表达水平.结果:与阴性对照组比较,20 μg·L-1 PPD处理48 h后,Siha细胞凋亡率增加(P<0.05),Siha细胞中caspase-9与caspase-3转录水平升高(P<0.01),表达上调(P<0.01),caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量增加(P<0.01).细胞免疫化学检测可见实验组细胞出现棕色颗粒.结论:PPD可促进人宫颈癌Siha细胞凋亡,其机制与激活caspase家族级联反应有关.     

硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响

目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加VE组(EG+VE)和病区粮饲料加Se加VE组(EG+Se+VE).喂养21 d后,取大鼠心脏,比色法测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;硫代巴比妥法测定血清丙二醛(MDA)含量;马松三色染色测定大鼠细胞外基质沉积情况;免疫组织化学法和Western blotting法测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF- β)和结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与正常对照组比较,EG组心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.05),心肌组织胶原蛋白大量沉积,并伴有TGF-β和CTGF表达上调(P<0.01).与EG组比较,EG+Se组和EG+Se+VE组病区粮心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力均提高(P<0.01 和P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);大鼠心肌细胞外基质沉积缓解;克山病大鼠心肌TGF- β和CTGF表达下调(P<0.01).结论:低Se和低VE在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用,适时适量补充Se和VE有利于减轻和逆转过度的心肌纤维化和心肌重构.