胞浆内线粒体 DNA 在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞炎症反应时的变化简

目的：观察胞浆内线粒体 DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的NR8383肺泡巨噬细胞炎症反应时的动态变化,以初步探讨胞浆内 mtDNA在肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）用终浓度为1μg·mL-1的 LPS刺激0、3、6、12和24 h后收集细胞培养上清液及细胞,采用差速离心法分离胞浆中的mtDNA,实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测胞浆中mtDNA表达情况,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液中 IL-1β蛋白水平。结果 LPS刺激后3、6、12和24 h IL-1β及胞浆中mtDNA的含量均显著高于0 h组（P＜0．01）。结论 LPS刺激肺泡巨噬细胞后,胞浆中mtDNA含量升高,推测其可能参与了肺泡巨噬细胞的炎症反应。     

急性酒精中毒对家兔失血性休克炎症介质的影响

目的：探讨急性酒精中毒对失血性休克后早期炎症反应的影响。方法将40只健康新西兰大耳白兔按随机数字表法分为4组,每组10只,分别为对照组（A 组）、失血性休克组（B 组）、急性酒精中毒组（C 组）和急性酒精中毒合并失血性休克组（D 组）,制作相应动物模型。监测达到休克所需的放血量和恢复伤前血压的补血、补液总量,分别于休克前、休克中、休克复苏后1 h、休克复苏后3 h 测定血清中 TNF-α、IL-6、IL-10含量。结果1）D 组的放血量要小于 B 组,复苏需要更多液体;2）与 A 组比较,B 组及 D 组血清 TNF-α、IL-6、IL-10含量均显著升高（P ＜0．01）;3）与 B 组比较,D 组各观察时点血清 TNF-α、IL-6、IL-10含量均显著升高（P ＜0．05或 P ＜0．01）。结论失血性休克后早期炎症因子的表达升高,急性酒精中毒能加重炎症介质的释放。     

左金丸对大肠癌APC表达及DNA甲基转移酶活性的影响

目的研究左金丸对结肠腺瘤性息肉基因（adenomatous polyposis coli,APC）的表达及DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,Dnmts）各亚型Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b活性的影响,探讨大肠癌的发病机制及左金丸中药的抑癌机理。方法将120只Wistar大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、左金丸组和对照组,每组40只。正常组为健康大鼠不做任何处理,左金丸组和对照组大鼠每周注射1次化学致癌剂1,2-二甲基酰肼（1,2-di meth-ylhydrazine,DMH）共12周,左金丸组从注射药物开始每天灌服左金丸汤剂,对照组与正常组灌服同等体积的生理盐水,分别在第11、21、34周将部分大鼠处死,切取肿物、进行切片、HE染色、病理观察Duke分期,用Western blot-ting半定量法检测不同肿瘤时期APC蛋白的表达;Elisa方法检测Dnmts活性。结果 APC相对蛋白含量比较：正常组〉左金丸组〉对照组,各组两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,但与肿瘤Dukes分期无关;Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b的活性比较：对照组〉左金丸组〉正常组,各组两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,其中对照组中Dnmt1、Dnmt3b的活性与肿瘤Dukes分期有关,随着肿瘤浸润程度的增加而升高。结论 APC蛋白参与了结直肠癌的发生,并且是肿瘤形成的早期事件,与肿瘤的发展进程无关;Dnmt1、Dn-mt3a、Dnmt3b参与了结直肠癌的发生过程,且Dnmt1、Dnmt3b活性升高与结直肠癌进展有关;左金丸组APC蛋白表达量的增加及甲基转移酶活性的降低可能跟左金丸的抑癌作用有关。     

丙泊酚对急性肺损伤大鼠 HMGB-1表达的影响

目的：探讨丙泊酚的肺保护作用及其可能作用机制。方法采用尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型,丙泊酚和锌原卟啉同样经过尾静脉给药。将 Wistar 大鼠按随机数字表法分为实验对照组（C 组）、脂多糖组（L组）、脂多糖＋丙泊酚组（LP 组）。C 组尾静脉注射生理盐水;L 组尾静脉注射 LPS 7．5 mg·kg-1;LP 组尾静脉注射 LPS 7．5 mg·kg-1,同时静脉注射丙泊酚30 mg· kg-1。给药前及开始后第3、6和12 h 测定动脉血氧分压（PaO2）,实验结束后观察肺湿/干重（W/D）比值、肺组织病理学检查并进行肺损伤轻重程度评分,同时观察各组大鼠肺组织高迁移率族蛋白1（HMGB-1）含量。结果实验前各组 PaO2无明显差异,注射 LPS 后 L 组 PaO2持续下降,和 C 组相比其 PaO2显著降低（P ＜0．05）。实验结束后 L 组和 C 组相比其 W/D 比值、肺组织病理学检查评分、HO-1及 HMGB-1含量显著增加（P ＜0．05）。而 LP 组和 L 组相比其 PaO2显著改善,而 W/D 比值、肺组织病理学检查评分及 HMGB-1含量显著降低（P ＜0．05）。结论丙泊酚具有肺保护作用,且该作用可能与其抑制 HMGB-1过度表达作用相关。     

白藜芦醇对皮肤光老化的保护作用

目的探讨白藜芦醇对皮肤光老化的保护作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分成5组:空白对照组、模型对照组、维生素E治疗组、白藜芦醇低剂量治疗组及白藜芦醇高剂量治疗组,每组8只。除空白对照组外其余各组大鼠制作光老化大鼠模型,空白对照组与模型对照组给予生理盐水20mL·kg-1,维生素E治疗组给予维生素E 30mg·kg-1,白藜芦醇低剂量及高剂量治疗组分别给予白藜芦醇10、60mg·kg-1,每日灌胃1次,共15周。比较各组大鼠皮肤病理学形态改变及对羟脯氨酸(Hyp)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果白藜芦醇高剂量治疗组、维生素E治疗组与模型对照组比较,SOD活性明显增高、羟脯氨酸含量显著增加,丙二醛含量显著降低(P<0.05)。HE病理切片显示白藜芦醇高剂量治疗组、维生素E治疗组较模型对照组皮肤有较大改善,接近正常皮肤组织形态。结论白藜芦醇可以提高光老化皮肤抗氧化物酶活性,改变氧化产物含量,达到抗皮肤光老化作用。     

依达拉奉对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨依达拉奉对心肌缺血再灌注的保护作用及机制.方法 将50只成年SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、再灌注组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只.建立大鼠急性缺血再灌注模型,描记术中心电图变化.假手术组：开胸,分离左冠状动脉并穿线,不结扎,旷置225 min;再灌注组：缺血45 min,再灌注3 h,灌注前1 min将生理盐水按0.2 mL·kg-1经右股静脉注入;低剂量组：再灌注前1 min,将依达拉奉按3 mg·kg-1经右股静脉注入;中剂量组：灌注前1 min将依达拉奉按6 mg·kg-1经右股静脉注入;高剂量组：灌注前1 min将依达拉奉按9 mg·kg-1经右股静脉注入.于再灌注末测定血清肌钙蛋白、心肌组织Ca2＋、SOD、MDA及Na＋-K＋-ATPase 、Ca2＋-ATPase的含量或活性.结果 再灌注组与低剂量组、中剂量组、高剂量组相比,再灌注后ST段回落程度较低、室性心律失常发作例数稍高,但4组间比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.低剂量组、中剂量组和高剂量组的血清肌钙蛋白明显低于再灌注组（均P＜0.05）;中剂量组、高剂量组及再灌注组血清肌钙蛋白明显高于假手术组（P＜0.05或P＜0.01）.与假手术组比较,再灌注组心肌组织MDA活性、Ca2＋含量明显增高,SOD活力及Na＋-K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性明显降低（均P＜0.05）;与再灌注组比较,低剂量组、中剂量组和高剂量组的MDA活力及Ca2＋含量降低,SOD活力及Na＋-K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性明显增加（均P＜0.05）.结论 在再灌注前注射依达拉奉可减轻心肌缺血再灌注损伤.其作用机制是有效地清除氧自由基、提高机体抗氧化应激能力.     

TLR4在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的 观察toll样受体4（toll-like receptor 4,TLR4）、白介素-1（interleukin-1,IL-1）在糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠模型中的表达变化,并观察厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠肾组织TLR4表达的影响,初步探讨TLR4在糖尿病肾病发生发展中的作用.方法 通过高糖高脂饮食4周＋腹腔注射链脲佐菌素（streptozocin,STZ）构建SD大鼠DN模型.实验分正常对照组（NC组,n=8）,模型对照组（MC组,n=20）,厄贝沙坦治疗组（ARB组,n=20）.在成模后2、4、6、8周分别检测各组大鼠血糖、24,h尿蛋白;于4、8周末取出肾脏行HE染色观察肾组织病理改变,免疫组化检测肾组织TLR4蛋白的表达,酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）法检测大鼠血清IL-1含量.结果 HE染色示NC组肾小球结构完整,无明显细胞增生,肾小管未见明显异常;MC组和ARB组可见部分肾小管上皮细胞空泡变性,肾小球体积肥大,炎性细胞浸润.免疫组织化学示肾组织TLR4表达MC组、ARB组均以肾小球、肾小管上皮细胞,细胞浆表达为主,ARB组表达较MC组显著增强（P〈0.05）,MC组表达比NC组显著增强（P〈0.05）.ELISA检测示IL-1含量MC组较NC组显著升高（P〈0.05）,ARB组介于NC组与MC组之间,但NC组与ARB组相比差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 糖尿病肾病可能通过上调TLR4的表达,进而上调炎性因子IL-1的表达而引起炎性反应,刺激肾脏基底膜增生引起肾小球、肾小管为主的肾脏病变,厄贝沙坦可通过下调TLR4的表达,对糖尿病肾病起到延缓肾功能衰竭的保护作用.     

丁桂儿脐贴及联合用药对脾胃虚寒幼龄大鼠模型的影响

目的：观察丁桂儿脐贴、丁桂儿口服及联合用药对脾胃虚寒幼龄大鼠模型的影响。方法将136只 SD大鼠按随机数字表法分为11组（每组12或13只）：正常对照组，模型对照组，模型赋形剂组，丁桂儿脐贴小、中、大剂量组，香砂六君子丸＋丁桂儿脐贴小、中、大剂量组，香砂六君子丸组，丁桂儿口服组。采用食醋法制备脾胃虚寒动物模型，观测各组大鼠体质量、食量、胃液游离胃酸及总酸度、胃蛋白酶活性、胃排空率及小肠推进率；采用 ELISA法检测大鼠血浆八肽胆囊收缩素（CCK-8）及胃动素（MTL）含量。结果与正常对照组比较，模型大鼠体质量逐渐降低，小肠推进率明显降低，MTL分泌显著减少，而胃酸及胃蛋白酶分泌无显著变化，提示模型主要反映胃肠动力不足。建模后14 d，与模型对照组比较，除丁桂儿脐贴中剂量组大鼠体质量有改善外，含丁桂儿的其他各组大鼠体质量无明显改变（P＞0．05）；含丁桂儿的各组大鼠胃排空率及小肠推进率无明显变化（P＞0．05）。与模型对照组比较，香砂六君子丸＋丁桂儿脐贴中剂量组血浆CCK-8含量显著降低（P＜0．01）；与正常对照组比较，模型对照组及模型赋形剂组大鼠血浆MTL含量显著降低（P＜0．05），丁桂儿脐贴小剂量组大鼠血浆MTL含量显著升高（P＜0．05）。结论丁桂儿脐贴及联合用药可参与调节胃肠激素的分泌，并改善脾胃虚寒动物模型的症状。     

大鼠心脏缺血预适应延迟保护模型的建立

目的建立、评价大鼠在体心脏缺血预适应延迟保护模型。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组,每组8只。缺血-再灌注组：大鼠结扎冠脉左前降支,缺血45 min后剪断结扎线再灌注3 h;假手术组：缺血-再灌注前24 h给大鼠行开胸手术,但不阻断冠脉血流;缺血预适应组：缺血-再灌注前24 h给大鼠行心脏缺血预适应,阻断冠脉左前降支造成心脏缺血3 min,再灌注5 min,反复4次。测定3组大鼠心肌梗死面积及血清肌酸激酶（CK）活性以评价心肌损伤的程度。结果缺血-再灌注组心肌梗死区面积为（0.18±0.03）cm2;缺血预适应组心肌梗死区面积为（0.11±0.02）cm2,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,假手术则对心肌梗死面积则无显著影响。与缺血-再灌组比较,缺血预适应组能显著减少血清CK的释放（P〈0.01）,假手术则对血清CK水平无显著影响。结论已建立的大鼠心脏缺血预适应延迟保护模型具有显著的心肌保护作用,可为缺血预适应的研究提供稳定的在体模型。     

雷帕霉素预处理对大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤的影响

目的探讨雷帕霉素（RPM）预处理对大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤的影响及相关机制。方法采用随机数字表法将60只大鼠分为：假手术组（S组）、肾缺血再灌注组（I/R组）、RPM预处理组（R组）,每组20只。采用右肾切除和左肾缺血45 min行再灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。R组缺血前给予RPM（10 mg·kg^-1·d^-1）×3 d,最后1次术前2 h灌胃。再灌注6 h后经心脏采集血样,检测血清SOD活性、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平;取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果,并测定肺组织湿干比重（W/D）。结果与S组比较：其他2组肺W/D、血清MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显升高（P〈0.05）,SOD活性明显降低（P〈0.05）;与I/R组比较：R组肺W/D、血清MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显降低,SOD活性明显升高,肺组织病理学损伤明显减轻（均P〈0.05）。结论 RPM预处理可减轻大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤,其机制可能与抗氧化应激和抗炎反应有关。