脂肪酶催化猪油合成L- 抗坏血酸脂肪酸酯工艺条件

研究一种L- 抗坏血酸脂肪酸酯酶法合成的新途径。以廉价的猪油和L- 抗坏血酸作为反应底物,探讨酶法合成L- 抗坏血酸脂肪酸酯的工艺条件。结果表明,在该酶促反应中,混合有机溶剂体系中底物转化率高于相应纯有机溶剂体系中的转化率,最佳反应体系为30% 叔戊醇:70% 异辛烷(V/V)。研究各反应因素对转化率的影响,确定最适反应条件为底物L- 抗坏血酸与复合猪油甲酯的物质的量比为1:10、酶量10%、温度55℃、反应时间24h,转化率可达到(52.7 ± 2.8)%。     

L-抗坏血酸脂肪酸酯抗氧化活性

从羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系、二苯苦味肼基自由基体系及还原力测试等方面研究L-抗坏血酸脂肪酸酯(VC脂肪酸酯)体外抗氧化活性,并将其添加到猪油和大豆油当中,评价其抗氧化效果.结果表明,在一定的质量浓度范围内,VC脂肪酸酯对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均有较好的清除效果,还原能力也较强,并呈一定量效关系,其抗氧化活性与L-抗坏血酸棕榈酸酯相当.VC脂肪酸酯在猪油中的添加质量分数为0.2%,100℃下强制氧化20h时,猪油的过氧化值为42.8 meq/kg,具有明显的抗氧化活性;在大豆油中添加质量分数0.2%,强制氧化14 h时,大豆油的过氧化值为11.9 meq/kg,其抗氧化能力大于TBHQ,与L-抗坏血酸棕榈酸酯接近,说明VC脂肪酸酯是一种有潜力的食品抗氧化剂.     

非水相脂肪酶催化合成L-抗坏血酸硬脂酸酯

研究了非水介质中Novozym435脂肪酶催化合成L-抗坏血酸硬脂酸酯(L-AS)。脂肪酶用量固定为L-抗坏血酸质量的20%,底物L-抗坏血酸与硬脂酸的摩尔比限定为1:2,对影响脂肪酶催化的因素如溶剂、温度、溶剂量、反应时间、分子筛用量和摇床转速进行了研究。优化后的反应条件:在30mL叔丁醇中加入6.82mmolL-抗坏血酸,13.64mmol硬脂酸,0.24g脂肪酶和3.0g4A分子筛,摇床转速150r/min,反应在55℃水浴中进行48h。通过分离提纯,产品采用红外及质谱检测后确定为L-抗坏血酸硬脂酸酯,产率最高时达64.7%。脂肪酶重复使用5次,最低产率为61%。     

催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的反应媒体和脂肪酶

对水、庚烷和叔戊醇等几种反应媒体和NOVO4 3 5(Candidaantartica) ,MML (Mucormiehei) ,LIPOLASE ,PPL(Porcinepancreas)等数种脂肪酶对L 抗坏血酸棕榈酸酯合成反应的影响进行了系统的研究 .结果表明 ,反应媒体及脂肪酶品种对反应影响极大 .所研究的几种反应媒体中 ,叔戊醇是唯一适用于该反应的反应媒体 .在所研究的几种脂肪酶中 ,NOVO 4 3 5表现出了良好的催化活性 ;MML也有一定活性 ,但不如NOVO 4 3 5,其相对活力只有NOVO 4 3 5的 2 0 % ,其余酶种则无催化活性 .     

CMC调节脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯

为提高脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的效果,以亲水性大分子羧甲基纤维素(CMC)的稀溶液溶解酶,通过物理吸附,将脂肪酶Pseudomonas cepacia lipase(PCL)和Aspergillus niger lipase(ANL)固定在反应器的内壁上,制备出固定化酶CMC-PCL和CMC-ANL,并用于催化L-抗坏血酸与棕榈酸的酯化反应,且与商品固定化酶Nov435比较。结果表明,相对于酶粉,两种固定化酶的活性和稳定性都有明显提高,尤其是CMC-PCL。催化反应24h,CMC-PCL使酯化反应的转化率达到63.7%。尽管3次重复使用后,CMCPCL的催化活性有所降低,但可以通过加水和再固定化而使其催化活性恢复。再有,在反应体系中额外加入CMC,依赖CMC的强吸水性,可拉动反应平衡向酯合成方向移动,使CMC-PCL催化反应的转化率进一步提高到85.3%,可与Nov435的催化作用相媲美。同样条件下,加入CMC吸水,使Nov435催化的酯化反应的转化率达到89.6%。     

L-抗坏血酸脂肪酸酯的合成及应用研究进展

L-抗坏血酸脂肪酸酯是L-抗坏血酸的一种重要的衍生物,具有良好的抗氧化性、抗衰老及抗肿瘤等作用,且脂溶性较好,在食品、化妆品、医药等诸多领域被广泛应用,具有较高的研究价值和广阔的应用前景.本文介绍了L-抗坏血酸脂肪酸酯的合成方法及应用,并对其发展前景进行了展望.     

L-抗坏血酸没食子酸酯的酶催化合成及抗氧化性

以没食子酸和L-抗坏血酸为原料,在固定化脂肪酶Novozym 435催化下合成了L-抗坏血酸没食子酸酯,并测试了其抗氧化活性。结果表明,在没食子酸10 mmol,L-抗坏血酸20 mmol,脂肪酶0.25 g,环己酮20 mL,50℃反应24 h的条件下,没食子酸转化率达82.7%。抗氧化性试验表明,L-抗坏血酸没食子酸酯可以有效清除DPPH自由基和羟基自由基,其IC50分别为9.97μmol/L和2.45 mmol/L,而L-抗坏血酸清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为23.55μmol/L和5.14 mmol/L,抗氧化活性明显好于L-抗坏血酸。     

非水相酶促酯交换法合成抗坏血酸脂肪酸酯

研究了一种L-抗坏血酸脂肪酸酯（AFAE）合成新途径。实验结果表明，氢化棕榈油、大豆油和海狗油等食用油脂作为脂肪酸基团供体，在固定化脂肪酶的催化下，在有机溶荆中与L-抗坏血酸直接进行酯交换反应形成L-抗坏血酸脂肪酸酯。对反应介质体系的筛选发现，在叔戊醇中用Novozym435催化此反应所得的产物浓度最高。对影响合成抗坏血酸脂肪酸酯的因素进行了探讨，确定了最适反应条件：初始油脂底物浓度为200-600mmol／L，温度为55℃，反应时间为9h。此条件下产物质量浓度可达43．51g／L。     

有机相脂肪酶催化合成肉桂酸肉桂酯的研究

肉桂酸肉桂酯是一种重要的花香型香精定香剂。本实验对有机相中脂肪酶催化合成肉桂酸肉桂酯进行研究,对酶催化条件进行了优化研究。实验结果表明:Candida anatarctic脂肪酶(Novozyme 435)有较好的催化活性。通过单因素实验考察各反应参数(反应溶剂、温度、底物摩尔比、底物浓度等)对脂肪酶Novozyme 435合成肉桂酸肉桂酯反应的影响,确定了反应最优工艺条件:在5 mL甲基叔丁基醚溶剂(分子筛脱水)体系中,肉桂醇100 mmol/L,n(肉桂醇):n(肉桂酸乙酯)=2:1,反应温度50℃,Novozyme 435脂肪酶添加量1%(质量体积比),反应36 h后反应转化率可达到55%,产物结构经气相质谱(GC/MS)鉴定。     

超声波场中酶法合成L-抗坏血酸豆蔻酸酯及其抗氧化性

以固定化脂肪酶（Novozym®435）为催化剂,在超声波场中合成L-抗坏血酸豆蔻酸酯,分别测定L-抗坏血酸豆蔻酸酯的清除羟自由基、DPPH自由基能力和还原力。结果表明：超声波可以显著加速底物在叔丁醇中的溶解,并使反应时间由48 h缩短到4 h,产率达77.58%,纯化后产物纯度为98.1%,固定化脂肪酶可重复利用4 次。L-抗坏血酸豆蔻酸酯具有很强的抗氧化性能,在等质量浓度条件下与L-抗坏血酸棕榈酸酯相当,优于特丁基对苯二酚,同时添加入油脂时其抗氧化能力也较优。     

脂肪酸甲酯-甘油体系醇解法合成单甘酯的研究

考察了脂肪酸甲酯醇解法制备单甘酯。实验结果表明，反应时间、配料比、反应温度、催化剂用量及种类对产品的纯度和颜色有较大影响。脂肪酸甲酯与甘油比在1：3，催化剂Ca(OH)2约0．4％(甲酯质量计)，在适当的温度和反应时间时，通过蒸馏除去甲醇可以得到46％的单甘酯产品。     

麦芽糖醇脂肪酸酯的酶催化合成及表面张力测定

以脂肪酶为催化剂,以麦芽糖醇和脂肪酸为原料合成麦芽糖醇脂肪酸酯。通过考察原料配比、催化剂的用量、反应时间、溶剂用量等主要因素对反应的影响,确定最佳反应条件。结果表明,以脂肪酶 Novozym 435为催化剂,脂肪酶用量为0.24g/mmol 脂肪酸,溶剂丙酮的用量为10mL/mmol 脂肪酸,麦芽糖醇:脂肪酸为2:1(mol/mol),在60℃条件下反应80h,脂肪酸的转化率为91%～95%。当麦芽糖醇脂肪酸酯溶液质量分数为0.06% 时,表面张力为38～40mN/m。     

Enzymatic Synthesis of l‐Ascorbyl Fatty Acid Esters Under Ultrasonic Irradiation and Comparison of Their Antioxidant Activity and Stability

A series of novel l ‐ascorbyl fatty acid esters were synthesized by catalization of Novozym^® 435 under ultrasonic irradiation and characterized by infrared spectroscopy, electrospray ionization mass spectra, and nuclear magnetic resonance. Their properties especially antioxidant activity and stability were investigated. The results showed that the reducing power, the scavenging activity of hydroxyl radical and 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl radical were decreased with the increase of the number of carbon atoms in fatty acid. The hydroxyl radical scavenging activity and reducing power of l ‐ascorbyl saturated fatty acid esters were better than that of tert‐butylhydroquinone. The induction period in lipid oxidation of l ‐ascorbyl saturated fatty acid esters and tert‐butylhydroquinone were longer than that of l ‐ascorbyl unsaturated fatty acid esters and l ‐ascorbic acid both in soybean oil and lard. Besides, the l ‐ascorbyl fatty acid esters showed different stabilities in different conditions by comparing with l ‐ascorbic acid, and the l ‐ascorbyl saturated fatty acid esters were more stable than l ‐ascorbyl unsaturated fatty acid esters in ethanol solution.     

蚕丝固定化脂肪酶催化猪油水解

研究了蚕丝固定化脂肪酶催化猪油水解的性能。结果表明：在温度为５５℃、ｐ Ｈ 为 ８２ 的条件下,固定化脂肪酶活性最高。底物浓度高达５５％ （ Ｗ ／ Ｖ）时,仍无底物抑制。适宜的搅拌速度是４５０ ｒ／ｍ ｉｎ～５００ ｒ／ｍ ｉｎ。在上述条件下,固定化脂肪酶间歇水解猪油时的操作半衰期约为 ２６０ ｈ。     

脂肪酶改良猪油制备功能性脂的研究

我国有丰富廉价的动植物油资源，但这一资源并末得到有效的利用，为了充分利用这些资源，开展了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂的研究工作。脂肪酶筛选实验表明，在所选用的五种脂肪酶中，来自T.languginosa的同定化脂肪酶Liopzyme TL IM的催化效果最好。以Lipozyme TL IM为催化剂，进一步研究了酶量、有机溶剂、底物比率、反心时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响。反应产物通过高效液相色谱法（HPLC）进行分析。研究结果表明，在正己烷介质中，脂肪酶量为15％（底物重量厅分比），底物比率为1：2（猪油：辛酸）反应时间24h，反应温度为55～60℃时，辛酸插入率最高。     

煎炸猪油掺杂比例对猪油低场核磁共振弛豫特性及脂肪酸组成的影响

研究不同比例煎炸猪油掺入食用猪油样品的低场核磁共振（low field-nuclear magnetic resonance,LF-NMR）弛豫特性及脂肪酸组成,并分析了二者间的相关性。结果表明：随着煎炸猪油掺杂比例的增加,猪油样品的T21峰起始时间显著减小（P＜0.05）、峰面积比例S21和S22/S23线性增加（R2＞0.968 1）,S22的增长规律符合二项式关系（R2=0.988 6）,峰面积比例S23、单组分弛豫时间T2W、不饱和脂肪酸C18∶1＋C18∶2的含量及不饱和脂肪酸含量/饱和脂肪酸含量（相对不饱和度）均线性降低（R2＞0.956 2）,而T22峰起始时间呈阶梯下降趋势,T23峰起始时间与掺杂比例间的规律性不明显。此外,样品的棕榈油酸C16∶1、棕榈酸C16∶0、亚油酸C18∶2、硬脂酸C18∶0、C18∶1+C18∶2含量及相对不饱和度与LF-NMR弛豫特性S21、T21、S22、T23、T2W存在良好的相关性（R2为0.942～0.995）。研究表明可通过样品的LF-NMR弛豫特性有效反映脂肪酸组成和含量的变化,并对煎炸猪油掺杂比例进行预测。     

In Situ Preparation of Fatty Acid Methyl Esters for Analysis of Fatty Acid Composition in Foods

Lipid extraction preceding fatty acid methyl esters (FAME) preparation for gas chromatography is time-consuming and cumbersome. We omitted the lipid extraction and performed in situ transesterification (ISTE) by heating lipid-containing foods at 90°for 10 min after adding 0.5N NaOH in methanol for methanolysis and continued heating another 10 min for further methylation after adding 14% BF₃ in methanol. FAME prepared by ISTE showed fatty acid composition virtually identical to FAME prepared after lipid extraction from powder, liquid, phospholipid-rich, and tissue products. Due to its simplicity, speed, and reduced organic solvent usage, ISTE should be useful to determine overall fatty acid composition of foods.     

降低高度不饱和脂肪酸乙酯中的过氧化值方法的研究

以LiAlH_4为还原剂,试图降低富含高度不饱和脂肪酸乙酯(主要是5、8、11、14、17、——廿碳五烯酸乙酯,5、8、11、14、17、20——廿二碳六烯酸乙酯。分别简称为EPA乙酯,DHA乙酯)的鱼油酸乙酯的过氧化值。其中,以乙醚为溶剂,LiAlH_4的用量为3％,反应时间为60～90min,去过氧化值的效果显著,方法较简便。