正交试验优化染料木素-锌配合物合成工艺

以天然活性成分染料木素为配体,与锌金属离子配位,合成染料木素-锌配合物。以配合物产率为考察指标,采用单因素试验和L_9(3~4)正交试验设计确定染料木素-锌配合物的最佳合成工艺条件,同时采用紫外光谱法和红外光谱法对染料木素-锌配合物进行了结构表征。结果表明,合成工艺中各因素的影响次序为反应pH反应温度反应时间,染料木素-锌配合物的最优合成工艺条件为反应pH 9.0、反应温度60℃、反应时间6 h,此条件下配合物的产率达39.67%。结构表征结果初步显示染料木素是通过4位羰基和5位羟基与锌金属离子进行配位的。筛选的合成工艺可有效提高染料木素-锌配合物的产率。     

藤茶活性成分二氢杨梅素对明胶酶的影响

该文探讨藤茶活性成分二氢杨梅素（DMY）对明胶酶酶活性和酶蛋白表达量的影响。通过收集不同质量浓度DMY处理的人乳腺癌细胞的条件化培养液上清液,取等蛋白质含量各处理组样本液,进行相同条件的明胶酶谱实验,以此检测DMY对明胶酶蛋白表达量的影响;收集未经过DMY处理的细胞培养液上清液,等量体积上样进行明胶酶谱实验的SDS-PAGE电泳部分,移除凝胶中SDS后置于含有不同质量浓度DMY的孵育液中进行孵育,以此检测DMY对明胶酶活性的影响。结果表明,20-80μg/mL的DMY对明胶酶活性未见明显影响,但以剂量依赖方式抑制明胶酶蛋白的表达。这表明DMY抑制肿瘤转移的作用机制可能是通过抑制明胶酶酶蛋白的表达量,而不是通过抑制该酶活性来完成的。     

橙皮苷-铜配合物的结晶与抗氧化活性

中药有效成分配位后可产生新的或更好的药物活性.本文探讨了橙皮苷一铜的结晶工艺,并借助邻苯三酚自氧化法探讨其抗氧化活性.结果表明:在实验条件下,橙皮苷一铜配合物的最佳结晶工艺条件是:将30mL浓度为1.33x10-3mol/L的橙皮苷-铜(Ⅱ)溶液于40℃下缓慢搅拌20 min,添加0.02 g橙皮苷-铜(Ⅱ)晶种后冷藏过夜.其中温度对配合物结晶有显著影响;配合物对自由基O2-清除活性好于橙皮苷.本研究可为农业废弃橙皮的高值化利用提供参考.     

Cu(Ⅱ)-L-amino acid-O-phen体系的园二色性研究

室温下,水溶液中测定了Cu(Ⅱ)-L-amino acid-O-phen(1∶1∶1)体系的园二色谱。根据750～200nm光谱内的Cotton效应,确定了测量条件下络合物的绝对构型。发现在260～320nm胱氨酸和色氨酸的园二色谱带符合三齿配体结构;而亮氨酸、谷氨酸、赖氨酸和精氨酸的络合物在这段光谱内无上述现象,从而确定为二齿配体结构。     

加压微波固相法制备L-羟脯氨酸-Cu(Ⅱ)及其结构表征

为减少食品和动物饲料加工过程中无机铜的使用和添加对环境的污染和营养物质的浪费,开发新型氨基酸铜制剂具有重要意义。本实验从食品级猪皮明胶中分离制备L-羟脯氨酸(L-Hyp),并以L-Hyp和Cu SO_4·5H_2O为原料,采用固相微波辐射和加压二级处理的方法制备L-羟脯氨酸-Cu(Ⅱ)(L-Hyp-Cu(Ⅱ)),制备条件为:L-Hyp和Cu SO_4·5H_2O物质的量比2.5∶1,即10.5 g L-Hyp和8.0 g Cu SO_4·5H_2O充分混匀,加入引发水20 m L,微波功率600 W,添加除酸剂无水Na_2CO_3 5.6 g,微波时间180 s;二级加压处理,将微波辐射处理后的样品转入加压反应釜中,在二级反应温度90℃、二级反应压强15 MPa、搅拌速率100 r/min条件下,反应35 min。并用紫外光谱、红外光谱、X衍射、扫描电子显微镜、配合分析、元素分析、重量分析等手段对配合物的组成和结构进行表征。结果表明:经微波辐射和加压二级处理可以提高L-Hyp-Cu(Ⅱ)螯合率,产品螯合率为86.4%。通过表征分析发现,Cu(Ⅱ)与L-Hyp中的羧基和亚氨基发生配位,反应所得产物L-Hyp-Cu(Ⅱ)配位比为1∶2,分子式为Cu(C_5H_8NO_3)_2。     

两种黄酮类铜(II)配合物的制备及体外抗氧化活性

为了研究黄酮化合物与金属离子协同作用增加抗氧化活性的构效关系,本文分别以天然黄酮化合物金雀异黄酮和山奈酚为原料,在无水乙醇-水混合溶剂中制备了2个铜(II)配合物。采用元素分析、络合滴定、红外光谱、电子吸收光谱和热重分析对2个目标配合物的组成及结构进行了分析,通过NBT光照还原法和水杨酸法测定了配合物的体外抗氧化活性。结果表明,在配合物的分子结构中,黄酮母核上的羰基氧和羟基氧与中心铜离子双齿配位,摩尔比为2:1,推测分子式为[Cu(Gen)₂(H₂O)₂]·3H₂O(Gen=金雀异黄酮)(1)和[Cu(Kae)₂(H₂O)₂]·1.5H₂O(Kae=山奈酚)(2)。在本实验条件下,配合物清除O₂^-·的IC₅₀分别为0.250和0.646 μmol/L,起主要作用的是中心铜离子;清除OH·的IC₅₀分别为158和129 μmol/L,黄酮配体发挥主导作用。配合物具有良好的清除O₂^-·和OH·的能力,且中心铜离子和黄酮配体显示出协同抗氧化活性。     

山奈酚-铜配合物的合成、表征及其抗氧化活性的研究

以山奈酚和二水合氯化铜为原料,合成山奈酚-铜金属配合物,通过紫外光谱、红外光谱、核磁共振氢谱及差热-热重分析对其结构进行表征,并采用DPPH法测定了配合物清除自由基的能力。结果表明:相比山奈酚,配合物的紫外光谱和红外光谱的吸收峰均发生明显红移;核磁共振氢谱中3-OH信号消失,其他质子信号均向高场移动;差热-热重分析显示山奈酚和Cu²⁺的配位比为1,且配合物中含三分子的配位水;在6种设定的实验浓度内(1.0~3.5 mol/L),山奈酚和配合物清除DPPH·半抑制浓度(IC₅₀)分别为1.63×10^-4、1.51×10^-4 mol/L。Cu²⁺是通过与山奈酚3位羟基和4位羰基的氧原子结合生成配合物,山奈酚与铜形成配合物后,对DPPH自由基的清除率有提高。     

大黄素金属配合物的制备与抗氧化性探究

本文以大黄素为配体合成了大黄素—锌金属配合物,采用XRD、紫外光谱法、红外光谱法、等对其结构进行表征。采用用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)法,Fe~(2+)-H_2O_2-亚甲蓝法对其抗氧化活性进行了研究,比较了配体大黄素和它的金属配合物之间抗氧化活性。结果表明,大黄素与金属锌发生配位反应后,其抗DPPH自由基的活性明显增强并高于配体。     

掺Sb的Fe(OH)3干凝胶晶化的穆斯堡尔谱研究

对掺杂Ｓb的Ｆe(OH)3干扰凝胶及α－Ｆe2O3晶化相进行穆斯堡尔谱研究,结果显示：Ｆe(OH）３非晶相的原子配位与Ｓb掺杂基本无关,其结构在晶化前随着热处理的进行无序度增加;掺Ｓb干凝胶加热时晶化为α－Ｆe2O3和ＦeＳbO4;部分Ｓb原子进入α－Ｆe2O3形成固溶体。     

木犀草素-锡(Ⅱ)配合物合成的工艺研究

探究了木犀草素与锡(Ⅱ)配合物的最佳合成条件,制备木犀草素-锡(Ⅱ)配合物以作进一步的活性研究.以木犀草素与锡(Ⅱ)配位反应生成的配合物在乙醇溶液中吸光度大小为指标,在单因素实验的基础上,利用正交实验法探讨了配位反应溶液pH、原料物质的量比、反应液温度以及反应时间的影响,并探究配合物的UV-Vis特征.结果表明,最佳的合成条件为溶液pH4.5,木犀草素与氯化亚锡的物质的量比为1∶2.5,反应液温度为35℃,反应时间为5h.反应溶液pH对配合物的生成影响最显著,反应时间次之,原料物质的量比较小,温度影响最小.在最佳工艺条件下制备了木犀草素-锡(Ⅱ)配合物,产率为75.14％.     

复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化多肽

研究复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化活性多肽的最佳条件,并探究其体外抗氧化活性。以水解度为指标,在单因素实验的基础上,以pH、温度、底物浓度、酶用量为实验因素,通过L₉(3⁴)正交实验设计筛选出制备绿豆多肽的最佳水解条件,使用DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明:复合酶协同水解绿豆蛋白的最适反应条件为pH8.5,温度56 ℃,底物浓度8%,酶用量4%,水解度可达到33.95%。所得绿豆抗氧化多肽对DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基清除率分别为82.8%、76.82%和56.85%,具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

酒石酸与铬配位影响因素的研究

根据反应液可见光谱的特征吸收峰位、峰值以及吸收半峰宽的变化,探讨了羟基、羧基解离度及铬配合物分子大小对酒石酸与铬配位的影响。结果表明：酒石酸分子中的羟基增强了其与铬的配位能力;适当增大酒石酸的羧基解离度、铬配合物的分子大小均有利于其与铬配位,但前者的影响程度大于后者;作为铬鞣蒙囿剂最好用酒石酸并在鞣制前期加入;酒石酸及其盐均可用于脱铬,用酒石酸需调pH值,而用其盐则不需调pH值;二者均可用于铬鞣革的漂洗,盐的效果会更好。     

海红果多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究

目的：探讨海红果多糖(polysaccharide from Malus prunifolia Borkh,PFM)提取工艺条件及其体外抗氧化活性。方法：采用三因素三水平正交试验设计,考察提取温度、时间和料液比3个因素对海红果多糖提取工艺的影响;以VC为对照,应用DPPH法测定海红果多糖清除有机自由基能力、ABTS法测定其总抗氧化能力、Fenton反应测定其清除羟自由基能力。结果：PFM最佳提取工艺条件为提取温度90℃、提取时间6h、料液比1:10(g/mL),此条件下PFM得率为6.75%;PFM对羟自由基具有较强的清除作用(P＜0.05),效果优于清除DPPH自由基和ABTS+自由基,但弱于VC。结论：优化海红果提取工艺得到的PFM具有较强的体外抗氧化活性。     

花生红衣多酚-锌配合物的制备及其抗氧化性质

采用超声波辅助法乙醇提取花生红衣多酚(PSP),将PSP与人体必需金属元素Zn2+配合,制备花生红衣多酚-锌配合物(PSP-Zn),采用响应面试验研究PSP-Zn制备条件,并研究其抗氧化性能。结果表明,在反应温度57.82℃、p H 5.86、质量比4.27︰1时,PSP与Zn2+的螯合率最高,为46.30%。PSP-Zn的清除DPPH自由基能力高于同浓度的PSP、VC、VE,且随浓度增加而增强;浓度1200μg/mL时,PSP-Zn的DPPH自由基清除率84%;PSP-Zn的清除羟基自由能力要略弱于PSP,且PSP-Zn和PSP的清除羟基自由能力均弱于同浓度的VC、VE。     

二氢杨梅素抑制黄曲霉菌生长的机制

本研究探讨了二氢杨梅素对黄曲霉的抗真菌活性和潜在的抗真菌机制。首先,通过抑菌实验证明,二氢杨梅素对黄曲霉孢子和菌丝的最小抑菌质量浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）均为4 mg/mL。通过荧光增白剂（calcofluor white,CW）和碘化丙锭（propidium iodide,PI）染色实验证明,二氢杨梅素处理后黄曲霉细胞壁和细胞膜受损。与对照组相比,1/2 MIC和MIC组黄曲霉细胞内容物释放量（OD260 nm）分别增加了3.14 倍和5.93 倍,细胞外相对电导率和pH值均升高,MIC的二氢杨梅素对黄曲霉的呼吸抑制率达25.82%。这些结果表明,二氢杨梅素通过破坏细胞壁和细胞膜的完整性以及干扰呼吸代谢发挥抗菌活性。此外,二氢杨梅素在MIC时能够完全抑制黄曲霉在花生和玉米籽粒上的萌发,因此,二氢杨梅素可作为一种有效的抗真菌天然化合物应用于粮食及农产品储藏中。     

Effect of dihydromyricetin on proline metabolism of Vibrio parahaemolyticus: Inhibitory mechanism and interaction with molecular docking simulation

Dihydromyricetin (DMY) is a principle bioactive component of the wild plant Ampelopsis grossedentata and possesses multiple pharmacological effects. However, the mechanism of its biological activity has not received much attention. In this study, the inhibitory mechanism of DMY was explored. Experiments were conducted to investigate the inhibitory effects of DMY on the proline metabolism of Vibrio parahaemolyticus by measurements of proline contents and proline dehydrogenase (PDH) activity. With DMY treatment, an increase in proline content and decrease in PDH activity were observed. Furthermore, molecular docking studies were used to confirm interaction mechanism of DMY with PDH. The results shown that DMY can interact with primary amino acid residues located within the active hydrophobic pockets of PDH, leading to decrease of PDH activity. The normal metabolism of proline was interfered by DMY, resulting in molecular damage and even death of V. parahaemolyticus cells.

Practical applications

The antimicrobial mechanism of dihydromyricetin (DMY) on Vibrio parahaemolyticus at the molecular level is reported for the first time in this study. The molecular docking simulation provided supportive data for DMY‐induced inhibition by allowing us to predict the binding site in the active site pocket of proline dehydrogenase. The data can be useful for future studies that involve evaluation of antibacterial mechanism of natural antimicrobial agents against foodborne pathogens and provide an insight into the structural and antibacterial properties of phenolic compounds.     

邻二氮菲-Fe~(2+)法测定牦牛乳酪蛋白酶解产物的抗氧化性

采用邻二氮菲-Fe2+法测定牦牛乳酪蛋白酶解产物的抗氧化性。通过单因素分析,确定了试剂的用量及反应条件对样品吸光度及羟自由基清除率的影响。优化得到的反应条件为:1 mL 1.5 mmol/L邻二氮菲,2 mLpH7.4磷酸盐缓冲液,1 mL抗氧化剂,充分摇匀后,加入1 mL 0.5 mmol/L FeSO4溶液,混匀,加1 mL 0.1%H2O2,具塞于38℃反应50 min,于波长536 nm处测定其吸光度。结果表明,改良的邻二氮菲-Fe2+法测定结果重现性好,适于酪蛋白酶解产物抗氧化性的测定。     

壳聚糖与糖美拉德反应产物的抗氧化性能研究

选用壳聚糖与3种糖(葡萄糖、麦芽糖和糊精)进行美拉德反应,测定反应物的吸光度A来判断反应进行的程度,同时检测了美拉德反应产物对超氧阴离子自由基O.2-和羟基自由基.OH的清除能力。结果表明:达到一定的褐变程度,壳聚糖与葡萄糖所需时间最短,壳聚糖与麦芽糖次之,壳聚糖与糊精所需时间最长。可以认为,壳聚糖与糖类的反应速率不仅与-NH2和-OH的比例有关,还与糖的结构有关;几种美拉德反应产物对超氧阴离子自由基O.2-和羟基自由基.OH具有较好的清除效果。     

DNS法检测灰略红链霉菌JSD-1产纤维素酶的CMC酶活条件的优化

为研究3,5-二硝基水扬酸法（DNS）检测纤维素酶的CMC酶活条件,采用单因素实验探讨了波长、酶促反应温度与时间、p H、粗酶液和底物添加量、底物浓度、显色时间及空白实验对测定结果的影响,并通过响应面（BoxBehnken）实验设计及方差分析确定了一种较优的CMC酶活检测条件组合。结果表明,CMC酶活检测最佳条件为:波长520nm、酶促反应温度和时间分别为45℃和30min、p H7.0、底物浓度12g/L、显色15min。      

金针菇多糖与Fe(II)螯合物的制备及抗氧化活性

确定金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的螯合工艺及其抗氧化活性。以螯合度为指标,探讨螯合时间、金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的质量比(mg/mg)、Fe(Ⅱ)的初始质量浓度(mg/mL)对金针菇多糖-Fe(Ⅱ)螯合物的影响,通过响应面试验确定最佳螯合条件,并对金针菇螯合前后的抗氧化性进行比较。结果表明：当螯合时间6h、金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的质量比3.54:1(mg/mg)、初始质量浓度为6mg/mL 时螯合度为86.21%;各抗氧化性实验结果显示金针菇多糖螯合Fe(Ⅱ)后其抗氧化性能较螯合前有所提高。