鲜切香瓜片上鼠伤寒沙门氏菌的控制方法

本文对化学( H2O2)、生物(蛭弧菌BDFM05)方法对香瓜片鼠伤寒沙门氏菌消除和控制效果进行了比较,并进行了感官评定,结果表明,与对照组相比,两种方法均能很好控制香瓜片鼠伤寒沙门氏菌的生长;且蛭弧菌控制方法优于化学方法;两种浓度蛭弧菌方法比较,则高浓度组优于低浓度组.通过蛭弧菌BDFM05和H2O2对比分析,前者能...     

草鱼片猪霍乱沙门氏菌生长的控制

为了有效控制生鱼片等生食食品携带致病菌的生长,比较了物理(超高压)、化学(双氧水)和生物(蛭弧菌BDM01)三种方法对草鱼片上接种的猪霍乱沙门氏菌进行消除和控制的效果,并对被处理鱼片进行了感官评定。结果表明,与对照组相比,三种方法对草鱼片猪霍乱沙门氏菌均有很好的控制作用(p<0.05);且蛭弧菌控制猪霍乱沙门氏菌的生物方法优于超高压和双氧水的物理、化学方法。与其他两种方法相比,蛭弧菌M01处理鱼片的生物方法能在较长时间内(48h)控制草鱼片猪霍乱沙门氏菌的增长,保持鱼片良好的感官状态。虽然在25℃保存/保鲜期间,生物处理组的猪霍乱沙门氏菌的初始浓度高于其他两种方法的处理组,但其增长受到更大的控制。结果表明,在受低度污染的鱼片保鲜中,蛭弧菌技术具有潜在的应用价值。      

草鱼片猪霍乱沙门氏菌生长的控制

为了有效控制生鱼片等生食食品携带致病菌的生长,比较了物理(超高压)、化学(双氧水)和生物(蛭弧菌BDM01)三种方法对草鱼片上接种的猪霍乱沙门氏菌进行消除和控制的效果,并对被处理鱼片进行了感官评定。结果表明,与对照组相比,三种方法对草鱼片猪霍乱沙门氏菌均有很好的控制作用(p<0.05);且蛭弧菌控制猪霍乱沙门氏菌的生物方法优于超高压和双氧水的物理、化学方法。与其他两种方法相比,蛭弧菌M01处理鱼片的生物方法能在较长时间内(48h)控制草鱼片猪霍乱沙门氏菌的增长,保持鱼片良好的感官状态。虽然在25℃保存/保鲜期间,生物处理组的猪霍乱沙门氏菌的初始浓度高于其他两种方法的处理组,但其增长受到更大的控制。结果表明,在受低度污染的鱼片保鲜中,蛭弧菌技术具有潜在的应用价值。     

鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白提取及多抗制备

鼠伤寒沙门氏菌是沙门氏菌属常见致病菌,其鞭毛蛋白具有抗原性,可诱导免疫系统产生针对该蛋白的抗体。实验采用直接提取法获得鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白,并以该蛋白为抗原免疫小鼠,制备鞭毛蛋白多抗,使用间接ELISA方法测定多抗的效价和特异性。SDS-PAGE实验结果表明,蛋白条带单一,分子量大小为57ku,说明提取的鞭毛蛋白是目标蛋白且纯度较高;间接ELISA检测结果表明,制备多抗的效价为1∶102400,除与猪霍乱沙门氏菌发生交叉反应外,与其他6种沙门氏菌和6种常见非沙门氏菌属的致病菌均不发生反应,说明该抗体的效价较高,特异性较好,可以用于与磁珠的偶联,为免疫磁珠的制备打下基础。     

四重荧光定量PCR法鉴定肠炎、鼠伤寒以及伤寒沙门氏菌

目的建立四重荧光定量PCR体系鉴定肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌以及伤寒沙门氏菌。方法针对沙门氏菌属特异性ompC基因、肠炎沙门氏菌sdf基因、鼠伤寒沙门氏菌STM4495和伤寒沙门氏菌STY2021序列设计引物和TaqMan探针,建立多重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究。结果 28株不同血清型的沙门氏菌均扩增出ompC基因,其他13株非沙门氏菌均未出现ompC的非特异性扩增。sdf、STM4495、STY2021的探针和引物分别特异性扩增出肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌以及伤寒沙门氏菌,而25株其他血清型沙门氏菌以及13株非沙门氏菌均未见扩增曲线。敏感性试验显示,该体系的最低检测限分别为48 pg/mL(ompC)、560 pg/mL(sdf)、530 pg/mL(STM4495)、35 pg/mL(STY2021)。结论该方法特异好、灵敏高、能够快速检测沙门氏菌并鉴定肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌以及伤寒沙门氏菌。     

食用孵化鸭蛋引起鼠伤寒沙门氏菌食物中毒的调查报告

本文报告了因食炒孵化鸭蛋引起的鼠伤寒沙门氏菌食物中毒,系因鸭蛋在孵化过程中引起鼠伤寒菌大量繁殖,炒食方法虽使蛋白质凝固,但达不到杀菌温度。对这起中毒进行了流行病学调查,临床统计,细菌培养,因子血清凝集,生化试验和病人血清凝集效价测定等证实是鸭蛋中有鼠伤寒沙门氏菌。     

实时荧光PCR法检测鼠伤寒沙门氏菌

目的 建立实时荧光PCR法检测鼠伤寒沙门氏菌的方法。方法 基于鼠伤寒沙门氏菌II型限制酶基因, 设计引物及Taqman探针, 利用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果 特异性探针可从25种血清型沙门氏菌(共49株)及11株阴性对照菌株中检测出全部的11株鼠伤寒沙门氏菌。以鼠伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR实验, 菌株模板浓度与Ct值呈良好线性关系, 线性系数(R2)为0.998, 扩增效率90%, 最低检测浓度300 cfu/mL。对已接种鼠伤寒沙门氏菌的4种模拟样品同时进行实时荧光PCR检测和传统方法鉴定, 两者结果一致。结论 此方法特异、灵敏、准确, 适于食品中鼠伤寒沙门氏菌的检测。     

食品检测用鼠伤寒沙门氏菌标准物质的研制

目的 研制均匀稳定的鼠伤寒沙门氏菌标准物质。方法 采用冷冻干燥技术制备含量为1.5-2.0×103 CFU /样品的菌球, 参照CNAS—GL29: 2010《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》, 随机抽取22件样品进行均匀性检验, 采用单因素方差分析对结果进行统计分析, 将样品分别于-20、4、25、37 ℃条件下保藏, 对其储藏稳定性和运输稳定性进行评价, 并组织3家实验室进行协同标定, 再使用45件食品作为基质, 按照国标法检验鼠伤寒沙门氏菌标准物质的适用性。结果 对22件标准物质的均匀性检测结果进行单因素方差分析, F=1.986, 符合标准物质的要求。标准物质在?20 ℃保藏28 d, 复苏率为103.1%; 在4 ℃保藏28 d, 复苏率为102.0%; 在25 ℃保藏14 d或者37℃保藏7 d, 样品中菌含量仍保持在103 CFU/样品的水平, 说明样品的短期储藏稳定性、长期储藏稳定性和运输稳定性都符合要求。经3家实验室协同标定, 样品活菌含量均在103 CFU/样品水平, 生化鉴定结果均符合沙门氏菌的特征; 标准物质加入到45种食品基质中, 均可以检出沙门氏菌。结论 本研究所制备的鼠伤寒沙门氏菌标准物质的均匀性、储藏稳定性和运输稳定性均符合要求, 适用性良好, 可用于食品检测实验室的质量控制和食品中沙门氏菌检测结果的评价。     

鼠伤寒沙门氏菌ompc基因PCR的检测方法

建立一种鼠伤寒沙门氏菌的聚合酶链式反应检测方法。根据GenBank中已发表的鼠伤寒沙门氏菌的ompc的基因序列,设计和合成了一对特异性引物,并优化了反应条件,检测了该方法的敏感性和特异性。结果成功扩增出了鼠伤寒沙门氏菌470 bp的ompc特异性基因片段,而对致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和志贺氏菌4 种食品中常见的病原菌均未扩增出相应片段。敏感性实验结果表明本方法可检测到最低1 pg/μL的鼠伤寒沙门氏菌基因组DNA。     

热-超声波联合对鼠伤寒沙门氏菌的杀菌效果研究

研究了32⁵2℃条件下,热处理以及热-超声波联合处理对鼠伤寒沙门氏菌的杀菌效果,分析了温度对热-超声波联合杀菌效果的影响。结果表明:32⁵2℃热处理杀菌效果远远达不到卫生标准;而热-超声波联合作用杀菌效果显著增强,在52℃下,190、380、570W分别处理40、30min和30min即可达到平板菌落计数法检测限;在热-超声波联合处理中,较低温度（32⁴7℃）对鼠伤寒沙门氏菌的杀菌效果贡献较小,杀菌效果主要取决于超声波作用;而致死温度（52℃）体现协同杀菌效应,增强杀菌效果,提高杀菌速率。      

基于pH响应聚合物的比色法检测牛奶中的鼠伤寒沙门氏菌

目的 基于pH响应聚合物构建一种用于检测牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的比色传感器。方法 通过溶剂诱导法,使用酚酞、适配体、牛血清白蛋白制备pH响应聚合物,基于适配体对鼠伤寒沙门氏菌的特异性结合与pH响应聚合物遇碱释放酚酞的比色反应建立鼠伤寒沙门氏菌比色检测方法,优化反应条件,并将其用于检测牛奶。结果 该传感器在鼠伤寒沙门氏菌菌液浓度10²～10⁷ CFU/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系,线性系数为0.982,检出限可达52 CFU/mL。将此法用于牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的检测,加标回收率为83.2%～102.0%。结论 该方法操作简便、结果可视化,为牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的快速检测提供了一种新思路。     

鼠伤寒沙门氏菌特异性多克隆抗体的纯化方法

以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌的多克隆抗体。分别通过辛酸-硫酸铵沉淀法、磁珠偶联抗原吸附法纯化抗体,所制备的抗体效价为3.2×105,纯度较高,但交叉反应现象较严重。本实验以杂菌抗原反向吸附法纯化抗体,有效消除了抗体与杂菌的交叉反应,初步建立了一种高特异性多克隆抗体的纯化方法。     

沙门氏菌感染肠上皮细胞外泌体宿主蛋白质组学分析

选用人肠上皮细胞Henle-407作为模型,经鼠伤寒沙门氏菌感染后提取其分泌的外泌体,利用Label?free相对定量蛋白质组学方法探究外泌体内宿主细胞蛋白质组的变化.结果表明,在鼠伤寒沙门氏菌感染或未感染的宿主细胞外泌体中共鉴定到宿主蛋白质2490种,其中包括321种差异表达蛋白.在该321种蛋白中,共有蛋白有7种,...     

Mutagenicity evaluation of nitroanilines and nitroaminophenols in Salmonella typhimurium

In our studies of structure-activity relationships, three nitroanilines and nine nitroaminophenols were tested for their ability to induce mutations in Salmonella typhimurium strains TA1535, TA100, TA1537, TA1538 and TA98. The compounds m -nitroaniline, 4-nitro-2-aminophenol, and 3-nitro-6-aminophenol were active in two or more of these strains. The compounds o -nitroaniline, 2-nitro-3-aminophenol, 3-nitro-4-aminophenol, 4-nitro-3-aminophenol, 3-nitro-2-aminophenol, 2-nitro-6-aminophenol, 2-nitro-4-aminophenol and 2-nitro-5-aminophenol were inactive, both in the presence and in the absence of S9 mix. The compound p -nitroaniline was also inactive in all tests with the possible exception of that in strain TA98 in the presence of S9 mix, where it was either very weakly mutagenic or non-mutagenic. The mutagenic activity or inactivity of these compounds appears to be dependent on the positions of the amino, nitro, and hydroxy groups in their chemical structures.
Etude en mutagénèse des nitroanilines et nitroaminophénols sur Salmonella typhimurium .     

基于核酸适配体杂交链式反应比色法检测鼠伤寒沙门氏菌

该研究探讨了基于核酸适配体特异性识别机制和杂交链式反应（hybridization chain reaction,HCR）扩增策略,以金纳米粒子（gold nanoparticles,AuNPs）颜色变化为比色信号,设计了一种无标记、无酶、灵敏的鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium,S. typhimurium）比色检测法。根据鼠伤寒沙门氏菌核酸适配体设计引发链和两个发夹探针,核酸适配体捕获鼠伤寒沙门氏菌,触发引发链打开发夹探针,发生杂交链式反应,在实现目标菌信号放大同时,利用反应前发夹探针粘性末端以及反应后形成的杂交长链对金纳米粒子结合差异性,产生比色信号,实现鼠伤寒沙门氏菌的快速检测。通过对杂交链式反应时间、发夹探针与金纳米粒子结合时间以及发夹探针浓度等实验参数进行优化,提高实验灵敏度。在最优实验条件下,鼠伤寒沙门氏菌浓度对数值与紫外吸光比值（A630/525）在103~107 CFU/mL范围内呈现良好的线性关系,检测限为6.3×101 CFU/mL,在牛奶样品中加标回收率为90.05%~109.97%。本比色法操作方便,无需要化学修饰以及复杂仪器且实验结果可视,为鼠伤寒沙门氏菌监测提供一种新的方法。